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赶黄草对小鼠酒精性脂肪肝的实验研究



全 文 :西南军医 2015年5月 第17卷 第3期 Journal of Military Surgeon in Southwest China,Vol. 17,No. 3,May, 2015
随着人民生活水平的提高和交往的扩大,饮酒人
群日益攀升,酒精已成为继病毒性肝炎后导致肝损害
的第二大病因[1],酒精性肝病(aleoholic liver disease,
ALD)已经成为威胁我国人民生命健康的又一严重社
会问题,酒精性脂肪肝(aleoholic fatty liver,AFLD)是
ALD的一种早期表现,AFLD发病机制非常复杂,尚
不完全清楚,目前临床上无有效的治疗药物。赶黄草
为虎耳草科扯根菜属,是植物扯根菜的干燥地上部
分。传统记载赶黄草为苗族传统药物,全草性温、味
甘、无毒,具清热、利尿消尿、解毒、活血、平肝、健脾、
祛黄疸等功效。主治黄疸、水肿、经闭、血崩、带下、跌
打损伤,以及各型肝炎、胆囊炎、脂肪肝等[2]。临床上
赶黄草常用于防治酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝
等肝病[3-4],我们已报道了以赶黄草为单味药的肝苏
颗粒在临床上对酒精性脂肪肝的治疗作用良好[5],前
期已建立了酒精性脂肪肝大鼠模型,并研究了赶黄草
的体内防治酒精性脂肪肝的部分作用[6-7]。本实验选
用健康雄性昆明小鼠SPF级,应用范建高等的造模方
法并改良,进一步研究赶黄草的体内防治酒精性脂肪
肝的作用,为下一步筛选有效成分、治疗最佳浓度及
研究机制打下基础。
1 材料与方法
1.1 材料 昆明小鼠SPF,体重(20±2)g,雄性[泸州
医学院实验动物中心,许可证号:SCXK(川)2013-17]。
赶黄草药材,采自泸州古蔺县,由泸州百草堂中药饮
片公司提供优质精品干燥全草。赶黄草提取物,由8
倍量体积分数95%乙醇提取3次,合并提取液,减压
回收溶剂,干燥而得。硫普罗宁(tiopronin,TPN,商品
名凯西来)由河南新谊制药有限公司提供。谷草转氨
酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三
酯(TG)试剂由北京中生北控生物科技股份有限公司
提供,丙二醛(MDA)测定试剂盒由南京建成生物工
程研究所提供。赶黄草提取物和TPN均以生理盐水
配置成适当浓度,备用。 OLYMPUS AU一 600全自
动生化分析仪(日本Olympus公司)。
1.2 方法
1.2.1 动物模型分组及给药方法 将 60只SPF小鼠
适应性喂养 3天后随机分为正常对照组、模型组、赶
黄草提取物低剂量(20 mg/kg)、中剂量(40 mg/kg)、高
剂量(80 mg/kg)和TPN阳性药物对照组(50mg/kg)。
模型组小鼠喂饲高脂饲料并给予 3g/kg bw的乙醇
(0.1ml/10g bw,i.g.),正常组给予基础饲料和等体积的
蒸馏水。赶黄草和TPN组分别给予乙醇后6h给予相
应剂量的药物,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,
连续给药三周。实验过程中观察动物食欲、行为、状
态、毛发及动物死亡情况。末次给药后禁食 12h,实
验结束时测定肝脏系数,眼球取血分离血清测定TG、
TC、ALT、AST、MDA。
1.2.2 检测指标 肝脏系数=肝湿重/体重×100%。血
清ALT、AST、TC、TG应用OLYMPUS AU一600全自
动生化分析仪检测。血清MDA操作步骤按试剂盒
使用说明进行。
1.3 统计学方法 实验数据用χ-±s表示,采用SPSS12.0
基金项目:泸州医学院-泸州医学院附属中医医院联合青年基金项目(泸医院科[2013]12号)
作者单位:646000四川泸州,泸州医学院附属中医医院(胡祥宇、魏 嵋、袁叶飞、杨文信)
通信作者:杨文信,E-mail:369930758@qq.com
赶黄草对小鼠酒精性脂肪肝的实验研究
胡祥宇,魏 嵋,袁叶飞,杨文信
[摘要] 目的 探讨赶黄草对小鼠酒精性脂肪肝的预防作用。方法 选用健康雄性昆明小鼠SPF级,应
用范建高等人的造模方法并改良,喂饲高脂饲料并给予3g/kg bw的乙醇(0.1ml/10g bw,i.g.),造模的同时给予赶
黄草提取物进行药物干预,以硫普罗宁(TPN)为对照,观察小鼠一般情况,检测肝脏系数,眼球取血分离血清测
定TG、TC、ALT、AST、MDA。结果 造模三周后形成小鼠酒精性脂肪肝。与模型组比较,赶黄草提取物组肝
脏脂肪明显改善,赶黄草提取物组血清中TG、TC、ALT、AST明显下降(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,赶黄
草提取物组血清MDA均有所下降,但无统计学意义。结论 赶黄草具有较好的预防酒精性脂肪肝的作用。
[关键词] 赶黄草;酒精性脂肪肝
[中图分类号] R 575.5 [文献标识码] A
[文章编号] 1672-7193(2015)03-0288-03 Doi:10.3969/j.issn.1672-7193.2015.03.019
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西南军医 2015年5月 第17卷 第3期 Journal of Military Surgeon in Southwest China,Vol. 17,No. 3,May, 2015
统计软件进行方差分析,若方差不齐,采用秩和检
验。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采
用 t检验。
2 结 果
2.1 一般情况及肝脏系数
2.1.1 一般情况 在整个实验过程中,正常组小鼠体
毛有光泽、较为活泼,体重逐渐增大;其他各组小鼠均
有不同程度的食欲减退,生长速度减慢。模型组小鼠
安静,不喜动,毛发蓬乱无光泽;赶黄草组、TPN组小
鼠体毛比较干净,精神状态较好。
2.1.2 肝脏系数 与正常组相比,模型组小鼠肝脏系
数显著增加(P <0.01);与模型组相比各用药组小鼠肝
脏指数均显著下降(P <0.05),见表1。
表1 赶黄草对小鼠肝脏系数的影响(χ-±s,n=10)
注:与正常对照组比较,**P <0.01;与模型组比较,
▲P <0.05。
2.2 血清 ALT、AST、TC、TG 模型组与正常组比
较,血中ALT,AST,TC,TG均明显升高(P <0.01);与
模型组比较,其他各用药组血中ALT,AST,TC,TG均
明显降低(P <0.05,P <0.01),见表2。
组 别
正常对照
模型对照
赶黄草低剂量组
赶黄草中剂量组
赶黄草高剂量组
TPN组
肝脏系数
4.33±0.44
5.62±0.43**
5.58±0.50▲
5.51±0.53▲
5.46±0.67▲
5.58±0.53▲
组 别
正常对照
模型对照
赶黄草低剂量组
赶黄草中剂量组
赶黄草高剂量组
TPN组
ALT(mmol/L)
26..37±2.35
44.35±4.95**
36.48±1.25▲
36.01±1.45▲
35.40±1.60▲
37.90±3.59
AST(mmol/L)
82.14±5.01
136.48±12.50**
107.44±10.45▲
105.80±13.25▲▲
102.10±10.10▲▲
112±5.91▲▲
TC(U/L)
3.40±0.35
6.18±0.25**
4.50±0.26▲▲
4.23±0.44▲▲
4.12±0.40▲▲
4.20±0.48▲▲
TG(U/L)
1.01±0.32
2.42±0.40**
1.50±0.22▲▲
1.42±0.28▲▲
1.23±0.15▲▲
2.2±0.55▲▲
表2 赶黄草对小鼠血清ALT、AST、TC、TG的影响(χ-±s,n=10)
2.3 血清MDA 模型组与正常组比较,血中MDA
明显升高(P <0.01);与模型组比较,赶黄草各剂量组
及TPN组对血中ALT、AST、TC、TG均有明显降低的
作用(P <0.05,P <0.01),见表3。
表3 赶黄草对小鼠血清MDA的影响(χ-±s,n=10)
注:与正常对照组比较,*P <0.05,**P <0.01,与模型组比
较,▲P <0.05,▲▲P <0.01。
3 讨 论
酒精引起的脂肪肝、肝炎及肝硬化,主要是乙醇
本身和它的氧化物通过多种途径直接或间接作用损
害肝脏正常的功能和结构所致。目前我国对酒精性
肝病的研究多以临床研究为主,在实验性酒精性脂肪
肝动物模型的建立方面多采用的是大鼠酒精灌胃模
型,但是单纯酒精灌胃造模方法周期长、操作繁琐易
造成试验动物死亡[8]。用酒精和高脂饮食同时作用
诱导,可在较短时间内成功建立AFLD大鼠模型,与
AFLD的发病相似、重复性好,可在以后的AFLD试验
研究中广泛应用[9-11]。查阅近年来的文献,采用给予
小鼠酒精剂量 3g/kg bw,并辅以高脂饲料喂养造模,
快捷简便成功率高。
本实验通过测定血清中ALT、AST的变化来反映
酒精性脂肪肝所导致的肝功能变化,测定血清中TC、
TG的变化来反映酒精性脂肪肝所导致的脂质代谢紊
乱,测定MDA的变化来反映机体内脂质过氧化程
度。结果显示与正常组相比,造模成功后小鼠血清
ALT、AST的活力显著升高,TC、TG、MDA均显著升
高,高中低剂量的赶黄草的运用干预后,均有效的抑
制了血清中转氨酶活性、血脂及体内脂质过氧化程度
的升高,在降低ALT上赶黄草的效果优于TPN,而其
他功效与TPN相当。我们从更佳的动物模型证实了
赶黄草具有较好的预防酒精性脂肪肝的作用,该药具
有良好的运用前景和研究空间,对于该药的作用机制
有待进一步研究。
组 别
正常对照
模型对照
赶黄草低剂量组
赶黄草中剂量组
赶黄草高剂量组
TPN组
MDA(nmol/ml)
8.50±0.71
12.22±1.02**
10.27±1.44▲▲
9.80±0.85▲▲
8.89±0.71▲▲
9.20±0.61▲▲
注:与正常对照组比较,**P <0.01;与模型组比较,▲P <0.05,▲▲P <0.01。
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西南军医 2015年5月 第17卷 第3期 Journal of Military Surgeon in Southwest China,Vol. 17,No. 3,May, 2015
【参考资料】
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性脂肪肝的实验研究[J].中华消化杂志,2003,23(12):
752-753.
(收稿日期:2014-11-02)
(责任编辑:杨惠文)
瘤体刮除骨水泥填充治疗膝关节周围骨巨细胞瘤的疗效分析
吴勇刚,王科学,鲜成树,赖国维
[摘要] 目的 探讨应用瘤体刮除骨水泥填充术治疗膝关节周围骨巨细胞瘤的疗效。方法 回顾分析
2006年1月~2012年1月我院收治的31例膝关节周围骨巨细胞瘤患者,年龄19~45岁,平均(35.68±7.02)岁,其中
胫骨近端 19例,股骨远端 12例。入院后行相关检查,穿刺、活检证实为骨巨细胞瘤,术后标本再次病检确诊。
所有患者均采用了瘤体刮除骨水泥填充术治疗。术后所有患者采用1976年美国特种外科医院提出的总分为
100分的评分系统(HSS评分系统)进行临床疗效评定:优≥85分,良70~84分,中60~69分,差≤59分。结果 本
组31例患者中28例切口Ⅰ/甲愈合,余3例经换药及抗感染治疗,均延迟愈合;所有患者均获得随访,随访时间
2.5~5年,平均(3.44±0.82)年,其中 3例复发,复发时间分别为术后 18、22、25个月,复发率为 9.68%;术后患者
HSS评分结果,优:14,良:16,中:1,差:0例,优良率为:96.77%。结论 膝关节周围骨巨细胞瘤因其部位特殊,
治疗较为棘手,对于病理组织学检查为良性,侵袭范围>1/2,但未累及周围软组织及软骨关节面的膝关节周围骨
巨细胞瘤,瘤体刮除骨水泥填充术,操作简单,创伤小,术后关节功能好,局部复发率低,临床效果佳。
[关键词] 骨巨细胞瘤;膝关节;骨水泥
[中图分类号] R 738.2 [文献标识码] B
[文章编号] 1672-7193(2015)03-0290-03 Doi:10.3969/j.issn.1672-7193.2015.03.020
骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCT)是一
种常见的原发性骨肿瘤,具有潜在侵袭性、局部复发
性及较低的肿瘤转移性等特点。好发于膝关节周围
(股骨远端及胫骨近端),发生率约占GCT的一半以
上[1],因膝关节活动量大,关节功能高,该部位的肿瘤
的治疗需要满足强大的支撑[2]。笔者收集本院 2006
年 1月~2012年 1月收治的 31例膝关节周围GCT患
者,均采取瘤体刮除骨水泥填充术治疗,现对其治疗
及疗效进行回顾性分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本组 31例患者,男 13例,女 18例;年
龄19~45岁,平均(35.68±7.02)岁;病史1个月~1.5年;
其中胫骨近端肿瘤19例,股骨远端12例;所有患者均
作者单位:610500成都,新都区人民医院(吴勇刚、王科学、鲜成树、赖国维)
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