全 文 ：基金项目:军队医疗机构制剂标准提高科研专项重点课题(编号:13ZJZ02)
通讯作者:史国兵 Tel:(024)28856262 E-mail:
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sysgb@ 126． com
中释放较少，而在碱性介质中溶散时限理想、释药与
普通 IDM肠溶片相比明显提高的 IDM肠溶滴丸，为
继续进行的体内实验奠定了实验基础。
参 考 文 献
1 孔令春． 吲哚美辛的临床应用进展［J］． 海峡药学，2006，18(2):
116-118
2 王巍，陈建明． 滴丸剂的特点及其应用［J］． 药学实践杂志，2003，
21(4):201-203
3 顾莉群．阿司匹林肠溶滴丸的研制及其体外释药研究［J］． 中国药
师，2010，13(1):59-61
4 李亚琴． 柴胡滴丸的成型工艺及优化［J］． 中成药，2005，27(11):
1254-1256
5 陆彬，卢丹． 吲哚美辛-PEG6000滴丸的研究［J］． 药学学报，1992，
27(3):227-230
6 范仁锋，郑敦胜，刘美华． 吲哚美辛-泊洛沙姆 188 固体分散体的制
备［J］． 医药导报，2011，30(3) :356-357
7 何艳，高萌，徐红．头孢克肟肠溶滴丸的制备及其质量评价［J］．中
国药房，2011，22(21):1973-1975
8 刘学起，刘伶，李莲秋． HPLC 法测定吲哚美辛肠溶片含量［J］．中
国药师，2007，10(3):258-259
(2013-12-10 收稿 2014-02-17修回)
复方黑参丸的质量标准研究
张晋 马宏达 高军 胡北 史国兵 (沈阳军区总医院药剂科 沈阳 110840)
摘 要 目的:建立复方黑参丸的质量控制标准。方法:采用薄层色谱法对复方黑参丸中的玄参、山豆根、射干分别进行定
性鉴别，采用高效液相色谱法同时测定哈巴俄苷及肉桂酸的含量。采用 Welchrom C18色谱柱，流动相为甲醇-乙腈-1%冰醋酸
溶液( 8∶ 21∶ 71) ，柱温 30℃，流速为1． 0 ml·min －1，检测波长为 278 nm。结果:玄参、山豆根、射干的薄层色谱鉴别具有较好的
专属性，阴性对照无干扰。哈巴俄苷与肉桂酸分别在1． 32 ～ 65． 80 μg·ml －1和0． 38 ～ 19． 20 μg·ml －1浓度范围内与峰面积线
性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的 ＲSD均小于 2% ;平均加样回收率分别为98． 06%、98． 78%，ＲSD为2． 16%、1． 34%
( n = 6) 。结论:所建立的定性和定量分析方法结果准确、可靠、重复性好，可用于复方黑参丸的质量控制。
关键词 复方黑参丸; 质量标准;哈巴俄苷;肉桂酸;高效液相色谱法
中图分类号:TQ460． 7 + 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)05-0716-03
Study on Quality Standard for Compound Heishen Pills
Zhang Jin，Ma Hongda，Gao Jun，Hu Bei，Shi Guobing (Department of Pharmacy，General Hospital of Shenyang Military Area Com-
mand，Shenyang 110840，China)
ABSTＲACT Objective:To establish the quality standard for compound Heishen pills． Methods:Scrophulariae Ｒadix，Ｒadix et
Ｒhizoma and Belamcancae Ｒhizoma were identified by TLC． HPLC was used to determine the content of harpagoside and cinnamic acid
in Scrophulariae Ｒadix on a Welchrom-C18 column using methanol -acetonitrile-1% ethylic acid (8∶ 21∶ 71)as the mobile phase． The
flow rate was 1． 0 ml·min －1 ． The column temperature was at 30℃ and the detection wavelength was set at 278 nm． Ｒesults:The TLC
method had good specificity without interference from negative control． The linear range of harpagoside was 1． 32-65． 80 μg·ml －1 with
the average recovery of 98． 06%(ＲSD = 2． 16%)，and that of cinnamic acid was 0． 38-19． 20 μg·ml －1 with the average recovery of
98． 78%(ＲSD = 1． 34%)． ＲSDs of precision，stability and reproductibility tests were all below 2% ． Conclusion:The established
method is accurate，feasible and reproducible． It can be used in the quality control of compound Heishen pills．
KEY WOＲDS Compound Heishen pills;Quality standard;Harpagoside;Cinnamic acid;HPLC
复方黑参丸［沈制字(2006)B01038 号］为沈阳
军区总医院的医院制剂，由玄参、山豆根、射干、天
冬、麦冬五味中药组成，具有清热解毒、养阴滋肺、利
咽消肿的功效，临床上用于治疗慢性咽炎，特别适于
地域性上呼吸道疾病。其君药玄参味甘、苦，性微
寒，归肺、胃、肾经，功能为清热凉血、滋阴降火、解毒
散结［1，2］。哈巴俄苷、肉桂酸为玄参主要成分，哈巴
俄苷为其特征性成分［3］，本文采用 HPLC 法测定玄
参中哈巴俄苷及肉桂酸的含量，采用 TLC 法对该制
剂中玄参、山豆根、射干分别进行定性鉴别，为全面
有效控制复方黑参丸的质量制定标准。
1 仪器与试药
日本岛津 LC-19AD 高效液相色谱仪;Welchrom
C18色谱柱(200 mm × 4． 6 mm，5 μm)，N2000 双通道
色谱工作站;KQ-250型超声波清洗器(昆山市超声仪
器有限公司，250 W，40 kHz)。
哈巴俄苷对照品(批号:111730-200605)、肉桂酸
对照品(批号:110786-200503)、苦参碱对照品(批号:
110805-200508)、玄 参 对 照 药 材 (批 号:121008-
201007)、射干对照药材(批号:0994-200203)均为中
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国食品药品检定研究院提供。复方黑参丸 (沈阳军
区 总 医 院 制 剂 室，批 号:20130706、20130820、
20130825、20130830);甲醇、乙腈为色谱纯;水为超纯
水;其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 TLC鉴别
2． 1． 1 玄参 取复方黑参丸 5 g，切碎，加硅藻土 4
g，研匀，加以水饱和的正丁醇 20 ml，超声处理 30
min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 2 ml使其溶解，作
为供试品溶液。另取玄参对照药材 1 g，加以水饱和
的正丁醇 20 ml，同法制成对照药材溶液。按处方比
例及工艺制备成不含玄参的样品，照供试品溶液的
制备方法制成阴性样品溶液。吸取供试品溶液 5
μl，阴性样品溶液 5 μl，对照药材溶液 2 μl，分别点
于同一硅胶 G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶ 2∶
1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸
溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，
在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑
点，阴性对照无干扰，结果见图 1。
2． 1． 2 山豆根 取复方黑参丸 5 g，切碎，加硅藻土
4 g，研匀，加浓氨试液 3 ml 润湿，再加二氯甲烷 30
ml，超声提取 30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲
烷 1 ml 溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照
品，加二氯甲烷制成每 1 ml 含 1 ml 的溶液，做为对
照品溶液。按处方比例及工艺制备成不含山豆根的
样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性样品溶液。
吸取供试品溶液 10 μl，阴性样品溶液 10 μl，对照品
溶液 10 μl，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以二氯
甲烷-甲醇-浓氨试液(5 ∶ 0． 6 ∶ 0． 3)的下层溶液为展
开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试
品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜
色的斑点，阴性对照无干扰，结果见图 2。
1．阴性样品
2．玄参对照药材
(批号:121008-201007)
3．复方黑参丸供试品
(批号:20130706)
1．阴性样品
2．苦参碱对照品
(批号:121008-201007)
3．复方黑参丸供试品
(批号:20130706)
图 1 玄参的 TLC鉴别 图 2 山豆根的 TLC鉴别
2． 1． 3 射干 取本品 4 g，切碎，加硅藻土 4 g，研
匀，加甲醇 30 ml，超声处理 30 min，滤过，滤液浓缩
至 2 ml，作为供试品溶液。另取射干对照药材 1 g，
加甲醇 10 ml，同法制成对照药材溶液。按处方比例
及工艺制备成不含不含射干的样品，照供试品溶液
的制备方法制成阴性样品溶液。吸取上述三种溶液
各 5 μl，分别点于同一硅胶 GF254 薄层板上，以乙
酸乙酯-甲醇-水(20∶ 2 ∶ 1)为展开剂，展开，取出，晾
干，置紫外光灯(254 nm)下检视。供试品色谱中，
在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，
阴性对照无干扰。
1．阴性样品 2．射干对照药材(批号:0994-200203)
3．复方黑参丸供试品(批号:20130706)
图 3 射干的 TLC鉴别
2． 2 含量测定
2． 2． 1 色谱条件 色谱柱:Welchrom C18色谱柱
(200 mm × 4． 6 mm，5 μm);流动相:甲醇-乙腈-1%
冰醋酸溶液(8∶ 21∶ 71);流速:1． 0 ml·min －1;检测
波长:278 nm;柱温为 30℃;进样量:20 μl。
2． 2． 2 对照品溶液的制备 分别取哈巴俄苷及肉
桂酸对照品适量，精密称定，加 30%甲醇溶解，分别
制成每 1 ml 含哈巴俄苷6． 5 μg及肉桂酸1． 9 μg的
混合对照品溶液。
2． 2． 3 供试品溶液的制备 取本品约 3 g，切碎，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 30 %甲醇 40
ml，密塞，超声处理 45 min，放冷，再称重，用 30 %甲
醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，微孔滤膜
(0． 45 μm)滤过，即得供试品溶液。
2． 2． 4 专属性试验 按处方比例及工艺制成不含
玄参的阴性样品，照“2． 2． 3”项下方法制备阴性样
品溶液。分别取哈巴俄苷对照品溶液、肉桂酸对照
品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各 20 μl，按上
述色谱条件测定，记录色谱图。结果表明，处方中其
他药材和辅料不干扰哈巴俄苷及肉桂酸的含量测
定。色谱图如图 4 所示。
2． 2． 5 标准曲线的制备 精密吸取混合对照品适
量，加 30%甲醇分别稀释至含哈巴俄苷浓度依次为
717
中国药师 2014 年第 17 卷第 5 期 China Pharmacist 2014，Vol． 17 No． 5
A．对照品 B．供试品 C．阴性样品 1．哈巴俄苷 2．肉桂酸
图 4 HPLC色谱图
1． 32，2． 63，6． 58，13． 16，26． 32，65． 80 μg·ml －1，含
肉桂酸浓度依次为0． 38，0． 77，1． 92，3． 84，7． 68，
19． 20 μg·ml －1的对照品溶液，各精密吸取 20 μl注
入高效液相色谱仪中，记录峰面积。以对照品溶液
浓度(X，μg·ml －1)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标
进行线性回归，哈巴俄苷回归方程为 Y = 8． 71 ×
104X － 7． 09 × 103，(r = 0． 999 9) ;肉桂酸回归方程
为 Y = 2． 96 × 105X + 1． 12 × 104，(r = 0． 999 7)。结
果表明，哈巴俄苷和肉桂酸分别在浓度范围1． 32 ～
65． 80 μg·ml －1，0． 38 ～ 19． 20 μg·ml －1与峰面积
呈良好的线性关系。
2． 2． 6 精密度试验 精密量取混合对照品溶液 20
μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件，重复进样 6
次，记录色谱图，结果哈巴俄苷及肉桂酸峰面积的
ＲSD分别为1． 36%和1． 83%。
2． 2． 7 重复性试验 取同一批样品(批号:
20130706)约 3 g，精密测定，共 6 份，分别按
“2． 2． 3”项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条
件测定，记录峰面积，计算样品中哈巴俄苷及肉桂酸
的含量。结果哈巴俄苷及肉桂酸的平均质量分数分
别为 0． 098 7 mg·g －1和 0． 039 5 mg·g －1，ＲSD 分
别为 1． 39%和 1． 77%，表明本方法重复性良好。
2． 2． 8 稳定性试验 取同一批样品(批号:
20130706)，切碎，取约 3 g，精密称定，按“2． 2． 3”项下
方法制备供试品溶液，于室温、阳光不直射的条件下
放置，分别在 0，3，6，12，15，18 h，测定哈巴俄苷峰及
肉桂酸面积，ＲSD 分别为1． 79%和1． 51%。结果表
明，样品溶液稳定性良好，在 18 h内测定完毕即可。
2． 2． 9 加样回收试验 取含量已知的同一批样品
(批号:20130706)6 份，精密称定，置于 50 ml 具塞
锥形瓶中，加入哈巴俄苷对照品溶液 2 ml(0． 080 4
mg·ml －1、肉桂酸对照品溶液 1 ml(0． 062 5 mg·
ml －1)，精密加入 30%甲醇 40 ml，照“2． 2． 1”项下色
谱条件分别测定，计算哈巴俄苷平均回收率为
98． 06%，ＲSD 为 2． 16%;肉桂酸平均回收率为
98． 78%，ＲSD为1． 34%。
2． 2． 10 样品测定 取 3 批样品(批号:20130820、
20130825、20130830)各 3 份，按“2． 2． 3”项下方法
制备供试品溶液。分别精密吸取混合对照品溶液、
供试品溶液各 20 μl，按上述色谱条件测定，记录色
谱图，根据峰面积，采用外标法计算 3 批样品中哈巴
俄苷及肉桂酸的含量，结果见表 1。
表 1 复方黑参丸中哈巴俄苷及肉桂酸
的测定结果(mg·g －1，n =2)
批号 哈巴俄苷 肉桂酸
20130820 0． 0880 0． 0352
20130825 0． 0872 0． 0346
20130830 0． 0903 0． 0371
3 讨论
3． 1 复方黑参丸是一种中药复方制剂，成分较为复
杂，影响 TLC鉴别的干扰因素较多。本文通过参考
文献［4］和预试验，选取处方中玄参、山豆根、射干 3
味药进行 TLC 鉴别。分别采用玄参对照药材对处
方玄参中特征性成分哈巴苷和哈巴俄苷进行鉴别;
对山豆根中更稳定的苦参碱进行定性鉴别;对射干
中特征性成分射干苷进行鉴别。结果表明该鉴别方
法专属性好，重复性高。
3． 2 在对玄参中的哈巴俄苷进行含量测定［5］时，发
现甲醇做有机相时，理论塔板数较低;乙腈做有机相
时，哈巴俄苷的保留时间较短，阴性干扰较大。结合
上述特点，进一步考察了甲醇、乙腈同时做有机相时
不同比例体系中的洗脱效果，同时 1%冰醋酸溶液做
水相。最终甲醇-乙腈-1%冰醋酸溶液体积比为 8∶ 21
∶ 71时，流量为1． 0 ml·min －1时，可以使哈巴俄苷与
其他成分完全达到分离，峰形良好，保留时间适宜。
同时也能满足肉桂酸的含量测定，故最终确定以甲
醇-乙腈-1%冰醋酸溶液(8∶ 21∶ 71)为流动相。
参 考 文 献
1 中国药典［S］． 2010 年版．一部． 108-109
2 夏聪华，石森林，葛卫红，等． 玄参药理活性研究进展［J］． 中国
药师，2008，11(8):911-913
3 耿莹莹，阙慧卿，师怡，等． 玄通胶囊中哈巴俄苷的 HPLC 测定
［J］． 中草药，2006，37(8):1187-1188
4 钮正睿，王如峰，荆宇，等． 玄参配方颗粒的制备工艺和含量测定
［J］． 中国中药杂志，2009，34(1):39-42
5 唐秀玲，吕铁峰． HPLC 法测定妇炎静胶囊中苦玄参苷ⅠA 的含
量［J］．中国药师，2011，14(3):429-431
(2013-12-05 收稿 2014-01-07 修回)
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