全 文 :文章编号:1008-1445(2001)01-0019-03
草原黄蘑菇菌丝营养特性的研究
代 元1 , 薛文新2
(1.互助县畜牧业开发中心 ,青海 威远镇 810500;2.互助县草原工作站 ,青海 威远镇 810500)
摘 要:在碳源含量为 2.0%,氮源含量为 0.2%的条件下 ,采用液体静置培养方法 ,研究了草原黄蘑菇 A
-522菌株对碳源 、氮源 、矿质元素和维生素的利用 。试验表明 ,A-522菌株对碳素 、氮素营养的利用都很
广泛。对葡萄糖的利用最好 ,蔗糖 、白糖 、麦芽糖 、淀粉 、红糖也是理想的碳源;菌丝营养生长利用最好的氮
源是硫酸铵和氯化铵 ,尿素 、蛋白胨和酵母粉是理想的氮源;添加矿质元素和维生素可促进菌丝生长。
关键词:草原黄蘑菇;碳素营养;氮素营养;矿质元素;维生素
中图分类号:Q935 文献标识码:A
草原黄蘑菇〔Armillaria luteo -virens(Alb.et
Schw.ex Fr)〕是一种珍贵稀有的食 、药用蕈菌。生
于草原 ,尤其喜生于高山草甸草地上 ,形成蘑菇圈 ,
与牧草形成菌根。营养丰富 ,据分析 ,每 100g 干菇
中含粗蛋白 36.61-39.0g ,粗脂肪 14.58g ,粗纤维
8.66g ,无氮浸出物 24g ,灰分 9.16g ,钙 0.028 ~ 0.
12g ,磷 0.87 ~ 1.76g ,热量 18.045千焦/g 。此外还
有 15种氨基酸 ,鼠李糖 、甘露醇 、木糖 、葡萄糖 、维
生素 B1 、维生素 B2 、维生素 C 、铁等 。草原黄蘑菇对
机体有补充营养 ,增进食欲 ,抗流感 ,防治神经炎 ,
脚气病 ,促进儿童发育等方面都具有药理作用〔1〕。
本试验进行了对草原黄蘑菇营养特性方面的研究 ,
现将试验结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
草原黄蘑菇 A-522由青海大学农牧学院草原
系微生物实验室提供 。
1.2 培养基
1.2.1 菌种活化培养基 小麦煮汁 1000ml葡萄
糖20g ,磷酸二氢钾 1.5g ,维生素 B2 微量 ,硫酸铵
1.0g ,蛋白胨 1.0g , MgSo4·7H2O1.5g ,琼脂 20g ,PH
值 7.0。
1.2.2 液体培养基 Ⅰ
去琼脂 PDA培养基〔2〕(土豆 200g ,葡萄糖 20g ,
水 1000ml),每 1000ml中并加 MgSo4·7H2O 0.3g ,
酵母粉 5g ,用柠檬酸调 PH 值 7.0 。
在土豆煮汁 1000ml中 ,取 100ml加入酵母粉
5.0g 取汁 ,然后加在 900ml土豆汁中 ,再加入其它
成分后分装 ,每 500m l罐头瓶中装量为 100ml , 1.
0kg/cm2 条件下灭菌 30min后备用。
1.2.3 液体培养基 Ⅱ
葡萄糖 10g ,硫酸铵 1g ,磷酸二氢钾 1g ,磷酸二
氢钠 0.12g ,硫酸镁 0.5g , 1%硫酸锌 5ml ,柠檬酸 0.
4g ,CaCl·2H2O 0.3g ,硼酸 10mg ,维生素 B1 微量 ,
维生素 B2微量 ,稀释至 1000ml。
1.3 试验方法
1.3.1 保存菌种活化
取 1g在 4℃保存的 A -522菌株 ,转接活化培
养基上 ,于 20℃左右培养 6d供试验用 。
1.3.2 液体培养基 Ⅰ试验
在液体培养基 Ⅰ中接入活化菌种 4-5mm2 一
块 ,于 18℃下培养 20d 后 , 取出菌丝测定湿重 ,于
60℃下风干 24h ,测定干重 。
1.3.3 碳素营养试验
以去碳源的液体培养基 Ⅱ为基础培养基 ,分别
以 2%葡萄糖 、红糖 、白糖 、可溶性淀粉 、蔗糖 、麦芽
19
草原黄蘑菇菌丝营养特性的研究 代 元等
收稿日期:2000-11-30
致谢:本文试验承蒙青海师范大学生物系刁治民副教授的指导 ,特此表示衷心感谢。
糖 、甘露醇 , 丙三醇为碳源 , 以无碳源为对照。
500ml罐头瓶中装量为 100ml试验培养基 ,灭菌后
分别冷却至 30℃左右接入菌种 4-5mm2 一块 ,置
18℃下静置培养 20d ,每试验处理做 4次重复。
1.3.4 氮素营养试验
将液体培养基 Ⅱ中的氮素分别换成 0.2g 酵母
粉 、氯化铵 、硫酸铵 、尿素 、蛋白胨 、硝酸钾为氮素营
养 ,以无氮源为对照 。试验处理同 1.3.3。
1.3.5 矿质元素试验
基础培养液土豆 200g 煮汁 ,葡萄糖 20g , 水
1000ml。
在基础培养液中分别加入 0.02%硫酸镁 、硫酸
铜 、硫酸锰 、硫酸亚铁 、硫酸锌 ,以无矿质元素为对
照。在 500m l罐头瓶内分装 100ml ,每试验处理 4
次重复 , 灭菌后接入等量菌种 , 18℃下静置培养
20d。
1.3.6 维生素利用试验
在基础培养液中分别加入 10mg/ l维生素 B1 、
维生素 B2 、叶酸 ,以无维生素为对照。试验处理同
1.3.5。
1.4 分析测定
1.4.1 观察 、记载菌丝生长速度 、密度 、长势及菌
落颜色 。
1.4.2 菌丝过滤后 , 60℃下风干 24h ,取出称重 ,最
后进行统计分析〔3〕 。
2 结果分析
2.1 不同碳素营养对草原黄蘑菇菌丝生长的影
响 。
表 1 、2表明 ,在碳素营养培养基中以葡萄糖 、
蔗糖 、白糖为主的培养基上菌丝生长速度快 ,长势
强 、密度大 、菌丝平均干重最重 ,是利用最好的碳
源;其次是麦芽糖 ,可溶性淀粉和红糖 。以甘露醇 、
丙三醇为主的培养基菌丝生长速度慢 ,长势弱 ,稀
少 ,而且易受污染 ,在无碳源培养基上菌丝不生长。
对这几种碳源的菌丝干重进行方差分析 ,结果表
明 ,不同碳素营养之间差异显著(F =49.11>F0.01
=3.50 ,P<0.01)。新复极差分析结果(表 2)表明 ,
在α=0.05 水平下 ,葡萄糖与蔗糖之间无显著差
异 ,蔗糖与白糖之间无显著差异 , 葡萄糖与白糖之
间差异显著 ,麦芽糖与可溶性淀粉 、红糖之间无显
著差异 ,甘露醇与丙三醇之间无显著差异。在α=
0.01水平下 ,葡萄糖 、蔗糖和白糖与其它几种碳素
营养的差异极显著。因此 ,就供试碳源而言 ,葡萄
糖 、蔗糖和白糖是草原黄蘑菇最好的碳素营养 。
表 1 A-522菌株在碳源 、氮源培养基上气生菌丝柱高度(cm)的测定结果。
培养基
培养天数(d)
4 8 12
日长速度
(cm/d) 长势 培养基
培养天数(d)
4 8 12
日长速度
(cm/d) 长势
红糖 0.5 1.4 2.6 0.216 +++ 酵母粉 0.4 1.5 2.1 0.175 +
白糖 0.6 1.5 2.5 0.208 ++++ 氯化铵 1.0 2.2 2.8 0.233 +++
淀粉 0.4 1.7 2.5 0.208 +++ 硫酸铵 1.2 2.2 2.6 0.216 ++++
葡萄糖 0.5 1.5 2.7 0.225 ++++ 尿素 0.5 1.5 2.6 0.133 ++
蔗糖 0.4 1.2 2.3 0.191 ++ 蛋白胨 0.4 1.5 2.0 0.167 +
麦芽糖 0.1 0.4 2.0 0.166 + 硝酸钾 0.2 0.8 1.0 0.083 +
甘露醇 0.2 0.3 0.4 0.041 +
丙三醇 0.1 0.3 0.5 0.041 +
对 照 - 对 照 -
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青海草业 2001年 第 10卷 第 1期
表 2 碳素营养 、氮素营养新复极差分析
碳素营养 菌丝干重(mg/100ml)
差异显著性
0.05 0.01 氮素营养
菌丝干重
(mg/100ml)
差异显著性
0.05 0.01
葡萄糖 327.85 a A 硫酸铵 332.58 a A
蔗糖 314.33 ab A 氯化铵 323.78 a A
白糖 286.26 b A 尿素 252.25 b A
麦芽糖 241.43 c B 蛋白胨 224.20 b B
淀粉 240.68 c B 酵母粉 189.68 b B
红糖 207.87 c B 硝酸钾 146.23 c B
丙三醇 136.85 d C
甘露醇 128.68 d C
2.3 不同氮源对草原黄蘑菇菌丝生长的影响
表1.2表明 ,在氮素营养培养基中硫酸铵和氯
化铵是最好的氮源 。尿素 、蛋白胨 、酵母粉是可以
利用的培养基质 ,以硝酸钾为氮源的培养基上菌丝
生长弱 、稀少 ,不能做为氮源 ,无氮源培养基上菌丝
不生长 。对表 2氮素营养菌丝干重进行方差分析 ,
结果表明 , 不同氮素营养间差异是显著的(F =
10.68>F0.01=4.25 , P <0.01)。新复极差分析结
果表明 ,在α=0.05水平下 ,硫酸铵和氯化铵与其
它氮素营养之间差异显著 ,在 α=0.01水平下 ,硫
酸铵 、氯化铵和尿素与蛋白胨 、酵母粉 、硝酸钾之间
差异极显著 。因此 ,硫酸铵和氯化铵是 A-522 菌
株最好的氮素营养培养基 。
2.4 不同矿质元素对草原黄蘑菇菌丝生长的
影响
表 3 A-522菌株在矿质元素 、维生素培养基上气生菌丝柱高度(cm)的测定结果
培养基 培养天数(d)
4 8 12
日长速度
(cm/d) 长势 培养基
培养天数(d)
4 8 12
日长速度
(cm/d) 长势
硫酸铜 1.2 3.0 3.6 0.300 ++++ 叶酸 1.8 4.5 4.8 0.408 ++++
硫酸锰 1.0 2.5 3.0 0.250 +++ 维生素 B1 1.2 3.5 4.1 0.342 ++++
硫酸亚铁 1.0 2.2 3.2 0.267 +++ 维生素 B2 1.0 3.2 3.5 0.292 +++
硫酸锌 0.8 2.5 2.9 0.241 +
硫酸镁 1.3 2.7 3.4 0.283 ++++
对照 0.5 2.2 2.8 0.233 +++ 对照 0.3 2.5 3.2 0.267 ++
表 3表明 ,在添加有矿质元素的 PDA培养基中 ,
硫酸铜 、硫酸镁是最好的矿质元素 ,菌丝生长速度快 ,
长势最强 ,菌丝浓密 ,其次为硫酸亚铁 、硫酸猛 、硫酸
锌 ,是可以利用的矿质元素 ,在无矿质元素的 PDA培
养基上菌丝长势较弱 ,稀少 。对菌丝干重进行方差分
析 ,结果表明 ,不同矿质元素的PDA培养基上菌丝干
重差异显著(F=6.65>F0.01=4.25 ,P<0.01)。新复
极差分析(表 4)表明 ,在α=0.05水平下 ,硫酸铜 、硫
酸镁 、硫酸锰 、硫酸亚铁之间无显著差异。在α=
0.01水平下 ,除硫酸锌与对照间无显著差异外 ,其它
矿质元素与不添加矿质元素之间有显著差异 ,而矿质
元素间均无显著差异。 (下转 39页)
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草原黄蘑菇菌丝营养特性的研究 代 元等
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THE PROSPECTSOF EXPLOITATION AND UTILIZATION
AND THE NUTRITIVE VALUE IN PHOTOSYNTHETIC BACTERIA
Diao Zhimin etal
(Department of Biology ,Qinghai Nomarl University ,Xining , 810008)
Abstract:The paper discusses the biological characteristics and the nutri tive value and the prospects of ex-
ploitation and utilization in Photosynthetic Bacteria(PSB).So we draw a conclusion that the PSB has a w ide area
of explo tation and utilization in the ag riculture and the animal husbandry and veterinary as a kind of new perfect
microorgansis resource.The exploitation and utilization of PSB will have importance effect on the development
of agricultural economy in Qinghai province.
Key Words:Photosynthetic Bacteria Bological Characteristics Nutritive Value; Expolitation and Uti-
lization.
(上接 21页)
表 4 矿质元素 、维生素新复极差分析
矿质元素 菌丝干重(mg/100ml)
差异显著性
0.05 0.01 维生素
菌丝干重
(mg/100ml)
差异显著性
0.05 0.01
硫酸铜 547.20 a A 维生素 B1 448.90 a A
硫酸镁 531.68 a A 维生素 B2 505.73 a A
硫酸铁 472.65 ab A 叶酸 448.48 a A
硫酸猛 467.73 ab A
硫酸锌 407.98 b AB
对照 309.48 c B 对照 309.48 b B
2.5 不同维生素对草原黄蘑菇菌丝生长的影响
表3.4 表明 ,在添加有维生素的 PDA 培养基
中菌丝生长速度快 ,长势强 ,菌丝浓密 ,而对照上菌
丝长势弱 ,稀少。对菌丝干重进行方差分析 ,结果
表明差异显著(F=6.91>F0.01=5.95 , P <0.01)。
经新复极差分析 ,维生素 B2 、维生素 B1 、叶酸之间无
显著差异 ,而与对照差异显著 。因此 ,新添加的维
生素都可以利用 。
3 讨论
草原黄蘑菇在不同碳源 、氮源 、矿质元素 、维生
素的培养基上菌丝生长量都有明显的差异 。试验
结果表明 ,以葡萄糖 、硫酸铵 、硫酸铜 、维生素 B2 为
营养素的培养基上菌丝生长均处于最佳状态 ,至于
这几种营养素的最优组合培养基有待于进一步研
究 。
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光合细菌的营养价值及开发应用前景 刁治民等