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野生重瓣棣棠花的组织培养研究



全 文 :湖 北 农 业 科 学 2010 年
收稿日期:2009-11-23
作者简介:王 波(1980-),男,四川成都人,助教,硕士,从事植物培育与应用方面的研究,(电话)0838-2651862(电子信箱)renewbob@yahoo.com.cn。
第 49 卷第 10 期
2010 年 10 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 49 No.10
Oct.,2010
重瓣棣棠花 [(Kerria japonica (Linn) DC. f.
pleniflora(Witte)Rehd)]为蔷薇科棣棠花属多年生
草本落叶灌木,为我国特有种[1]。目前对该属的植物
棣棠,有学者进行了引种试验[2,3]、育苗研究[4]。 其组
织培养体系的建立为其规模生产提供了参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料
从四川德阳市郊区采集野生重瓣棣棠花,将采
回的植株栽植于四川工程职业技术学院苗圃。
试验试剂:6-BA、NAA、IBA,含量≥98%,成都
科龙化工试剂厂生产。
1.2 方法
1.2.1 外植体的处理 以重瓣棣棠花幼嫩枝条为
试验材料,剪取 3~4 cm 带芽的幼嫩茎段,用自来水
冲洗 2~3 h。 然后转入超净工作台上,用 75%酒精浸
泡 15 s,再转入 0.1%的升汞溶液中灭菌 6 min,最后
用无菌水冲洗 5~6 次。 将带芽茎段剪成 1~2 cm 的
小段,接种于培养基中。
1.2.2 初代培养与有效苗的诱导 基本培养基采
用 MS, 以不同浓度 6-BA (0.5~2.0 mg / L)、NAA
(0.05~0.5 mg / L)、IBA(0.1~1.0 mg / L)组合做启动培
养。 30 d后统计芽启动率。
1.2.3 继代增殖培养 将初代培养的嫩茎切成
0.5~1.0 cm 长的小段转入增殖培养基培养, 基本培
养基为 MS。 以不同浓度 6-BA(0.5~1.5 mg / L)、NAA
(0.05~0.2 mg / L)进行继代增殖培养,40 d 后统计增
殖系数。
1.2.4 生根培养 将苗高≥3 cm 的小苗接种于生
根培养基中,基本培养基为 1 / 2MS,即大量元素减
半,添加不同浓度配比 6-BA(0.5~1.5 mg / L)、NAA
(0.05~0.2 mg / L)、AC (活性炭)(1~5 g / L), 蔗糖 15
野生重瓣棣棠花的组织培养研究
王 波 1,吴建文 1,蒋天仪 2,宋 碧 3
(1.四川工程职业技术学院建筑工程系,四川 德阳 618000; 2.成都农业科技职业学院农学园艺系,成都 610000;
3.四川凹凸环境营造有限责任公司,成都 610000)
摘要:以野生重瓣棣棠花茎段为外植体,进行组织培养技术体系的建立。 结果表明,启动培养时,外源激
素为 6-BA 1.0 mg / L+NAA 0.1 mg / L 的效果最好,启动率达到 93.33%;适合继代增殖的培养基是 6-BA
1.5 mg / L+NAA 0.1 mg / L,增殖系数达到 7.8;而 1 / 2MS+6-BA 1.0 mg / L +NAA 0.1 mg / L+AC 5g / L 的培
养基生根效果高于其他处理,生根率达到 78.60%。
关键词:重瓣棣棠花;野生资源;组织培养
中图分类号:Q943.1 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2010)10-2356-02
Tissue Culture of wild Kerria japonica
WANG Bo1,WU Jian-wen1,JIANG Tian-yi2,SONG Bi3
(1.Sichuan Engineering Technical College of Architectural Engineering, Deyang 618000, Sichuan, China;
2.Department of Agriculture and Horticulture, Chengdu Vocational College of Agricultural Science and Technology, Chengdu 610000, China;
3.Sichuan Concave-convex Environment Building Limited Company, Chengdu 610000, China)
Abstract: In this paper, the steam of Kerria japonica (Linn) DC. f. pleniflora (Witte) Rehd was used as explants to carry
out its tissue culture. The results revealed that the best initiation rate of 93.33% was obtained after adding exogenous hor-
mone of 1.0mg / L 6-BA and 0.1 mg / L NAA in medium. The multiplication coefficient of subculture in the most suitable
subculture multiplication medium containing 1.5 mg / L 6-BA and 0.1 mg / L NAA could reach 7.8. The highest rooting rate of
78.60% was observed in the medium containing 1 / 2 MS, 1.0 mg / L 6-BA, 0.1 mg / L NAA and 5 g / L AC.
Key words: Kerria japonica (L.) DC. f. pleniflora (Witte) Rehd; wild resources; tissue culture
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2010.10.057
第 10 期
g / L。 40 d后统计生根率。
2 结果与分析
2.1 不同浓度激素组合对启动培养的影响
经观察,重瓣棣棠花带芽茎段培养 10 d 后开始
萌动,逐渐在叶腋处萌生出小芽。 15 d 后抽生新稍
明显, 长出绿色小叶。 从表 1 可以看出,6-BA1.0
mg / L+NAA 0.1 mg / L 对芽的诱导效果最好, 培养
30d 后启动率达到 93.33%。 经试验对比,IBA 对重
瓣棣棠花启动培养影响不显著。
2.2 不同浓度激素配比对继代增殖培养的影响
初代茎段培养 40 d 后,在外植体周围出现大量
丛芽,增殖系数大多能达到 5.0 以上,发挥了组织培
养快速繁殖的优势,达到了快速繁殖的目的。从表 2
可以看出,适合继代增殖的培养基是 6-BA 1.5 mg/L+
NAA 0.1 mg / L,增殖系数达到 7.8。
2.3 不同培养基对生根的影响
生根培养 20 d 后即可观测到有白色突起的根
状物,30 d 后大多数培养基上的植株都可以观察到
白色的细根。 从表 3可以看出, 处理 1 / 2MS+6-BA
1.0 mg / L+NAA 0.1 mg / L+AC 5g / L 的效果明显地
高于其他处理,生根率达到 78.60%。
2.4 开花培养
试验在继代培养过程中,经 60 d 左右,小苗株
高 4~5 cm,于株顶开花,花径约 1.5 cm,重瓣,具有
正常的雌蕊与雄蕊,花期 15 d。 开花现象在瓶苗中
重复出现。 经试验对比,6-BA 1.0 mg / L+ NAA 0.1
mg / L开花培养效果最好,开花率达到 33.33%,其次
是 6-BA 1.5mg / L+NAA 0.1mg / L。
3 小结
初代培养时,6-BA 1.0 mg / L+NAA 0.1 mg / L 培
养基对芽的诱导效果最好。表明 6-BA、NAA以及二
者的配合使用促进了茎段芽的启动。 随着使用浓度
的升高,启动率也升高,但过了一定的值,则开始下
降,说明浓度过高对芽的诱导起了抑制作用。 同时
还发现 IBA 对重瓣棣棠花芽的启动诱导影响不显
著。 而在继代增殖培养时 ,6-BA 1.5 mg / L+NAA
0.1 mg / L 培养基的增殖系数最高,培养 40 d 时达到
了 7.8。 瓶苗重复出现开花现象,6-BA 1.0 mg / L+
NAA 0.1 mg / L 开花培养效果最好, 开花率达到了
33.33%。 生根培养时,1 / 2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA
0.1 mg / L+AC 5g / L 培养基的效果最好。 本试验中,
NAA 对重瓣棣棠花的生根影响极显著 , 但随着
NAA用量的增加,生根率呈下降的趋势。 与其他草
本植物不同, 细胞分裂素在生根培养中起作用,可
能是与重瓣棣棠花主茎木质化程度较高有关。
参考文献:
[1] 中国植物志编辑委员会. 中国植物志[M]. 北京:科学出版社,
2001.
[2] 许福全. 棣棠引种试验[J]. 宁夏农林科技,2002(3):13.
[3] 陈克武.棣棠花的栽培技术[J].安徽林业科技,2005(1):32.
[4] 温爱存 . 棣棠嫩枝扦插育苗试验研究 [J]. 中国林副特产 ,
2009(2): 32-33.
表 3 不同培养基对生根的影响
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
6-BA
mg/L
0.5
0.5
0.5
1.0
1.0
1.0
1.5
1.5
1.5
NAA
mg/L
0.05
0.1
0.2
0.1
0.2
0.05
0.2
0.05
0.1
AC
g/L
1
3
5
5
1
3
3
5
1
接种数

30
30
30
30
30
30
30
30
30
平均根数

1.2
1.7
2.2
3.3
2.4
1.9
2.2
2.0
2.3
生根率
%
36.66
60.00
56.66
78.60
66.66
63.33
56.66
53.33
73.33
表 1 不同浓度激素组合对重瓣棣棠花启动培养的影响
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
6-BA
mg/L
0.5
1.0
1.5
2.0
0.5
1.0
1.5
2.0
0.5
1.0
1.5
2.0
0.5
1.0
1.5
2.0
NAA
mg/L
0.05
0.05
0.05
0.05
0.1
0.1
0.1
0.1
0.2
0.2
0.2
0.2
0.5
0.5
0.5
0.5
IBA
mg/L
0.1
0.2
0.5
1.0
0.1
0.2
0.5
1.0
0.1
0.2
0.5
1.0
0.1
0.2
0.5
1.0
接种数

30
30
30
30
30
30
30
30
30
30
30
30
30
30
30
30
启动数

18
15
18
9
19
28
26
11
16
23
17
21
6
22
14
16
启动率
%
60.00
50.00
60.00
30.00
63.33
93.33
86.67
36.67
53.33
76.67
56.67
70.00
20.00
73.33
46.67
53.33
表 2 不同浓度激素配比对继代增殖培养的影响
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
6-BA
mg/L
0.5
1.0
1.5
0.5
1.0
1.5
0.5
1.0
1.5
NAA
mg/L
0.05
0.05
0.05
0.1
0.1
0.1
0.2
0.2
0.2
接种数

30
30
30
30
30
30
30
30
30
40d 后苗数

189
202
214
166
221
234
106
188
206
增殖系数
6.3
6.7
7.1
5.5
7.4
7.8
3.5
6.3
6.9
王 波等:野生重瓣棣棠花的组织培养研究 2357