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虎耳草不同表现型对比研究



全 文 :中国农业信息 / 2016.06 113
中国农业信息 科研·生产实验报告
虎耳草不同表现型对比研究
袁 双,陈道军,刘开毅,蒋 坤,安斯扬,潘玉杰
(贵州百灵企业集团制药股份有限公司,安顺 561000)
摘 要:文章比较不同表现型的虎耳草产量及岩白菜素含量的差异,并结合虎耳草现行质量标准,用高
效液相色谱法,对不同表现型的虎耳草样品,进行岩白菜素含量分析。通过试验研究,对比了 6 种不同表现
型虎耳草的产量和品质,比较出其中的优势品种,为虎耳草种质资源的优选、优育,提供基础依据。
关键词:虎耳草 表现型 产量 品质
虎耳草是虎耳草科,虎耳草属的多年生常绿草本植
物,用于风热咳嗽,急性中耳炎,大泡性鼓膜炎,风疹瘙
痒等,而孕妇慎用 [1]。
1 田间材料与方法
1.1 试验用具
温室大棚、苗盘、固体基质(腐熟药渣泥炭土︰珍珠
岩 =2~4∶2~3∶1~2 混合)、不同表现型的虎耳草种苗、
尺子、磅秤、托盘天平等。
1.2 方法与操作
1.2.1 种植模式与设施介绍
温室大棚外部采用棚膜,两侧通过电动卷膜机,使大
棚通风透气。棚顶采用电控遮阳网和喷淋降温,棚内采用
4 层的栽培架,每层铺设栽培苗床,试验仅在第 1 层和第
2 层摆放苗盘定植,苗盘规格为 54 cm×27 cm×6.5 cm。
1.2.2 移栽定植
按照试验区组设计方案,在对应的小区,种植相应
品 种 的 虎 耳 草 种 苗, 穴 栽 定 植, 每 个 苗 盘 按 照 株 行 距
15 cm×20 cm 定植 6 穴,每穴 1 株。统一田间管理。
1.2.3 采收与测产
1 年 2 收,移栽定植 6 个月进行采收。徒手将苗连根
拔起,抖去基质,立即称鲜重,填写记录表,结果见表 1。
(2)采收时,虎耳草生长期均为 6 个月。
2 实验室检测方法
2.1 检测 [1,2]
虎耳草岩白菜素含量测定:对照高效液相色谱法(《中
国药典》2010 年一部附录ⅥD)测定。色谱条件与系统
适用性实验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相
为甲醇 - 水(25∶75);检测波长为 275 nm。理论板数按
图 1 不同表现型虎耳草岩白菜素含量检测液相峰值图
114 中国农业信息 / 2016.06
CHINA AGRICULTURAL INFORMATION科研·生产 实验报告
岩白菜素峰计算,应不低于 4 000。
测 定 法: 分 别 吸 取 对 照 品 溶 液 与 供 试 品 溶 液 各
5μL,注入液相色谱仪,测定,即得。该品按干燥品计算,
含岩白菜素(C14H16O9)不得少于 0.080%。
2.2 实验室测定结果(图 1、表 2)
从表 2 可见,不同表现型虎耳草的岩白菜素含量差异
较大,含量最高的虎耳草 F(0.472%)比标准要求高达
5 倍。
3 试验结果与分析
根据试验的测产和检测结果,制订不同表现型虎耳草
产量及品质对比图。
试验检测结果结合图 2 分析,不同表现型虎耳草产量
从高到低的排列顺序为虎耳草 D >虎耳草 B >虎耳草 F
>虎耳草 C >虎耳草 E >虎耳草 A,其岩白菜素含量从
高到低的排列顺序为虎耳草 F >虎耳草 B >虎耳草 D >
虎耳草 C >虎耳草 A >虎耳草 E。因此,虎耳草 B、F 符
合产量高、品质优的选择条件。虎耳草 D 进一步研究。
4 讨论
在试验过程中发现,虎耳草 F 的表现型稳定性不好,
在其生长周期内,有部分植株退化成近似虎耳草 D 或虎
耳草 E 的表型,特别是新萌发的小植株,未见雾状物或
仅有少部分雾状物平铺于叶面。其他类型的虎耳草,在试
验过程中表现稳定。因此,虎耳草 F 还应进行下一步稳定
性的试验研究,才能判定是否作为下一步优品扩繁选择。
试验得出,综合考虑产量和品质,虎耳草 B 最优,
可作为中药材虎耳草优品筛选的首选。试验为虎耳草种质
资源的优选、优育,提供基础依据。
参考文献
[1] 贵州省中药材、民族药材质量标准﹒贵阳:贵州科技出版社,
2003,235
[2] 中国药典(一部)﹒北京:中国医药科技出版社,2010,(36):52
表 1 不同表现型虎耳草试验统计分析表(μ±s,n=3,kg/3 m2,30 m2)
处理 鲜重(kg) 折合单产量(kg/667 m2)
虎耳草 A 4.47±0.31 d(C) 994
虎耳草 B 5.40±0.20 ab(AB) 1 201
虎耳草 C 5.03±0.21 bc(ABC) 1 118
虎耳草 D 5.60±0.20 a(A) 1 245
虎耳草 E 4.80±0.26 cd(BC) 1 067
虎耳草 F 5.27±0.15 ab(AB) 1 172
注:(1)表中有不同小写字母表示,差异显著(p=0.05);不同大写字母表示,差异极显著(p=0.01)。
表 2 不同表现型虎耳草岩白菜素含量检测结果
名称 出峰时间 峰面积 浓度(c)μg/ml 含量(%) 药材水分(%) 称样量(g)
岩白菜素对照品 6.166 777.9 109.4 — — —
虎耳草 A 6.145 139.9 19.67 0.209 6.09 0.500 4
虎耳草 B 6.108 266.3 37.45 0.403 7.02 0.500 3
虎耳草 C 6.133 177.1 24.91 0.262 4.83 0.500 2
虎耳草 D 6.137 199.0 27.99 0.291 3.86 0.500 2
虎耳草 E 6.129 115.8 16.29 0.172 5.53 0.500 9
虎耳草 F 6.136 289.4 40.70 0.427 4.85 0.500 3
(上接第 112 页)
4.4 猪蓝耳病病毒 RT-PCR 比对结果
11 个市级实验室检测结果中,3 个市级实验室结果全
部准确,4 个市级实验室结果未准确检测出弱阳性,还有
4 个市级实验室未参加病原学的检测比对。需要进一步提
升该项目的检测能力水平。
5 讨论
从比对结果总体来看,部分实验室的检测值与参考
值存在较大偏差。在这次 46 个实验室比对中,4 个检测
项目全部正确的有 32 个实验室,合格率仅占 69.5%。部
分实验室在 H7N9 亚型流感血凝抑制试验过程存在较大偏
差,布病试管凝集抗体检测比对结果有 6 个实验室结果均
也出现偏差。实验室报告填写不规范。从各市县实验室提
交的检测结果报告来看,仍有部分实验室报告填写不规
范,如受检单位应填为山西省动物疫病预防中心,抽送样
者应填为领样人,检测报告的编制人、审核人和批准人为
手写版,报告封面的红章应盖在单位名称处,正本和副本
的骑缝章应盖在正副本的左边,检测编号备注里应写某抗
体的判定标准、检测结果不能手写、修改、涂抹,没有做
的实验名称不应出现在报告中。
参考文献
[1] 关于开展 2015 年兽医系统实验室检测力比对工作的通知 . 农业部
办公厅,2015,(02):28
[2] 关于开展 2015 年山西省兽医系统实验室检测能力比对工作的通知
.山西省畜牧兽医局,2015,(03):10