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耐高温型灰树花菌株筛选及供试灰树花亲缘关系分析



全 文 :研究报告
Research Report
耐高温型灰树花菌株筛选及供试灰树花亲缘关系分析
杨军 1 徐吉 2 宋一鸣 1 朱坚 1*
1福建农林大学园艺学院,福州, 350000; 2福建农林大学植物保护学院,福州, 350000
*通讯作者, zhujian6469@126.com
摘 要 从 40株供试菌株中筛选获得两株可在 21.5~23.5℃条件下正常开片出菇的灰树花菌株 Gr0001+3
和 Gr0017。其中 Gr0001+3的子实体性状均优于 Gr0017,菌株 Gr0001+3在选育耐高温灰树花品种中可作为
育种亲本。本试验采用 RAPD和 ISSR分子标记技术对供试的 40株灰树花菌株进行了遗传多样性分析。其
中,8个 RAPD引物共扩增出 83条特异性条带,在相异系数 D=0.455处将 40株灰树花分为 9大类。9个
ISSR引物共扩增出 63条特异性条带,在相异系数 D=0.63处将 40株灰树花分为 5大类。综合分析显示,亲
缘关系聚类图在分子水平上显示了供试菌株之间的亲缘关系。从中可发现,21.5~23.5℃条件下可出菇的两
个菌株间亲缘关系较近,这些都将为今后灰树花的遗传育种亲本的选配提供理论依据。
关键词 灰树花,耐高温, RAPD, ISSR
Screen of Grifola frondosa Thermotolerant Strains and Analysis of the
Genetic Relationship of Candidate Strains
Yang Jun 1 Xu Ji 2 Song Yiming1 Zhu Jian 1*
1 College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou, 350000; 2 College of plant protection, Fujian Agriculture and Forestry
University, Fuzhou, 350000
* Corresponding author, zhujian6469@126.com
DOI: 10.13417/j.gab.035.000396
Abstract We screened two Grilfola frondosa strians Gr0001 +3 and Gr0017, which can fruit normally under
21.5~23.5℃, from forty candidate Grilfola frondosastrains. We observed that the fruitbody characters of Gr0001+3
were better than that of Gr0017, so Grilfola frondosastrain Gr0001+3 would be chosen as a parent for breeding
offsprings that are tolerent with high temperature. In our study, we employed RAPD and ISSR to analyze the
genetic diversity of the forty Grilfola frondosa candidate strains. Eight RAPD primers resulted in eighty-three
specific bands, and divided the forty Grilfola frondosa strains into nine groups when the dissimilarity coefficient is
0.455. Nine ISSR primers resulted in sixty-three specific bands, and divided the forty candidate Grilfola frondosa
strains into five groups when the dissimilarity coefficient is 0.63. The comprehensive analysis result showed that the
clustering figure indicated the genetic relationship of the forty strains at molecular level. From the corresponding
analysis, we can see that the two strains that could fruit at 21.5~23.5℃ have a close genetic relationship, which will
supply theoretical foundation for parent choice in Grilfola frondosa genetic breeding.
Keywords Grifola frondosa, Thermostability, RAPD, ISSR
基金项目:本研究由福建省现代农业食用菌产业技术体系建设项目(K83139296)资助
基因组学与应用生物学,2016年,第 35卷,第 2期,第 396-405页
Genomics and Applied Biology, 2016, Vol.35, No.2, 396-405
灰树花(Grifola frondosa)在分类学上属于真菌门、
担子菌纲、无褶菌目、多孔菌科、树花菌属,是食、药兼
用蕈菌(徐锦堂, 1997)。研究表明,其不仅口味鲜脆、营
养丰富,而且其活性成分对抑制肿瘤、改善机体功
能、以及调节血糖等均具有显著作用(李小定等, 2006),
因此市场对其需求量与日俱增。
目前,国内灰树花的人工栽培(季节栽培)已具备
一定规模,但是由于我国灰树花育种研究起步较晚,
现有菌种主要来自野生驯化或引自日本,这些菌种
均存在适应能力差、易染杂菌、生物转化率偏低等不
足(刘振伟和史秀娟, 2005),而为了满足市场持续增
长的需求,实现灰树花的周年工厂化生产是十分必
要的,但现有的菌种由于其自身的各种缺陷,并不都
能直接用于工厂化栽培,因此,选育适合工厂化栽培
的高产优质菌株是灰树花工厂化栽培的重要研究内
容(潘辉等, 2011)。
灰树花空调栽培的出菇温度通常为 16~18℃
(洪立钦, 2005),对于工厂化周年生产而言,在高温季
节维持这样一个出菇温度,势必增加生产成本,所以
本研究,从“福建省食用菌种质资源保藏管理中心”
的 40株灰树花菌株出发,在较高温度下进行出菇试
验,通过多种农艺性状的比较分析,旨在筛选出可作
为品种改良的较耐高温的亲本菌株或可直接用于工
厂化栽培的优良菌株。
相关文献表明(王守现等, 2010;温志强等, 2011;
王春晖等, 2013),RAPD和 ISSR两种分子标记可用
于灰树花间亲缘关系的鉴定,因此本试验利用这两
种分子标记对供试的 40株灰树花的亲缘关系进行
鉴定,以期为后续的灰树花杂交遗传育种提供依据。
1结果与分析
1.1耐高温菌株筛选
各项统计结果(表 1),在高温(21.5~23.5℃)条件
下,只有 Gr0001+3和 Gr0017菌株可正常岀菇(图 1),
且均为白色品种,其走菌周期较其他大多数菌株均
较短,分别只需 16.79 d和 16.97 d,出菇周期分别为
18.65 d 和 16.97 d,但产量均不高,单产分别为
134.95 g/袋和 117.60 g/袋,且出菇一致性较差,分别
为 5和 3。此外供试菌株满袋一致性 Gr0001+5最佳,
相隔一天全部满袋,各菌株走菌周期在 16~19 d内,
其中 Gr0011、Gr0025、Gr0026、走菌速度最快,分别
为 16.37 d、16.27 d、16.05 d。
1.2供试灰树花菌株子实体农艺性状比较分析
在出菇温度为 21.5~23.5℃条件下,在供试的 40株
灰树花菌株中,菌株 Gr0001+3和 Gr0017可以正常分
化开片出菇,其他菌株或不能正常形成原基,或形成
原基后不能正常分化开片(图 2)。Gr0001+3和 Gr0017
均为白色灰树花,出菇周期分别为 18.65 d和 16.97 d,
平均单产分别为 134.95 g/ 袋和 117.60 g/ 袋,
Gr0001+3 开片优于 Gr0017,Gr0001+3 的平均丛径
130.00 mm、丛高 85.00 mm、蒂重 5 g/ 袋,Gr0017 的
平均丛径 127.00 mm、丛高 77.10 mm、蒂重 9.8 g/袋。
从各方面数据比较可知,除了出菇周期 Gr0017
短于 Gr0001+3,在其他方面 Gr0001+3优于 Gr0017,
所以菌株 Gr0001+3在选育耐高温灰树花品种中更
适合作为育种亲本。
1.3 40株灰树花亲缘关系分析
1.3.1 RAPD多态性分析
利用 8个 RAPD随机引物对 40个灰树花菌株
进行 RAPD-PCR扩增,共获得 83条清晰可辨的特异
性条带,条带的数量均在 4条以上,除了引物 S33和
S64外,其他引物均可获得 100%多态性片段,其中
S17为 17条、S27为 4条、S33为 14条、S64为 5条、
S242为 5条、S1010为 14条、S1015为 11条、S1058
为 13条。图 3为引物 S27对 40株灰树花菌株的扩
图 1菌株 Gr0001+3和 Gr0017
注: A,B: Gr0001+3开片情况; C,D: Gr0017开片情况
Figure 1 Strain Gr0001 and Gr0017
Note: A,B: Gr00013 fruiting body; C,D: Gr0017 fruiting body
图 2非正常分化开片子实体
Figure 2 The abnormality of fruiting body
耐高温型灰树花菌株筛选及供试灰树花亲缘关系分析
Screen of Grifola frondosa Thermotolerant Strains and Analysis of the Genetic Relationship of Candidate Strains 397
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
表 1耐高温菌株筛选统计分析
Table 1 Results of screening of strains tolerant of high temperature
库藏编号
Stock number
Gr0001
Gr00011
Gr00012
Gr00013
Gr00015
Gr0002
Gr0003
Gr0003+1
Gr0005
Gr0006
Gr0007
Gr0008
Gr0009
Gr0011
Gr0011+1
Gr0012
Gr0012+1
Gr0013
Gr0014
Gr0015
Gr0016
Gr0017
Gr0018
Gr0019
Gr0020
Gr0021
Gr0022
Gr0023
Gr0024
Gr0025
Gr0026
Gr0027
Gr0028
Gr0029
Gr0030
Gr0031
Gr0032
Gr0033
Gr0034
Gr0035
满袋一致性(d)
Full bag of
consistency (d)
2
3
3
2
1
2
2
3
4
2
3
3
4
3
3
4
2
4
4
2
2
4
3
3
3
3
2
2
2
3
2
3
6
3
2
3
2
5
4
3
走菌周期(d)
Walk the
fungus cycle (d)
17.37
17.11
18.5
16.79
18.39
18.24
18.65
18.73
18.5
18.49
18.07
17.37
18.28
16.37
16.58
18.07
17.6
18.16
18.61
16.81
17.23
16.97
17.51
18.33
17.01
17.59
17.85
17.1
17.73
16.27
16.05
18.02
18.21
18.13
17.63
18.73
18.21
18.19
18.08
18.21
开口一致性(d)
Open the
consistency (d)
3
0
0
0
2
2
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
0
2
0
2
0
0
0
2
3
0
0
0
0
0
0
2
0
0
0
0
0
0
2
出菇一致性(d)
The mushroom
consistency (d)
5
3
采收一致性(d)
Harvest
consistency (d)
6
3
出菇周期(d)
The mushroom
cycle (d)
18.65
16.97
398
耐高温型灰树花菌株筛选及供试灰树花亲缘关系分析
Screen of Grifola frondosa Thermotolerant Strains and Analysis of the Genetic Relationship of Candidate Strains
库藏编号
Stock number
Gr0001
Gr0001+1
Gr0001+2
Gr0001+3
Gr0001+5
Gr0002
Gr0003
Gr0003+1
Gr0005
Gr0006
Gr0007
Gr0008
Gr0009
Gr0011
Gr0011+1
Gr0012
Gr0012+1
Gr0013
Gr0014
Gr0015
Gr0016
Gr0017
Gr0018
Gr0019
Gr0020
Gr0021
Gr0022
Gr0023
Gr0024
Gr0025
Gr0026
Gr0027
Gr0028
Gr0029
Gr0030
Gr0031
Gr0032
Gr0033
Gr0034
Gr0035
续表 1
Continuing table 1
平均单产(g/袋)
Average
yield (g/bag)
134.95
117.6
平均蒂重(g/袋)
The average
mushroom head
heavy (g/bag)
5
9.8
朵型色泽
The mushroom
shape and
colour (g/bag)
白色
White
白色
White
开片情况(三级)
Situation of the
opening up
(three-level)
++
+
平均丛径(mm)
The average
cluster size (mm)
130
127
平均丛高(mm)
The average
cluster high (mm)
85
77.1
399
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
图 3引物 S27扩增 40个灰树花菌株电泳检测
注: M: Marker 2 000 bp
Figure 3 Electrophoretogram for primer S27 amplifying specific
bands from forty strains
Note: M: Marker 2 000 bp
增图谱。
1.3.2 RAPD聚类分析
由 RAPD聚类分析(图 4)可知,40 株灰树花的
相异系数值在 0~0.72之间,在相异系数 D=0.455时,
40株灰树花分为 9大类,其中 Gr0001+3、Gr0008、
Gr0017、Gr0025, Gr0033 单独各为一类,Gr0003 和
Gr0003+1 为一类,Gr0026、Gr0031、Gr0035 为一类,
Gr0011、Gr0011+1、Gr0015、Gr0020 为一类,Gr0001、
Gr0001+1、Gr0001+2、Gr0001+5、Gr0002、Gr0005、
Gr0006、Gr0007、Gr0009、Gr0012、Gr0012+1、Gr0013、
Gr0014、Gr0016、Gr0018、Gr0019、Gr0021、Gr0022、
Gr0023、Gr0024、Gr0027、Gr0028、Gr0029、Gr0030、
Gr0032等 25株为一大类。
1.3.3 ISSR多态性分析
利用 9 个 ISSR 引物对 40 个灰树花菌株进行
ISSR-PCR扩增,共获得 63条清晰可辨的特异性条
带,除了引物 ISSR835外,其他引物均获得 100%多
态性片段,其中 ISSR1为 5条、ISSR2为 3条、ISSR3
为 7 条、ISSR4 为 5 条、ISSR17 为 9 条、ISSR825 为
8 条、ISSR835 为 10 条、ISSR836 为 6 条、ISSR873
为 10条。引物 ISSR1对 40株灰树花菌株的扩增图
谱(图 5)。
1.3.4 ISSR聚类分析
由 ISSR聚类分析(图 6)可知,灰树花相异系数
值在 0~0.95 之间,其中 Gr0011 与 Gr0011+1 间,
Gr0009与Gr0014间,Gr0002与Gr0007间,Gr0001+2
与 Gr0027间相异系数均为 0。在相异系数 D=0.63
时,40株灰树花分为 5大类,其中 Gr0005单独为一
类,Gr0019和 Gr0023为一类,Gr0001+2、Gr0003+1、
Gr0027 为一类,Gr0001+3、Gr0008、Gr0017 为一类,
Gr0001、Gr0001+1、Gr0001+5、Gr0002、Gr0003、Gr0006、
Gr0007、Gr0009、Gr0011、Gr0011+1、Gr0012、Gr0012+
1、Gr0013、Gr0014、Gr0015、Gr0016、Gr0018、Gr0020、
Gr0021、Gr0022、Gr0024、Gr0025、Gr0026、Gr0028、
图 4灰树花 RAPD分析遗传聚类
Figure 4 Dendrogram based on RAPD analysis of G. frondosa
图 5引物 ISSR1扩增 40个灰树花菌株电泳检测
注: M: Marker 2 000 bp
Figure 5 Electrophoretogram for ISSR1 primer amplifying specif-
ic bands from G. frondosa
Note: M: Marker 2 000 bp
Gr0029、Gr0030、Gr0031、Gr0032、Gr0033、Gr0034、
Gr0035等 31株为一大类。
1.3.5 RAPD-ISSR综合分析
统计 RAPD和 ISSR特异性条带总数,对统计数
据进行相似系数计算和非加权组平均法 UPGMA聚
类分析(图 7),40 株灰树花的相异系数值在 0~0.68
之间,在相异系数为 D=0.518处,40个菌株可分为
11类,其中 Gr0001、Gr0002、Gr0008、Gr0026、Gr0033
各自为一类,Gr0001 +3、Gr0017 为一类,Gr0003、
400
图 6灰树花 ISSR分析遗传聚类
Figure 6 Dendrogram based on ISSR analysis of G. frondosa
图 7 40株灰树花菌株的 RAPD-ISSR综合聚类
Figure 7 Dendrogram based on RAPD-ISSR analysis of 40
maitake strains
Gr0003+1 为一类,Gr0031、Gr0035 为一类,Gr0023、
Gr0025 为一类,Gr0001+1、Gr0001+2、Gr0001+5、
Gr0005、Gr0006、Gr0007、Gr0009、Gr0012、Gr0012+1、
Gr0013、Gr0014、Gr0016、Gr0018、Gr0019、Gr0021、
Gr0022、Gr0024、Gr0027、Gr0028、Gr0029、Gr0030、
Gr0032、Gr0034等 23株为一大类。
从 RAPD 聚类分析、ISSR 聚类分析以及
RAPD-ISSR综合聚类分析可知,在 21.5~23.5℃条件
下可以开片出菇的菌株 Gr0001+3和 Gr0017的亲缘
关系较近。
2讨论
灰树花空调栽培的出菇温度一般为 16~18℃,本
试验筛选耐高温型灰树花菌株所设定的筛选温度为
21.5~23.5℃,此温度下供试的 40个菌株中,只有菌
株 Gr0001+3和 Gr0017可以正常开片出菇,而这两
株灰树花是否可以耐更高的出菇温度,有待进一步
验证。从 Gr0001+3和 Gr0017的子实体性状看,菌株
Gr0001+3 总体上优于 Gr0017,Gr0001+3 可作为选
育耐高温灰树花品种的一个亲本。
本试验分别利用 RAPD、ISSR两种分子标记结
果和综合这两类标记的结果对 40株灰树花菌株进
行了聚类分析。在 RAPD标记中,在相异系数 D=
0.455时,菌株 Gr0001+3和 Gr0017被分别单独归为
一类,即便如此两菌株的亲缘关系仍十分近,在相异
系数 D=0.64时即可归为同一类;在 ISSR标记中,在
相异系数 D=0.63时,菌株 Gr0001+3和 Gr0017被归
为同一类;在 RAPD-ISSR综合分析中,在相异系数
为 D=0.518处,菌株 Gr0001+3和 Gr0017也被归为
同一类,综合三类分析,菌株 Gr0001+3和 Gr0017的
亲缘关系很近,这与 Gr0001+3 和 Gr0017 均能在
21.5~23.5℃出菇温度下正常开片出菇相互印证。从
3类聚类图中可以发现,利用两种分子标记对 40株
灰树花进行综合分析比单独使用分子标记鉴定的结
果准确,菌株类别被划分得更精细。此外,两类标记
聚类的结果有一定差异,这与特异性条带数量不够
多直接相关,如果两种分子标记能够筛选更多引物,
获得更多特异性条带,这种差异性将逐渐变小,两种
聚类结果将趋于相同。
本试验不仅获得两个耐更高出菇温度菌株
Gr0001+3和 Gr0017,而且将 40株供试菌株的亲缘
做了初步分析,这些都将为后续的灰树花育种工作
耐高温型灰树花菌株筛选及供试灰树花亲缘关系分析
Screen of Grifola frondosa Thermotolerant Strains and Analysis of the Genetic Relationship of Candidate Strains 401
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
提供一定依据。
3材料与方法
3.1耐高温灰树花菌株筛选
3.1.1供试菌株
40个灰树花菌株均来自福建省食用菌种质资源
保藏管理中心(表 2)。
3.1.2培养基配方
PDA培养基(g/L):马铃薯 200 g,葡萄糖 20 g,琼
脂 20 g。
原种培养基配方(质量比):木屑 75% (粗:细=1:2),
麦麸 8%,玉米粉 15%,蔗糖 1%,石膏 1%。另:配方
含水量 65%。
栽培袋培养基配方(质量比):木屑 45% (粗:细=
1:3),棉籽壳 30%,麦麸 8%,玉米粉 15%,过磷酸钙
1%,蔗糖 1%。另:配方含水量 65%。
3.1.3实验设计
40个供试菌株,每个菌株 5次重复,每次重复做
20袋,共计 4 000袋;每袋袋高 17 cm,袋重 1 200 g
(湿重);岀菇温度 21.5~23.5℃。
3.1.4栽培管理
走菌:环境温度 22~23℃、空气相对湿度 70%~
75%,二氧化碳 3 000 ppm以下,黑暗的培养室内培
养;催蕾:菌丝满袋、菌丝垫形成后,开袋增湿,并用
50 Lx光诱导,菌丝垫隆起成块状,颜色转黑,表面皱
褶时,搬入出菇室出菇;出菇:出菇室温度为 21.5~
23.5℃,空气相对湿度 90%~95%,光照 300~500 Lx,
二氧化碳浓度不高于 1 000 ppm;采收:灰树花充分
开片,菌管开始形成时采收称重、切除蒂头称重、测
定相关指标。
3.1.5观测与记录项目
观察并记录以一下指标和农艺性状。
满袋一致性:指第一袋到最后一袋菌丝长满的
间隔时间;开口一致性:指第一袋到最后一袋菌丝垫
形成,开袋光诱导的间隔时间;出菇一致性:指第一
袋到最后一袋现蕾出菇的间隔时间;采收一致性:指
第一袋到最后一袋采收的间隔时间;走菌周期:指从
接种到搬入菇房出菇历经的平均天数;出菇周期:指
从搬入菇房到采收历经的平均天数;平均单产:指每
袋采收后切除蒂头的平均丛重;平均蒂重:指每袋采
收后切除蒂头的平均蒂头重;朵型色泽:文字描述每
个菌株菇丛的典型特征和颜色;开片情况:分“好、
中、差”(或+++, ++, +)三级表示;平均丛径:指每袋采
收后切除蒂头,测量菇丛最大直径;平均丛高:指每
袋采收后切除蒂头,测量菇丛最大高度。
3.2基于 RAPD和 ISSR的 40株灰树花亲缘关系分析
3.2.1供试菌株
供试菌株同 3.1.1。
3.2.2菌丝培养与基因组 DNA的提取
将灰树花菌株用 PDA 液体培养基在 25℃、
120 r/min 摇床中培养 15 d,并收集菌丝,采用改良
CTAB法(蓝碧秀等, 2015)进行 DNA提取。
3.2.3引物与 PCR扩增
通过查阅文献(温志强等, 2011;王春晖等, 2013)
和预实验验证选取了 8个多态性较高的 RAPD引物
和 9个 ISSR引物,引物信息(表 3),由上海生工生物
工程有限公司合成。
RAPD-PCR和 ISSR-PCR扩增体系参照温志强
等(2011)的方法进行。PCR产物用 1%的琼脂糖凝
胶进行电泳,设置电压 160 V,电流 150 mA,电泳
60 min后于紫外凝胶成像仪上拍照。
3.2.4数据分析
统计特异性条带数,有条带的记作 1,无条带的
记作 0,用 Excel软件将统计结果转换成 0/1矩阵;利
用 DPS7.05软件进行数据分析,采用非加权组平均
法 UPGMA进行聚类分析,并生成亲缘关系聚类图。
作者贡献
杨军是本研究的主要执行人,负责材料的收集、
试验方案的实施、数据的整理以及文章初稿的撰写;
徐吉、宋一鸣参与部分试验实施;朱坚指导试验设计
和论文的修改。全体作者都阅读并同意最终文本。
致谢
本研究由福建省现代农业食用菌产业技术体系
建设项目(K83139296)资助。感谢福建农林大学菌物
研究中心为本研究提供了试验条件。
参考文献
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vation, Fujian Nongye Keji (Fujian Agricultural Science and
Technology), (1):43-44 (洪立钦, 1996,灰树花栽培的技术
402
表 2供试菌株来源
Table 2 The sources of the candidate strains
库藏编号
Stock number
Gr0001
Gr0001+1
Gr0001+2
Gr0001+3
Gr0001+4
Gr0001+5
Gr0002
Gr0002+1
Gr0003
Gr0003+1
Gr0004
Gr0005
Gr0006
Gr0007
Gr0008
Gr0009
Gr0011
Gr0011+1
Gr0012
Gr0012+1
Gr0013
Gr0035
菌号
Strain number
白灰树花
White maitake
白灰树花
White maitake
白灰树花
White maitake
白灰树花
White maitake
白灰树花
White maitake
白灰树花
White maitake
G5
G5
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
GF5
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
灰树花-2
Maitake-2
灰树花-2
Maitake-2
灰树花-3
Maitake-3
灰树花-3
Maitake-3
52
-
二级来源
The secondary source
福建省轻工业研究所蘑菇菌种研究推广站
Fujian Research Institute of Light Industry
福建农林大学
Fujian Agriculture and Forestry University
日本产品组织分离
Issue isolation from Japan product
东北食药用菌研究所
Northeast Edible and Medicinal Mushroom Institute
福州市农科所食用菌室
Edible Mushroom Department of Fuzhou Agricultural Science Research Institute
福建省农科院植保所
Institute of Rlant Protection, FAAS
福建省轻工业研究所蘑菇菌种研究推广站
Fujian Research Institute of Light Industry
福建省农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
日本产品组织分离
Issue isolation from Japan product
日本产品组织分离
Issue isolation from Japan product
姜堰市富康食用菌研究所
Jangyan Fukang Edible Mushroom Research Institute
习酒食用菌研究中心
Xijiu Edible Mushroom Research Center
华中农大菌种中心
Spawn Center of Huazhong Agricultural University
河北保定冀微覃源
Jiwei Tanyuan in Baoding, Hebei Province
四川农科院微生物实验室
Microbiological Laboratory of Sichuan Academy of Agricultural Sciences
辽宁锦州市亚泰食用菌研究所
Yatai Edible Mushroom Research Institute of Jinzhou, Liaoning Province
漳州市龙海九湖食用菌研究所
Zhangzhou Longhai Jiuhu Edible Mushroom Research Institute
三明真菌研究所
The Sanming Mycological Institute
漳州市龙海九湖食用菌研究所
Zhangzhou Longhai Jiuhu edible Mushroom Research Institute
三明真菌研究所
The Sanming Mycological Institute
三明真菌研究所
The Sanming Mycological Institute
福建农林大学
Fujian Agriculture and Forestry University
耐高温型灰树花菌株筛选及供试灰树花亲缘关系分析
Screen of Grifola frondosa Thermotolerant Strains and Analysis of the Genetic Relationship of Candidate Strains 403
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
库藏编号
Stock number
Gr0014
Gr0015
Gr0016
Gr0017
Gr0018
Gr0019
Gr0020
Gr0021
Gr0022
Gr0023
Gr0024
Gr0025
Gr0026
Gr0027
Gr0028
Gr0029
Gr0030
Gr0031
Gr0032
Gr0033
Gr0034
菌号
Strain number
53
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
120
151
B
G6
灰庆
Huiqing
灰黑日
Huiheibai
灰曾
Huiceng
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
-
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
-
-
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
灰树花
Maitake
二级来源
The secondary source
三明真菌研究所
The Sanming Mycological Institute
福州市农科所食用菌室
Edible Mushroom Department of Fuzhou Agricultural Science Research Institute
湖南农业大学食用菌研究所
Edible Mushroom Mesearch Institute of Hunan Agricultural University
福建农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
福建农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
福建农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
福建农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
福建农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
福建农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
福建农科院植保所
Institute of Plant Protection, FAAS
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu Edible Mushroom Science and Technology Ltd.
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu Edible Mushroom Science and Technology Ltd.
福建农林大学
Fujian Agriculture and Forestry University
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu Edible Mushroom Science and Technology Ltd.
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu Edible Mushroom Science and Technology Ltd.
福建农林大学
Fujian Agriculture and Forestry University
福建农林大学
Fujian Agriculture and Forestry University
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu edible Mushroom Science and Technology Ltd.
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu Edible Mushroom Science and Technology Ltd.
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu Edible Mushroom Science and Technology Ltd.
福建大九素食用菌科技有限公司
Fujian Dajiusu edible Mushroom Science and Technology Ltd.
续表 2
Continuning table 2
404
表 3 RAPD和 ISSR引物
Table 3 Primers of RAPD and ISSR
引物
Primer
S17
S27
S33
S64
S242
S1010
S1058
S1518
序列(5-3)
Sequence (5-3)
TGGGGACCAC
GAAACGGGTG
CAGCACCCAC
CCGCATCTAC
CTGAGGTCTC
GGGATGACCA
GGCTAGGTGG
GTGGGCATAC
引物
Primer
ISSR1
ISSR2
ISSR3
ISSR4
ISSR17
ISSR825
ISSR835
ISSR836
ISSR873
序列(5-3)
Sequence (5-3)
(CTC)4SC
(ACA)5BDB
(CA)8WG
(CAC)4SC
(TG)8RC
(AC)7T
(AG)7YC
(AG)7YA
(GACA)3
要点,福建农业科技, (1):43-44)
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利用改良 CTAB 法快速小量提取微胚乳玉米基因组
DNA,基因组学与应用生物学, 34(1): 190-194)
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Wu J.T., ed., 1997, Chinese medicinal mycology, Peking Union
Medical College Press, Beijing, China, pp.707-708) (徐锦
堂,主编, 1997,中国药用真菌学,中国协和医科大学联合
出版社,中国,北京, pp.707-708)
RAPD
Random amplification polymorphic DNA
ISSR
Information storage selection and retrieval
耐高温型灰树花菌株筛选及供试灰树花亲缘关系分析
Screen of Grifola frondosa Thermotolerant Strains and Analysis of the Genetic Relationship of Candidate Strains 405