全 文 ：性差异(P ＜ 0. 01) ;治疗组大鼠治疗后海马中 c － jun
表达，较模型组均显著降低，差异有统计学意义(P ＜
0. 05)。从数值上看，阳性组治疗效果优于中药复方
组，但各治疗组之间相比差异无统计学意义(P ＞
0. 05)。西药、中药治疗后均可明显减少凋亡细胞数，
说明西药和中药皆可抑制神经元细胞凋亡，起到控制
癫痫发作的作用。中药的抗痫作用机制可能与降低脑
内 c － jun 表达水平有关。中药抗痫复方在治疗时具
有多环节、多靶位的优势，中药抗痫复方治疗组与西药
对照组之间相比无显著差异，说明其在同等疗程内疗
效与西药相当，而且与西药抗癫痫药相比，中药抗痫复
方具有毒副作用小，价格便宜的优势。
综上所述，以活血化痰开窍、熄风镇惊安神为立法
组成的中药抗痫复方对癫痫有明确的抗痫作用。能有
效地减少痫性发作次数，上调抑凋亡基因 c － jun 及其
蛋白表达，能够有效地保护海马神经细胞，从而起到防
治癫痫的效果。
参考文献:
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neuronal injury during development and long － term consequences
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菝葜提取物对肠易激综合征大鼠血浆 SP、
CGRP含量的影响
李铁男，王兵，刘影，马腾飞
(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:探讨菝葜提取物对肠易激综合征(IBS)大鼠血浆 P 物质(SP)、降钙素基因相关肽
(CGRP)含量的影响，探讨其作用机制。方法:采用乳鼠结肠 PTCA球囊刺激法造 IBS大鼠模型，分为模
型组、空白组、阳性药组、菝葜提取物高、中、低剂量组，给药 3 周后，应用放射免疫法分别检测 IBS 大鼠
血浆 SP、CGRP含量变化。结果:与空白组比较，模型组大鼠血浆 SP、CGRP 水平显著升高，差异有统计
学意义(P ＜ 0． 01) ;给药组大鼠血浆 SP、CGRP 水平降低，与模型组比较差异有统计学意义(P ＜ 0． 01，
P ＜ 0． 05)。结论:菝葜治疗 IBS的作用机制可能是通过降低血浆 SP、CGRP水平实现的。
关键词:菝葜提取物;肠易激综合征;SP;CGRP
中图分类号:R256． 34;R285． 5;R574 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2392(2011)04 － 0026 － 03
收稿日期:2011 － 03 － 20 修回日期:2011 － 06 － 10
基金项目:2008 年度教育部“春晖计划”合作科研项目(编号:Z2008 － 1
－ 15014)
作者简介:李铁男(1954 －) ，男，教授，硕士研究生导师，主要从事中医
内科疾病研究。
肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS) ，是
一种非器质性肠道功能紊乱性疾病，以腹痛或腹部不
适同时伴排便习惯及大便性状改变为主要症状。传统
医学认为 IBS 属于腹痛、泄泻、便秘范畴［1］。近年来，
中医药对 IBS 的临床治疗研究取得了很大的进展，在
改善症状上疗效显著，且副作用少。中药菝葜在民间
应用历史悠久，在临床上常用于治疗痢疾、腹泻、消化
不良等。但有关菝葜在治疗消化系统疾病的实验研究
及作用机理研究较少。本实验通过乳鼠结肠 PTCA 球
囊刺激法复制内脏高敏感的 IBS 大鼠模型，从血液生
化角度探讨菝葜提取物治疗 IBS的作用机理。
1 材料与方法
1． 1 实验材料
1． 1． 1 实验动物 新生 SD大鼠 48 只，雌性，体重5 ～
6g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。实验环
境:温度 20 ～ 22℃，相对湿度:30% ～35%。
1． 1． 2 实验药物及试剂 菝葜(北京同仁堂制药集
团哈尔滨药店，经黑龙江中医药大学佳木斯学院陈孝
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中 医 药 学 报
Acta Chinese Medicine and Pharmacology
2011 年第 39 卷第 4 期
Vol. 39，No. 4，2011
忠副教授鉴定) ;将菝葜加入 10 倍量的 70%乙醇中浸
泡 48h后超声提取、过滤、浓缩干燥得固形物，保存于
4℃冰箱。临用前，加蒸馏 水配制成 0． 5g /mL(低剂量
组)、1g /mL(中剂量组)、2g /mL(高剂量组) ，按生药量
计。阳性对照药:取西沙必利胶囊 2 粒，加蒸馏水配制
成 0． 5mg /mL的混悬液。
SP、CGRP放射免疫试剂盒，由南京建成生物工程
研究所提供。酸性正丁醇、正庚烷、OPT 溶液、半胱氨
酸:由 Sigma公司提供。
1． 1． 3 实验仪器 C － 911 － 1 －放射免疫记数器(中
国科技大学实业总公司) ;台式高速低温离心机(Gen-
tri － fuge5415，德国) ;海尔牌 BCD － 286H 低温冰箱
(－ 70℃) ;分析天平(TG328 型，湘仪天平仪器厂) ;自
制球囊导管;自制大鼠透明有机玻璃固定盒(20cm ×
6cm ×8cm)。
1． 2 实验方法
1． 2． 1 模型制备 出生 2 ～ 3d 的乳鼠与母鼠一同饲
养，发育至 25d后，将母鼠与幼鼠分离饲养。分离后的
大鼠每 10 只一笼，给予足够的食物、水。
同时，在出生后第 8 天，取雌性乳鼠，乙醚麻醉后，
用温生理盐水擦拭肛周后，以涂有液体石蜡的 PTCA
球囊自肛门插入，PTCA 球囊通过三通管分别与压力
表和注射器相连，然后向球囊内注入空气，使压力缓慢
上升到 60mmHg(用压力表控制压力) ，每天 2 次，每次
持续 1min，两次之间间隔 30min，共持续 14d，每次刺
激结束后，以酒精和生理盐水擦拭 PTCA球囊。
1． 2． 2 分组及给药 将造模后大鼠随机分成模型组、
阳性药组、菝葜提取物高、中、低剂量组，每组 8 只，并
设空白组 8 只。灌胃给药，阳性药组灌胃给予西沙必
利水溶液 20mL /kg、菝葜高、中、低剂量组分别按
20mL /kg灌胃给药，空白组和模型组同步给予等体积
生理盐水。1 次 /d，于大鼠出生后第 7 周开始灌胃，给
药 3 周，至第 10 周开始指标检测。
1． 2． 3 肠道敏感性评估 于造模后第 4 周，取模型组
和对照组大鼠各 8 只，检测大鼠腹部回缩反射
(AWR)。参照文献［1］方法进行操作。
1． 2． 4 指标观察
1． 2． 4． 1 容量阈值测定 末次给药后 6h，进行球囊
结肠扩张，球囊末端距肛门 1cm，再用胶布把导管和大
鼠尾巴根部缠在一起。将大鼠置入透明有机玻璃固定
盒中，使大鼠不能转身，10min 后逐渐注入空气扩张肠
道，分别观察引起腹部抬起和背部拱起的容量阈值，进
行行为评估。
1． 2． 4． 2 排便粒数测定 将动物置于代谢笼，测定各
组大鼠 2h 内排便粒数，观察球囊刺激对大鼠排便的
影响。
1． 2． 4． 3 血浆 SP、CGRP 测定 动物结肠扩张结束
后，10%水合氯醛麻醉，腹主动脉取血，放免法测定血
浆 SP、CGRP含量，按放免试剂盒说明书操作进行。
1． 2． 5 统计学处理 计量资料用(珋x ± s)表示。用
SPSS13． 0 统计软件进行统计学处理，组间比较用 t
检验。
2 结果
2． 1 容量阈值
模型组大鼠腹部隆起和背部拱起的扩张容量阈值
明显降低，且与空白组相比具有显著性差异(P ＜
0. 01)。结果见表 1。
表 1 大鼠腹部隆起和背部拱起的扩张容量
阈值组间比较(珋x ± s，n = 8)
组别 数量(n) 腹部隆起 /mL 背部拱起 /mL
模型组 8 0． 724 ± 0． 07△△ 1． 477 ± 0． 156△△
空白组 8 0． 911 ± 0． 057 1． 985 ± 0． 182
注:与空白组比较，△△P ＜ 0． 01。
2． 2 排便粒数
造模 3d、7d、10d、14d 时，模型组动物排便明显增
加，与空白组相比具有显著性差异(P ＜ 0. 001)。结果
见表 2。
表 2 球囊刺激对大鼠排便的影响(珋x ± s，n = 8)
组别 数量(n)
排便数(粒数 /2h)
3d 7d 10d 14d
模型组 8 7． 43 ±1． 99△△ 8． 43 ±2． 64△△ 5． 71 ±2． 14△△ 5． 43 ±1． 81△△
空白组 8 2． 86 ± 1． 68 2． 57 ± 1． 13 2． 29 ± 1． 11 2． 43 ± 1． 51
注:与空白组比较，△△P ＜ 0． 01。
2． 3 血浆 SP、CGRP含量测定
造模后，模型组与空白组相比，血浆 SP 水平显著
升高，差异有显著性意义(P ＜ 0． 01) ;阳性药组，高、
中、低剂量组血浆 SP 含量下降，其中，阳性药组、高剂
量组与模型组比较，有显著性差异(P ＜ 0． 05) ，高、中
剂量组与阳性药组比较，无显著性差异(P ＞ 0． 05)。
模型组与空白组相比，血浆 CGRP水平显著升高，
差异显著(P ＜ 0． 01) ;阳性药组，高、中、低剂量组血浆
CGRP含量下降，其中，阳性药组，高、中剂量组与模型
组相比，有显著差异(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05) ;高、中、低剂
量与阳性药组比较，无显著性差异(P ＞ 0． 05)。结果
见表 3。
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Vol. 39，No. 4，2011
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Acta Chinese Medicine and Pharmacology
表 3 大鼠血浆 SP、CGRP含量
组间比较(珋x ± s，n = 8)
组别 数量(n) SP含量(pg /mL) CGRP含量(pg /mL)
高剂量组 8 61． 95 ± 5． 45▲ 158． 92 ± 6． 83▲▲
中剂量组 8 63． 54 ± 5． 66 160． 94 ± 7． 42▲
低剂量组 8 64． 34 ± 6． 78 164． 14 ± 6． 52
阳性药组 8 59． 97． 3 ± 6． 39▲ 162． 95 ± 5． 49▲▲
模型组 8 69． 47 ± 6． 93 147． 3 ± 5． 65
空白组 8 48． 06 ± 4． 99▲▲ 171． 29 ± 8． 85▲▲
注:与模型组比较，▲P ＜ 0． 05，▲▲P ＜ 0． 01。
3 讨论
肠易激综合征是临床上的常见疾病，病因至今尚
不明确［2］。胃肠动力异常、内脏感觉致敏以及神经精
神的改变是 IBS 的主要临床特征。本研究采用结肠
PTCA球囊刺激法制造 IBS 模型，以排便和 AWR 压力
阈值为指标观察动物胃肠道功能的改变，排便粒数反
映了动物胃肠道运动功能的状态，AWR压力阈值则反
映了动物内脏感觉的状态。排便实验结果表明，造模
3 天后，模型组排便粒数与空白组相比明显增加，第 7
天达到高峰，显示其胃肠道运动功能的亢进。造模后
4 周，模型组动物腹部隆起和背部拱起的扩张容量阈
值明显降低，与对照组相比差异显著，表明刺激导致了
动物内脏感觉的增敏。上述结果显示球囊刺激所致内
脏感觉增敏和胃肠运动亢进与 IBS 患者出现的腹痛、
腹部不适感觉及排便异常等临床症状相吻合。
现代医学上 IBS 的发病机制涉及胃肠道动力异
常、内脏高敏感性、炎症、脑肠轴和精神异常等多个方
面，他们之间并不是孤立存在的，而是相互影响。密切
关联的。胃肠动力和内脏感觉相互影响，又都受肠神
经和中枢神经系统的支配。而将肠神经和中枢神经联
系在一起，调控胃肠运动、分泌和感觉功能的神经 －内
分泌网络就是脑肠轴。而脑肠肽是调节胃肠道运动的
重要物质，与 IBS 发病密切相关。它们包括 5 －羟色
胺(5 － HT)、胆囊收缩素(CCK)、P 物质(SP)、血管活
性肠肽(VIP)、胃动素(MTL)、生长抑素(SS)、神经肽
Y(NPY)、一氧化氮(NO)、降钙素基因相关肽(CGRP)
等。这些介质在调节内脏感觉和运动中起重要作用。
SP是由十一个氨基酸组成的多肽，主要分布于神
经系统和胃肠道内，是脑肠肽之一。肠道的 SP大部分
存在于 SP能神经元中，少部分由肠嗜铬细胞分泌。在
神经系统中 SP作为一种神经传递调节因子发挥作用:
SP在痛觉传导中具有重要作用［3 － 5］，对消化道平滑肌
有强烈的刺激作用，可增加胃肠蠕动［6］。有人检测了
IBS患者回肠末端及结肠粘膜的 SP 含量，发现 SP 含
量与正常组有显著升高［7］。我们发现，IBS 大鼠血浆
中 SP水平均有显著升高，与国内外报道相一致。菝葜
高剂量组能显著降低模型大鼠血浆 SP含量，该药可能
通过降低模型大鼠血浆 SP含量，进而减弱背角神经元
兴奋性，提高内脏痛阈，消除肠道过敏。
CGRP是一种含有 37 个氨基酸残基的多肽，广泛
分布于中枢和外周神经系统，特别是感觉神经元胞体
和末梢以及胃肠道壁内神经丛，CGRP 与多种神经递
质或神经肽共存，CRRP 作为感觉神经传递介质在内
脏疼痛的调节中起重要作用;作为神经调节介质，
CGRP可通过轴反射调节局部血流、平滑肌收缩、免疫
反应、肥大细胞脱颗粒等改变时内脏感觉的传入信号。
本研究发现 IBS大鼠血浆 CRRP水平均显著高于空白
组，提示 CGRP增高与内脏高敏感性有关。
菝葜(Smilax china)是被子植物门百合科菝葜属
植物，通常以根茎入药，其功效为健脾益气，温肠止泄。
常用于消化不良、腹泻、痢疾等疾病的治疗。其根茎内
含有皂苷、黄酮及其苷、氨基酸类及其他类化合物，生
物活性比较明显，为菝葜的临床应用及开发研究提供
了理论依据。课题组前期试验中利用菝葜治疗便秘小
鼠，取得了满意的疗效，但大多只是涉及总提取制剂的
临床疗效观察，很少有深入研究菝葜的提取物及其作
用机理的研究。
本实验研究发现，菝葜提取物中剂量组能显著降
低 IBS 大鼠血浆 SP 水平，而高、中剂量组显著降低
IBS大鼠血浆 CGRP 水平，说明该药的治疗作用是通
过降低血浆 SP、CGRP实现的，作用机理可能是减弱背
角神经元兴奋性，从而提高内脏痛阈，降低肠道高敏感
性，减缓胃肠道蠕动，从而实现治疗作用的。
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