全 文 ：表 2　贞芪扶正胶囊和颗粒中两种异黄酮类成分的含量
样品名称 批号 毛蕊异黄酮(μg·粒-1)
芒柄花素
(μg·袋-1)
贞芪扶正胶囊 20000703 4.183±0.235 1.995±0.106
贞芪扶正胶囊 20030202 2.690±0.117 0.859±0.040
贞芪扶正胶囊 20030605 3.863±0.037 0.707±0.040
贞芪扶正颗粒 20030605 23.702±0.432 6.333±0.078
2.5　重复性试验
重复性:(1)精密称取 3 号样品 3 份(每份 5
粒),按 2.3.1项下方法处理 ,测定峰面积 ,毛蕊异黄
酮 、芒柄花素的 RSD 分别为 0.986%, 1.12%。(2)
取 4号样品 3袋 ,分别按 2.3.2项下方法处理 ,测定
峰面积 , 毛蕊异黄酮 、芒柄花素的 RSD 分别为
1.31%,1.32%。
2.6　加样回收率实验
精密吸取已知含量的贞芪扶正胶囊样品(批号:
20000703)和贞芪扶正颗粒样品(批号:20030605)各
5mL ,分别加入 10mL 量瓶中 ,分别加入对照品储备
液 25μL ,定容至 10mL ,用 0.45μm 微孔滤膜过滤 ,
续滤液用 2.1项色谱条件分析 ,结果见表 3。
表 3　 加样回收率
序号 样品含量(g)毛蕊异黄酮 芒柄花素
加入量(μg)
毛蕊异黄酮 芒柄花素
测得值(μg)
毛蕊异黄酮 芒柄花素
回收率(%)
毛蕊异黄酮 芒柄花素
1 11.06 5.09 23.50 23.25 34.59 28.88 100.13 102.33
2 11.06 5.09 23.50 23.25 35.18 27.14 102.64 94.85
3 11.06 5.09 23.50 23.25 34.12 27.53 98.14 96.53
4 11.66 6.34 23.50 23.25 34.68 28.53 97.97 95.43
5 11.66 6.34 23.50 23.25 33.82 29.12 94.31 97.96
6 11.66 6.34 23.50 23.25 35.00 28.09 99.32 93.53
　　注:1 , 2 , 3为胶囊 ,其中毛蕊异黄酮和芒柄花素的平均回收率分别为 100.3%(RSD=2.25%), 97.9%,(RSD =4.01%), 4 , 5 , 6为颗粒 , 其
中毛蕊异黄酮和芒柄花素的平均回收率分别为 97.20%(RSD =2.66%), 95.65%,(R SD=2.32%)。
3　结果与讨论
3.1　对照品中毛蕊异黄酮 、芒柄花素色谱峰用二极
管阵列检测器对其进行紫外扫描 ,两者均在 250nm
左右有较强的吸收 ,为了便于检测 ,选择检测波长为
250nm 。
3.2　比较表 2中的数据可发现两种制剂中毛蕊异
黄酮的含量均大于芒柄花素的含量 ,这与我们测定
的黄芪药材基本一致 。
3.3　该实验采用高效液相色谱法测定了贞芪扶正
胶囊中的毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量 ,该方法简
便 ,准确 ,快速 ,重现性好 ,为该制剂的质量控制提供
了科学的依据 ,对提升该类制剂的质量 、为该类制剂
走向国际市场具有积极的意义。
参考文献:
[ 1] 　杜　 ,刘晓俊 , 刘　涤 , 等.黄芪化学质量标准的初步研究
[ J] .中成药 , 2000 ,(10):745-748.
[ 2] 　任德权.中药质量控制的里程碑———中药指纹图谱[ J] .中成
药 , 2001 , 23(1):1-2.
[ 3] 　候云德 ,宋代军 ,付丰勇 ,等.黄芪某些生物活性的有效部分的
研究[ J] .中西医结合杂志 , 1984 , 4:420-422.
HPLC测定橘红丸中柚皮苷 、橙皮苷的含量
丁桂兰1 , 　薛亚光1 , 　邢春来2 , 　刘英姬2
(1.吉林省药品检验所 ,吉林 长春市 130062;2.吉林国药制药有限责任公司 ,吉林 吉林市 132011)
收稿日期:2003-12-01
作者简介:丁桂兰(1964～ ),女 ,吉林省长春市人, 副主任药师 , 主要研究方向:中药材 ,中成药质量标准的起草及检验工作 ,电话:0431-
7913212。
关键词:HPLC;橘红丸;柚皮苷;橙皮苷
摘要:目的:建立橘红丸(化橘红 , 陈皮 ,当归等)中柚皮苷 、橙皮苷的含量测定方法。方法:采用 Shim-pack ODS(Υ6.0mm
×150mm)分析柱 , 流动相:甲醇-醋酸-水(30∶4∶60),检测波长:283nm , 流速:0.8mL·min-1 , 柱温:40℃。结果:柚皮苷和
707
2004 年 9 月
第 26 卷　第 9 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
September 2004
Vol.26　No.9
橙皮苷分别在0.072 ～ 1.43μg 和 0.068 ～ 1.37μg 范围内呈线性关系 , r=0.9999。平均回收率:柚皮苷为 99.3%, RSD =
0.6%(n =5);橙皮苷为 99.4%, RSD =0.6%(n =5)。结论:该方法简便 , 结果准确 ,可靠。
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2004)09-0707-03
Determination of narigin and hesperidin in Juhong Pills by HPLC
DING Gui-lan1 , 　XUE Ya-guang1 , 　XING Chun-lai2 , 　LIU Ying-ji2
(1 .Jil in Provincial Insti tute of Drug Control , Changchun 130062 , China;2.Ji lin Guoyao Pharmaceu tical Co.Ltd , Ji lin 132011 , China)
KEYWORDS:HPLC;Juhong Pills;narigin;hesperidin
ABSTRACT:AIM:To establish the determination of narigin and hesperidin in Juhong Pills(Exocarpium , Citri
Grandis , Pericarpium Citri Ret iculatae , Radix Angelicae Sinensis , etc.).METHODS:The ex traction w as com-
pleted w ith ether.The Shim-pack ODS(Υ6.0mm ×150mm)column w as used w ith mobile phase of CH3OH-
CH3COOH-H2O(30∶4∶60).The detection w avelength was at 283nm.RESULTS:The linear range fo r narigin
w as 0.072 ～ 1.43μg , r =0.9999 and the linear range for hesperidin w as 0.068 ～ 1.37μg , r=0.9999 , respec-
tively.Both the average recoveries were 99.3% and 99.4%, respect ively .Both RSD were 0.6%(n =5).
CONCLUSION:The method is simple and the result is reliable.
　　橘红丸是由化橘红 、陈皮 、当归 、半夏 、茯苓等
15味中药组成的复方制剂 ,具有清肺 ,化痰 ,止咳 。
用于咳嗽痰多 ,痰不易出 ,胸闷口干 。本方收载于中
国药典2000年版一部[ 1] ,橘红丸项下无含量测定方
法。方中化橘红和陈皮分别为君 、臣药 ,化橘红的主
要化学成分为柚皮苷 ,陈皮的主要化学成分为橙皮
苷。为有效的控制其质量 ,我们采用高效液相色谱
法测定本品中柚皮苷和橙皮苷的含量 ,收到满意的
效果 ,方法简便 ,准确 ,重现性好。为控制该产品质
量提供了可靠的依据 。
1　仪器与试药
岛津 LC-10Atvp高效液相色谱仪 。浙江大学
N2000色谱工作站;HS10260D超声波清洗器;柚皮
苷 、橙皮苷对照品由中国药品生物制品检定所提供
(批号:722-200107和 0721-200010),均为含量测定
用;甲醇为优级纯 ,水为 Milli-Q 经 0.22μm 膜净化
的超纯水 ,其它试剂为分析纯;橘红丸样品由各厂家
提供 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件[ 1]
色谱柱:Shim-pack ODS(6.0mm×150mm),流
动相:甲醇-醋酸-水(30∶4∶60)流速:0.8mL·min-1 ,
柱温 40℃,检测波长:283nm ,进样量 10μL ,理论板
数按橙皮苷峰计算为 5672 。在此条件下 ,所得色谱
图(见图 1)。结果表明 ,柚皮苷 、橙皮苷色谱峰分离
良好 ,且阴性样品互不干扰。
2.2　对照品溶液的制备
A.柚皮苷、橙皮苷对照品HPLC B.橘红丸样品 HPLC
C.缺化橘红的橘红丸 HPLC D.缺陈皮的橘红丸 HPLC
图 1　
　　分别取柚皮苷 、陈皮苷对照品适量 ,精密称定 ,
加甲醇制成每 1mL 含柚皮苷 、橙皮苷各 70μg 的混
合溶液 ,作为对照品溶液。
2.3　供试品溶液的制备
取本品水蜜丸 1.5g ,研碎;取小蜜丸或大蜜丸
2g , 切碎 , 置 100mL 碘量瓶中 , 精密加入流动相
50mL ,密塞 , 称定重量 , 放置使溶散 , 超声处理
30min ,放冷 ,再称定重量 ,用流动相补足减失重量 ,
摇匀 ,滤过 ,(不易滤过者可先离心 ,取上清液滤过),
弃去初滤液 ,取续滤液作为供试品溶液。
2.4　线性关系
精密称取柚皮苷 、橙皮苷对照品适量 ,加甲醇制
成每 1mL 分别含柚皮苷 71.64μg ,橙皮苷 68.4μg
708
2004 年 9 月
第 26 卷　第 9 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
September 2004
Vol.26　No.9
的混合溶液 ,分别精密吸取 1 , 5 , 10 , 15 , 20μL 注入
液相色谱仪 ,测定 ,以对照品的进样量为横坐标 ,峰
面积值为纵坐标 ,作图 ,分别得到近过原点的两条直
线 , 柚皮 苷回 归 方 程 Y = 1103430.713X -
1534.9477 r =0.9999;橙皮苷回归方程 Y =
1155126.834X -2036.644 r =0.9999。结果表明 ,
柚皮苷在0.072 ～ 1.43μg ,橙皮苷在0.068 ～ 1.37μg
范围内呈良好的线性关系 。
2.5　精密度试验
供试品溶液连续进样 5次 ,测定峰面积 ,柚皮苷
和橙皮苷 RSD 均为 0.46%。
2.6　重复性试验
取同一供试品 ,依本方法独立测定 5次 ,柚皮苷
RSD 为 1.3%,橙皮苷 RSD 为 0.9%。
2.7　稳定性试验
取同一供试品溶液 ,每隔一定时间进样 1次 ,结
果在 24h内 ,供试品溶液中柚皮苷和橙皮苷的含量
稳定 。
2.8　回收率试验
精密称取同法测定已知含量的供试品(柚皮苷:
0.7078mg·g -1 ,橙皮苷:0.9269mg·g-1)约 1g ,一式
10份 , 前 5 份分别精密加入柚皮苷对照品溶液
(14.52μg·mL -1 ,流动相溶解)50mL ,后 5份分别精
密加入橙皮苷对照品溶液 、(18.76μg·mL-1 ,流动相
溶解)50mL 依法测定 ,计算回收率 ,结果见表 1 、表
2。
Table 1　　The results of recovery experiments(Narigin)
S ample
Con tents
(mg)
Added
(mg)
Detected
(mg)
Recovery
(%)
Average
Recovery
( x , %)
RSD
(%)
0.7152 0.726 1.4319 98.72
0.7132 0.726 1.4368 99.67
0.7138 0.726 1.4390 99.89 99.3 0.6
0.7166 0.726 1.4398 99.61
0.7176 0.726 1.4323 98.44
Table 2　The results of recovery experiments(Hesperidin)
S ample
Con tents
(mg)
Added
(mg)
Detected
(mg)
Recovery
(%)
Average
Recovery
( x , %)
RSD
(%)
0.9338 0.938 1.8709 99.90
0.9291 0.938 1.8652 99.80
0.9369 0.938 1.8650 98.66 99.4 0.6
0.9335 0.938 1.8603 98.81
0.9373 0.938 1.8716 99.61
　　如表 1 、表 2 所示 ,本法柚皮苷平均回收率为
99.3%, RSD 为 0.6%。橙皮苷平均回收率为
99.4%, RSD 为 0.6%,表明本法回收率较高 ,准确
度好。
2.9　样品测定
依本方法分别对不同厂家的水蜜丸 、小蜜丸 、大
蜜丸进行了含量测定 ,结果见表 3 、表 4 、表 5 。
Table 3　 The contents of Narigin and Hesperidin in water-honeyed pill
Manufacturer No
Conlents(mg·g-1)
Narrigin Hesperidin
Mean(mg·g -1)
Narrigin Hesperidin
吉林鹿王制药有限公司 030401 0.99 0.94 2.18 2.03 1.0 2.1
通化紫金药业股份有限公司 010901 2.42 2.43 2.08 2.09 2.4 2.1
通化紫金药业股份有限公司 021202 2.51 2.51 1.71 1.69 2.5 1.7
通化紫金药业股份有限公司 030302 2.45 2.46 1.99 2.01 2.5 2.0
吉林力源药业股份有限公司 030301 3.67 3.69 2.42 2.49 3.7 2.5
昆明中药厂有限公司 010811 3.23 3.24 1.24 1.26 3.2 1.2
山东环中制药股份有限公司 020401 0.68 0.70 0.87 0.89 0.7 0.9
Table 4　 The contents of Narigin and Hesperidin in small honeyed pill
Manufacturer No
Conltents(mg·pill-1)
Narigin Hesperidin
Mean(mg·pill-1)
Narigin Hesperidin
吉林省力源药业股份有限公司 030301 8.17 8.19 5.52 5.50 8.20 5.50
3　讨论
3.1　供试品溶液的制备
由于橙皮苷的溶解性较差 ,小蜜丸 、大蜜丸及水
蜜丸切碎的程度不同 ,故溶散的时间长短不一 ,一般
在加入溶剂后需放置 20h以上才能溶散。
3.2　色谱柱的选择
试验比较了 ①shim-pack ODS(Υ6.0mm ×
150mm)和②Diamonsil C18(5μ250mm ×4.6mm)色
谱柱 。结果在色谱条件完全一致的情况下 ,样品中
柚皮苷与橙皮苷均得到很好的分离 ,但色谱柱②的
分析时间较色谱柱①长 。故选择色谱柱①为本法的
色谱柱 。
3.3　含量限度的确定
　　通过对不同生产单位的不同规格橘红丸样品的
709
2004 年 9 月
第 26 卷　第 9 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
September 2004
Vol.26　No.9
Table 5　 The contents of Narigin and Hesperidin in big honeyed pill
Manufactu rer No
Conltents(mg·pi ll-1)
Narigin Hesperidin
Mean(mg·pill-1)
Narigin Hesperidin
吉林鹿王制药有限公司 030301 4.24 4.23 5.45 5.48 4.2 5.5
吉林金宝药业有限公司 20020905 4.12 4.21 8.45 8.74 4.2 8.6
吉林省力源药业股份有限公司 030301 16.10 16.17 12.84 12.92 16.1 12.9
吉林修正药业集团通化市制药有限公司 030311 2.75 2.78 17.90 18.17 2.8 18.0
吉林省银河制药厂 20030201 4.61 4.71 6.55 6.69 4.7 6.6
长春经开药业有限公司 20021105 3.94 3.98 7.37 7.45 4.0 7.4
山东临涛中药厂 20000804 4.57 4.60 10.36 10.32 4.6 10.3
昆明中药厂 020405 13.95 14.05 5.28 5.28 14.0 5.3
山东大陆药业有限公司 20021104 4.16 4.28 5.48 5.64 4.2 5.6
河北药都制药集团有限责任公司 DM310001 14.16 14.51 5.47 5.64 14.3 5.6
天津达仁堂制药厂 000602 11.00 11.37 7.61 7.81 11.2 7.7
甘肃省河西制药厂 020701 4.70 4.72 6.09 6.07 4.7 6.1
山东维仿医药集团股份有限公司中药厂 030201 3.34 3.33 4.39 4.30 3.3 4.3
广西梧州三鹤药业有限公司 021202 5.44 5.47 5.15 5.19 5.5 5.2
云南省腾冲县制药厂 020316 16.28 16.28 4.55 4.53 16.3 4.5
石家庄华龙药业股份有限公司 20030301 2.86 2.84 8.40 8.53 2.8 8.5
内蒙古自治区包头中药厂 20030305 3.31 3.27 4.80 4.73 3.3 4.8
山西华康药业股份有限公司 20030401 7.89 7.85 4.85 4.88 7.9 4.9
山西榆社阿胶厂 20020914 5.31 5.41 6.40 6.52 5.4 6.5
承德中药集团有限责任公司 20020117 6.23 6.54 6.96 7.16 6.4 7.1
干凉佛明制药有限责任公司 20030603 4.84 4.84 6.17 6.13 4.8 6.2
测定 ,结果表明 ,水蜜丸柚皮苷含量在 0.7 ～ 3.7mg·
g
-1;橙皮苷含量在 0.9 ～ 2.5mg·g-1 。大蜜丸柚皮
苷含量在 2.8 ～ 16.3mg·pill-1;橙皮苷含量在 4.3 ～
18mg·pill-1 。中国药典 2000 年版化橘红药材规定
柚皮苷的含量不得低于 1.5%,陈皮药材规定橙皮
苷的含量不得低于 3.5%。按处方量[ 1]折算 ,橘红
丸柚皮苷含量理论值水蜜丸:1.28 ～ 1.39mg·g-1;
大蜜丸 4.77 ～ 5.28mg·pill-1 。橙皮苷含量理论值
水蜜丸:1.99 ～ 2.16mg·g -1;大蜜丸 7.42 ～ 8.22mg
·pill-1 。考虑到投料药材不同及工艺的波动 ,规定
水蜜丸柚皮苷含量每 1g 不得少于 1.0mg ,橙皮苷含
量每 1g 不得少于 1.2mg;大蜜丸柚皮苷含量每丸不
得少于 3.0mg ,橙皮苷含量每丸不得少于 4.5mg 。
由于小蜜丸样品数量较少 ,参照大蜜丸的限度规定
柚皮苷含量每丸不得少于 1.5mg ,橙皮苷含量每丸
不得少于 2.2mg 。为拟上中国药典 2005年版一部
橘红丸的含量测定提供了可靠的依据 。
参考文献:
[ 1] 　中华人民共和国药典(一部)[ S] .北京:化学工业出版社 ,
2000 , 56-57 , 148-149 , 626.
HPLC测定洁康舒洗剂中大黄酸 、大黄素及大黄酚的含量
刘腊娥 , 　陈立新 , 　杨长成 , 　田益民
(中国人民解放军第 163中心医院 ,湖南 长沙 410003)
收稿日期:2004-03-02
作者简介:刘腊娥(1951～ ),女 ,湖南人 ,副主任药师 , 研究方向:药物分析及中药新制剂开发 ,电话:0731-4569050 , E-mail:lle163@21cn.
com。
关键词:HPLC;洁康舒洗剂;大黄酸;大黄素;大黄酚
710
2004 年 9 月
第 26 卷　第 9 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
September 2004
Vol.26　No.9