全 文 ：第 16卷　第 2期 华　夏　医　学 V ol. 16 No. 2
2003年 4月 ACTA　 MEDICINAE　 SIN ICA Apr. 2003
5种广西产蜘蛛抱蛋中偏诺甾体四糖皂甙含量的比较
黎　霜 1 ,王恒山 2 ,李光照 3 ,龚崇松 2 ,陈伟胜 2
( 1.桂林市药品检验所 ,广西 桂林　 541002; 2.广西师范大学化学化工系 ,广西 桂林　 541004;
3.广西植物研究所 ,广西 桂林　 541006)
摘要: 目的: 考察广西产 5种蜘蛛抱蛋中偏诺甾体四糖皂甙 (结构式为: ( 18S、 19S) -3β-pennogenin-3-O-α-L-
rhamnopy rano sy1( 1-4) -α-L-rhamnopy ranosy1( 1-4) [α-L-rham nopy rano sy1( 1-2) ]-β -D-g lucopy ranosy1)含量 ,为进一
步开发利用广西甾体药源植物奠定基础。方法: 采用 HPLC法测定 5种广西产蜘蛛抱蛋中偏诺甾体四糖皂甙的含量。
结果: 5种广西产蜘蛛抱蛋植物中偏诺甾体四糖皂甙的含量在 1. 014% ～ 3. 804%之间。 结论:该方法简单、快速 ,结果
准确、可靠。
关键词: 蜘蛛抱蛋 ;偏诺甾体四糖皂甙 ;含量
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1008-2409( 2003) 02-0166-03
The Quantitative Determination of Steroidal Pennogenin Four Glycosides among Five Species Aspidistra of Guangxi /
LI Shuang,WANG Heng-shang, LI Guang-zhong, et al. / /The Insitute of Drug Control of Guilin ,Guilin 541002,China
Abstract: Objectiv e: To observ e the content o f ster oidal pennogenin four g ly co sides ( its st ructure is ( 18S、 19S) -3-β-
pennogenin-3-O-α-L-rhamnopy ranosy1( 1-4) -α-L-rhamnopy ranosy1( 1-4) [α-L-rhamnopy rano sy1( 1-2) ]-β-D-g lucopy r-
anosy1) in fiv e species Aspidistra of Guangx i, and establish the basis o f exploita tion o f the steroida l pha rmaceutical
plants in Guangxi. M ethods: A ana ly sis method by HPLC was used. Comparison w as done with the index o f stero idal
pennogenin four glyco sides. Results: By the HPLC method, th e cont ents of ster oidal pennogenin four g ly cosides o f the
fiv e species Aspidist ra plants in Guangxi w er e determined, which ranged from 1. 014% to 3. 804% . Conclusion: The
method is quick and simple , and the r esult is accura te.
Key words: aspidistra; steroida l pennogenin four g ly co sides; quantita tiv e dete rmination
　　蜘蛛抱蛋亦称蛇退、山蜈蚣、一帆青 ,是百合科铃兰族中
最大的一个属 ,主要分布于我国、日本等地。其根茎入药 ,具有
止血、镇痛和消炎等功效 ,民间广泛用于治疗跌打损伤、风湿
痹痛、肺热咳嗽等 [1]。 该属植物富含多种甾体化合物 ,许多甾
体化合物都具有广泛的生理活性。自 1982年日本学者对其做
了研究 [2～ 4] ,分离得到甾体皂甙化合物以后在国内对本种植物
也多有研究 [5～ 9]。 笔者对分布在广西的蜘蛛抱蛋属植物:线叶
蜘蛛抱蛋 ( A. linearifolia )、大花蜘蛛抱蛋 ( A. tonkinensis)、罗
甸蜘蛛抱蛋 ( A. luodianensis)、广东蜘蛛抱蛋 ( A. Luridaker
Gawler )、广西蜘蛛抱蛋 ( A. ela tio r Blume )等进行研究。 采用
HPLC法 ,以偏诺甾体四糖皂甙对照品为外标测定 5种蜘蛛
抱蛋植物的偏诺甾体四糖皂甙的含量 ,并作了对比研究。 5种
蜘蛛抱蛋植物中偏诺甾体四糖皂甙的含量在 1. 014% ～
3. 804%之间 ,其中罗甸蜘蛛抱蛋 ( A. luodianensis)中的偏诺甾
体四糖皂甙含量最高 ,为 3. 804%。
1　仪器与试剂
1. 1　仪器
LC-10ATV P高效液相色谱仪 (日本岛津 )及色谱工作站
(日本岛津 ) ;亚沸水器 (江苏宜兴勤华玻璃仪器厂 ) ; BS110S
电子天平 (北京 Sar to rius) ; CG16-W高速微量离心机 (北京医
用离心机厂 ); 10μl Micr oliter# 701型进样器 (美国 )。
1. 2　材料与试剂
蜘蛛抱蛋植物样品 2001年 7月采于广西不同地区 ,原植
物由广西植物研究所研究员李光照鉴定 ;提取用试剂为 95%
乙醇 ;偏诺甾体四糖皂甙对照品 (由桂林市药品检验所提供 ,
经 HPLC检识纯度高于 99% );水 (亚沸水 );甲醇为国产色谱
纯 ,其他试剂为分析纯。
·166·
作者简介: 黎霜 ( 1968- ) ,女 , 1990年毕业于中南民族大学 ,研究生 ,现任广西桂林市药品检验所化学室主任 ,主管药师 ,主要从事药品检
验监督工作及天然产物的研究与开发。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件
色谱柱: shim-pack Vp-ODS柱 ( 150mm× 4. 6mm, 5μm );
流动相: 75%甲醇 ;流速: 0. 5ml /min;柱温: 室温 ;检测波长:
210nm。
2. 2　标准曲线
准确称量偏诺甾体四糖皂甙对照品 50mg用流动相 ( 75%
甲醇 )定容于 50ml容量瓶中 ,超声振荡使之充分溶解 ,分别吸
取 1. 0ml, 3. 0ml, 5. 0ml, 7. 0ml, 9. 0ml于 10ml容量瓶中 ,加
75%甲醇至刻度。按上述色谱条件 ,采用外标法分别进样 5μl,
以浓度对峰高作图 ,得标准工作曲线 ,计算回归方程为: Y=
0. 000193759X+ 0. 00349596 ( Y 为浓度 , X 为峰高 ) , r =
0. 9985,线性范围为 0. 05～ 0. 45μg。
2. 3　样品供试液的制备
分别取已干燥的上述 5种蜘蛛抱蛋植物样品适量 ,粉碎 ,
过 20目筛 ,准确称取各样品粗粉 10g ,装入小滤纸筒内 ,放入
索氏提取器中 ,以 95%乙醇提取 4h,减压回收乙醇 ,膏溶于
水 ,以乙醚萃取脱酯 ,水层再用正丁醇萃取 ,减压回收正丁醇
将提取物转入 100ml容量瓶中 ,加入适量流动相 ( 75%甲醇 ) ,
超声振荡使之充分溶解 ,冷却后定容 ,吸取 5ml高速离心
5min。取上层清液 1ml于 10ml容量瓶中 ,加 75%甲醇至标线 ,
作为待测样液 ,进样前用 0. 45μm滤膜过滤。
2. 4　样品的测定
取前面配好的样品供试液 ,按上述色谱条件分别进样
5μl。 各样品及对照品的色谱图见图 1,测定结果见表 1。
图 1　对照品 ( a )及各样品 ( b～ f) HPLC色谱图
·167·
2期　　　　　　　黎　霜等: 5种广西产蜘蛛抱蛋中偏诺甾体四糖皂甙含量的比较　　　　　　　　 16卷
表 1　不同品种蜘蛛抱蛋植物总甙中的
偏诺甾体四糖皂甙的含量
编号 名　　称 含量 (% )
A-1 线叶蜘蛛抱蛋 1. 880
A-2 大花蜘蛛抱蛋 1. 014
A-3 罗甸蜘蛛抱蛋 3. 804
A-4 广东蜘蛛抱蛋 1. 224
A-5 广西蜘蛛抱蛋 1. 595
2. 5　精密度测试
将偏诺甾体四糖皂甙对照品溶液 ( C= 0. 5mg /ml)按同样
色谱条件进行分析 ,连续进样 5次 , 5μl /次 ,测定其峰高和峰面
积 , RSD= 0. 22% ,精密度良好。
3　讨论
3. 1　本研究所用偏诺甾体四糖皂甙对照品是从广西蜘蛛抱
蛋植物中提取分离得到的自制品 ,经 13CNM R、 1 HNM R与
FAB-M S分析鉴定结构式为 ( 18S、 19S) -3-β -pennogenin-3-O-
α-L-rham nopy rano sy1( 1-4) -α-L-rhamnopyr anosy1( 1-4) [α-L-
rhamnopyrano sy1 ( 1-2) ]-β -D-g lucopy rano sy即偏诺甾体四糖
皂甙 ,经 HPLC检识纯度高于 99%。 在 UV下测得其 λmax为
210nm,故选择 210nm为检测波长。
3. 2　本研究采用 HPLC法测定了广西桂林产的不同品种的
蜘蛛抱蛋植物中偏诺甾体四糖皂甙成分的含量。 结果显示: 5
种不同蜘蛛抱蛋植物中偏诺甾体四糖皂甙成分的含量在
1. 014% 至 3. 804%之间 ,其中罗甸蜘蛛抱蛋 ( A. luodianensis)
的偏诺甾体四糖皂甙成分含量最高 ,为 3. 804%。
3. 3　由图谱中的保留时间可知 ,在这 5种蜘蛛抱蛋存在着许
多相似的化学成分。 为进一步研究和开发利用该属植物提供
了科学依据。
3. 4　本研究建立了测定不同品种蜘蛛抱蛋中偏诺甾体四糖
皂甙含量的方法。 本法简便快速、准确可靠 ,并可以此为依据
判断该属植物品质的优劣。
[参考文献 ]
[ 1 ]　国家中医药管理局《中华本草》编委会 .中华本草 [M ].上海: 上
海科学技术出版社 , 1999. 150.
[2 ]　 Hiraj Y, Konishi T, Sanada S. Studies on the cons ti tuen ts of
aspidis t ra elat ior blum e. I: on th e s teroids of th e underground
part [ J ]. Chem Ph arm Bull , 1982, 30( 10): 3476- 3484.
[3 ]　 Konishi T, kiyosaw a S, Shoji J. Studies on the cons tituents of
aspidis t ra el tior blum e. II: on th e s teroid al glycosides of th e
leaves( 1) [ J] . Ch em Pharm Bull, 1984, 32( 4): 1451- 1460.
[4 ]　 Koketsu Mamoru, Kim muji , Yamamo to, et al. An tifungal
activi ty against food-borne fungi of aspiclis t ra elatior blum e[ J] .
Agric. Food. Ch em, 1996, 44( 1): 301- 303.
[5 ]　陈梦菁 . 铃兰族的甾体皂甙 [ J ].植物学通报 , 1995, 7( 1 ): 19-
22.
[6 ]　陈梦菁 .四川蜘蛛抱蛋的甾体皂甙 [ J] .天然产物研究与开发 ,
1995, 7( 1): 19- 22.
[7 ]　陈昌祥 ,周俊 .蜘蛛抱蛋根茎中的甾体皂甙 [ J] .云南植物研究 ,
1994, 16( 4): 397- 400.
[8 ]　陈梦菁 .乐山蜘蛛抱蛋的甾体皂甙 [ J] .植物学报 , 1994, 36( 7 ):
568- 571.
[9 ]　杨庆雄 ,杨崇仁 .云南永善产蜘蛛抱蛋的甾体成分 [ J ].云南植物
研究 , 2000, 22( 1): 109- 115.
(收稿日期: 2003- 01- 15)
[责任编辑　高莉丽　邓德灵 ]
作者撰写结构式摘要须知
　　为了适应国际学术交流及文献检索的需要 ,凡在本刊发表的论著文章均应按结构式摘要格式撰写中英文摘要。中文摘
要限 200字内 ,英文摘要限 150词内。结构式摘要分目的、方法、结果和结论 4部分 ,可以连续排列 ,但需标明目的、方法、结
果、结论字样。 现将各部分的撰写要求分述如下。
目的 ( Objectiv e)　简要说明研究的目的及提出问题的缘由 ,表明研究的范围和重要性。
方法 ( Methods)　简要说明研究课题的基本设计 ,使用了什么材料和方法 ,如何分组对照 ,研究范围及精确程度 ,数据
是如何取得的 ,经何种统计学方法处理。
结果 ( Results)　简要列出研究的主要结果和数据 ,有什么新发现 ,说明其价值及局限。 叙述要具体、准确 ,并给出结果
的置信值、统计学显著性检验的确切值。
结论 ( Conclusion)　简要说明经验证、论证取得的正确观点及其理论价值或应用价值 ,是否可推荐或推广等。
(本刊杂志社 )
·168·
2期　　　　　　　　　　　　　　　　　　华　夏　医　学　　　　　　　　　　　　　　　　　 16卷