全 文 ：赶黄草抗酒精性脂肪肝研究
*
肖丽萍1，2，谢晓芳1，2，宋洋洋1，2，贺 抒1，2，杜巧辉1，2，刘建林1，2，张大永3，彭 成1，2＊＊
(1 成都中医药大学，成都 610075;2 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，
成都 611137;3四川古蔺肝苏药业有限公司，成都 610036)
摘 要 目的:研究赶黄草对酒精性脂肪肝的防治作用。方法:将大鼠分为正常对照组、模型组、硫普罗宁组( 0． 1g /kg) 和赶
黄草 16． 7g /kg，8． 4g /kg，4． 2g /kg组，除正常对照组外，各组每日灌胃乙醇两次并喂饲含 1． 5%硫酸亚铁的饲料。从造模第 4 周开
始，给药组上午灌酒精，下午给药。9 周后，取血测定谷丙转氨酶( ALT) 、谷草转氨酶( AST) 、总胆红素( TBIL) 、胆固醇( CHO) 、甘
油三酯( TG) 、高密度脂蛋白( HDL-C) 、低密度脂蛋白( LDL-C) ，并将肝组织匀浆测定总胆固醇( TC) 、TG 、游离脂肪酸( NEAF) 、丙
二醛( MDA) ，将肝脏行病理组织学检查并进行脂肪变性评分。结果:模型组大鼠血清中 AST，肝组织中 TG、NEAF 含量及肝组织脂
肪变性评分明显升高，血清中 HDL-C明显降低; 与模型组相较，各给药组能明显降低 AST及肝组织中 TG、NEAF的含量及脂肪变性
评分降低，但赶黄草 16． 7g /kg，8． 4g /kg，4． 2g /kg三者的药效作用强度未呈现出一定的剂量依赖关系。结论:赶黄草对脂肪肝有防
治作用。
关键词 赶黄草;酒精性脂肪肝
酒精性脂肪肝是酒精性肝病的初期表现，可进展为酒精性
肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化［1］。而酒精性肝病是欧
美国家肝硬化的主要病因，在我国有日趋增多的趋势，目前居
肝硬化病因的第二位［2］。赶黄草(Penthorum chinense Pursh)又
名扯根菜，为虎耳草科扯根菜属植物扯根菜的干燥地上部分，
始载于《救荒本草》，为苗族民间治疗肝病的经验药。现在市面
上有关于赶黄草治疗脂肪肝的报道，并且赶黄草水溶性部位分
离得到的槲皮素和没食子酸为已知具有保肝作用的成分［3］，有
研究表明槲皮素可降低肝脏肝质沉积，提高肝脏的抗氧化能
力［4］，对酒精性脂肪肝及体外酒精性肝损伤有防护作用［5，6］，我
们本次实验通过酒精灌胃并喂饲含硫酸亚铁的饲料复制酒精
性脂肪肝模型，探究赶黄草对大鼠酒精性脂肪肝是否有一定的
防治作用及其可能的作用机理。
1 材料和方法
1． 1 试验药物 赶黄草提取物，由四川古蔺肝苏药业有限公司
提供，经成都中医药大学中药鉴定学李敏教授鉴定为虎耳草科
扯根菜属植物扯根菜(Penthorum chinense Pursh)。赶黄草提取
物制备方法:取扯根菜 1000g，切碎，加水煎煮三次。第一次加
10 倍量水，第二、三次加 8 倍量水，每次煎煮 2h，每次滤过取水
煎液，将三次煎液合并，浓缩成 3g /ml。硫普罗宁肠溶片，阳性
药物，批号 121203，由河南省新谊药业股份有限公司生产。
1． 2 动物 SD 大鼠，清洁级，体重 180 ～ 220g，雌雄各半，由成
都中医药大学动物中心研究中心提供，动物质量合格证号
SCXK(川)2008-11，检疫后备用。实验设施质量合格证号:
SCXK(川)2008-049。
1． 3 试剂 无水乙醇，由成都市科龙化工试剂厂提供，批号
20130130;测血清指标的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶
(AST)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)试剂盒批号分别为
120521、130471、121001、120651，均购自中生北控生物科技股份
有限公司;总胆红素(TBIL)试剂盒由四川迈克生物科技股份有
限公司提供，批号 0313011;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低
密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒，由浙江伊利康生物技术有
限公司提供，批号分别为 130302、130101。测肝组织指标的总
胆固醇(TC)、TG试剂盒由长春汇力生物技术有限公司提供，批
号分别为 2013021、2013016;游离脂肪酸(NEAF)、丙二醛
(MDA)试剂盒批号分别为 20130517、20130311，均由南京建成
生物工程研究所提供。
1． 4 仪器 全自动生化分析仪(美国 BECKMAN COULTEＲ公
司，型号 AU5400);多功能酶标仪(美国 Thermo 公司，VAＲIOS-
KAN FLASH);紫 外 分 光 光 度 仪 (Techcomp 公 司，型 号
UV1100)。
1． 5 方法 取清洁级大鼠 60 只，待适应环境之后，将大鼠按
体重分为正常对照组、模型组、硫普罗宁组、及赶黄草高、中、低
剂量组，其中模型组大鼠 20 只，其余各组 8 只。造模方法根据
文献报道［5，7］及预试确定，即自试验第 1 天开始，模型组和各给
药组大鼠每日灌胃 45%乙醇，并给予喂饲含 1． 5%硫酸亚铁饲
料，正常对照组灌胃蒸馏水和给予普通饲料喂饲，各组灌胃体积
均为 10ml /kg，上下午各 1 次，期间根据造模大鼠状态，逐周调
节乙醇浓度，连续 3 周;自第 4 周起各造模组仅上午灌胃乙醇 1
次，下午预防给药，其中赶黄草高、中、低剂量组分别灌胃赶黄草
提取物 16． 7，8． 4，4． 2g /kg，硫普罗宁组灌胃硫普罗宁溶液 0．
1g /kg，正常对照组和模型组灌胃蒸馏水，给药体积均为 10ml /
kg，至试验结束。自试验第 6 周起，于每周给药末模型组取 4 只
动物进行血清 ALT，AST，TBIL，TC，TG，HDL-C，LDL-C 水平测定
和肝组织病理学检查。第 8 周末时肝组织出现脂肪变，第 9 周
末时终止试验。
末次给药 24h后，股动脉取血，离心后取血清采用全自动生
化仪测定 ALT，AST，TBIL，CHO，TG，HDL-C，LDL-C 水平;同时
每只大鼠立即剖剪一小部分肝组织，称重后用锡箔纸包裹冷冻
于-80℃，测定前匀浆，取匀浆液，测定肝组织 T-CHO，TG，NEAF，
MDA含量。另所有大鼠均取一叶肝组织用 10%的福尔马林固
定后，行病理学检查，包括病理学镜下图片及其脂肪变性评分。
29 中药药理与临床 2014;30(3)
* 基金项目:综合性中药新药研究开发技术大平台( 2009zx9301 － 005) ＊＊通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.03.029
其中脂肪变评分标准依病理损伤程度共分 4 级:(-)正常 评分
为 0。(+ )轻度损害 肝细胞内的脂肪空泡较小，且散在，评分
为 1。(+ +)中度损害 肝细胞内的脂肪空泡变大，范围较宽，
评分为 2。(+ + +)重度损害 脂肪空泡融合为大空泡，将细胞
核挤向胞膜下，状似脂肪细胞，评分为 3。
2 结果
2． 1 对肝功能和血脂水平的影响 模型组大鼠血清 AST明显
升高，HDL-C明显降低，ALT、CHO、TG亦有上升趋势，而其它指
标无明显变化;与模型组比较，各给药组血清 AST均明显下降，
CHO、TG有不同程度下降，但大部分值低于正常对照组值，而对
其余指标无明显影响，结果见表 1、表 2。
表 1 赶黄草提取物对大鼠肝功能的影响(珋x ± s)
组别
鼠数
(只)
剂量
(g /kg)
ALT
(U /L)
AST
(U /L)
TBIL
(umol /L)
正常对照 8 35． 9 ± 3． 9 237． 6 ± 4． 5＊＊ 1． 30 ± 0． 20
模型对照 8 42． 1 ± 7． 4 302． 7 ± 15． 0 1． 34 ± 0． 34
硫普罗宁 8 0． 1 40． 3 ± 7． 1 247． 7 ± 19． 0＊＊ 1． 55 ± 0． 61
赶黄草 8 16． 7 44． 3 ± 6． 2 244． 2 ± 15． 6＊＊ 1． 36 ± 0． 34
赶黄草 8 8． 4 40． 6 ± 7． 1 242． 6 ± 19． 5＊＊ 1． 90 ± 0． 39
赶黄草 8 4． 2 40． 0 ± 7． 0 255． 0 ± 28． 2* 1． 36 ± 0． 39
与模型组比较 * P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01(下同)
表 2 赶黄草提取物对大鼠血脂影响(珋x ± s)
组别
鼠数
(只)
剂量
(g /kg)
CHO
(mmol /L)
TG
(mmol /L)
HDL-C
(mmol /L)
LDL-C
(mmol /L)
正常对照 8 1． 86 ± 0． 14 1． 01 ± 0． 07 0． 65 ± 0． 03＊＊ 0． 55 ± 0． 05
模型对照 8 1． 88 ± 0． 13 1． 09 ± 0． 16 0． 58 ± 0． 04 0． 50 ± 0． 11
硫普罗宁 8 0． 1 1． 77 ± 0． 26 0． 69 ± 0． 17 0． 52 ± 0． 06 0． 53 ± 0． 10
赶黄草 8 16． 7 1． 69 ± 0． 26 0． 81 ± 0． 15 0． 56 ± 0． 08 0． 51 ± 0． 06
赶黄草 8 8． 4 1． 94 ± 0． 17 1． 06 ± 0． 23 0． 60 ± 0． 07 0． 62 ± 0． 10
赶黄草 8 4． 2 1． 78 ± 0． 31 0． 72 ± 0． 13 0． 54 ± 0． 13 0． 54 ± 0． 09
2． 2 对肝组织中 T-CHO、TG、NEAF和 MDA含量的影响 模型
组大鼠 TG，NEAF含量明显高于正常对照组，此外 T-CHO 含量
有也有升高趋势，MDA含量下降;与模型组比较，各给药组均能
显著降低模型大鼠肝组织中 TG、NEAF含量，结果见表 3。
表 3 赶黄草提取物对大鼠肝组织中 T-CHO、TG、NEAF和 MDA含
量的影响(珋x ± s)
组别
鼠数
(只)
剂量
(g /kg)
T-CHO
(mmol /L)
TG
(mmol /L)
NEAF
(umol /g)
MDA
(nmol /mg)
正常对照 8 1． 11 ± 0． 14 0． 73 ± 0． 11＊＊ 135． 4 ± 22． 4＊＊ 3． 18 ± 0． 36
模型对照 8 1． 24 ± 0． 18 1． 08 ± 0． 25 243． 4 ± 36． 2 1． 57 ± 0． 27
硫普罗宁 8 0． 1 1． 04 ± 0． 17 0． 82 ± 0． 26* 144． 6 ± 34． 7＊＊ 3． 02 ± 1． 17
赶黄草 8 16． 7 1． 70 ± 1． 47 0． 66 ± 0． 15＊＊ 141． 9 ± 29． 0＊＊ 3． 00 ± 1． 14
赶黄草 8 8． 4 1． 23 ± 0． 39 0． 72 ± 0． 18＊＊ 143． 1 ± 24． 5＊＊ 2． 44 ± 0． 33
赶黄草 8 4． 2 2． 95 ± 3． 41 0． 75 ± 0． 23＊＊ 144． 3 ± 28． 3＊＊ 2． 53 ± 0． 58
2． 3 对大鼠肝组织形态学的影响 正常对照组大鼠肝脏组织
外观红褐色，质软富弹性;模型组大鼠肝脏质地较韧，色泽较晦
暗，体积明显增大，切面略带油腻感;赶黄草高、中剂量组和阳性
药组肝外观较模型组好。
光镜下 HE染色，正常对照组肝小叶轮廓清晰，肝细胞排列
呈放射状，肝细胞大小形态正常，肝索排列整齐，核圆，位于细胞
中央，胞质均匀，模型组镜下可见肝细胞弥漫性水肿明显，胞浆
内出现大量大小不等脂肪空泡(后期大泡脂滴为多)，细胞核被
挤向周边，可见散在坏死灶及炎性细胞浸润。赶黄草高剂量组
同模型组比较，肝小叶结构清晰，胞浆脂滴明显减小，肝细胞排
列整齐，肝窦基本恢复正常，无炎性细胞浸润及坏死，赶黄草中、
低剂量组和硫普罗宁组大鼠部分肝组织正常，肝细胞索排列规
整，但仍有部分肝组织可见含有小脂滴细胞，或见肝细胞浊肿。
各试验组均有部分大鼠肝组织呈坏死样变，考虑为检测前肝组
织固定不理想所致，病理图片见图 1。
图 1 赶黄草提取物对酒精性脂肪肝大鼠肝组形态学的影响( HE染色，100 × )
39中药药理与临床 2014;30(3)
2． 4 对肝组织脂肪变性的影响 按脂肪变的程度分级进行评
分，模型组评分明显升高，与正常对照组比较有明显差异;经给
药后各组肝组织脂肪变评分均下降，其中赶黄草高剂量组最突
出，结果见表 5。
表 5 赶黄草提取物对酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂肪变性的影响(珋x
± s)
组别
鼠数
(只)
剂量
(g /kg)
脂肪变性分级 分值
正常对照 8 7(-)/ 1(+) 0． 13 ± 0． 35＊＊
模型对照 8 1(-)/ 7(+) 0． 88 ± 0． 35
硫普罗宁 8 0． 1 3(-)/ 5(+) 0． 63 ± 0． 52
赶黄草 8 16． 7 5(-)/ 3(+) 0． 38 ± 0． 52*
赶黄草 8 8． 4 3(-)/ 5(+) 0． 63 ± 0． 52
赶黄草 8 4． 2 3(-)/ 5(+) 0． 63 ± 0． 52
3 讨论
中医虽无脂肪肝这一病名，但根据其临床特点，多将其归
为胁痛、积聚、酒疸、伤酒 酒癖等范畴［8，9］。本病
为过量饮酒之后，湿热毒邪蕴结体内，损伤肝脾，肝郁脾虚，气血
不和，痰浊内生，气血痰湿搏结，停于胁下，形成积饮(酒癖)［9］。
故治疗应以清热解毒、疏肝健脾、活血化瘀、化痰除湿等为治疗
原则，而始载于《救荒本草》的赶黄草，具有清热、利湿、解毒、活
血、平肝、健脾等作用，其治疗酒精性脂肪肝有了中医理论为支
撑。而现代药理研究也表明赶黄草具备利胆、退黄、降酶作用，
保肝作用(酒精性肝损伤、抗肝纤维化)等［10］，近年临床报道用
来治疗多种肝病［11］，取得较好疗效，故赶黄草为抗酒精性脂肪
肝的试验研究奠定了理论基础。
酒精性脂肪肝的发病机制主要是通过酒精及其代谢产物、
氧化应激与脂质过氧化反应、细胞因子及免疫异常、铁过量
等［12］损害肝细胞的结构或者功能，脂肪在肝细胞的蓄积增加、
排出障碍而形成。实验结果表明模型组大鼠血清 AST 明显升
高，HDL-C明显降低，ALT有一定的下降趋势，而对血脂其它指
标无明显变化，说明酒精对大鼠肝功能有损害作用，而铁有可
能进一步加重了肝脏的负担，但对血液中的脂质代谢尚未造成
明显的紊乱;而在模型组大鼠肝组织中的 TG、NEAF 含量明显
高于正常对照组，而 T-CHO 有一定上升趋势，说明了可能是因
为游离脂肪酸参与氧化应激而损伤肝脏导致肝细胞内的脂质
蓄积增多。而赶黄草各给药组均能明显降低肝组织中 TG、
NEAF以及肝功能 AST，说明赶黄草抗酒精性脂肪肝的机制可
能是通过改善肝功能、调节肝脏脂质蓄积以及提高抗氧化能力
来完成的。
关于目前很多临床报道和试验报道多是脂肪肝形成后给
药，体现的是赶黄草的治疗作用。而此试验的优势是不仅体现
其治疗作用，更重要的是表现其对酒精性脂肪肝的防预作用。
本试验前 3 周每日灌 45%的酒精 2 次，从第 4 周开始各给药组
造模的同时预防给药，且在饲料中添加了硫酸亚铁加重肝脏负
荷。这样既可以缩短实验的周期，保证了能顺利造成酒精性脂
肪肝模型;又体现了赶黄草对脂肪肝的预防作用，可满足现代
人难以戒酒但又想预防脂肪肝的目的，但关于赶黄草用于临床
治疗酒精性脂肪肝的疗效需要更多的临床试验来进一步证实。
参考文献
1 中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组． 酒精性肝病诊疗
指南．胃肠病学，2010;15(10)∶ 617 ～ 621
2 陈灏珠，林果为．实用内科学．人民卫生出版社．第 13 版，2009∶ 2098
～ 2101
3 张旭，杨明．赶黄草有效成份的研究．成都中医药大学学报，2002;25
(4)∶ 46，51
4 张才科，白静，余慧，等．槲皮素体外抗氧化及对小鼠血脂代谢作用的
作用．天然产物研究与开发，2012;24∶ 663 ～ 667
5 袁叶飞，胡祥宇，欧贤红．赶黄草与檞皮素预防酒精性脂肪肝的比较
研究．中国药学杂志，2011;46(21)∶ 1635 ～ 1638
6 刘爽，姚平，宋毅，等．槲皮素对酒精性肝损伤的防护作用及其与 I型
血红素氧化酶关系的研究．营养学报，2009;31(1)∶ 83 ～ 85
7 李丹，郭春林，王春艳．郁芝胶囊对大鼠酒精性脂肪肝的治疗作用．中
国老年学杂志，2012;32(6)∶ 1200 ～ 1202
8 刘丽花，刘秀林，车念聪．从痰湿论治酒精性脂肪肝 72 例． 北京中医
药，2009;28(8)∶ 612 ～ 613，614
9 史亚祥，薛博瑜．扶脾活血化浊法治疗酒精性脂肪肝的中医病因学探
讨．中国中医急症，2009;18(1)∶ 65 ～ 67
10 胡杨洋，王胜鹏，陈锐娥，等．赶黄草的药学研究和应用．中药药理与
临床，2012;28(3)∶ 136 ～ 139
11 宋丽，臧志和，廖洪利．赶黄草的研究进展．西南军医，2007;9(2)∶
87 ～ 88
12 冯志强，沈志样，谭诗云．酒精性脂肪肝的发病机制研究进展． 世界
华人消化杂志，2002;10(3)∶ 346 ～ 348
Experiment research about resistant effects of Penthorum chinese Pursh on alcoholic fatty liver
Xiao Liping1，2，Xie Xiaofang1，2，Song Yangyang1，2，He Shu1，2，Du Qiaohui1，2，Liu Jianlin1，2，Zhang Dayong3，Peng Cheng1，2
(1Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 610075;2 State Key Laboratory of Systematic Ｒesearch and Exploitation
of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 61137;3 Sichuan GuLin liver Sue Pharmaceutical Limited Company，Chengdu 610036)
Objective:To study the therapeutic effects of Penthorum chinese Pursh extract on alcoholic fatty liver． Methods:The experimental rats
were divided into 6 groups:the nomal control group，the model group，tiopronin group(0． 1g /kg)，Penthorum chinense Pursh 16． 7g /kg，8． 4g /
kg，4． 2g /kg group． Except the nomal control group，other groups of alcoholic fatty liver were induced by alcoholic intragastrically two times ev-
ery day for 3 weeks and fed fodder with 1． 5% FeSO4． Those groups which were given relevant medicine every afternoon since fourth week
should induced by alcoholic intragastrically every morning ． At the end of 9 weeks，alanine aminotransferase (ALT) ，aspartate aminotransferase
(AST) ，total bilirubin(TBIL) ，Cholesterol(CHO) ，triacylglycerol(TG) ，high density lipoprotein cholesterol(HDL-C) ，low density lipoprotein
49 中药药理与临床 2014;30(3)
cholesterol(LDL-C)in blood were examined． Total choesterol(TC)，TG，free fatty acid(NEAF) ，malondialdehyde(MDA)in hepatic tissue
were detected，and the hepatic tissue pathological changes were observed，steatosis grade was evaluated． Ｒesults:Compared with the nomal
control group，model group，s content of AST in serum and TG ，NEAF，steatosis score about hepatic tissue increased significantly，and HDL-C
descended obviously． Every group can significantly decreased AST in serum and TG，NEAF in hepatic tissue． But Penthorum chinense Pursh
16． 7g /kg，8． 4g /kg，4． 2g /kg didn，t show the relationship of dose-effect． Conclusion:Penthorum chinese Pursh extract can treat alcoholic
fatty liver．
Key words Penthorum chinese Pursh(赶黄草);alcoholic fatty liver
辛夷对酒精性肝损伤小鼠氧化应激和 CD14、TNF-α mＲNA表达的影响*
黄川锋1，2，李 玲1，2，夏西超2，焦志峰2，丁 可2，李德加1＊＊
(1 武汉大学公共卫生学院，武汉 430072;2 南阳医学高等专科学校，南阳 473003)
摘 要 目的:探讨辛夷对酒精性肝损伤小鼠的保护作用及作用机制。方法:用连续灌服白酒的方法建立小鼠酒精性肝损伤
模型。将 60 只小鼠随机分为 6 组:空白对照组、酒精模型组、联苯双酯组( 150 mg /kg) 和辛夷制剂组( 2． 0、4． 0、8． 0g /kg) ，连续灌胃
4 周。肝组织 HE染色观察病理改变，测定肝指数，血清丙氨酸氨基转移酶( ALT) 和天冬氨酸氨基转移酶( AST) 活性及肝匀浆超氧
化物歧化酶( SOD) 活性和丙二醛( MDA) 含量，ＲT-PCＲ检测肝组织 CD14、TNF-α mＲNA表达。结果:与模型组相比，辛夷组( 4． 0、8．
0g /kg) 小鼠肝细胞形态基本正常; ALT、AST活性、MDA含量、CD14、TNF-α mＲNA表达水平显著降低，SOD活性显著增高。结论:辛
夷对小鼠酒精性肝损伤具有明显的保护作用，可能与降低肝细胞氧化应激和 CD14、TNF-α mＲNA表达有关。
关键词 辛夷;酒精性肝损伤;白细胞分化抗原 14;肿瘤坏死因子-α
酒精性肝病(alcoholic liver diseases，ALD)是我国常见的肝
脏疾病之一，其患病率有逐年上升的趋势。ALD 的发病机制十
分复杂，自由基损伤和炎症介质释放被认为是其致病基础 ［1］，
目前尚缺乏疗效肯定的药物［2］。中医药防治 ALD 的研究取得
了一定的进展，显示出独特的优势［3，4］，但对作用机制的研究不
够深入。辛夷为中药界所称的八大宛药之一，具有抗炎、抗
氧化等多面的药理活性［5］，具有潜在的保肝作用，但尚未发现
这方面的研究。本文通过小鼠急性酒精性肝损伤模型，研究辛
夷对酒精性肝损伤的防治作用。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 辛夷药材购自南阳市仲景大药房，经南阳医学
高等专科学校中药教研室袁国卿副教授鉴定，为木兰科木兰属
多年生落叶乔木望春玉兰(Magnolia biondii Pamp，MBP)的干燥
花蕾;将辛夷捣碎，称取 80g，用纱布包好，加入 500ml 蒸馏水，
浸泡 30min后武火迅速煮沸，再改用文火煮沸 10 分钟，收集煎
煮液(约 1:4)。再次同上处理，合并煎煮液，浓缩至 200ml(相
当于 0． 4g /ml)，4℃冷藏备用。联苯双酯滴丸(1． 5mg /丸)，浙
江万邦药业股份有限公司生产，批号:A02121101。
1． 2 动物 昆明种雄性小白鼠，SPF 级，6 ～ 8 周龄，体重 18 ～
22g，购自河南省实验动物中心，合格证号:SCXK(豫)2005-
0001。动物于实验前适应环境 1 周，普通饮料喂养，自由摄食和
饮水，自然光照，控制室温 18 ～ 20℃。
1． 3 试剂 北京红星二锅头(56%，北京红星股份有限公司
GB/T10781·2);ALT、AST (速率法)、MDA(TBA法)、SOD(羟
胺法)试剂盒购自南京建成生物工程研究所;TaKaＲa MiniBEST
Universal ＲNA Extraction Kit、TaKaＲa PrimeScript One Step ＲT-
PCＲ Kit Ver． 2，购自大连宝生物工程有限公司。
1． 4 仪器 GL-21M 型高速冷冻离心机(长沙)，680 酶标仪、
PTC-200 PCＲ 仪(美国 Bio-Ｒad 公司)，JY3000 +型多用途电泳
仪、Carestream Molecular Imaging(Carestream Health，Inc．)。
1． 5 方法 将 60 只雄性昆明种小鼠随机分为 6 组:空白对照
组、酒精模型组、联苯双酯 150 mg /kg、辛夷煎剂组(2． 0、4． 0、8． 0
g /kg)，每组 10 只。依据 2010 版《中国药典》中成人的辛夷生药
剂量(3 ～ 9g)［6］与《药理实验方法学》中人和小鼠的剂量换算系
数，按成人 9g辛夷剂量换算成小鼠低剂量(2． 0 g /kg)。每日灌
胃给药，连续 4 周。先是除空白组外，其余 5 组给予 56 度白酒
(10． 0 ml /kg)。1 h后联苯双酯组和辛夷组给予相应剂量药物，
空白组和模型组则给予等量生理盐水，每周根据动物体重调整
剂量。末次给药后禁食不禁水 12h，取血及肝组织进行各项指
标测定。
1． 5． 1 HE染色检测肝组织改变 取肝组织迅速置于 4%甲
醛中固定，石蜡包埋。切片厚度约 5μm，常规脱蜡脱水，做常规
HE染色，光学显微镜下(× 400)观察肝组织病理学改变。
1． 5． 2 肝指数、血清 ALT、AST 活性测定 摘眼球取血，制备
血清。脊椎脱臼法处死小鼠，迅速解剖，取出肝脏称重，计算肝
指数 =(肝重 /体重)× 100%。使用全自动生化分析仪以速率
法测定血清 ALT、AST活性。
1． 5． 3 肝组织MDA、SOD测定 制备 10%、1%肝匀浆分别用
于 MDA含量和 SOD 活性测定，使用 TU-1810 紫外分光光度计
59中药药理与临床 2014;30(3)
* 基金来源: 河南省教育厅自然科学研究计划项目( 项目批准号 No． 2007180036) ＊＊通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.03.030