全 文 ：ExperimentalStudyonAnti-inflammatoryEfectsof
MahuangDecoctionandItsCompositions
LiuYonggang1 , 2 , LuoJiabo1 , HeFeng1
(1.KeyLaboratoryofPharmaceuticalofMateriaMedica, NanfangMedicalUniversity, Guangzhou510515;2.DepartmentofPharma-
ceutical, GuangdongProvincialCorpsHospitalofChinesePeople sArmedPoliceForce, Guangzhou510507)
Abstract　Objective:Toexploretheregularityofrecipecompositionbyobservinganti-inflammatoryefectsofMahuangDecoction
(MHD)anditscompositions.Methods:Neutrophilaggregationwasinducedbyintraperitonealinjectionofglycogeninrats.Intraperito-
neallavagefluid(PLF)wascollectedandneutrophilswereremoved.NeutrophilswerestimulatedbycalciumionophoreA23187invitro
toproduceleukotrieneB4.TheconcentrationofleukotrieneB4 wasmeasuredbyreversed-phaseHPLC, anti-inflammatoryefectwas
observedbytheauricularedemawithdimethylbenze.Result:MHDanditscompositionscouldinhibittheauricularedemawithdimeth-
ylbenzeandleukotrieneproductionfromneutrophilsinrats.InhibitoryeffectsofMHDcompositionswerediferent.Conclusion:MHD
hadsignificantlyinhibitoryeffectsontheauricularedemawithdimethylbenzeandleukotrieneproductionfromneutrophilsinrats.The
originalformula(MHD)workedbest.TheseresultconfirmedtherationalityandscientificlevelofMHD.
Keywords　MahuangDecoction;Anti-inflammatory;LeukotrieneB4
虎斑游蛇对炎症介质影响的实验研究
赵文静　李淑莲　刚宏林
(黑龙江中医药大学 ,哈尔滨 150040)
　　摘要　目的:通过研究虎斑游蛇对炎症介质(组胺和 5-羟色胺)的影响 , 以探讨虎斑游蛇的抗炎作用机理。方
法:采用荧光法测定大鼠足趾炎性渗出物中组胺和 5-羟色胺的含量。 结果:虎斑游蛇对炎性渗出物中的炎症介质
有显著的抑制作用 , 能够明显减少渗出液中组胺和 5-羟色胺的含量。结论:虎斑游蛇通过抑制组胺和 5-羟色胺的
合成及释放而发挥抗炎作用。
关键词　虎斑游蛇;抗炎;炎症介质
　　虎斑游蛇 NatrixtigrinaLateralis(Berthold)为游
蛇属无毒蛇 。传统医学认为虎斑游蛇具有祛风湿 、
止痹痛 、解毒等功能 ,在民间被广泛应用于治疗风湿
性关节炎 、骨结核等疾病 。本课题组对虎斑游蛇的
抗炎作用已作了系统的实验研究 ,证实了其具有良
好的抗炎作用 〔1〕。本文从炎症介质方面对其进行
药理实验研究 ,结果报道如下。
1 　实验材料
1.1 　材料　虎斑游蛇捕捉于黑龙江省虎林县境
内 ,活体经黑龙江中医药大学生药教研室鉴定为游
蛇科虎斑游蛇 NatrixtigrinaLateralis(Berthold),药
材经干燥磨成粗粉 ,由黑龙江中医药大学机能实验
室制备成 100%的醇提液(含生药量 1 g/ml),根据
所需浓度用生理盐水配制 。
1.2 　药品及试剂　正丁醇(哈尔滨市化工试剂
厂),邻苯二甲醛(Sigma-ALDRich, co.p.o.Box.
14508, St, Louis.MO863178USA314-771-5750), L-
半胱胺酸 (上海新兴化工试剂研究所 , 批号:
020518),过碘酸钠(天津市天大化工实验厂),四硼
酸钠(天津石英钟厂霸洲市化工分厂 ), 5-羟色胺
(Sigmachemicalcorp.o.Box.14508 St.Louis.Mo
863178USA314-7715-5)。
1.3　实验动物　Wistar大鼠 ,由黑龙江中医药大
学动物实验中心提供。
1.4　实验仪器　荧光分光光度计(日本 ·岛津 ,
RF-5301PC),离心沉淀机(上海医且分析仪器厂)。
2　方法与结果
2.1　大鼠炎性渗出物中组胺的含量测定〔2〕　取健
康 Wistar大鼠 40只 , ♂,体重为 140 ～ 180g,随机分
成 4组 ,然后分别灌胃给高 、低不同浓度的虎斑游蛇
制剂(100%、50%浓度的醇提液)和对照药物(空白
对照组 0.9%生理盐水 ,阳性对照组 0.075%氢化可
的松),每天灌胃 1次 ,连续灌胃给药 7 d。于末次
给药 1 h后 ,将配好的 10%新鲜鸡蛋清 0.1 ml,注入
每只大鼠右足跖皮下致炎 ,致炎 4 h后沿踝关节上
约 0.5 mm处剪下致炎右足 ,进行称重 ,然后划破足
跖皮肤组织浸泡于 5.0 ml的酸化正丁醇溶液中 4
h,去掉致炎足 ,浸液离心 (1500 r/min, 5 min)。取
·415·中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.05.023
水相 0.5 ml,加入 1.5 ml的三蒸水稀释一倍 ,再加
0.4 mol/LNaOH 0.5 ml碱化 , 混匀并迅速加入
0.1%OPT溶液 0.1 ml,立即混匀并在 21 ～ 22℃反
应 10min,然后加入 0.5 mol/LHCl0.5 ml酸化以
终止缩合反应 ,在激发光波长为 360 nm、发射光波
长为 440 nm下测定荧光强度 。同时制备组胺的工
作曲线 ,计算渗出液中组胺的含量 ,比较给药组和空
白对照组中组胺含量的差异 ,结果见表 1。虎斑游
蛇醇提物高 、低剂量组及氢化可的松组均对 10%新
鲜蛋清致大鼠足肿胀的组胺渗出有明显的抑制作
用 ,其中高剂量组对组胺的抑制作用与氢化可的松
相当。
　Tab.1　EffectsofNTLoncontentsofhisinflammatory
ininflammatoryeffusionofrat( x±s, n=10)
Group Dose(g/kg) Histame(ng/ml)
Control - 35.41±4.14
100%NTLExtract 20 24.12±4.45＊＊
50%NTLExtract 10 27.56±3.62＊
0.075%Hydrocortisone 15mg 22.67±4.14＊＊
　　＊P<0.05, ＊＊P<0.01, vscontrolgroup
2.2 　大鼠炎性渗出物中 5-羟色胺的含量测定〔3〕　
分组 、给药与处理均同 2.1项 。剪下致炎右足 ,进行
称重 ,然后划破足跖皮肤组织浸泡于 5.0 ml的酸化
正丁醇溶液中 4 h,去掉致炎足 ,浸液离心(1500 r/
min, 5 min)。取水相 0.5 ml,加入 0.1 ml的 0.5 %
半胱氨酸 ,依次加入酸性 OPT溶液 3 ml和 0.02%
的过碘酸钠 0.1 ml,在沸水浴中煮 10min,然后用水
冷却到室温 ,在激发光波长为 365 nm、发射光波长
为 480nm下测定荧光强度 。同时制备标准管和样
品空白管以计算 5-HT含量 ,比较给药组和空白对
照组中 5-HT含量的差异 ,结果见表 2。虎斑游蛇醇
提物高剂量组对 10%新鲜蛋清致大鼠足肿胀的 5-
HT渗出有抑制作用 , 其低剂量组则无抑制作用
(P>0.05)。
3 　讨论
血管活性胺类是细胞释放的炎症介质 ,主要为
组胺(Histame)和 5-羟色胺(5-HT),它们是参与炎
症早期反应的主要炎症介质。其中 5-羟色胺既是
一种对各种用织有局部作用的自体活性物质 ,又是
　Tab.2　　EffectsofNTLoncontentsof5-HTin
inflammatoryeffusionofrat( x±s, n=10)
Group Dose(g/kg) 5-HT(ng/ml)
Control - 15.32±1.30
100%NTLExtract 20 14.67±0.86＊
50%NTLExtract 10 15.38±1.55
0.075%Hydrocortisone 15mg 14.52±0.83＊＊
　　＊P<0.05, ＊＊P<0.01, vscontrolgroup
一种中枢神经递质。大部分分布于肠嗜铬细胞内 ,
一部分在血小板内 ,一小部分在中枢神经系统。参
与炎症反应的 5-羟色胺主要来源于血小板 。组胺
主要存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中 ,系
由 L-组胺酸经组胺酸脱羧酶(HDCO)的作用形成
的 ,形成后的组胺与肝素结合 ,以颗粒的形式储存在
细胞内 ,在有免疫性刺激 、化学性刺激或物理性刺激
时 ,肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒而释放出组胺。
二者都可通过舒张微血管平滑肌和毛细血管前括约
肌和升高小动脉的通透性 ,引起所谓血管内壁开窗
(fenestration),使血管透性增加 〔4〕 ,血浆蛋白 、红细
胞等从血管渗出 ,而引起炎症局部充血或血浆外渗
而发生水肿。本课题使用荧光法测量蛋清性足肿胀
渗出液中的 5-羟色胺和组胺的含量 ,结果表明 ,虎
斑游蛇醇提物能够明显的抑制足肿胀 ,减少渗出液
中 5-羟色胺和组胺的含量 ,说明虎斑游蛇主要是通
过抑制内源性炎症介质— 5-羟色胺和组胺的释放 ,
而发挥抗炎作用。
　　注:本课题为黑龙江省自然科学基金资助项目(C0215)
参 考 文 献
1　赵文静 ,等 .虎斑游蛇抗炎作用的实验研究 .中国中医
药科技 , 2003, 10(1)∶27
2　向俭军 ,等 .组胺的荧光测定法的研究.中国医学科学
院学报 , 1981, 3(3)∶183
3　方福德 ,等 .现代医学技巧全书 .北京:北京医科大学
中国协和医科大学联合出版社 , 1995∶158 ～ 162
4　殷凯生 .组胺研究进展近况 .国外医学· 生理病理学
科分册 , 1983, 3(4)∶180
(2004-09-22收稿)
《中药材 》杂志为国家首批公布的可登处方药广告的专业媒体 。
·416· 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月