全 文 ：!#$
杨! 玲，王振宇，#
（!东北林业大学林学院食品科学专业，黑龙江哈尔滨 !#$$%$；
&哈尔滨工业大学食品学院，黑龙江哈尔滨 !#$$’(）
摘) 要：为探讨蓝靛果提取物的体外抗氧化作用，研究了其对 *++,·、·-,、- .& ·体系的清除效果以及抗猪油、抗脂
质过氧化反应，并以 /0、/1 作为对照。结果表明，蓝靛果提取物对 *++,·、·-,、-
.
& ·均具有一定清除作用，且与浓
度呈量效关系，对·-,清除效果明显优于 /0、/1。蓝靛果抗猪油过氧化效果明显，但其对抗脂质过氧化实验的效果
不如 /0、/1。
关键词：蓝靛果，提取物，抗氧化
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中图分类号：K=&$!&) ) ) ) 文献标识码：L) ) ) ) 文 章 编 号：!$$&.$M$(（&$$N）!&.$!(&.$M
收稿日期：&$$N.$M.!$
作者简介：杨玲（!N’%.），女，硕士研究生，研究方向：功能性食品。
) ) 蓝靛果忍冬（ !#$%&’( &)*+$, -*’%.）是忍冬科
（0435?:9@?4>242）忍冬属（O98?>254）植物，落叶灌木。
蓝靛果对心脑血管疾病有一定疗效［!］，还可防止血管
破裂，降低血压［&］，并有抗病毒、抗癌和改善肝脏解毒
作用［M］等功效［%］，具有较高的营养价值及药用功
能［#］，是天然抗氧化剂的良好资源［(］。野生蓝靛果忍
冬果实含有大量的维生素 0 和氨基酸以及多种微量
元素及大量黄酮类成分，提取物还富含次级代谢所
需的花色苷和酚酸［P］。研究显示，蓝靛果与其他许多
产品相比有很强的抗氧化活性。近年来，国外主要
以蓝靛果为主要材料研究其抗氧化性质，而有关蓝
靛果抗氧化物质提取的研究在国内尚无报道。因
此，本文首次研究了蓝靛果提取物对 *++,·、
·-,、- .& ·的清除能力以及抗猪油、抗脂质过氧化
反应，对开发具有天然抗氧化功能的蓝靛果产品，实
现蓝靛果的有效增值具有重要的意义。
! 材料与方法
;! 材料与仪器
蓝靛果) 采摘于大兴安岭；*++,·) L@:4 公司；
其他试剂) 均为国产分析纯。
紫外可见光分光光度计 P#(+0) 上海光谱仪器
有限公司；旋转蒸发仪 Q.&$! ) 上海申胜生物技术
有限公司；,,.% 恒温水浴锅) 国华电器有限公司。
;#! 实验方法
!&!) 蓝靛果乙醇提取物的制备) 称取 !$$A匀浆后
的蓝靛果鲜果，在液料比 & R!，超声时间 ($7?8，超声
温度 #$S，超声功率 &$$T，乙醇含量 #$U条件下提
取，然后 M$$$5 V 7?8 离心 #7?8，上清液旋转蒸发浓
缩，浓缩液用双蒸水在 !$$7O容量瓶中定容，即配制
成 !A V 7O的蓝靛果提取液。%S保存 !A V 7O 蓝靛果
提取液，用时稀释至不同浓度。
!&&) 清除 *++, 自由基的测定方法 ) *++, 全称
二苯代苦味肼基自由基（&，& . 5G .
DG<54WG@ 544@，*++,），有个单电子在 #!P87有强吸
收，其甲醇溶液呈深紫色。当有自由基清除剂存在
时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪
色程度与其接受的电子数成定量关系，通过吸光度
的减少量可测定自由基清除剂的清除能力。
取各浓度提取物 &$$7O，加入 *++,&$$7O，放
置 M$7?8，溶剂为对照，测定在 #!P87 处的吸光度
L?。然后取各浓度提取物 &$$7O，与 &$$7O 乙醇混
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2009.12.107
!#$
合后在 !#$% 处的吸光度 &’。再测 ()**%+ ,--.
与 ()**%+溶剂混合后在 !#$% 处的吸光值 &/。清
除能力用 0表示，计算按下式：
0 1［ 2（&3 2 &’）4 &/］5 **6
)()78 清除·9. 自由基的测定方法 8 甲基紫在酸
性溶液中呈现紫色，在 !#:$% 处有强吸收。反应产
生的·9.具有高的反应活性，会与甲基紫中具有高
电子云密度的2; 1 ;2基团发生亲电加成反应，使甲
基紫褪色。通过测定甲基紫在 !#:$%处吸光度值的
变化可间接测定出·9.的生成量。
试管加入 )*%+ 甲基紫（ ()* 5 * 2< %=> 4 +）、
)*%+ ?@( A（)* 5 * 27 %=> 4 +）、)*%+ .(9(（*)(6），
用 BC3D2.;>缓冲液调节 E.<)! 后用水稀释到 *%+，
放置 7*%3$，在 !#:$% 处测定吸光值 &*，甲基紫和
BC3D2.;>缓冲液做空白测吸光值 &，两者均以水为参
比。测定样品时在上述体系中先加入 )*%+ 样品溶
液，测吸光度值 &D，同体积样品溶液、BC3D2.;> 和水
溶液作参比，清除率公式：
清除率（6）1（&D2&*）4（&2&*）5 **6
)()<8 清除 9 2( ·的测定方法 8 邻苯三酚在碱性条
件下迅速发生自氧化释放 9 2( ·，9
2
( ·可加速邻苯三
酚自氧化速率，生成有色中间产物。当有抑制剂存
在时，可清除 9 2( ·，从而阻止中间产物的积累，通过
比色法检验物质清除 9 2( ·的能力。
向 E.:)(* !)#%+ !*%%=> 4 + BC3D2.;> 缓冲液中
加入 *)(%+ 样品，(!F保温 *%3$，加入 G%%=> 4 + 邻
苯三酚 *)%+，测定反应 %3$ 时 7(*$% 处的吸光值
&D，等浓度样品溶液作参比；另取试剂同上，将样品
用等体积水代替，以 BC3D2.;>做空白，测定反应 !%3$
时吸光度值（&*）)
清除率 H（6）1（&*2&D）4 &* 5 **6
)()!8 抗猪油过氧化实验8 油脂过氧化值（-9I）是
判断油脂及其制品酸败程度的主要指标。-9I 是
**J 油脂中过氧化物氧化碘化钾所析出碘的克数。
原理为油脂氧化时产生过氧化物与碘化钾作用，产
生游离碘，用硫代硫酸钠滴定。
每只烧杯中加 **J 猪油。除空白外，分两组添
加抗氧化剂。第一组加猪油重的 *)*!6添加蓝靛果
提取液、IK、I;；第二组加猪油重的 *)*(!6、*)*!6、
*)*6蓝靛果提取液，（G* L ）F恒温培养箱保存，每
隔相同天数测定猪油的过氧化值（-9I）。按下式
计算：
-9I（%@M 4 NJ）1（I2I(）5 ; 4（% 5***）
式中：I 为样品对硫代硫酸钠标准溶液的消耗
量（%+）；I( 为空白试剂对硫代硫酸钠标准溶液的消
耗量（%+）；;为硫代硫酸钠标准溶液的浓度（%=> 4 +）；
%为样品重量（J）。
)()G8 抗脂质过氧化能力的测定8 硫代巴比妥酸法
（BO&法）是基于不饱和脂肪酸通过自由基反应，产
生过氧化自由基，而氧化生成环氧化物，与 BO&作用
生成 BO&染料，最大吸收波长为 !7($%。抗氧化剂
会抑制自由基链反应的进行，最终表现出 BO& 染料
生成的少，吸光度值小。
取 *)!%J 4 %+ I;、*)!%J 4 %+ IK 及提取液各 <%+，
加入 <)%+ :6鱼肝油（P 4 P，乙醇配制，美国 N3CN>Q$R
公司，,.& AK-*6）、:%+磷酸缓冲液（*)*!%=> 4 +，
E. 1 #)*）和 7)S%+ 去离子水，放置 <*F恒温干燥箱
中培养。取第 *R 的培养液各 %+，分别加入 (*6
三氯乙酸溶液 %+ 混匀，静置约 (*%3$，再加 (%+
*)76硫代巴比妥酸溶液，混匀后沸水浴 *%3$，冷却，
7***C 4 %3$离心 (*%3$，上清液于 !7($% 下测定其吸
光值。
! 结果与分析
!#$ 清除 %&&’·的实验结果
由图 可知，不同浓度的蓝靛果提取液及 I;、IK
对 ,--.·有很强的清除能力。并且随着蓝靛果提
取液浓度的增加，,--.·清除能力越来越强，浓度
为 ()*%J 4 %+的蓝靛果提取液清除 ,--.·的能力最
强，几乎接近 :*6。相同浓度 *)!%J 4 %+的蓝靛果提
取液清除 ,--.·能力较 IK 要强，但较 I; 弱。
图 8 不同浓度蓝靛果提取物及
I;、IK 对 ,--.·的清除作用
!#! 清除·(’的实验结果
由图 ( 可知，不同浓度的蓝靛果提取液对·9.
有较强的清除能力，蓝靛果提取液浓度在 ()*%J 4 %+
时清除率接近 G*6。随着蓝靛果提取液浓度的增
加，·9.清除能力越来越强，浓度为 ()*%J 4 %+的蓝
靛果提取液清除·9. 的能力达到了 G()#:6。相同
浓度 *)!%J 4 %+ 的蓝靛果提取液清除·9. 能力较
I;、IK 要强。
图 (8 不同浓度蓝靛果提取物及 I;、IK 对·9.的清除作用
!#) 清除 ( *! ·的实验结果
如图 7 可知，不同浓度的蓝靛果提取液及 I;、IK
都具有较强的清除 9 2( ·的能力，并且随着蓝靛果提
取液浓度的增加，对 9 2( ·的清除率不断上升，当蓝
靛果提取液浓度为 ()*%J 4 %+ 时，对 9 2( ·的清除能
力接近 **6。当 IK 浓度为 *)!%J 4 %+时，清除 9
2
( ·
能力达到最大，清除率已达到 **6，高于此浓度清除
率不会再随浓度升高而变化；而浓度为 *)!%J 4 %+ I;
!#$
清除 ! # ·的能力也很强，达到了 $%&’(。而相同浓
度的蓝靛果提取物的抗氧化性就不及前两者，只有
)*&*$(。但总的来说，蓝靛果提取物清除 ! # ·能力
也较强。
图 *+ 不同浓度蓝靛果提取物及 ,-、,. 对 !
# ·的清除作用
!#$ 抗猪油过氧化的实验结果
如图 / 所示，浓度为 0&01( 的蓝靛果提取物、
,-、,. 三种不同抗氧化剂在猪油中的抗氧化活性的
比较中，蓝靛果提取物能够有效地减缓猪油的氧化，
对猪油的抗氧化作用明显强于 ,-、,.。
图 /+ 浓度为 0&01(三种不同抗氧化剂
在猪油中的抗氧化活性
如图 1 所示，不同浓度的蓝靛果提取物在猪油
的抗氧化活性的比较中，随着蓝靛果提取物浓度的
增高，其抗氧化活性也增强。含量达到 0&01(以上
时，抗氧化效果非常好，过氧化值不超过 #0234 5 67，
表现出良好的抗氧化性。
图 1+ 不同浓度蓝靛果提取物在猪油中的抗氧化活性
!%$ 抗脂质过氧化抑制率的实验结果
如图 ’ 所示，不同浓度的蓝靛果提取物对脂质
过氧化反应有一定的抑制作用，被测物浓度从
0&0#127 5 28升高至 #&027 5 28，对脂质过氧化的抑制
作用随之增强，但变化不是很明显，说明蓝靛果提取
物对脂质抗氧化活性变化很小。由图 ’ 还可知，浓度
同样是 0&127 5 28的蓝靛果提取物和 ,-、,. 比较，蓝
靛果提取物的抗脂质过氧化能力不如后两者，以 ,.
表现最佳。
&$ 结论
图 ’+ 不同浓度蓝靛果提取物抗脂质过氧化的能力
通过对蓝靛果提取物、,-、,. 抗氧化特性的对比
实验可知：蓝靛果提取物的清除 9::;·、清除羟自
由基、清除邻苯三酚自动氧化产生的超氧阴离子、抗
猪油过氧化、抗脂质氧化的能力较强，并且随着浓度
的增加，抗氧化能力增强。
相同浓度 0&127 5 28的蓝靛果提取物清除 9::;·
能力较 ,. 要强，但较 ,- 要弱，清除·!; 能力优于
,-、,.。当 ,. 浓度为 0&127 5 28时清除 !
# ·能力达
到最大，清除率已达到 <00(，高于此浓度清除率不
会再随浓度升高而变化；而浓度为 0&127 5 28 ,- 清
除 ! # ·的能力也很强，达到了 $%&’(。相同浓度的
蓝靛果提取物的抗氧化性就不及前两者，只有
)*&*$(。占猪油含量 0&01(的蓝靛果提取物、,-、
,. 三种不同抗氧化剂在猪油中的抗氧化活性的比
较中，蓝靛果提取物能够有效地减缓猪油的氧化，
对猪油的抗氧化作用明显强于 ,-、,.。浓度同样
是 0&127 5 28的蓝靛果提取物和 ,-、,. 比较，蓝靛
果提取物的抗脂质过氧化能力不如后两者，以 ,.
表现最佳。综上，蓝靛果提取物是一种较好的抗氧
化剂。
参考文献
［<］=>?@?A?BC = :& DCEFE G?H I?223HIFC@ IJ@KFBCKF?L ?G A@J3
>?L3MEJI6@3［N］&OCP?B?PEKB? Q ,FL?7HCPCHEKB?，<$$0（%）：#*#1&
［#］王启伟，金政，李相伍，等 &蓝靛果对四氯化碳损伤小鼠血
清谷草转氨酶的影响［ N］&延边大学医学学报，#00<，#/（*）：
<$<<$#&
［*］金政，王启伟，金美，等 &蓝靛果对四氯化碳所致小鼠肝损
伤修复作用的形态学研究［ N］&中国中医药科技，#00#，$
（<）：/’
［/］向延菊，郑先哲，王大伟 &野生浆果资源—蓝靛果忍冬利
用价值的研究现状及应用前景［N］&东北农业大学学报，#001，
*’（1）：’’$’)<&
［1］王宏涛，叶云，肖顺林，等 &蓝靛果乙酸乙酯提取物对胃溃
疡大鼠胃黏膜血管活性物质的影响［N］&辽宁中医杂志，#00)，
*/（*）：*’0*’<&
［’］RCL7 ;，-C? S，:HF?H T 8&U?KC@ CLKF?VFPCLK ICWCIFKM ?G GHJFKE
［N］&N?JHLC@ ?G X7HFIJ@KJHC@ CLP Y??P ->32FEKHM，<$$’（//）：)0<
)01&
［)］RCL7 O Z，8FL ; O&XLKF?VFPCLK CIKFBFKM FL GHJFK CLP @3CB3E ?G
A@CI6A3HHM，HCEWA3HHM，CLP EKHC[A3HHM FE CGG3IK3P AM IJ@KFBCH CLP
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