全 文 ：西北林学院学报 ２０１４，３０（５）：１２９～１３２
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
　　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７４６１．２０１４．０５．２４
ＨＰＬＣ同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁方法的建立及
在杂种后代选择中的应用
　收稿日期：２０１３－１２－１６　修回日期：２０１４－０１－１３
　基金项目：林业公益性行业科研专项（２０１２０４６０５）。
　作者简介：魏军坤，男，在读硕士，研究方向：林木遗传育种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｕｎ＿ｋｕｎ＠１２６．ｃｏｍ
＊通信作者：杨秀平，女，高级实验师，研究方向：林产化工。Ｅ－ｍａｉｌ：３０２６７１０１９＠ｑｑ．ｃｏｍ
魏军坤，刘闵豪，杨秀平＊，李　煜
（西北农林科技大学 林学院，陕西 杨陵７１２１００）
摘　要：建立利用高效液相法（ＨＰＬＣ）同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁的方法。色谱柱为Ａｇｌｉｅｎｔ
ＺＯＲＢＡＸ　ＳＢ－Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相组成为甲醇－乙酸－水（体积比为５０∶１∶４９），
检验波长为３４０ｎｍ，流量为１ｍＬ／ｍｉｎ，检测温度为３２℃。在该色谱条件下，绿原酸和芦丁分别在
０．０６０　０～２．０００　０μｇ／ｍＬ和０．００１　８～０．０９０　０μｇ／ｍＬ范围内线性关系良好，相关系数分别为
０．９９９　７和０．９９９　３。利用此方法对杜仲杂交后代中４１株生长性状表现优良的个体进行了叶片中
绿原酸和芦丁含量的测定，为杜仲优良无性系的选择提供依据。
关键词：杜仲；ＨＰＬＣ；绿原酸；芦丁；优良单株
中图分类号：Ｓ７８１．４１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００１－７４６１（２０１４）０５－０１２９－０４
Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｌｏｎｏｇｅｎｉｃ　Ａｃｉｄ　ａｎｄ　Ｒｕｔｉｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ
Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ｕｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｙｂｒｉｄｓ
ＷＥＩ　Ｊｕｎ－ｋｕｎ，ＬＩＵ　Ｍｉｎ－ｈａｏ，ＹＡＮＧ　Ｘｉｕ－ｐｉｎｇ＊，ＬＩ　Ｙｕ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ　ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ　ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ（ＨＰＬＣ）ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｓ　ｂｅｅｎ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｆｏｒ
ｔｈｅ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｌｏｎｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｒｕｔｉｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ．Ｔｗｏ
ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｓａｐｅｒａｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　Ａｇｌｉｅｎｔ　ＺＯＲＢＡＸ　ＳＢ－Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）ｗｉｔｈ　ａ
ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ－ｗａｔｅｒ（５０∶１∶４９，Ｖ／Ｖ）ａｔ　ａ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１ｍＬ／ｍｉｎ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅ－
ｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　２４０ｎｍ　ａｎｄ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　３２℃．Ｔｈｅ　ｃｈｌｏｎｏｇｅｎｉｃ　ａｎｄ　ｒｕｔｉｎｅ　ｅａｃｈ　ｓｈｏｗｅｄ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅｒ　ｒｅ－
ｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｉｎ　ａ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．０６０　０μｇ／ｍＬ～２．０００　０μｇ／ｍＬ　ａｎｄ　０．００１　８μｇ／ｍＬ～０．０９０　０μｇ／ｍＬ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ－
ｌｙ，ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　ｏｆ　０．９９９　７ａｎｄ　０．９９９　３．Ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　４１ｆｉｎｅ　ｉｎ－
ｄｉｖｉｄｕａｌ　ｃｌｏｎｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｂｏｖｅ　ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｐｅｒｉｏｒ　ｃｌｏｎｅｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ；ＨＰＬＣ；ｃｈｌｏｎｏｇｅｎｉｃ；ｒｕｔｉｎ；ｓｕｐｅｒｉｏｒ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ
　　杜仲（Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ），杜仲科杜仲属植
物，为我国所特有，大体分布于秦岭、黄河以南，五岭
以北，黄河以西，云南高原以东，其间基本上是长江
中、下游流域［１］，且在我国许多地方都有大面积栽
植。研究表明，杜仲叶和皮中含有的一些化学成分
具有降血压［２］、降血糖［３］、抗氧化［４］和抗突变［５］等药
物活性以及强身健体、促进新陈代谢和抗疲劳等保
健作用，且在部分类似的有效成分上杜仲叶要高于
杜仲皮［６］。２００５版《中华人民共和国药典》里面将
绿原酸作为指标成分，绿原酸具有保肝利胆、抗菌、
利尿和降压等多种功能，同时也是质量控制的重要
指标［７］。芦丁具有很广泛的药理活性，临床用于防
止脑溢血、高血压等心脑血管疾病［８］。目前，利用高
效液相法同时测定桑叶、大蓟等植物中的绿原酸和
芦丁含量的方法在已有文献报道［９－１０］，但在杜仲上
却鲜有研究。传统的无性系选育在杜仲遗传改良中
已取得一些成果［１１－１２］，杂交育种作为一种重要的育
种手段在杜仲遗传改良方面的应用并不多，其中仅
魏永成［１３］等通过析因交配设计进行控制授粉建立
了杜仲有性杂交群体，并进行了初步的遗传分析。
对利用高效液相法同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁
含量的方法进行了研究，并对杜仲有性杂交后代中
生长性状表现优良的个体叶片中两种物质的含量进
行了测定分析，为杜仲优良无性系的选择提供依据。
１　材料与方法
１．１　植物材料
以河南灵宝天地科技有限公司提供的８个杜仲
优良品种或无性系（“小叶”、“大叶”、“大果”、“闫
雌”、“华仲２号”、“洛超３号”、“紫叶”、“龙拐”）及西
北农林科技大学的２个杜仲优良品种（“秦仲１号”、
“秦仲２号”）作为杂交亲本。其中，“小叶”、“大叶”、
“大果”、“闫雌”和“华仲２号”为母本，“洛超３号”、
“紫叶”、“龙拐”、“秦仲１号”和“秦仲２号”为父本，
采用析因交配设计组成２５个组合。于２００９年３月
进行控制授粉，１０月采集种子，４℃下贮藏；２０１０年３
月下旬用质量浓度为７０％赤霉素（ｇ／Ｌ）处理种子，营
养杯内播种育苗；７月移栽至西北农林科技大学林学
院试验苗圃，育苗试验采用完全随机区组设计，１０株
小区，３次重复，株行距１０ｃｍ×１０ｃｍ［１３－１４］。
２０１３年１０月初对根据生长型性状选择结果得
到的４１株生长性状表现优良的个体进行叶片采集，
每个单株采集２份叶片（每份样品约１００ｇ，其中各
取２５ｇ混合用于有效成分测定）。采集后立即进行
杀青，烘干，封袋于干燥环境下保存备用。
１．２　仪器和试剂
日立－Ｌ２０００高效液相色谱：日立Ｌ－２３００柱温
箱，日立Ｌ－２２００自动进样器，日立Ｌ－２１３０泵，日立
Ｌ－２４５５二极管阵列检测器；超纯水仪（成都超纯科
技有限公司）；ＫＱ－６００ＤＶ超声波清洗仪（昆山市仪
器有限公司）。芦丁标准品（国药集团化学试剂有限
公司）；绿原酸标准品（上海源叶生物有限科技公
司）；甲醇（色谱醇，美国ＴＥＤＩＡ，ＤＩＫＭＡ原装色谱
纯试剂）。
１．３　方法
１．３．１　绿原酸和芦丁含量测定
１．３．１．１　标准品溶液的配制　称取绿原酸标准品
０．４００　０ｇ与芦丁标准品０．１２０　０ｇ，分别用甲醇溶
解并定容至１００ｍＬ和１　０００ｍＬ，得到４．０００ｍｇ／
ｍＬ绿原酸与０．１２０　０ｍｇ／ｍＬ芦丁标准品贮备液，
各取１０ｍＬ于４℃冰箱中保存备用。
１．３．１．２　色谱条件　色谱柱为 Ａｇｌｉｅｎｔ　ＺＯＲＢＡＸ
ＳＢ－Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流速为１ｍＬ／
ｍｉｎ，对流动相组成进行考察。其中甲醇体积分数
考察范围为３５％～６５％；乙酸的体积分数考察范围
为０．２％～１．０％；检验波长的考察范围为紫外光区
１９０～５００ｎｍ。
１．３．１．３　样品待测液制备和检测　取烘干的叶片
样品，粉碎机粉碎，经６０目筛过筛，准确称取过筛后
的粉末０．５００　０ｇ，用６０％乙醇浸泡６０ｍｉｎ，超声提
取３０ｍｉｎ（频率４０ｋＨｚ，温度４０℃）［１５］，于容量瓶中
用６０％乙醇定容至５０ｍＬ，经０．２２μｍ微孔滤膜过
滤，得样品待测液。
１．３．２　优良单株的选择　每株树取２份叶片样品
的平均值用于数据处理，利用ＳＰＳＳ软件对数据进
行处理。其中变异系数ＣＶ＝Ｓ珡Ｘ×１００％
。
对上述得到的个体叶片中的绿原酸和芦丁含量
进行标准化变换，即Ｘ＝（Ｘ０－珡Ｘ）／Ｓ，其中，Ｘ０ 表
示测定数值，珡Ｘ 表示平均值，Ｓ表示标准差，并按其
合计值大小进行排序，进行优良单株的选择。
２　结果与分析
２．１　绿原酸和芦丁测定的色谱条件
２．１．１　检测波长的选择　分别将绿原酸和芦丁标
准品溶液用１９０～５００ｎｍ的紫外光区进行扫描，结
果显示，绿原酸在２２０ｎｍ和３２９ｎｍ处有２个吸收
峰，芦丁在以上２个波长处也有较大吸收。根据样
品中２种成分的含量，在２６０、２８０、３２０ｎｍ 和３４０
ｎｍ　４个波长进行检测，最后确定以３４０ｎｍ作为检
测波长，目标峰明显，杂峰影响小。
２．１．２　流动相的优化　试验了不同甲醇含量和乙
酸浓度对２种物质的分离度、保留时间和峰形的影
响。结果表明，用甲醇和水作为流动相，经Ｃ１８柱可
以很好地将绿原酸、芦丁和样品中的杂质分离开，但
是绿原酸和芦丁的峰形有拖尾现象。这主要是因为
绿原酸和芦丁中含有的羟基和黄酮苷元产生电离，
与固定相表面存在着双保留机制［１６］，因此在流动相
中加入少量的乙酸，以消除拖尾现象［１７］。根据不同
浓度的乙酸对峰形的改良效果，最后确定乙酸浓度
为１．０％。
流动相甲醇含量影响样品的保留时间，当流动
相中甲醇含量为４０．０％时，色谱峰分离很好，但是
时间较长；当甲醇含量为６０．０％时，绿原酸和芦丁
的峰与杂质峰分离度不好，通过改变流动相中甲醇
的含量，最后确定流动相各项组成为甲醇∶醋酸∶
水＝５０∶１∶４９，时间在２５ｍｉｎ内结束（图１）。
０３１ 西北林学院学报 ３０卷　
图１　（ａ）绿原酸和芦丁标准品、（ｂ）杜仲叶片的色谱图
Ｆｉｇ．１　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ（ａ）ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｒｕｔｉｎ　ｓｔａｎｄａｒｄｓ，（ｂ）ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ
２．１．３　标准曲线制作　用混合储备液分别配置６
个浓度梯度，其中绿原酸质量浓度为２．０００　０、
１．０００　０、０．８００　０、０．３００　０、０．１００　０ ｍｇ／ｍＬ 和
０．０６０　０ ｍｇ／ｍＬ，芦 丁 质 量 浓 度 为 ０．０６０　０、
０．００３　０、０．０２４　０、０．００９　０、０．００３　０ ｍｇ／ｍＬ 和
０．００１　８ｍｇ／ｍＬ，０．２２μｍ微孔滤膜过滤后进行检
测。以峰面积为纵坐标、质量（μｇ）为横坐标，进行
一次线性回归，计算绿原酸与芦丁的回归方程和相
关系数（ｒ）。标准曲线方程：绿原酸：ｙ＝２．８７３　０×
１０７　ｘ＋ ２．７１３　５×１０６，ｒ＝０．９９９４，线性范围为
０．０６０　０～２．０００　０μｇ／ｍＬ；芦丁：ｙ ＝ ２．２７４　６×
１０７　ｘ ＋ ８．５２２　９×１０４，ｒ＝０．９９９　３，线性范围为
０．００１　８～０．０９０　０μｇ／ｍＬ。
２．１．４　精密度试验　取标准品稀释液（绿原酸和芦
丁含量分别为１．０００ｍｇ／ｍＬ和０．００３　０ｍｇ／ｍＬ），
重复进样６次，计算绿原酸与芦丁的含量，并计算各
组分的相对标准偏差（ＲＳＤ），结果为：绿原酸ＲＳＤ
＝０．８６％，芦丁ＲＳＤ＝０．９２％，精密度良好。
２．１．５　加样回收试验　精密称取一定含量的待测
样品０．５００　０ｇ，分别计入标准品稀释液１ｍＬ（其中
含有绿原酸１ｍｇ，芦丁０．０６ｍｇ），根据２．３制备待
测液，测定，并计算加样回收率。结果表明，２种物
质的回收率分别为９８．６７％和９８．３２％，ＲＳＤ 分别
为１．７３％和１．４２％。
２．１．６　稳定性试验　取同一待测样品，间隔４ｈ分
别进样进行检测，结果表明，绿原酸和芦丁在２４ｈ
内稳 定；绿 原 酸 ＲＳＤ ＝１．４６％，芦 丁 ＲＳＤ ＝
１．２３％，２４ｈ稳定性良好，因此测定工作应在２４ｈ
内完成。
２．１．７　重复性试验　取杜仲叶片样品６份，根据
２．３制备待测品，进行测定。计算各组分测定的结
果的ＲＳＤ，检验方法的重复性（表１）。
表１　ＨＰＬＣ测定２种物质含量的重复性试验结果
Ｔａｂｌｅ　１　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ％
成分
含量
１　 ２　 ３　 ４　 ５　 ６ 均值
ＲＳＤ
绿原酸 １．７９７　 １．７７２　 １．７９２　 １．７７０　 １．７９３　 １．７８２　 １．７８４　 １．７８４
芦丁 ０．２２３　 ０．２１６　 ０．２２３　 ０．２０３　 ０．２２６　 ０．２０６　 ０．２１７　 ０．２１７
　　 测得绿原酸 ＲＳＤ＝１．１５％，芦丁 ＲＳＤ＝
１．０１％。由于样品中被测成分含量较低，重复性检
验的ＲＳＤ值应＜５％，固重复性良好。
２．２　优良单株的选择
利用上述方法，对４１株优良单株叶片中的２种
化学成分含量进行了测定及分析（表２）。
表２　样品中２种物质的分析结果
Ｔａｂｌｅ　２　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　ｓａｍｐｌｅｓ
成分 均值 最小值 最大值 标准值 变异系数／％
绿原酸 １．６８３　４　 ０．２２０　２　４．２２１　４　 ０．８１０　０　 ４８．１２
芦丁 ０．３８１　７　 ０．１４４　８　０．７８７　５　 ０．１４２　７　 ３７．３８
对于样品叶片中绿原酸的含量，变异幅度为
４．００１　２，变异系数为４８．１２％；对于叶片中的芦丁
含量，变异幅度为０．６４２　６，变异系数为３７．３８％。
结果表明，这２种物质在群体中变异明显，具有较大
的选择潜力。利用ＳＰＳＳ软件对两种物质含量进行
相关性分析，得到相关性系数为０．３９８＊＊，达到了极
其显著水平。
对上述数据进行标准化变换，求和，排序，选出
１０株优良单株（表３）。入选个体的绿原酸含量的平
均值为２．６１９　９％，芦丁含量的平均值为０．５６６　９％，
与初选群体相比，分别提高了５５．６４％和４８．５３％。
１３１第５期 魏军坤 等：ＨＰＬＣ同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁方法的建立及在杂种后代选择中的应用
表３　优良单株选择结果
Ｔａｂｌｅ　３　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｓｕｐｅｒｉｏｒ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
编号
绿原酸含量／％
实测值 标准化值
芦丁含量／％
实测值 标准化值
标准化合计值 排序
３　 ４．２２１　４　 ３．１３３　２　 ０．３８２　０　 ０．００２　１　 ３．１３５　３　 １
１７　 １．９１７　９　 ０．２８９　６　 ０．７８７　５　 ２．８４３　７　 ３．１３３　３　 ２
１９　 ２．５７７　７　 １．１０４　０　 ０．６５４　３　 １．９１０　６　 ３．０１４　６　 ３
４　 ３．１１１　５　 １．７６３　０　 ０．５０７　６　 ０．８８２　６　 ２．６４５　６　 ４
８　 ３．１４９　８　 １．８１０　３　 ０．４６３　７　 ０．５７４　８　 ２．３８５　１　 ５
２　 １．８７９　８　 ０．２４２　６　 ０．６４２　５　 １．８２７　７　 ２．０７０　２　 ６
３２　 ２．９８７　０　 １．６０９　３　 ０．４３８　３　 ０．３９６　６　 ２．００５　９　 ７
１５　 １．９４６　１　 ０．３２４　４　 ０．６０２　５　 １．５４７　７　 １．８７２　１　 ８
３３　 １．７８７　９　 ０．１２９　１　 ０．６２３　９　 １．６９７　２　 １．８２６　３　 ９
５　 ２．６８２　０　 １．２３２　８　 ０．４５６　１　 ０．５２１　８　 １．７５４　６　 １０
３　结论
建立了同时测定杜仲叶片中绿原酸和芦丁含量
的高效液相色谱条件，色谱条件为：色谱柱：Ａｇｌｉｅｎｔ
ＺＯＲＢＡＸ　ＳＢ－Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动
相组成为甲醇－乙酸－水（体积比为５０∶１∶４９）；检验
波长为３４０ｎｍ。利用此方法测定杜仲叶片中绿原
酸和芦丁含量时，重复性和稳定性指标均符合测定
要求，因此通过此方法可以快速、准确的测定杜仲叶
中２种物质的含量。
对叶片中绿原酸和芦丁含量的相关性系数为
０．３９８＊＊，达到了极其显著水平，因此可以同时对２
个性状进行改良。１０株优良单株的叶片中绿原酸
和芦丁的平均含量分别为２．６１９　９％和０．５６６　９％，
较初选群体分别提高了５５．６４％和４８．５３％。这些
优良单株将通过嫁接的方式繁育成无性系，开展杜
仲优良无性系的选育，进一步促进杜仲资源的开发
和利用。
参考文献：
［１］　张康健．杜仲［Ｍ］．北京：中国林业出版社，１９９０．
［２］　ＫＷＡＮ　Ｃ　Ｙ，ＣＨＥＮ　Ｃ　Ｘ，ＤＥＹＡＭＡ　Ｔ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ－
ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｖａｓｏｒｅｌａｘａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｅｕ－
ｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ　Ｏｌｉｖ．Ｌｅａｆ　ａｎｄ　ｂａｒｋ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅｉｒ
ａｎｔｉ－ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００４，４０：
２２９－２３５．
［３］　ＬＥＥ　Ｍ　Ｋ，ＫＩＭ　Ｍ　Ｊ，ＣＨＯ　Ｓ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ
Ｄｕ－ｚｈｏｎｇ（Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ　Ｏｌｉｖ．）ｌｅａｖｅｓ　ｉｎ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏ－
ｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｅｓ　Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒ．，２００５，
６７：２２－２８．
［４］　ＨＳＩＥＨ　Ｃ　Ｌ，ＹＥＮ　Ｇ　Ｃ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｕ－ｚｈｏｎｇ
（Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ　Ｏｌｉｖ．）ｔｏｗａｒｄ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｄａｍａｇｅ　ｉｎ　ｂｉｏ－
ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ［Ｊ］．Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉ．，２０００，６６：１３８７－１４００．
［５］　ＮＡＫＡＭＵＲＡ　Ｔ，ＮＡＫＡＺＡＷＡ　Ｙ，ＯＮＩＺＵＫＡ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎ－
ｔｉｍｕｔａｇｅｎｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｏｃｈｕ　ｔｅａ（ａｎ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｅｕｃｏｍｍｉａ
ｕｌｍｏｉｄｅｓ　ｌｅａｖｅｓ）：ｔｈｅ　ｃｌａｓｔｏｇｅｎ－ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｔｏｃｈｕ
ｔｅａ　ｉｎ　ＣＨＯ　ｃｅｌｓ　ａｎｄ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ．，１９９７，３８８：７－２０．
［６］　张康健，王蓝，张凤云，等．杜仲叶与皮有效成分含量的比较研
究［Ｊ］．西北林学院学报，１９９６，１１（２）：４４－４８．
ＺＨＡＮＧ　Ｋ　Ｊ，ＷＡＮＧ　Ｌ，ＺＨＡＮＧ　Ｆ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ
ｂｅｔｗｅｅｎ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂａｒｋ　ａｎｄ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ
Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉ－
ｖｅｒｓｉｔｙ，１９９６，１１（２）：４４－４８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［７］　张鞍灵，马琼，高锦明，等．绿原酸及其类似物与生物活性［Ｊ］．
中草药，２００１（２）：７９－８２．
［８］　李茂星，谢景文，葛欣．芦丁的药效学研究进展［Ｊ］．华西药学
杂志，２０００（６）：４５０－４５１．
［９］　陈秋虹，徐慧，蒋艳芳．高效液相色谱法测定桑叶中的绿原酸
和芦丁的含量［Ｊ］．中华中医药杂志，２００９（５）：６６３－６６５．
［１０］　史礼貌，解成喜．超声提取－反相高效液相色谱法测定新疆大
蓟中绿原酸和芦丁的含量［Ｊ］．分析科学学报，２０１２（３）：４０１－
４０４．
［１１］　张博勇，张康健，张檀，等．秦仲１－４号优良品种选育研究［Ｊ］．
西北林学院学报，２００４，１９（３）：１８－２０．
ＺＨＡＮＧ　Ｂ　Ｙ，ＺＨＡＮＧ　Ｋ　Ｊ，ＺＨＡＮＧ　Ｔ，ｅｔ　ａｌ．Ｒｅａｓｅｒｃｈｅｓ
ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　ｓｕｐｅｒｉｏｒ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ
Ｑｉｎｚｈｏｎｇ１－４［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
２００４，１９（３）：１８－２０．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１２］　杜红岩，张再元，刘本端，等．华仲１号等５个杜仲优良无性系
的选育［Ｊ］．西北林学院学报，１９９４，９（４）：２７－３１．
ＤＵ　Ｈ　Ｙ，ＺＨＡＮＧ　Ｚ　Ｙ，ＬＩＵ　Ｂ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｅｘｃｅｌｅｎｔ　ｃｌｏｎｅｓ　ｏｆ　Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ［Ｊ］．
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，１９９４，９（４）：２７－３１．
（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１３］　魏永成，李周岐，李煜，等．杜仲杂交子代苗期表型性状的遗
传分析［Ｊ］．西北农林科技大学学报：自然科学版，２０１２（８）：
１３７－１４３．
［１４］　魏永成．杜仲杂交子代苗期表型性状遗传分析及选择［Ｄ］．杨
陵：西北农林科技大学，２０１２．
［１５］　董娟娥，马柏林，刘丽，等．超声波提取杜仲叶中有效成分工艺
研究［Ｊ］．西北林学院学报，２００３，１８（３）：６６－６８．
ＤＯＮＧ　Ｊ　Ｅ，ＭＡ　Ｂ　Ｌ，ＬＩＵ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｅｕｃｏｍｍｉａ　ｕｌｍｏｉｄｅｓ　ｌｅａｖｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈ－
ｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００３，１８（３）：６６－６８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１６］　曹慧，陈晓青，肖建波，等．杜仲中京尼平甙酸的硅胶柱色谱
分离纯化及反相高效液相色谱／液相色谱－电喷雾质谱／核磁
共振鉴定［Ｊ］．色谱，２００５，２３（５）：５３４－５３７．
［１７］　张丽静，符继红，易新萍．ＨＰＬＣ法测定新疆贯叶连翘中绿原
酸和芦丁的含量［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００６，１８（２）：
３１１－３１２．
２３１ 西北林学院学报 ３０卷