全 文 ：第 7卷 第 2期
1 9 9 9年 6月
生 态 农 业 研 究
ECO—AGRICULTURE RESEARCH
V01．7 No．2
June， 1 9 9 9
SO～
珠美海棠组培苗繁殖技术的研究 *
王玉珍 冯学赞 罗景兰 陈文龙
(中国科学院石家庄农业现代化研究所 石家庄 050021)
S 66I t 0L}
摘 要 以珠美海棠为材料．研究了培养基配比、苗龄、璩脂等组培苗T-广化生产关键技术，
光照条件和培养客嚣对组培苗生长发育 的影响。结果表 明，采用改良型培养基 Ms+6-BA
0．5mg／L+IAA0．2mg／L用于舟化培养、1／2MS+IAA0．5mg／L或 I／2MS+IBA0．5mg／L用
于生根培养，苗龄 30～40d．使用接近国际标准的琼脂、光照强度 1500~20001x条件下生产的
组培苗繁殖系数最大、有效苗最多、生根率高及 生长速度最快，移栽成活率>90 苗圃移栽
成活率>85 ，1年生苗株高均>1．5m。并建立 了珠美海棠工厂化 生产工艺及 组培苗培养标
准，为其他植物组培苗繁殖提供理论依据。
关■词 珠美海棠 组培苗 繁疆岐求 培养基
— — 一 1 ——
Technology of tissue cultural propagation of Mulus md．W ang Yuzhen，Feng Xuezan-Luo
Jinglan，Chen Weniong(Shljhzhuang Institute of Agricultural Modernization，CAS，Shiji—
azhuang 050021)，EAR，1999-7(2)：50~ 52
Abstract Culturing the stems of 如 zumi in vitro·the key techniques including medium·
auxin，age of sprouts and agar B．re studied．The results show that if there is the advanced
medium M S+6-BA 0．5mg／L+IAA0．2mg／L for multiplicating，1／2MS+ IAA0．5mg／L or
1／2MS+IBA0．5mg／L for rooting，sprout’s age being 30~ 40 days，agar corresponding to the
lnternBti0nB1 stand ard and the light intensity sustaining at 1500～ 20001x，the coeficient of
multiplication，the quantity of effictive plantlets and the rate of ro ta~ and growth are best，
and the surviving ratio of transplantati0n of plantlets and nursery seed ling is above 90 and
85 respectively，and 1一yr-old tree height is above 1．5m．Based on the study-the industrial—
izing technology of tube—plantlets of Malus zumi and the culture standard which improves a
theoretical basis for vegetive propagation of others plant are summarized ．
Key words M alus zumi，Tissue culture sprout，Propagative technology，Culture medium
1 试验材料与方法
以珠美海棠(Malus zumi)茎尖为试验材料，接种到培养基中，试管苗在培养过程中选
优汰劣，以保持试管苗健壮生长。实验表明，外植体生长好坏与树龄、季节、部位有关，顶芽
比侧芽生长快 ，树龄小的外植体比树龄大的生长快。试验于 3～4月选 1年生珠美海棠顶
芽，编号排列 ，培养一段时间后选其生长繁殖系数最大、生长势最强的为继代繁殖种 ，以保
· “八五 国家重 点推广 项 目部 分研究 内容
收稿 日期：1998—04—16 改日 日期 ：1998—05—20
l
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第 z期 王玉珍等 ：珠美海棠组培苗繁殖技术的研究 51
持种质且其后代均～ ．树型大小一致 ，作为标准化果园和城市绿化、美化的优良品种。
用改良 MS做基本培养基，附加不同激素的配 比．筛选出适宜的培养基激素配比，以
多出苗、出牡苗。用不同浓度的 1／2MS分别加入 IAA、IBA试验其对珠美海棠诱导生根
的影 响．每处理调查 2次根原基发生时间、根形态、数量、诱导率等，确立理想生根培养基
用不同苗龄的无根苗 ，接种到同一培养基上观察根的形态、生根数和生根率。采用 5
种不 同品牌的琼脂 ，分化苗培养 40d，无根苗培养 1 5d调查琼脂对试管苗生长的影响。将
珠美海棠茎尖接种到固体培养基后交替进行光培养及暗培养 ，观察光照条件对试管苗的
影 响 。
2 结果与分析
2．1 培养基激素与浓度配比
由表 1可知，改 良 MS
袁 1 不同培养基激素配比的增殖效应(培养 40d)
Tab．1 Efect of auxin composition 0n multiplication／or 40 days
培养基激素配比／mg·I _。 接种敬／十 增殖敬／芽 单株有效苗敬／株
A㈨ composition Cultivated shoo~ M uldPled shoot Efective shoot
+6一BA 0．5mg／L+IAA馨 MsS+6一-B^A。0．5十IAA。．2 34： 0．2mg／L培养基激素配比鐾 +GK觚T0； ；}0 8．5 7 0
6 0
3．5
0 -0
2．9
2 7
的繁殖 系数最大 ，单株有
效苗最多 。无根苗有 3～4个叶片，叶平展，叶色浓绿，茎杆较粗牡即为合格的有效无根苗 。
袁2 不同浓度激素对诱导生根的影响 从表 2可知，1／2MS
Tab．2 Efcet of auxin concentration on rooting
Auxin coaeentration RoOfing tare Roots per plantlet Roofing I皿 既 Roots c0r “on
+ IAA 0．5mg／L 和 1／2
MS+IBA0．5mg／L培 养
／
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2
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4．5 。 器 篓 器 基诱导生根效果最佳，而
／
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2 M
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．
． ‘譬～ in j蔸 激素浓度三 ng／L时根
I／2MS+IBA0．5 93 2 7． 10 0 7 直 接 生 根在愈伤组织处生长 ，根不
能直接吸收营养和正常进行养分循环，造成移栽成活率下降，苗前期生长缓慢。这 2种激
素配比处理一般接种 5d基部变粗，7d可见突起．12d长出完整根 ，15d可移栽 ．移栽后不
缓苗 ，生长快。
2．2 不同苗龄与诱导生根的关系
无根苗在试管中生长时间与木质化程度成正相关．木质化程度越高越不易生根．生根
率低 ；反之，木质化程度低．生根率高。苗龄为 30~40d时无根苗诱导生根率撮高．此时木
质化程度适宜．叶片平展，苗高 2．5～3．5cm，根的诱导率>95 ．移苗成活率达 9 。苗
龄 20d时生根率较高．但苗较细弱．叶片小，不易进行光合作用，移栽成活率低，苗龄 60～
80d时生根率明显降低 ．根质量差 ，移栽成活率仅 62 。
2．3 不同琼脂对试管苗分化的影响
琼脂是影响组培苗质量的重要因素之一 不同厂家生产的琼脂对试管苗生长影响差
异较大。琼脂除起支持作用外，还具有一定吸附能力。琼脂制作工艺差异使其纯度相差较
大 ，苗木工厂化生产时应严格试验筛选最佳琼脂 。优质琼脂透明度高，凝聚力强 ，含植物所
需营养成分多。琼脂中某些微量元素可能抑制植物生长，zn含量低导致培养物(茎尖 )代
谢失调 ，苗生长慢并逐渐变黄终至死亡；N含量接近国际标准 0．71 时 ，苗表现撮佳 ；Fe、
Mn之间存在拮抗关系，Fe、Mn比例失调易出现大量早期玻璃苗，高 Mn抑制 Fe吸收．反
之 高Fe影响Mn吸收 ；K含量高则在代谢过程中造成N和K比例失 调．N素代 谢受干
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生 态 农 业 研 究 第 7卷
扰，导致酶活性降低造成叶边缘和叶尖干黄。
2．4 不同光照条件及培养容器对试管苗的影响
试验表明，光照过强影响珠美海棠培养细胞生长和器官发育；光照不足，试管苗生长
衰3 不同光照强度与光照时间对珠美海棠生长的影响 受 阻；光 照 强 度 为
Tab-3 Effect of light on the growth of M atus zurni
— — 1500~20001x时利于试
光照时间，h光照强度／Ix橡高／cm株鲜质量／g根敦／条 叶质量／g叶长／cm 叶宽／em
[fighting Light Shoot Fresh plantQuantity I|e Leaf Leaf
time intensity height weight of~oot weight length width
1000 3 09 0．11 12．6 0．04 0 90 0．60
2000 3．94 0 12 13．9 0．09 0．93 0．63
100O 4 88 0．14 13．8 0．07 1．10 0 69
‘‘ 2000 5 18 0 18 i6．0 0．92 i．i7 0 85
重要意义 。
不同培养容器对试管
管苗生长(见表 3)。故
调节 适度光 照对 降低
污 染 率、缩 短 继 代 周
期、降低生产成本具有
衰 4 不同培养容器对试管苗繁殖率的影响(30d)
Tab．4 Effect of vessel size on multiplication rate after 30 days
苗单位面积生产效率的影 篆量 毫曹 曼幕譬篓 。慧 矗篓墓
响不同(见表4)。S0ml罐 — 竺 号 — ——
头瓶可使单位面积转移数 ：怒： 矗磊 ： ； ； ；：：i
最 高 ，约 比 其 他 容 器 高一
2o ，整齐度好且接种方便 ，有效苗分化率和转移率均比其他容器高。
3 抗盐珠美海棠组培苗工厂化生产工艺
在各种条件适宜情况下，珠美海棠试管苗的移栽成活率可达 90 以上，基础苗移栽
成活率>85 ，苗圃 1年生苗株高均达 1．5m以上。珠美海棠组培苗工厂化生产工艺可分
为优良株选择；丛生芽培养；生根培养 ；试管苗移栽 ；速生培育 ；苗圃速生壮苗等步骤。生产
过程中还应严格把握以下标准 ：缩短培养过程 ，增加有效培养；采用无毒害的凝固剂(琼
脂)；诱导生根选择的增殖苗以 3～4片叶为宜 ；试管移栽苗选择 3～4片叶、4条根以上最
佳 ；砸 石苗 10cm 以上进行苗圃定植。
珠美海棠作为一种抗盐树种 ，对开发利用盐碱地，绿化盐碱地城镇 ，扩建耐盐碱果园
以及海防造林，改善生态环境均有重要作用。采用遗传基因工程技术，定位和提取抗盐基
因可丰富我国抗逆性基因库 。
参 考 文 献
1 吴 奇(印度／林木果树的生物技术 北京 ：中国林业出版社，1986
2 谭文澄等、观赏植物组织培养技术．北京：中国林业出版社t1986
3 陈文龙等．组培工厂化育苗技术研究 北京 ：科学技术出版社，1983
4 龚激柱等．盐碱地造林学．北京：中国林业出版社 ，1986
9 H ·T晗特曼(美／．植物繁殖原理和技术 北京：中国林业出版杜，1981
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