全 文 :第 33 卷第 6 期
2014 年 12 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Resources
Vol. 33 No. 6
Dec. 2014
收稿日期:2014 - 03 - 18
基金项目:国家”十二五”科技支撑计划(2012BAD36B01)
作者简介:姜洪芳(1974 -),女,博士研究生,副研究员,主要研究天然产物活性物质应用与开发。E-mail:jhf74@ 163. com
* 通讯作者:张卫明,男,研究员,从事植物活性物质的应用与开发。E-mail:botanyzh@ 163. com;施国新,男,教授,从事重金属
对植物生理生化影响研究。E-mail:gxsh@ njnu. edu. cn
doi:10. 3969 / j. issn. 1006 - 9690. 2014. 06. 003
凤仙花不同部位乙醇提取物多酚、黄酮含量测定
及抗氧化活性研究
姜洪芳1,2,石宝俊2,程 晶3,张凤倩3,朱 熹1,施国新1* ,张卫明1,2*
(1.南京师范大学,江苏 南京 210046;2.南京野生植物综合利用研究院,江苏 南京 210042;
3.南京农业大学,江苏 南京 210095)
摘 要 采用 55%的乙醇分别回流提取凤仙花的茎、叶、花中的活性物质,采用比色法测定各部位的多酚及总黄酮
含量,测定各提取物对 DPPH、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能力和还原力等抗氧化活性指标。结果表明,凤
仙花各部位的多酚(以没食子酸计)、总黄酮(以芦丁计)含量由高到低依次为凤仙花的叶、花、茎,多酚含量分别为
72. 81、66. 07、33. 07 mg /mL,总黄酮含量分别为 112. 13、108. 06、30. 62 mg /mL。各种提取物均有不同程度的抗氧化
活性,且抗氧化活性与提取物浓度存在量效关系,其中叶提取物清除 DPPH 自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基
活性以及还原力均最高,本研究为凤仙花作为低毒高效的天然抗氧化剂应用提供了依据。
关键词 凤仙花;提取物;多酚;总黄酮;抗氧化活性
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1006 - 9690(2014)06 - 0009 - 06
Determination of Total Phenolic and Flavonoids Content and
Antioxidant Activities of Ethanol Extract from Different
Aerial Parts of Impatiens balsamina L.(Balsaminaceae)
Jiang Hongfang1,2,Shi Baojun2,Cheng Jing3,Zhang Fengqian3,
Zhu Xi1,Shi Guoxin1* ,Zhang Weiming1,2*
(1. Nanjing Normal University,Nanjing 210046 ,China;2. Nanjing Institute for Comprehensive Utiliza-
tion of Wild Plants,Nanjing 210042,China;3. Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095 ,Chi-
na)
Abstract The aim of this study was to investigate the total phenolic content,total flavonoid contents,
and antioxidant activity of 55% ethanolic extract from flowers,stems and leaves of Impatiens balsamina
L. (Balsaminaceae). The results revealed that the total phenolic (72. 81 - 33. 07 mg Galic acid /g ex-
tract)and flavonoid (112. 13 - 30. 62 mg Rutin /g extract)contents of leaf extract were higher than those
of flower and stem extract. Leaf extracts exhibited the highest activity in removing DPPH free radicals,
hydroxyl free radicals and superoxide anion as well as the highest reducing capacity. From these results,
the leaf extract from I. balsamina L. might be a valuable bioactive resource,and would be applicable as
a natural antioxidant in food preservation.
Key words Impatiens balsamina;phenolic;flavonoid;antioxidant activity
凤仙花(Impatiens balsamina L.)为凤仙花科
(Balsaminaceae)凤仙花属(Impatiens)一年生草本植
物。凤仙花属共有植物 900 余种,全球均有分布,其
中凤仙花(Impatiens balsamina L.)作为观赏植物国
—9—
中 国 野 生 植 物 资 源 第 33 卷
内外均有种植,也是该属植物的常见品种,其花、茎、
叶、种子在民间有悠久的药用历史,被广泛用于各种
中药配方中,例如抗感染、关节炎、镇痛、抗炎、抗过
敏、抗肿瘤、肌肉拉伤及产后产生的疼痛[1 - 2]。已经
从凤仙花中分离鉴别了多种成分,如黄酮、多酚、花
青素、皂苷、醌类。一些化合物的镇痛和抗过敏活
性,特别是多酚及醌类已经进行了广泛研究[3 - 6],而
以植物化学为基础的凤仙花提取物的其他传统应用
相对研究较少。凤仙花的传统用法为,用水煮沸直
接饮用治疗细菌及真菌感染,或者是直接制成糊剂
用于治疗皮肤及指甲的局部感染。国内胡喜兰等利
用不同溶剂对凤仙花的红色花瓣进行活性成分提
取,采用试剂盒法对其进行抗氧化活性测定,结果
显示凤仙花的各种不同提取物均具有一定的抗氧化
能力[7]。现代研究表明,抗氧化剂具有延缓衰老,
降低多种疾病产生,增强人体免疫力等多种功能,研
究开发安全高效的天然抗氧化剂已经成为当今研究
热点之一,而凤仙花各部位又具有不同功效,因此对
于凤仙花不同部位的抗氧化活性具有进一步探索的
必要。
本文用 55%的乙醇分别回流提取凤仙花的茎、
叶、花中的活性物质,然后测定各部位的多酚及黄酮
含量,采用常用的几种体外抗氧化体系,测定各提取
物对 DPPH、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能
力和还原力等抗氧化活性指标。结果表明,凤仙花
各部位的多酚含量由高到低依次为凤仙花的叶、花、
茎。各种提取物均有不同程度的抗氧化活性,且抗
氧化活性与提取物浓度存在量效关系,其中叶提取
物清除 DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基
活性以及还原力均最高,本研究为凤仙花作为低毒
高效的天然抗氧化剂应用提供了依据。
1 实验部分
1. 1 仪器、试剂与材料
T6 紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有
限公司)、恒温水浴锅、分析天平(METTLER)、离心
沉淀机(上海手术器材厂)、旋转蒸发仪(上海亚荣
仪器厂)。
没食子酸、芦丁均购于中国生物制品检定研究
院,批号 110831 - 201303、100080 - 201202。
抗坏血酸(即 Vc),三氯化铝、福林酚(Folin -
Ciocalteu)试剂、无水碳酸钠、DPPH(1,1 -二苯基 -
2 -三硝基苯肼)、过氧化氢、邻苯三酚(焦性没食子
酸)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、盐酸、三氯乙酸、磷
酸二氢钠 、磷酸氢二钠、三氯化铁、水杨酸、硫酸亚
铁、铁氰化钾为市售分析纯。
凤仙花的花、茎、叶、均于 2013 年 7 月采自南京
市 郊 区,晾 干,经 鉴 定 其 基 原 为 Impatiens
balsamina L.。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 提取物的制备
分别称取 50 g凤仙花的花、茎、叶,研磨碾碎后
分别加入 55%乙醇 750 mL,回流提取 2 h,过滤,滤
渣加入 55%乙醇 600 mL 混匀,再次回流提取 2 h,
过滤,合并两次滤液,70 ℃减压蒸干,备用。
1. 2. 2 多酚、总黄酮含量测定[8 - 9]
1. 2. 2. 1 多酚标准曲线的绘制
精密称定 0. 1001 g没食子酸,用蒸馏水溶解定
容至 100 mL,得 1. 001 mg /mL 没食子酸标准溶液。
分别移取 0、0. 05、0. 10、0. 15、0. 20、0. 25、0. 30 mL
到 50 mL容量瓶中,加入 25 mL 蒸馏水,加入 2. 00
mL Folin - Ciocalteu试剂摇匀,静置 4 ~ 5 min,加入
10%Na2CO3 溶液 4. 00 mL,用蒸馏水定容至 50 mL,
置于 25 ℃的恒温水浴锅中显色 2 h,于最大吸收波
长 765 nm处测定各个标准溶液吸光度,以没食子酸
浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求
线性回归方程。
1. 2. 2. 2 总黄酮标准曲线的绘制
精密称定 0. 042 01 g 芦丁,用甲醇溶解定容至
10 mL,得 4. 201 mg /mL 芦丁标准溶液。分别移取
0. 05、0. 06、0. 07、0. 08、0. 09、0. 10 mL 到 10 mL 具
塞试管中,加入 1% AlCl3 溶液 5. 00 mL,混匀,室温
静置 30 min,于 415 nm 处测定吸光度值,以芦丁浓
度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求线
性回归方程。
1. 2. 2. 3 凤仙花不同部位多酚、总黄酮测定
准确称取凤仙花的花、茎、叶提取物各 0. 1000
g,溶于 100 mL 65%乙醇中,得 1. 000 mg /mL 样品
液,准确吸取 0. 10 mL 提取液按 1. 2. 2. 1、1. 2. 2. 2
进行显色反应,按照回归方程计算测定液中多酚、总
黄酮浓度,并计算出提取物中多酚、总黄酮的含量。
1. 2. 3 凤仙花各部位提取物抗氧化活性比较
准确称取凤仙花的花、茎、叶提取物和对照品
Vc各 0. 100 0 g,溶于 100 mL 65%乙醇中,得 1. 000
mg /mL母液,并分别稀释,配制成 0. 10、0. 25、0. 50、
0. 75、1. 00 mg /mL的提取物及对照品溶液,供抗氧
化活性测定用。
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第 6 期 姜洪芳,等:凤仙花不同部位乙醇提取物多酚、黄酮含量测定及抗氧化活性研究
清除率 =
A0 - A1
A0
× 100%
1. 2. 3. 1 对 DPPH自由基清除活性的测定[10]
(1)0. 5 mmol /L DPPH甲醇溶液
准确称取 DPPH固体粉末 0. 049 5 g,在烧杯中
用少量甲醇溶解,定容至 250 mL 容量瓶中,配制成
0. 5 mmol /L DPPH甲醇溶液。
(2)样品溶液的测定
分别移取不同浓度的样品及对照品溶液 2. 00
mL,加入 0. 5 mmol /L DPPH 甲醇溶液 2. 00 mL,混
匀 15 s后,放置 30 min,以 2 . 00 mL 不同浓度样品
或对照品溶液加入 2. 00 mL甲醇为参比,于 517 nm
测吸光度,记为 A1,每个试样作 3 次平行测定,取其
均值,同时移取 2. 00 mL 65%乙醇加入 2. 00 mL 0. 5
mmol /L DPPH甲醇溶液,混匀 15 s后,放置 30 min,
以 2. 00 mL 65%乙醇加入 2. 00 mL 甲醇为参比,于
517 nm测吸光度,记为 A0,并根据下述公式计算清
除率。
1. 2. 3. 2 对羟自由基清除活性的测定
采用改良的 Smirnoff水杨酸法[11],即利用 H2O2
与 Fe2 +反应产生羟自由基,即:H2O2 + Fe
2 +→·OH
+ H2O + Fe
3 +,在体系内加入水杨酸捕捉并产生有
色物质,该物质在 510 nm处有最大吸收。
(1)10 mmol /L硫酸亚铁溶液的配制
精密称取 0. 3475 g 硫酸亚铁,溶于 250 mL 蒸
馏水中,即得 10 mmol /L硫酸亚铁溶液。
(2)10 mmol /L水杨酸乙醇溶液的配制
精密称取 0. 417 5 g 水杨酸,溶于 250 mL 乙醇
中,即得 10 mmol /L水杨酸乙醇溶液。
(3)2. 5 mmol /L H2O2 溶液的配制
精密量取 0. 13 mL H2O2 溶液(体积分数为
30%),加蒸馏水稀释,并定容至 500 mL,即得 2. 5
mmol /L H2O2 溶液。
(4)样品溶液的测定
分别准确量取 10 mmol /L 硫酸亚铁溶液、10
mmol /L水杨酸乙醇溶液和不同浓度的样品溶液各
1. 00 mL,置于具塞试管中混匀,分别加入 2. 5
mmol /L H2O2 溶液 2. 00 mL,37 ℃水浴 30 min 后,
分别在 510 nm处测定吸光度值。每个试样作 3 次
平行测定,取其均值为 A1,另外参照上述操作分别
测定相应的吸光度值 A0 和 A2,按下式计算羟自由
基清除率:
清除率 =
A0 -(A1 - A2)
A0
× 100%
其中:A0 为反应体系中不含样品,但含邻苯三
酚的吸光度值;A1 为反应体系中既含样品,又含邻
苯三酚的吸光度值;A2 为反应体系中含有样品,但
不含邻苯三酚的吸光度值。
1. 2. 3. 3 对超氧阴离子自由基清除活性的测定
采用邻苯三酚自氧化法测定样品对超氧阴离子
自由基的清除能力[12]。
(1)0. 05 mol /L Tris - HCl缓冲液(pH =8. 2)的
配制
精密称取 1. 211 g 三羟甲基氨基甲烷(Tris),溶
于蒸馏水中定容至 100 mL;量取 50. 00 mL 上述溶
液与 0. 1 mol /L盐酸 22. 90 mL混匀后,加水稀释至
100 mL,所得缓冲液 pH值为 8. 2。
(2)盐酸溶液的配制
精密量取 0. 8 mL 的浓盐酸,加蒸馏水稀释至
100 mL,即得 0. 1 mol /L 盐酸溶液;精密量取 0. 85
mL浓盐酸,加水稀释至 1 000 mL,即得 10 mmol /L
盐酸溶液。
(3)25 mmol /L邻苯三酚溶液的配制
精密称取 0. 315 0 g邻苯三酚,用 10 mmol /L盐
酸溶解,定容至 100 mL,即得 25 mmol /L 邻苯三酚
溶液。
(4)样品溶液的测定
精密量取 0. 05 mmol /L Tris - HCl 缓冲液 4. 50
mL,25 ℃水浴 20 min,分别加入 1. 00 mL 不同浓度
的各样品溶液和 25 mmol /L 邻苯三酚溶液 0. 40
mL,混匀,于 25 ℃水浴中反应 5 min,加入 10 mmol /
L盐酸溶液 1. 00 mL终止反应,于 325 nm处测定吸
光度。每个试样作三次平行测定,取其均值为 A1。
另外参照上述操作分别测定相应的吸光度值 A0 和
A2,按下式计算超氧阴离子清除率:
清除率 =
A0 -(A1 - A2)
A0
× 100%
其中:A0 为反应体系中不含样品,但含邻苯三
酚的吸光度值;A1 为反应体系中既含样品,又含邻
苯三酚的吸光度值;A2 为反应体系中含有样品,但
不含邻苯三酚的吸光度值。
1. 2. 3. 4 凤仙花还原力的测定
参考 Oyaizu 和 Amarowicz 等的方法,稍作
改进[13]。
(1)pH6. 6 磷酸缓冲液的配制
分别精密称取磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和氯化
钠 1. 740 0 g、2. 700 0 g、1. 700 0 g,溶于 400 mL 蒸
馏水中,即得 pH6. 6 磷酸缓冲液。
—11—
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(2)1%铁氰化钾溶液的配制
精密称取 1. 000 0 g 铁氰化钾,溶于 100 mL 蒸
馏水中,即得 1%铁氰化钾溶液。
(3)10%三氯乙酸溶液的配制
精密称取 10. 000 0 g三氯乙酸,溶于 100 mL蒸
馏水中,即得 10%三氯乙酸溶液。
(4)0. 1%三氯化铁溶液的配制
精密称取 0. 170 0 g 六水合氯化铁,溶于 100
mL蒸馏水中,即得 0. 1%三氯化铁溶液。
(5)样品溶液的测定
精密量取不同浓度的样品溶液 2. 50 mL于试管
中,依次加入 2. 50 mL 磷酸缓冲液(pH6. 6)和 1%
铁氰化钾溶液 2. 50 mL,于 50 ℃水浴保温 20 min,
快速冷却,再加入 10%三氯乙酸 2. 50 mL,以 3 000
r /min 离心 10 min,取上清液 2. 50 mL,依次加入
2. 00 mL蒸馏水,0. 1%的三氯化铁溶液 0. 50 mL,
充分混匀,静置 10 min 后,于 700 nm 处测吸光度
值,吸光值越大表示还原力越强(以蒸馏水作对
比)。每个试样作 3 次平行测定,取其平均值。
2 结果与讨论
2. 1 凤仙花各部位乙醇提取物的提取率、多酚及总
黄酮含量
从表 1 中可以看出,凤仙花不同部位的乙醇提
取物的得率存在差异,其中凤仙花的花提取物得率
为 33. 20%,凤仙花的茎提取物得率为 22. 40%,凤
仙花的叶提取物的得率为 28. 33%。通过应用多酚线
性回归方程:y = 0. 108 5x - 0. 027 9(R2 = 0. 995 5)
及总黄酮线性回归方程:y = 6. 517x - 1. 159 6(R2 =
0. 999 2),计算出凤仙花不同部位醇提取物中的多
酚含量(以没食子酸计)及总黄酮含量(以芦丁计),
见表 1。
表 1 凤仙花不同部位乙醇提取率和多酚、
总黄酮含量
提取物样品 提取率(%) 多酚含量(mg /g)
总黄酮
(mg /g)
凤仙花的花 33. 32 66. 07 108. 06
凤仙花的茎 22. 40 37. 07 30. 62
凤仙花的叶 28. 33 72. 81 112. 13
2. 2 凤仙花各部位提取物抗氧化活性比较
2. 2. 1 对 DPPH自由基清除活性的测定结果
DPPH法从 1958 年被提出后,就被广泛地用于
各种生物试样和食品的抗氧化能力测定。DPPH 自
由基以氮为中心,其结构十分稳定,主要是由于起共
振作用的 3 个苯环的空间障碍,使氮原子上的单电
子不能够发挥电子成对作用。DPPH 检测法是根据
DPPH自由基于 517 nm处有一强吸收峰,其醇溶液
呈紫色的特性。当自由基清除剂存在时,通过使
DPPH分子中 1 个稳定自由基与抗氧化剂提供的 1
个电子配对结合使 DPPH 的特征紫色消失,褪色的
程度和自由基清除剂的电子数量存在定量关系,因
此可用分光光度计进行快速定量分析从而用于抗氧
化剂清除自由基能力的评价。与其他体外抗氧化法
相比,清除 DPPH自由基法更加快速、简单、灵敏,因
而被广泛应用。
图 1 凤仙花不同部位提取物对 DPPH清除活性
凤仙花各部位乙醇提取物对 DPPH清除率的分
析如图 1 所示,在此实验中,以 Vc为对照,在试验浓
度范围内,随着浓度的升高,Vc 及各样品对 DPPH
自由基的清除率都呈现增长的趋势,且各样品对
DPPH自由基清除率在浓度较低时上升较快,在浓
度较高时上升较慢。各试验样品对 DPPH清除能力
大小从高到低分别为:Vc >凤仙花的叶提取物 >凤
仙花的花提取物 >凤仙花的茎提取物。当浓度达到
1. 00 mg /mL 时,Vc 对 DPPH 自由基的清除率高达
98. 03%,凤仙花的叶提取物对 DPPH自由基也具有
较好的清除能力,清除率为 88. 53%。
2. 2. 2 对超氧阴离子自由基清除活性的测定结果
人体内大部分氧分子代谢生成水,但有约 5%
的氧分子受单一电子还原,从而成为超氧阴离子,超
氧阴离子不仅是阴离子同时也是自由基,性质十分
活泼,具有很强的氧化性和还原性。超氧阴离子是
氧自由基生成中的第一个自由基,是生物体生理反
应常见的中间产物,作为活性氧的一种,可能引起细
胞结构功能的破坏,从而导致组织损伤、衰老,诱发
炎症和肿瘤。
邻苯三酚自氧化法是测定超氧阴离子自由基清
除活性的常用方法,其主要机理为,邻苯三酚在碱性
条件下发生自氧化从而释放超氧阴离子自由基,并
生成有色中间物质,该物质在 325 nm左右有特征吸
收,当有抑制剂存在时,可以减少此中间物质的积
—21—
第 6 期 姜洪芳,等:凤仙花不同部位乙醇提取物多酚、黄酮含量测定及抗氧化活性研究
累,因此可通过比色法检测该物质的吸光度值来计
算待测物质对超氧阴离子的清除能力。
图 2 凤仙花不同部位提取物对超氧阴离子
自由基的清除活性
以 Vc为对照,测定凤仙花各部位提取物清除
超氧阴离子的能力,结果如图 2 所示。从图中可以
看出,在试验所测定浓度范围内,各样品对超氧阴离
子自由基的清除率都随着浓度的升高而升高。各试
验样品对超氧阴离子清除能力大小从高到低分别
为:Vc >凤仙花的叶提取物 >凤仙花的花提取物 >
凤仙花的茎提取物。其中 Vc 的上升趋势较快,并
且在浓度达到 0. 75 mg /mL 时,Vc 对超氧阴离子自
由基的清除率已经达到 95%;凤仙花各部位提取物
对超氧阴离子自由基的清除率虽然有所升高,但趋
势较为缓慢,在 1. 00 mg /mL 的浓度下,其抑制率不
到 40%,因此凤仙花对超氧阴离子自由基具有一定
的清除作用,但是较弱。
2. 2. 3 凤仙花对羟自由基清除活性的测定
人体在生命活动氧化代谢过程中会产生各种
各样的自由基,而羟自由基是其中化学性质最活
泼、对机体危害最大的自由基。它能够和多肽、蛋
白、脂类、DNA,特别是鸟嘌呤核苷等发生反应,使
得不饱和脂肪酸氧化,生成脂质过氧化物,导致膜
结构遭到破坏,从而使机体受到损伤与破坏,加快
机体的衰老,引起脑缺血、帕金森氏症、风湿性关
节炎、呼吸窘迫综合症、心血管疾病和癌症等疾
病[1]。本试验采用水杨酸法测定样品对羟自由基
的清除能力,水杨酸是最常用的捕获剂,其羟基化
产物是 2,3 -二羟基苯甲酸以及 2,5 -二羟基苯甲
酸。过氧化氢和硫酸亚铁溶液中的二价铁离子发生
Fenton反应产生羟自由基,用水杨酸捕捉高活性的
羟自由基可产生有色物质,且该有色物质在 510 nm
处有最大吸收,若向反应体系里加入抗氧化剂,可以
和水杨酸形成竞争从而减少有色物质生成。因此本
试验通过分光光度计对有色物质的吸光度进行测定
达到间接测定自由基的目的,进而反应氧化应激
水平。
图 3 凤仙花不同部位提取物对羟自由基的清除活性
从图 3 可以看出,在试验浓度范围内,随着浓度
的增大,Vc对羟自由基的清除率上升较快,凤仙花
各部位提取物对羟自由基的清除率有缓慢的升高。
当浓度在 0. 1 mg /mL左右时,各提取物的清除能力
均高于 Vc;当浓度达到 0. 25 mg /mL时,凤仙花的叶
提取物对羟自由基的清除率分别达到 57. 84%,基
本与 Vc(清除率为 58. 14%)相同;随着浓度继续升
高,试验样品对羟自由基清除能力大小从高到低分
别为:Vc >凤仙花的叶提取物 >凤仙花的花提取物
>凤仙花的茎提取物;当浓度达到 1 mg /mL 时,凤
仙花的叶提取物对羟自由基清除率分别达到
74. 57%,具有较强的清除作用。
2. 2. 4 还原力测定
一种物质的还原能力可以在一定程度上反应它
潜在的抗氧化活性,通过给自由基提供电子而自身
得到一个质子,使自由基失活。通常来说,物质的还
原力越强,就表示其抗氧化活性越强。还原力测定
的实质就是检测待测样品能否成为好的电子供应
者。本试验以普鲁士蓝的生成作为检测指标,待测
样品将 Fe3 + /铁氰化物还原为 Fe2 + /铁氰化物,反应
体系溶液变为不同程度的蓝色,其在 700 nm处有特
征光吸收,吸光度大小反应待测样品的抗氧化活性。
图 4 凤仙花不同部位提取物还原力测定
由图 4 可以看出,在试验浓度范围内,试验样品
还原力大小由高到低分别为:Vc >凤仙花的叶提取
物 >凤仙花的花提取物 >凤仙花的茎提取物。Vc
还原力随着浓度的增加而明显增大,在浓度为 0. 25
mg /mL时,其还原能力达到 1. 4;凤仙花各部位提取
—31—
中 国 野 生 植 物 资 源 第 33 卷
物的还原力与浓度存在量效关系,但还原能力一般,
在浓度为 1 mg /mL时,凤仙花的花、茎、叶提取物的
还原力分别为 0. 536、0. 315、0. 787。
3 结 论
3. 1 凤仙花的花、茎、叶三个部位均采用 55%乙醇
回流提取获得提取物,但提取率有所差异,其中凤仙
花的花得率最高为 33. 32%,其次为凤仙花的叶,凤
仙花茎的得率最低为 22. 40%;凤仙花各部位醇提
取物中多酚的含量也有差异,凤仙花的叶的多酚含
量最高为 72. 81 mg /g,其次为凤仙花的花 66. 07
mg /g,而凤仙花茎的多酚含量最低为 37. 07 mg /g,
总黄酮的含量在花、茎、叶三个部位中为 112. 13 ~
30. 62 mg /g。
3. 2 目前,没有一种普遍通用的方法就能较为准确
地定量测定某样品的抗氧化能力,因此在评价某样
品抗氧化活性时,通常采用几种不同的检测方法。
本文采用了 DPPH 自由基清除能力测定、羟自由基
清除能力测定、超氧阴离子清除能力测定和还原能
力测定,以 Vc 为对照,结果表明,凤仙花各部位提
取物均有不同程度的抗氧化活性,且抗氧化能力与
浓度呈量效关系;综合各个检测方法,凤仙花的叶相
比花和茎,具有较强的自由基清除活性和还原力,但
仍低于对照组的 Vc,且都有剂量依赖性,其次是凤
仙花的花,而凤仙花的茎抗氧化活性最低。
3. 3 样品的抗氧化活性与多酚、总黄酮含量之间存
在一定的相关性。虽然未对其相关性作定量测定,
但实验结果表明,总的来说凤仙花各部位的抗氧化
活性与多酚、总黄酮含量有较为密切的关系,多酚及
总黄酮含量越高的部位,其抗氧化活性也越强。
3. 4 凤仙花提取物中成分复杂,但其中的多酚可能
是主要抗氧化成分之一。通过本实验可知,凤仙花
的各部位特别是凤仙花的叶,具有较好的综合抗氧
化能力,可以作为新型天然抗氧化剂的原料来开发
利用。
参考文献:
[1] 江苏新医学院.中药大辞典:上册[M]. 上海:上海科学技术出
版社,1984:278 - 346.
[2] 鞠培俊,孔德云,李晓波.凤仙花化学成分及药理作用研究进
展[J].沈阳药科大学学报,2007,24(5):320 - 324.
[3] Sakunphueak A,Panichayupakaranant P. Comparison of antimi-
crobial activities of naphthoquinones from Impatiens balsamina
[J]. Nat Prod Res,2012,26,1119 - 1124.
[4] Oku H,Ishiguro K. Cyclooxygenase-2 inhibitory 1,4-naphthoqui-
nones from Impatiens balsamina L. [J]. Biol Pharm Bull,2002,
25,658 - 660.
[5] Reanmongkol W,Subhadhirasakul S,Panichayupakaranant P,et
al. Anti-allergic and anti-oxidative activities of some compounds
from Thai medicinal plants [J]. Pharm Biol,2003,41,592
- 598.
[6] 胡喜兰,朱慧,刘存瑞,等. 凤仙花的化学成分研究(分离鉴定
了豆甾醇及山奈酚苷)[J].中成药,2003,25(10):833 - 834.
[7] 胡喜兰,韩照祥,刘玉芬,等.凤仙花提取物的抗氧化活性研究
[J].食品科学,2007,28(2):48 - 50.
[8] Singleton V L,Rossi J R. Colorimetry of total phenolics with phos-
phomolybdicphosphotungstic acid[J]. Am J Enol Vitic,1965,
16,144 - 158.
[9] Meda A,Lamien C E,Romito M,et al. Determination of the total
phenolic,flavonoid and proline contents in Burkina Fasan honey,
as well as their radical scavenging activity[J]. Food Chem,2005,
91,571 - 577.
[10] 韦献雅,殷丽琴,钟成,等. DPPH 法评价抗氧化活性研究进展
[J].食品科学,2014,35(9):317 - 322.
[11] Halliwell B,Gutteridge J M C,Aruoma O I. The deoxyribose
method:A simple“test-tube”assay for determination of rate con-
stants for reactions of hydroxyl radicals. Anal[J]. Biochem,
1987,165,215 - 219.
[12] 张晓璐,徐凯宏. 山楂叶总黄酮清除 DPPH 和超氧阴离子自
由基的研究[J].林业科技,2008,33(5):51 - 54.
[13] 李颖畅,孟宪军.蓝莓叶黄酮提取物抗氧化活性的研究[J].
营养学报,2008,30(1):
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