全 文 ：凤仙花不同提取物中山奈酚的测定
胡喜兰 , 韩照祥 , 刘玉芬 , 顾海星 , 孙银鹤 , 王　革
(淮海工学院化工系 , 连云港 222005)
摘　要:为寻求有效的山奈酚分离 、纯化条件 , 并从凤仙花中提取山奈酚;分别
采用不同溶剂和不同方法对凤仙花红色花瓣进行了提取 , 并利用高效液相色谱
法对其主成分进行了测定;实验结果表明:9种提取物中均含有山奈酚 , 乙酸
乙酯提取物中山奈酚的含量最高:1 g 凤仙花红色花瓣的乙酸乙酯提取液中含
有 8.1 mg 的山奈酚 。
关键词:凤仙花;提取物;山奈酚;测定
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　　文章编号:1000-0720(2007)05-033-03
　　山奈酚(又名黄芪苷元 , 山奈黄素 , Kaempfe-
rol)的结构为 5 ,7 , 4′-三羟基黄酮醇 , 药理筛选表
明山奈酚具有止咳祛痰和消炎等作用 , 凤仙为凤
仙花科植物凤仙的全草 , 我国大部分地区均有分
布 , 资源丰富 。其花具有活血通经 、利尿止痛的
作用 , 在临床上具有散寒 、生发 、润肤之功效 , 还
具有收敛 、止血 、抗肿瘤 、降低血压 、镇静止痛作
用[ 1 ,2] 。凤仙花含有香豆素类 、黄酮类等多种化学
成分 , 其中山奈酚是其主要的黄酮化合物[ 3, 4] 。为
了更好的提取 、分离 、纯化制备山奈酚 , 进一步地
开发利用该资源 , 我们对其进行了研究。
1　实验部分
1.1　材料 、试剂和仪器
凤仙花红色花瓣:采于新疆石河子 , 自然凉
干揉碎储存于密闭的玻璃瓶中备用 。
石油醚 、环已烷 、乙酸乙酯 、正丁醇 、无水乙
醇等均为分析纯;二次蒸馏水;芦丁 、槲皮素 、山
奈酚均为标准品 , 购于中国药品生物制品鉴定所 。
LC-10ADVP 型高效液相色谱仪 、CLASS-VP 工
作站 、 SPD-M10AVP二极阵列检测器(日本岛津公
司);HH-S 恒温水浴锅;RE-5285 型旋转蒸发器;
722型可见分光光度计;SK-1快速混匀器;CL-2型
恒温加热磁力搅拌器;SHZ-D 型循环水式多用真
空泵;赛多利斯电子天平;KDM 型调温电热套
(1000 mL);WKY微量移液管;DK-8A 型电热恒温
水槽;SYZ-B型石英亚沸高纯水蒸馏器。
1.2　实验方法
1.2.1　样品制备及对照品溶液的配制[ 5] 　(1)样
品H0的提取 。称取 0.5049 g 的凤仙花红色花瓣 ,
用 15 mL甲醇浸泡 17 h后 , 再用超声提取 20 min ,
共 3次 , 完全转移并定容于50 mL 容量瓶中 , 标为
H0 , 避光保存备用。
(2)样品 H1 ～ H5 的提取。称取 9.2 g 的凤仙
花红色花瓣 , 用索式提取器按极性大小以石油醚 ,
环己烷 , 乙酸乙酯 , 丙酮 , 无水乙醇的顺序进行依
次分别回流提取 , 直到回流液基本无色(每次约 3
～ 4 h), 所得各提取液减压浓缩后用提取剂定容
于50 mL 容量瓶中 , 分别标为 H1 、 H2 、 H3 、H4 、
H5 , 避光保存备用。
(3)样品 H6 ～ H8 的提取。称取凤仙花红色花
瓣 25 g , 放入1000 mL 圆底烧瓶中 , 加入250mL 食
用酒精浸泡 24 h , 将浸泡好的凤仙花放入恒温水
浴锅内水浴加热回流 , 待 2 h后用布式漏斗抽滤 ,
滤渣中加入 200 mL 食用酒精 , 加热煮沸 1.5 h 后
再用布式漏斗抽滤 , 重复 1次 , 合并滤液 , 减压浓
缩至 30 mL (密度约为 0.954 g mL)浓缩液(无醇
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第 26 卷第 5期
2007 年 5月 　　　　　　　　　　　　 分析试验室Chinese Journal of Analy sis Laboratory　　　　　　　　　　　　Vol.26.No.52007-5
收稿日期:2006-03-27;修订日期:2006-05-17
基金项目:江苏省海洋生物技术重点实验室(2005HS008);淮海工学院引进人才启动资助基金(KK01060)项目资助
作者简介:胡喜兰(1961-), 女 , 教授
DOI :10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2007.0129
味), 分别用等体积的石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇
依次萃取 4次 , 所得萃取液浓缩后用萃取液定容
至50 mL 容量瓶中 , 依次标为 H6 、H7 、H8 , 避光保
存备用。
(4)对照品溶液的配制。山奈酚标准贮备液:
准确称取 19.00 mg 的山奈酚 , 加甲醇溶解 , 完全
转移并定容至 100.0 mL容量瓶中备用。
槲皮素标准贮备液:准确称取 29.60 mg 的槲
皮素 , 加甲醇溶解 , 完全转移并定容至 100.0ml容
量瓶中备用。
芦丁标准贮备液:准确称取10.00 mg的芦丁 ,
加甲醇溶解 , 完全转移并定容至 100.0 mL 容量瓶
中备用。
标准对照液:分别移取一定量的上述标准贮
备液 , 加甲醇定容至50.0 mL 容量瓶中 , 使其中山
奈酚 、槲皮素 、芦丁的量分别为 19.00 、 17.28和
32.10 μg mL。
1.2.2　各提取物中黄酮的测定　色谱条件:色谱
柱 VP-ODS(150 L×4.6 mm);流动相为 V(甲醇)∶
V(0.1%乙酸的水溶液)=1∶1 , 梯度程序:0 ～ 30
min甲醇体积分数 50%～ 100%;检测波长:360
nm;柱温:室温。
各提取液移取一定体积 , 挥干溶剂后 , 用一
定体积的甲醇溶解后 , 分别进样进行测定。
2　结果与讨论
2.1　各提取物中黄酮的测定
测定结果见表 1 、图 1和图 2。
表 1　各提取物的黄酮测定结果
Tab.1　Determination results of flavone content of different
extracts
样品 芦丁
w (mg g)
槲皮素
w (mg g)
山奈酚
w (mg g)
H0 1.096 0.9772 6.346
H1 103 4.396 1.079 2.441
H2 103 1.304 0.4341 0.7628
H3 0.6326 0.4084 8.104
H4 0.2621 0.08349 1.424
H5 0.7567 0.09501 0.7797
H6 103 2.336 0.2616 4.680
H7 2.744 0.4893 5.353
H8 1.400 0.2552 2.786
图 1　样品色谱图
Fig.1　Chromatograms of the samples
a-标准对照液;b-H0;c-H3;d-H1
图 2　样品色谱图
Fig.1　Chromatograms of the samples
a-标准对照液;e-H8;f-H7;g-H6
由表 1 、图 1及图 2可知 , 各提取物中 , 均含
有芦丁 、槲皮素和山奈酚 , 且山奈酚是主要成分 ,
在乙酸乙酯提取物中山奈酚的含量最高 , 1 g 凤仙
花用乙酸乙酯提取可得到 8.1 mg 的山奈酚 。另外
从图 1 和图 2还可以看出 , 在各提取物中除含有
芦丁 、槲皮素和山奈酚外 , 还存在一种成分 , 且在
乙酸乙酯和醇提物中含量还相当高 , 根据前期的
工作和有关文献[ 3 , 4] 判断可能是山奈酚的糖苷 。
本次实验初步分析对比了凤仙花各提取物中
各黄酮的含量 , 可以看出凤仙花中的山奈酚是能
用乙酸乙酯提取的 ,对于含量较高的山奈酚的糖苷
可用酸分解后再用乙酸乙酯萃取 , 进一步的分离 、
纯化工作还在进行 。
参考文献
[ 1] 　江苏新医学院编.中药大辞典 , 上海:上海人民出版
社 , 1983 , 486
[ 2] 　危建安 , 谢　琪.时珍国医国药 , 2001 , 12(2):164
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2007年 5 月 　　　　　　　　　　　　 分析试验室Chinese Journal of Analysis Laboratory　　　　　　　　　　　　Vol.26.No.52007-5
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[ 4] 　Lin Hua , Zhaofeng Peng , Lian Sai Chia et al.J Chroma-
togr A , 2001 , (909):297
[ 5] 　刘成梅 , 游海主编.天然产物有效成分的分离与应
用 , 北京:化学工业出版社 , 2003:173
Determination of kaempferol in different extracts from the flowers of Impatiens balsamina L.
HU Xi-lan＊ , HAN Zhao-xiang , LIU Yu-fen , GU Hai-xing , SUN Yin-he and WANG Ge (Department of Chemical
Engineering , Huai-hai Institute of Technology , Lianyungang 222005), Fenxi Shiyanshi , 2007 , 26(5):33 ～ 35
Abstract:Try to explore the conditions of isolation and purification of kaempferol , and lay foundation for further re-
search on how to extract the kaempferol from the flowers of Impatients balsamina L ., different solvents and different
methods were used separately to the red flower petals for the extraction , and its main ingredients were determined by
high-performance liquid chromatography (HPLC).The results show that all of the 9 extracts contain kaempferol , and
the content of kaempferol is the highest in the etoAc extracts(8.1 mg g).
Keywords:Impatiens balsamina L.;Extracts;Kaempferol;Determination
第三届全国实验室管理科学研讨会会议通知
(第二轮)
由中国分析测试协会主办 、《分析试验室》编辑部承办的“第三届全国实验室管理科学研讨会”定于 2007 年 7 月 10 ～ 14
日在青海省西宁市召开。
会议内容包括实验室管理科学 、实验室认证认可 、实验室比对 、 实验室信息管理系统(LIMS)、实验室仪器设备运行及
考核 、实验技术人员培训等有关方面的学术研讨。会议将邀请国内有关专家做大会报告。欢迎全国各行业的实验室管理
人员及实验室科研工作人员参加会议。
现将已落实的大会邀请报告预告如下 , 其他大会报告尚在邀请确认中:
1.中国分析测试协会　汪正范教授　　题目:实验室能力验证与比对
2.北京钢铁研究总院　佟艳春教授　　题目:实验室认证与认可
3.广州分析测试中心　陈江韩　　题目:分析检测实验室的市场化
4.北京有色金属研究总院　臧慕文教授　　题目:常规分析测试中的质量管理控制
5.岛津国际贸易(上海)有限公司　李大为先生　　题目:建立全面符合 FDA Part 11 的实验室
6.安捷伦公司　周珊女士　　题目:安捷伦最新产品介绍及其应用
欲参加会议的各界人士 , 请填写下列回执 , 于 2007 年 6月 15 日前寄回筹备组 , 以便会议筹备组安排。
筹备组地址:北京新外大街 2 号 603 室实验室管理会议筹备组　　邮政编码:100088
电话 传真:010-82013328　　E-mail:ana-info@263.net
联系人:孙臣良
中国分析测试协会
2007 年 4 月18日
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