作 者 ：杨建强
期 刊 ：中国人民解放军军事医学科学院 2005年 07期 页码：103
关键词：漆酶；改良；定点突变；易错PCR；毕赤酵母原核表达；
摘 要 ：漆酶是一类含铜的多酚氧化酶,它的合成分泌存在有一系列的转译后加工过程(如糖基化等),一般认为漆酶蛋白的异源表达是比较困难。另外,漆酶的某些性质如氧化还原电位较低,高温易失活等也阻碍了它在实际中的应用。 野生革耳是新发现的一种能生产组成型漆酶的白腐真菌,该菌产生的漆酶具有较好的热稳定性,是一种极具研究价值和开发潜力的真菌漆酶。本研究中首先利用PCR扩增的方法在野生革耳漆酶基因lcc的3′端添加了编码5个氨基酸的酵母偏爱密码子,得到了改造的野生革耳漆酶基因lccT。将基因lcc和lccT分别连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA中,转化毕赤酵母进行分泌表达,获得了重组野生型...