全 文 ：自然科学版 西 北 师 范 学 院 学 报 19 8 4年第 4 期
薄层层析一分光光度法联用测定鬼灯架
甲 素 和 乙 素 的 含 量 ’
郑尚珍 沈序维 付正生 蔡恩护
鬼灯架 ( R o d g e r s i a A e s e u l i f o l i a B a t a t ) 系虎耳草科鬼灯整属植物 , 它是民间较常用 的
清热解毒 、 止血 、 止 泻中草药 , 用于湿热腹泻 、 痢疾 、 便血 、 血崩 、 吐 血 、 外 伤 出血 、 疮
疖 , 烫火伤等的治疗 。 所含有效成分中的鬼灯整甲素及其同系物鬼灯整乙素对哮喘 , 慢性支
气管炎有显著的疗效 , 它们酸性水解后的提取物 , 对金黄色葡萄球菌 , 绿脓杆 菌 、 大 肠 杆
菌 、 弗氏痢疾杆菌等有抑制作用 ; 并对标准株腺病毒 10 个型 , 单纯泡疹等 8 9株病毒有广谱性的
抗毒作用 。 甲素的含量测定 , 我国药典用紫外分光光度法 ` , 文献上也曾报 导 过 磷 钨 酸
一磷锢酸试剂在碱性有机溶剂中的比色测定法 “ 及重氮对氨基苯磺酸比色法 “ 等 。 前者对
样品分析值偏高 ; 第二种方法操作繁杂 , 费时间 , 条件不容易控制 ; 而第三种方法 灵 敏 度
差 , 显色不稳定 。 此外 , 还有过直接与重氮对硝基苯胺试液偶合的比色测定法 J 的 报 ’导 。
由于鬼灯巢中除含有上述两种成分外 , 尚含有黄酮贰 , 熊果贰及糖配 3 、 4 、 5 一三经基甲
酸等带掀基和轻基的酚性物质 , 故仅用一般涎定经基及欲基官能团的方法 , 很难准确测定鬼
灯巢中甲素和乙素的含量 。 我们采用硅胶 G 薄层层析一分光光度计联用的方法 , 获得较满意
的结果 , 本法准确 、 灵敏 、 简便 、 重视性好 。
实 验 部 分
一 、 仪器与试剂
常规层析缸 、 2 5 4 n m紫外分析仪 、 10 x 15 C m 硅胶 G 板 (自制 ) , 7 51 型分光光度计 。
丁醇 、 氯仿 、 甲酸 , 对一硝基苯胺 、 亚硝酸钠 、 盐酸 , 5 %氢氧化钠溶液 , 重氮对硝 基
苯胺试液 。 取对硝基苯胺 0 . 49 , 加 2 %盐酸溶液 20 m l , 抗拌话解后加水至 10 m l , 置 棕 色
瓶中备用 。 临用时取上述配制的试 液 s m l缓缓加入 10 %亚硝酸钠溶浓 0 . 25 m l (在冰浴 下 进
行 , 温度控制在 10 OC以下 ) 即得 。
二 、 鬼灯整甲素和乙素标准品的制备
用 自制的硅胶 G 板 ( 2 0 9 硅胶 G , 80 m l水 ) , 以正丁醇 : 氯仿 : 甲酸 ( 8 : 1 : 1 ) 溶
剂系为展开剂 , 将反复重结晶后的甲素和乙素再析三次 (薄层上只显一个点 ) 作为标 准样 。
· 本文曾在全国高等学校第三届有机分析孝术会议止报告过 ,
此稿 10 5 4年 2 月2 0日收到

邢肠部
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0 0 4 2 8 x : 一 0 。 0 0 3 1 4 ( x 。一浓度 ,
2
、 鬼幻一繁粗品及浸膏中甲素和
乙素的含量测定
准确称取 32 。 s m g粗品 (或浸膏 )
溶于甲醇后置入 2 5m l容量瓶 中 , 以甲
醇稀释至刻度 。 用微量注射器准确吸
取 1 0 0川 , 于硅胶 G 薄板上点成 1 . sc m
的带 , 其余操作同标准曲线 。 按下式
计算鬼灯整甲素的含量 。
卜g /m l y Z一光密度 )
冻。个
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鬼灯桨甲素% 二 y 一 + 0
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图 2
鬼灯架乙素含量测定与甲素相同 。
鬼灯集甲素标准回归曲线
一 0 。 0 1 04 5 )
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( y = C
。
0 0 4 2 1 5 x
结 果 与 讨 论
一 、 溶剂系统的探讨
曾选用 ( 1 ) C H C I 。 : C H 3 C O C H 。 : C : I J 。 O H : H C 0 2壬I ( 1 3 : 3 : 3 : 1 ) , ( 2 ) C H c l : :
C H 3 C 0 2 C : H
。 : H C O Z H ( 5 : 凌 : 1 ) , ( 3 ) n C ` H 。 O H : C } I 3 C O : 11 ( 5 : 1 ) , ( 4 ) n C ` H 。 O H : C H C 13 :
H c o
:
H ( 8 : 1 : 1 ) 等四个溶剂系统对鬼灯巢甲素和乙素进行层析分离 , 作为薄层层析展
开剂 , 比较结果以 ( 4 ) 溶剂系统较佳 , 其余三者 色点不是园点 , 往往 有拖尾 、 鬼影产生 ,
如 ( 1 ) ; 有的色点R ;值太小 , 有色点延长或不集中等现象 , 不便于有效分离 , 如 ( 2 ) 和
( 3 )
。 在实验 中我们以 n C ` H 。 O H : C H C 13 : H C O : H ( 8 : 1 : 1 ) 溶剂系统作为薄层层析
的展开剂 , 层析结果 , 不但色点集中 , 均为园点 , 而且加大甲素和乙素彼此 间的距离 , 不致
产生双重色点 , 从而得到较好的分离效果 。
二 、 与经肘酸法及紫外分光光制法比较
实验发现 , 用经肪酸法比色时 , 显 色时间超 30 二 in 后就不稳定 , 且要消耗大量的甲醇 ;
用紫外光谱分析时 , 数据 含量偏高 。 比较结果见表 2 , 以本法较佳 。
表 2 紫外光语法和薄层— 分光光度法测定甲素含量的 比较
试 样 编 号 紫 外
1
2
3
4
光 谱 法 ( % ) 薄层— 分光光度法 ( % )
ō“ù八U1nU01卜口,自60
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三 、 薄板回收率
分别点一定量的甲 素标准品 、 浸膏样品及标准品加浸膏样品进行薄层层析 , 收集后进行
比色测定 , 测得结果及回收率见表 3 、