全 文 ：第 1 5卷 第 4 期
9 18 3 年 7 月
生物化学与生物物理学报
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蓖麻蚕血淋 巴 中的凝集素
莫 汉 庆 孙 册
(中国科学院上海生物化学研究所 )
凝集素是一类蛋白质 (或糖蛋 白) , 它们具有凝集细胞的活性 , 并能够与某种 (或某些 )
糖类专一结合 。 凝集素现已被广泛地用作研究细胞表面糖蛋白、 糖脂的糖链结构以及研
究伴随细胞生长和恶性转化时 , 细胞表面含糖物质变化的探针。 另外 , 凝集素在生物体内
的生理意义 , 也正在引起人们 日益广泛的兴趣 。
凝集素在 自然界中分布极广 , 自 18 8 年 H . 氏 in m ar k 首次从蓖麻籽中发现凝 集素
以来 , 人们在植物 (特别是豆科植物的种子 ) 、 海绵 、 软体动物 、 甲壳动物以及哺乳动物的脏
器中都已陆续发现了凝集素山 。
近年来 , 名取俊二等人在雪隐肉蝇 (aS ” 叩h a g a 卿犷eg 再。动幼虫的血淋 巴中发现了一
个凝集素 , 并认为这一凝集素参与昆虫的防御机制 〔` 们 。
最近我们在蓖麻蚕 (hP 落砧￡“ 。 赫 C夕娜 t从 a 再时耐 )的血淋巴中也发现 了凝集素活力 , 并
对这一凝集素的糖结合专一性和血凝活性进行了初步研究。
一 实验方法和结果
1
. 血淋 巴的采梁 5 龄的蓖麻蚕 “ 白黄” 系广东省蚕种场提供 , 饲养于 25 ℃ 温室
中 , 喂以蓖麻叶 。
采集血淋巴时 , 用小剪刀把蓖麻蚕的足基部剪破 , 收集滴出的血淋巴 , 离心 ( 18 , 0 0 9
x s 分钟 )除去血细胞 , 上清即可进行血凝试验或贮于 一 2 o0 C 冰箱中保存。
2
. 血 凝活 性试验 各种来源的红细胞用磷酸缓冲的生理盐水 (简称 P BS , 75 m M
N a C z
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75 m M N
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2 ) 洗涤 4 次 , 然后使红细胞悬浮于 P BS 中 , 浓
度为 2多。 血凝活力用倍比稀释方法在微量 V 型血凝板上进 行 。 每孔 中加入 25 微升
P B S
, 在每排的第一孔内加 25 微升蓖麻蚕血淋 巴 , 倍 比稀释至 s2 , 在微型振荡器上混匀 ,
然后边振荡边加入悬浮于 PBS 的 2多 的红细胞 , 加毕后继续振荡 1 分钟 , 室温放置 1 小
时后 , 用肉眼观察结果。 不凝集的红细胞在孔的底部形成一个界面清晰的红点 , 而凝集的
红细胞则在孔底形成扩散的一簇红斑。
3
. 格抑制试验 与血凝活性试验一样 , 将蓖麻蚕的血淋巴倍比稀释后 , 每孔中再
加入 2 5 微升的 0 . 3万 的各种糖 , 在微型振荡器上混匀后 J 室温下放置 30 分钟 , 然后边振
荡边加入 25 微升红细胞 , 加完后继续振荡 1 分钟。 室温放置 1 小时后 , 用肉眼观察结果。
4
. 实验结果 5 龄各天的蓖麻蚕幼虫及蛹的血淋 巴均能明显地凝集兔 及 大 鼠的
本文 工9 8 2 年 6 月 12 日收到。
今.
生物化学 与生物物 理学 报 15 卷
红细胞 , 但不能凝集猴、 豚鼠 、 鸡的红细胞 , 也不能凝集任何血型的人红细胞 。
在试验过的各种糖类中 , 该凝集素的血凝活性能被半乳糖和乳搪所专一抑制 , 半乳搪
的抑制作用比乳糖强 。 半乳糖胺只有极微弱的抑制作用。 甘露糖、 葡萄搪 、 阿拉伯糖 、 -L
岩藻搪、 葡萄糖胺、 -N 乙酞葡萄搪胺、 N 一乙酞半乳糖胺 、 麦芽糖都没有抑制作用。
二 讨论
有人报道昆虫的血淋巴中存在着凝集哺乳动物红细胞的活性 , 但在某些种类的昆虫
中 , 这种血凝活性并不是始终存在的 , 而只是局 限于生长发育的某个阶段才出现 , 或由于
体表受伤及细菌感染后才诱导产生 J 一司 。 本试验中 , 我们研究了 4 龄眠期 , 5 龄各天直到
蛹期的蓖麻蚕血淋巴的血凝活性 , 发现在这段时间内 , 蓖麻蚕即使未受损伤及细菌感染 ,
其血淋巴中都有血凝活性存在 , 血凝效价 (即能产生血凝的样品最大稀释倍 数 ) 一 般在
妙~ 妙 左右 。
本试验的结果表明 , 蓖麻蚕血淋巴的血凝活性具有动物种属专一性。
目前 , 纯化这一凝集素并探讨其在蓖麻蚕体内的生理功能的工作正在进行中。
本工作承沈昭文教授热心指导 , 谨致谢忱。
参 考 文 献
孙册: 凝集萦 ( L 印 U n )研究进展 。 生物 化学与生物物左进展 , 1 98 1 , 3 , 15 。
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