全 文 ：— 44 — 现代中药研究与实践2011年第25卷第2期Chin Med J Res Prac,2011 Mar.,Vol.25 No.2
唇香草抑菌活性筛选及挥发油类化学成分分析
周晓英 1，施 洋 2，马秀敏 3，宫海燕 3，田树革 2*
（1. 新疆医科大学药学院， 新疆 乌鲁木齐 830011 ；2. 新疆医科大学中医学院中药系，新疆 乌鲁木齐
830011 ；3. 新疆医科大学基础医学院，新疆 乌鲁木齐 830011)
摘要： 目的 筛选唇香草抑菌活性成分及分析其挥发油类化学成分。方法 采用纸片琼脂扩散法和对
倍稀释法对唇香草水提取物与挥发油进行抑菌实验研究，经 GC-MS 联用技术，结合 Kovats 指数技术对唇
香草挥发油抑菌的活性成分进行了成分分析。结果 唇香草挥发油对白假丝酵母菌有较强的抑制作用，水
提取物对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用，而对大肠杆菌、铜绿假单胞菌的抑制作用较弱。结论 唇香
草挥发油和水提取物对白假丝酵母菌、金黄色葡萄球菌有较好抑制作用，本研究为唇香草的临床应用提供
了理论根据。
关键词：唇香草 ；挥发油 ；抑菌实验 ；GC-MS
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2011)02-0044-04
Inhibit Bacterial Activity Screening and Volatile Oil Chemical Composition Analysis of
Ziziphora clinopodioides Lam.
ZHOU Xiao-ying1，SHI Yang2，MA Xiu-min3，GONG Hai-yan3，TIAN Shu-ge2
(1. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011,China ; 2. College of Traditional
Chinese Medical, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011,China ; 3. College of Medical, Xinjiang Medical
University, Urumqi 830011, China)
Abstract: Objective To study inhibiting bacterial activity and volatile oil chemical composition analysis
of Ziziphora clinopodioides Lam. Methods Different extraction of the Ziziphora clinopodioides Lam inhibited
bacterial activity screening by the filter paper method and standard plate dilution method. In order to find
antibacterial components, the constituents of volatile oil from Ziziphora clinopodioides Lam. were analysed by
techniques of GC-MS and Kovats index. Results Volatile oil of Ziziphora clinopodioides Lam. has a stronger
effect on Candida albicans, aqueous extract has a good effect on Staphylococcus aureus and a weak effect on
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa. Conclusion The volatile oil and extract of water have a better effect
for inhibting Candida albicans, Staphylococcus aureus.This study provide theory basis for clinical treatment of
Ziziphora clinopodioides Lam.
Keywords: Ziziphora clinopodioides Lam. ;volatile oil ; inhibit bacterial activity ; GC-MS
收稿日期：2010-04-22
基金项目：新疆自然科学基金项目（项目编号：200821130）
*通讯作者：田树革， 教授,硕士生导师。Tel:0991-4365195; 15999441880,
E-mail: tsgyz@sina.com.
唇香草 Ziziphora clinopodioides Lam. 唇形科多
年生半灌木状草本植物 , 全草含 0.8%~1.5% 的挥发油 ,
具有强心利湿、理气化痰、消炎散结的功效 [1,2]。目
前对唇香草化学成分与生物活性的研究报道少见 [3,4],
本文采用纸片琼脂扩散法和对倍稀释法，对新疆产
地唇香草水提物与挥发油的抑菌作用进行研究，采用
GC-MS 联用技术结合 Kovats 指数，对唇香草挥发油
成分进行了成分分析。
1 实验部分
1.1 材料、试剂与仪器
唇香草全草来源于新疆乌鲁木齐南山地区，
经新疆医科大学中医学院李永和主任药师鉴定为
Ziziphora clinopodioides Lam.，样品标本存于新疆医
科大学中药民族药标本馆）。金黄色葡萄球菌（ATCC
25923）、大肠杆菌（ATCC 25922）、铜绿假单胞菌
（ATCC 27853）、白假丝酵母菌（ATCC 10231）对
照菌种（均购自中国药品生物制品检定所）。肉汤、
营养琼脂培养基（批号 ：20080313-2），沙保氏培养
基（批号 ：20071029）（均购自杭州微生物试剂厂）；
青霉素钠盐（10 u 青霉素钠盐药纸片，购自北京天坛
药物生物技术开发公司；80 万 u 注射用青霉素钠盐，
购自华北制药股份有限公司批号 F0609101）；C6-C20
正构烷烃系列（天津 色谱纯）。
DOI:10.13728/j.1673-6427.2011.02.020
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GC-MS-QP2010 型气相色谱质谱联用仪（日本
岛津公司）， GBC4.0 型紫外分光光度计（澳大利亚），
RE-52 型旋转式蒸发器（上海安亭电子仪器厂），YJ-
875A 型医用净化工作台（苏州金燕净化设备厂），
DNP-9162 型电热恒温培养箱（上海精宏实验设备有
限公司）。
1.2 样品的制备
1.2.1 唇香草水提液的制备 称取一定量的唇香草
全草，粉碎后过 40 目筛，称量样品粗粉 20 g，加入
200 mL 蒸馏水，采用 KQ-400DB 型数控超声波清洗
器超声 30 min 后，在不断搅拌下浸提 24 h，过滤后
将滤液浓缩至 20 mL, 得到 1 000 g•L-1 唇香草水提液，
测定 pH 值为 6.4，无菌实验检测后装入无菌试管中，
备用。
1.2.2 唇香草挥发油的制备 称取过 40 目筛的唇香
草粉末 100 g, 置于挥发油提取器中 , 加水 800 mL, 加
热至沸腾 , 提取 6 h, 得浅黄色油状液体约 1.2 mL, 加
无水 Na2SO4 脱水干燥 , 无菌实验检测后装入无菌试
管中，备用。
以上两种样品均需放置在冰箱保存，于 48 h 内
使用，以保证药效稳定。
1.3 抑菌实验方法
1.3.1 菌种培养 金黄色葡萄球菌（ATCC 25923）、
大 肠 杆 菌（ATCC 25922）、 铜 绿 假 单 胞 菌（ATCC
27853）、白假丝酵母菌（ATCC 10231）均为鉴定后
保存的标准菌种，经复苏转种培养后，取新传代金黄
色葡萄球菌（大肠杆菌、铜绿假单胞菌等）接种于
M-H 肉汤培养基，置于 37℃恒温箱培养 6 h ；取新传
代白假丝酵母菌接种于沙保氏液体培养基，置于 37
℃恒温箱培养 8 h。分别取金黄色葡萄球菌（大肠埃
希杆菌、铜绿假单胞菌等）6 h 培养液用肉汤培养基
稀释，充分振荡后，经麦氏比浊管调整菌液浓度为
109cfu•mL-1 ；用沙保氏液体培养基稀释白假丝酵母菌
8h 培养液，充分振荡后经麦氏比浊管调整菌液浓度
为 109 cfu•mL-1。
1.3.2 纸片琼脂扩散法 取培养 6 h 的试验菌液（0.5
麦氏单位 1.5×108 cfu•mL-1），用无菌棉试子蘸取矫正
过的菌液，分别均匀涂布于 MH 琼脂平板表面，稍
干后 , 在无菌条件下取含不同药液的圆滤纸片（直
径 5.1 mm，每片吸取水提唇香草药液约唇香草 5.56
μg、挥发油 10 μL），贴于 MH 琼脂平板表面，37 ℃
恒温箱培养 24 h 后用游标卡尺观察以测量抑菌圈直
径，每个药物抑菌实验重复 3 次，抑菌结果是 3 次实
验的平均值。
1.3.2 液体培养基连续稀释法 唇香草水提取物（1
mg•mL-1）、挥发油用 MH 肉汤培养基作连续对倍稀
释，使 MH 肉汤培养基含药浓度分别为 500、250、
125、62.5、31.25，15.62、7.81、39、19.50、9.70、
4.90、0.25 mg•mL-1，分别接种等量的金黄色葡萄球
菌 菌 液（1.67×107 cfu•mL-1） 和 白 假 丝 酵 母 菌 菌 液
（7.1×106 cfu•mL-1）0.1 mL，并以 MH 肉汤培养和无
药 MH 肉汤培养基接种相同量菌液作为对照，于 37
℃恒温箱培养 24 h 后，肉眼观察药物的最低抑菌浓
度（MIC），因中药药液有色泽，肉眼常不宜判断，
再取培养液接种琼脂平板表面，37 ℃恒温箱培养 24
h 后以完全无菌生长的最低浓度为该药物的最低杀菌
浓度（MBC），每个药物抑菌实验重复 3 次。
1.4 GC-MS 分析方法
色谱条件 : DB-5 石英毛细管色谱柱 ( 30 m×0.25
mm×0.25 μm) ; 进 样 口 温 度 250 ℃ , 程 序 升 温 4
℃ •min-1 ; 质 谱 条 件 : 载 气 为 He, 流 量 1.0 mL•min-1,
电 离 方 式 EI, 电 子 能 量 70 eV, 离 子 源 温 度 200 ℃ ,
接口温度 : 250 ℃ , 质量范围为 33~450 amu; 样品与
C6~C20 正构烷烃系列标样混合液混合均匀，进样量 1
μL。通过 GC-MS 测定 , 得样品挥发油的总离子流图、
各成分气相色谱保留指数与质谱图。经美国 NIST05
and NIST05s 质谱库与保留指数检索以及有关文献 [9],
分析确定各化学成分 , 用峰面积归一化法计算各组分
的含量。
2 结果与讨论
2.1 抑菌作用
2.1.1 纸片琼脂扩散法检测唇香草水提液、挥发油的
抑菌作用 唇香草挥发油对白假丝酵母菌有较强的
抑制作用，唇香草水提液对白假丝酵母菌、金黄色葡
萄球菌有较强的抑制作用，对大肠杆菌、铜绿假单胞
菌的抑制作用较弱，见表 1。
2.1.2 连续稀释法检测唇香草水提液、挥发油的抑
提取物浓度
（mg•mL-1）

唇香草水提取物5.56μg/每片
唇香草挥发油10μL/每片
青霉素钠盐纸片10μg/每片
表1  纸片法检测唇香草水提液、挥发油的抑菌作用结果
Tab. 1 Antibacterial activity of the aqueous extraction and volatile oil of
Ziziphora clinopodioides Lam., by the filter paper method
金黄色葡萄
球菌
17.7
10
32.8
白假丝
酵母菌
4.8
32
大肠
杆菌
5.2
3.1
铜绿假
单胞菌
2
1.6
抑菌圈直径（mm）
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菌作用 唇香草挥发油对白假丝酵母菌有较强抑制
作 用， 其 MIC 分 别 是 为 0.96 mg•mL-1, MBC 是 1.9
mg•mL-1。唇香草挥发油对金黄色葡萄球菌有较好抑
制作用，其 MIC 分别是为 61 mg•mL-1, MBC 是 123
mg•mL-1。唇香草水提取物对金黄色葡萄球菌有较好
抑 制 作 用， 其 MIC 是 0.125 mg•mL-1, MBC 是 0.625
mg•mL-1。
2.2 GC-MS 分析结果
按上述色谱 - 质谱条件对挥发油进行分析 , 获得
的总离子流图如图 1，图 2 所示。各种成分的保留时
间 ( 按先后顺序 )、峰面积、相对百分含量、名称及
相对保留指数见表 2。

唇香草挥发油得率为 1.2% (mL/100 g)，从挥发
油中鉴定了 37 种化合物 , 占挥发油总量的 98.66%。
在鉴定出的化合物中 , 含量在 1% 以上的成分有胡薄
荷酮 (59.32%) 、顺 -5- 甲基 -2-(1- 甲基乙基 ) 环己酮
(10.65% ) 、辛烷 (6.04%)、反 -5- 甲基 -2-(1- 甲基乙
基 ) 环己酮 (4.32%)、对二甲苯 (2.19%)、反式 -1,2-
二甲基环己烷 (1.88%) 和右旋柠檬烯 (1.02%), 萜烯类
占 75.31%。
2.3 讨论
Kovats 保留指数是化学物质在相应类型分离柱
中对应正烷烃的一种比较稳定的性质。用于分离的色
谱柱性质相同 , 气相色谱条件相近 , 同种组分在不同
仪器上所计算出来的 RRI 值通常为常数。因此 , 考虑
分离峰的质谱匹配度和 RRI 匹配度，可大大提高鉴
定结果的准确性。在芳香精油复杂组分鉴定中 , 该方
法在国际上得到普遍认可并大量使用 [10、11]。
图1  唇香草挥发油总离子流图
Fig. 1 Total ion current chromatogram of volatile oil from Ziziphora
clinopodioides Lam.
图2  唇香草挥发油加C6～C20正构烷烃系列总离子流图
Fig.2 Total ion current chromatogram of volatile oil from Ziziphora
clinopodioides Lam.and C6～C20 alkane
表2  唇香草挥发油类化学成分GC-MS的分析结果
Tab. 2 GC/MS analysis results of the constituents of volatile oil in Ziziphora
clinopodioides Lam.
峰 保留时间 峰面积 峰面积 化合物名称 相对保
号 Time/min 百分比% 留指数
1 4.526 633171 0.85 Cyclohxane,1.1-dimethyl 789
2 4.578 407805 0.55 Cyclohxane,1-ethyl-2-methyl 792
3 4.699 4496984 6.04 Octane 800
4 4.762 1399179 1.88 Cyclohxane,1.2-dimethyl-trans 802
5 4.894 633792 0.85 Cyclohxane,1.3-dimethyl-trans 808
6 5.087 102113 0.14 Heptane, 2,2-dimethyl 815
7 5.157 120188 0.16 Heptane,2.4-dimethyl 818
8 5.330 230076 0.31 Heptane,2.6-dimethyl 825
9 5.454 389514 0.52 Cyclohxane,1.2-dimethyl-,cis 830
10 5.531 914754 1.23 Cyclohxane,ethyl 833
11 5.624 472437 0.63 Cyclohxane,1.1.3-trimethyl 837
12 5.727 113038 0.15 Cyclohexane, 1,2,4-trimethyl- 841
13 5.999 333458 0.45 Octane,4-methyl 4- 852
14 6.142 434549 0.58 Ethylbenzene 858
15 6.226 134688 0.18 Octane, 2-methyl- 861
16 6.371 1628468 2.19 p-xylene 867
17 6.978 360007 0.48 O-xylene 892
18 7.169 578862 0.78 Nonane 900
19 8.171 116562 0.16 Bicyclo[3.1.1]hept-2-ene, 2,6,6-trimethyl- 933
20 9.520 240690 0.32 Β-pinene 978
21 9.830 200804 0.13 Β-myrcene 988
22 11.113 760190 1.02 D-limonene 1029
23 15.148 3214769 4.32 Cyclohxanone,5-methyl-2-(1-methylethyl)-cis 1158
24 15.435 7929915 10.65 Cyclohxanone,5-methyl-2-(1-methylethyl)-trans 1167
25 15.579 183486 0.12 Cyclohxanone,5-methyl-2-(1-methylethyl) 1172
- (1α,2β,5α)-
26 15.675 133138 0.18 Bicyclo[2,2,1]heptan-2-ol,1.7.7 1175
-trimethyl-,(1s-endo)
27 15.753 528530 0.71 p-menth-8en-2-one 1177
28 15.820 293954 0.39 P-menthan-3-ol 1179
29 16.769 149127 0.20 1-dodecen-3-yne 1210
30 16.933 331363 0.21 Propanal,2-methyl-3-phenyl 1218
31 17.050 569787 0.76 Cyclohxanone,2-isopropyl-2,5-dimethyl- 1220
32 17.688 44192483 59.32 Pulegone 1241
33 17.783 482705 0.30 2-(2-methyl-propyl)-cyclohexanone 1244
34 18.150 661402 0.89 2-cyclohexen-1-one,3 1256
-methyl-6-(1-methylethyl)
35 19.186 174737 0.11 Thymol 2- 1291
36 23.308 196549 0.12 1-penanone,1-(1H-imidazol-2-yl) 1437
37 24.171 583662 0.78 10-undecen-1-yl acetate 1469

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为提高实验数据的可信度 , 经美国 NIST05 and
NIST05s 质谱库的检索，同时采用分析确定各化学成
分 , 质谱库检索时将确定化合物的标准即符合度限定
在 85% 以上。因此 , 得到的化学成分分析结果更为
准确、可靠。实验结果显示 , 萜烯是唇香草挥发油的
主要成分。
国内近 10 年来 , 机会性真菌感染率呈现出明显
的上升趋势。真菌病对人类健康的危害成为科学工作
者关注的焦点。深部真菌感染病原菌主要为条件致病
性真菌 , 最常见的为白假丝酵母菌 [12]。本研究结果显
示 , 从唇香草全草中提取的挥发油对白假丝酵母菌具
有明显的抗菌活性 , 不仅能够抑制白假丝酵母菌的生
长繁殖 , 而且对白假丝酵母菌还具有显著的杀灭作用 ,
对金黄色葡萄球菌也具有较好抑制作用。
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美乐涂膜剂抗炎及皮肤刺激性试验研究
程 静，刘 燕，杨苏亚，狄索妮
（解放军第 451 医院，陕西 西安 710054）
摘要：目的 研究美乐涂膜剂的抗炎作用及单次给药对皮肤的刺激性。方法 采用铁器烫伤制作深Ⅱ
度皮肤烫伤模型，测定血清 IL-1，IL-6，TNF-α 含量 ；采用完整皮肤、破损皮肤单次给药，观察其刺激性。
结果 高、中剂量组能够明显降低大鼠烫伤 6 h、24 h 后血清中 IL-1，IL-6，TNF-α 含量，与赋形剂组比较
有显著性差异（P<0.05）；单次背部给药，对动物完整皮肤、破损皮肤未产生任何刺激反应。结论 美乐涂
膜剂具有抗炎作用及单次用药的安全性。
关键词：美乐涂膜剂 ；IL-1 ；IL-6 ；TNF-α ；刺激性
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2011)02-0047-03
Study on Anti-inflammatory and Skin Irritation of Meile Plaster
CHENG Jing, LIU Yan, YANG Su-ya, DI Suo-ni
（The 454th Hospital of PLA, Xi’an 710054, China)
Abstract: Objective To study the anti-inflammatory and skin irritation of Meile plaster. Methods Using
the ironware to make deep second degree burn model and determine the content of serum IL-1, IL-6, TNF alpha;
observing the irritation after single-dose administration. Results High, medium dose group can decrease the
content of serum IL-1, IL-6, TNF alpha after scalding 6 h , 24 h; compared with the blank control group there
was significant difference（P<0.05）；there was no irritation after single-dose administration to intact skin and
damaged skin. Conclusion Meile plaster was anti-inflammatory and safe for single-dose administration .
Key words: Meile plaster; IL-1；IL-6；TNF-α; irritation
收稿日期：2010-04-15