全 文 ：广枣Vc含量的测定
狄建军1，张树军1，丁海麦2，魏永春1，薛 艳1
（1 .内蒙古民族大学生命科学学院，内蒙古 通辽 028000；2 .包头医学院生物化学与分子生物学教研室,内蒙古 包头 014000）
〔摘 要〕利用二甲苯－二氯靛酚比色法测定广枣中维生素C（Vc）的含量.结果表明：利用超声法破碎细胞测得
的Vc含量与未超声提取所测Vc含量有极显著差异，同时处理时间之间也存在显著性差异.广枣Vc含量随处理
时间延长而增多，未超声处理组和超声处理组的Vc含量平均值分别为33.113mg/mL和51.626mg/mL.
〔关键词〕广枣；超声处理；Vc含量
〔中图分类号〕Q56 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1671-0185（2012）04-0434-03
Determination of the Vitamin C in Fructus Choerospondiatis
DI Jian-Jun1,ZHANG Shu-Jun1，DING Hai-Mai2,WEI Yong-Chun1,XUE Yan1
（1 .School of Life Science, Inner Mongolia University for Nationalities, Tongliao 028000，China;
2 .Department of Biochemistry and Molecular Biology, Baotou Medical College, Baotou 014000,China）
Abstract: Guangzao vitamin C（Vc）content was measured by the Xylene-dichloro-indophenol colorimetry. The Vc content
were significantly different in Ultrasonic treatment and non-ultrasound treatment. There was an obvious difference between
the treatment time. Guangzao Vc content increased with prolonged treatment time. The average content of Vc with the
ultrasound treatment group and no ultrasound treatment group were 51.626mg/mL and 33.113mg/mL, respectively.
Key words: Guangzao; Ultrasonic treatment; Vc content
维生素C（vitamin C, Vc），又名抗坏血酸,是世界卫生组织及联合国工业发展组织共同确定的人类26种基本药物之一.
Vc参与体内活性氧清除,调控细胞分裂和细胞生长,并作为多个酶的辅因子参与多种生理过程〔1〕，现在人们又认识到维生
素C在心血管系统疾病和癌症预防和治疗中可能发挥很重要的作用〔2〕.广枣为漆树科植物南酸枣Choerospondias axillaris
（Roxb.）burtt et Hill的干燥成熟果实，其性平，味甘、酸，具有行气活血、养心安神之功效，用于气滞血瘀、胸痹作痛、心悸气
短、心神不安等症〔3〕.现代药理学研究证明，广枣具有多种生理活性，尤其对心血管系统有显著作用〔4〕.冠状动脉粥样硬化是
一种预后严重的疾病.严重发作常可导致患者突然死亡，劳动力也大大受到影响，因而早期治疗具有重要的意义.广枣是蒙
医治疗心血管病的主药.近年来使用蒙药广枣为主的处方在治疗冠心病、心绞痛取得了较好的疗效〔5〕.
南酸枣果实中Vc含量很高，每100g鲜果含维生素C为1200mg〔6〕，广枣中的Vc含量还未见有详细报道，研究广枣中维
生素C的含量，对于广枣药效机制的阐明、广枣药材的质量控制以及广枣药品、食品的研发均具有一定的参考价值.维生素
C的测定方法很多,包括磷钼酸法（可见光分光光度法）、2,6-二氯酚靛酚滴定法、高效液相色谱法、核磁共振内标法〔7〕等.本
文利用二甲苯－二氯靛酚比色法测定了广枣的Vc含量（mg/100g）.
1 仪器和材料
1.1 仪器
KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；EPS-2001电子天平（长江湘平科技发展有限公司）；SHB-B88
循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；T6新世纪型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器责任有限公司）以
及其他实验室常用设备.
1.2 原料
基金项目：内蒙古民族大学校级科研项目（MDX2008023）
作者简介：狄建军，内蒙古民族大学生命科学学院讲师，硕士.
第27卷 第4期 内蒙古民族大学学报（自然科学版） Vol.27 No.4
2012年7月 Journal of Inner Mongolia University for Nationalities Jul.2012
DOI:10.14045/j.cnki.15-1220.2012.04.023
广枣购于蒙王医药公司.
2 实验方法
2.1 广枣的处理
取适量的广枣将其粉碎，过40目的筛子，得到干燥的广枣粉末.分两组.
超声组：分别称取2g的干燥广枣粉末，然后用60mL 2%的偏磷酸（W/V）浸渍，放入超声清洗仪中分别超声20min、
40min、60min、80min、100min、120min，再将超声后得到的广枣溶液放入抽滤器中抽滤去渣，将得到的抽滤液用100mL容量
瓶定容待用.
非超声组：分别称取2g的干燥广枣，然后用60mL 2%的偏磷酸浸渍，分别静置20min、40min、60min、80min、100min、
120min，再将得到的广枣溶液放入抽滤器中抽滤去渣，将得到的抽滤液用100mL容量瓶定容待用.
2.2 测定步骤
2.2.1 2,6－二氯靛酚（2,6－二氯靛酚吲哚酚钠盐）溶液配制及滴定度测定：参照中华人民共和国国家标准GB/T 6195—86.
滴定度按式（1）计算:
滴定度T（mg/ml) = C ×VV1 -V2 （1）
式中:T—─每毫升2,6－二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数;C—─抗坏血酸的浓度,mg/mL;V—─吸取抗坏血酸的体
积,mL;V1—─滴定抗坏血酸溶液所用2,6－二氯靛酚溶液的体积,mL;V2—─滴定空白所用2,6－二氯靛酚溶液的体积,mL.
2.2.2 标准曲线的绘制: 参照中华人民共和国国家标准GB/T 6195—86.用6只50mL具塞试管加入5mL 2%偏磷酸和5mL
pH4.0的乙酸钠缓冲液,然后依次加入0.0,0.1,0.3,0.6,0.9,1.2及1.5mL 2,6－二氯靛酚溶液,用力摇动5s,再向各试管中加入
10mL二甲苯,再激烈摇动20s,静置分层后与试样管同时比色（无染料的试液作空白）,以吸光度为纵坐标,2,6－二氯靛酚的
毫升数为横坐标绘制标准曲线.
2.2.3 样品Vc测定
吸取5mL2%偏磷酸样品浸出液于50mL具塞试管中,加5mLpH4.0的乙酸钠缓冲液和2mL染料溶液,激烈摇动5s,立即
加入10mL二甲苯,再激烈摇动20s,待静置分层后,从二甲苯层中小心吸取一份,放入1cm比色杯中于500nm波长下进行比
色.记录吸光度A,在标准曲线上查出二甲苯层中2,6－二氯靛酚的毫升数.整个操作应在30min内完成.Vc含量据式（2）计
算：
维生素C（mg/mL) =（2-V） ×T × 202 × 100
式中: V——滴定样液时消耗染料溶液的体积,mL; T——2,6－二氯靛酚染料滴定度, mg/mL;
3 结果及结果分析
3.1 2,6－二氯靛酚溶液滴定度
经计算2,6－二氯靛酚溶液滴定度为0.096mg/mL.
滴定度T（mg/mL) = C ×VV1 -V2 =
1 × 110.533- 0.090 = 0.096(mg/mL)
3.2 标准曲线
参照中华人民共和国国家标准GB/T 6195—86，利用二甲苯－二氯靛酚比色法绘制标准曲线（如图1）.
图1 标准曲线
Figure 1 Standard curve
第4期 狄建军等：广枣Vc含量的测定 435
表1 Vc含量单因素方差分析
Table 1 Vc content with one-way ANOVA
来源
模型
超声时间
是否超声
误差
总计
注：R2 = 0.981
III 型平方和
138601.207a
3179.855
6169.124
2695.560
141296.767
df
7
5
1
65
72
均方
19800.172
635.971
6169.124
41.470
F
477.456
15.336
148.761
Sig.
.000
.000
.000
经SPSS进行统计分析结果显示，随着处理时间的延长所测得的Vc含量也在不断增加，其平均值如表2所示.
表2 不同处理时间所测的的Vc含量平均值
Table 2 The average eontent of Vc by the different treatment tine
处理时间（min）
Vc含量（mg/mL）
20
31.536
40
39.982
60
40.133
80
43.089
100
46.011
120
53.466
4 讨论
维生素C作为维持机体生理功能的重要维生素之一，对人体健康有着重要的意义.目前测定维生素C含量的方法很多，
主要有滴定分析法、微量滴定法〔8〕、分光光度法、电极法、薄层色谱法、高效液相色谱法等.其中，滴定法操作简单，笔者也试
图使用此法测定，但由于广枣Vc浸提物有色，不管是浓度高还是浓度低对滴定终点都难以准确判断，经白陶土脱色处理也
不理想，其滴定终点仍然难以判断；对于分光光度法，笔者也曾参考郑京平〔9〕所建立的紫外分光光度快速测定法，对广枣
Vc浓度进行测定，经多次重复后发现，在用NaOH处理浸提液后，紫外吸收有增高，目前还不知其具体原因，有待进一步验
证.另外，高效液相色谱法灵敏度高、选择性好，但前期处理较复杂，定量时需要高纯度物质作对照〔6〕，且所需仪器较贵重，
还不能普遍使用.本文利用二甲苯-二氯靛酚比色法虽然适用于测定深色样品还原型抗坏血酸, 但由于萃取液二甲苯为有
机溶剂, 有很强的毒性, 既不利于操作人员的健康, 也不利于环境保护, 所以有待于建立更好的测定广枣Vc含量的办法，乃
至推广到适用于浸提物有色的干燥中草药中Vc含量的测定.
参 考 文 献
〔1〕余春梅,李斌,李世民等.拟南芥和作物中维生素C生物合成与代谢研究进展〔J〕.植物学报，2009, 44（6）: 643-655
〔2〕杨淑梅,杨晓梅.维生素C的研究动态及新的治疗前景〔J〕.中国医药导报,2008,5（28）:11-13
〔3〕中华人民共和国国家药典委员会.中国药典〔M〕.一部. 2005.
〔4〕李卫民,高志.蒙药广枣的药效学研究概况〔J〕.中国民族医药杂志, 1996, 2（1）: 41.
〔5〕娜仁满都拉,色图雅,照日格图.蒙药广枣七味丸治疗冠心病的体会〔J〕.中国民族医药杂志, 2004,1（1）:30
〔6〕罗登宏.野生南酸枣发酵保健饮料的研制〔J〕.中国酿造，2010（1）：164-166.
〔7〕陈春丽,田兰,马晓丽等.核磁共振内标法测定维生素C片中维生素C的含量〔J〕.中国药房,2010,21（32）：3063-3065
〔8〕蔡凌霜,徐昊,张玉清.微量滴定法测定抗坏血酸（Vc）含量〔J〕.内蒙古民族大学学报（自然科学版）. 2004,19（5）:
521-523.
〔9〕郑京平.水果、蔬菜中维生素 C含量的测定——紫外分光光度快速测定方法探讨〔J〕.光谱实验室，2006,23（4）:
731-735.
〔责任编辑 徐寿军〕
内 蒙 古 民 族 大 学 学 报 2012年436