全 文 ：中　国　药　科　大　学　学　报
Journa l of China Pharmaceutical Universi ty　 2001, 32( 6): 448～ 450
菝葜三种提取物活血化瘀药理作用研究

吕永宁 , 陈东生 , 付　磊 1 , 李玉倩
(华中科技大学同济医学院附属协和医院 , 武汉 430022; 1武汉大学药学院 , 武汉 430061)
摘　要　目的: 研究菝葜的活血化瘀药理作用。方法:菝葜水煎液 (Ⅰ )、正丁醇萃取物 (Ⅱ )、正丁醇萃取剩余
物 (Ⅲ )高 ( 100 g /kg )、低 ( 50 g /kg )剂量对小白鼠灌胃给药 7 d后 ,眼眶取血 ,采用凝固比浊法测定 APTT、 PT,采
用 deriv e法测定 FIB;全自动血细胞计数仪测定血小板数 ,采用比浊法体外测定Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ对人血小板的聚集功
能 Ma 、M 1、 V 1的影响。结果: 100 g /kg剂量的Ⅰ 和Ⅲ能显著延长 APTT (P < 0. 05) , 50～ 100 g /kg剂量的Ⅲ能
使 FIB显著增加 (P < 0. 05) ,而 50 g /kg剂量的Ⅱ能使 FIB显著减少 (P < 0. 05)。稀释 8倍后的Ⅰ 和Ⅱ能抑制体
外的血小板聚集功能 ,特别是对 V1的影响更显著 (P < 0. 01) ,但三者对血小板数无明显影响。结论: 菝葜具有明
显活血化瘀的药理作用 ,其作用机制可能与抑制血小板聚集和延长内源性凝血时间及影响纤维蛋白原生成有
关。
关键词　菝葜 ; 活血化瘀 ; 药理作用
中图分类号: R965　　文献标识码: A　　文章编号: 1000-5048( 2001) 06-0448-03
　　菝葜为百合科菝葜属植物 Smilax china L. 的
根茎 ,具有消肿止痛、祛风利湿、活血化瘀及抗肿瘤
等作用 ,临床单用或与其它药物配伍用于各种炎症
性疾病 ,如妇科盆腔炎症及炎症性包块、前列腺炎、
类风湿性关节炎及各种肿瘤等 ,均取得满意疗效。
现代药理研究证实其具有 [1-3 ]: 抗炎、抑菌及抗肿瘤
等作用 ,但关于活血化瘀研究未见报道。菝葜中主
要含有由薯蓣皂甙元构成的皂甙 ,此外还有一些氨
基酸类和肽类、生物碱及糖类等。 1992年日本学者
研究发现从菝葜中提取的总皂甙能抑制特异性
cAM P水解酶 PDE,其中一种皂甙的 IC50与罂粟碱
相当 [ 1] ,结合 PDEs抑制剂研究成果 [4 ]及抗血小板
药的研究 [5 ] ,本实验通过研究菝葜水煎液及其正丁
醇萃取各部分高、低剂量对小白鼠 APTT、 PT、 FIB
和血小板数的影响以及体外对血小板聚集功能的
影响 ,摸索菝葜活血化瘀的有效部位及有效剂量 ,
为以后进行更深入的研究提供有效的依据。
1　仪器与材料
1. 1　动物
昆明种小白鼠 ,雄性 , 18～ 22 g , 80只 ,华中科
技大学同济医学院实验动物中心提供。
1. 2　菝葜三种提取物的制备
1. 2. 1　菝葜水煎液 (组分Ⅰ )　取菝葜饮片 (原材
料采自武昌金水镇 ,由协和医院吕永宁鉴定 ) 10
kg ,加水洗净 ,浸泡 ,用氢氧化钠调至 pH 8～ 9,蒸
气煎煮两次 [7 ] ,每次 4 h,合并煎煮液 ,静置过夜 ,用
粗纱布过滤 ,滤液调至 pH 6左右 ,浓缩至 1500 ml
( 1 ml相当于生药 6. 7 g )。
1. 2. 2　正丁醇萃取物 (组分Ⅱ )　取上述水煎液
1000 ml加入正丁醇萃取 ,每次 500 m l,至正丁醇
层蒸干后无固体残留物。合并萃取液 ,减压浓缩 ,回
收正丁醇 ,再加入适量甲醇溶解 ,水浴蒸干 ,收得固
体 18. 5 g。 用蒸馏水调制 ( 1 ml相当于生药 6. 7
g)。
1. 2. 3　正丁醇萃取剩余物 (组分Ⅲ )　合并上述剩
余物 ,加热至干 ,收得固体 85 g。 用蒸馏水调制 ( 1
ml相当于生药 6. 7 g )。
1. 3　药品
阿斯匹林肠溶片 (武汉同济明治医药有限公
司 ) ,硫喷妥钠粉针剂 (上海新亚药业有限公司 ,
990502 ) ,枸橼酸钠 (广东台山新宁 制药厂 ,
990801)。
1. 4　仪器
库尔特公司 ACL-200型血凝仪 , Chrono-
448
收稿日期　 2001-07-04
Log430血小板聚集仪 ,全自动血细胞计数仪。
1. 5　富含血小板血浆 ( PRP)及少血小板血浆
( PPP)的制备
选择年龄在 20～ 35岁之间的男性健康受试者 ,
检测前 2周内未服用过抗凝药。 空腹情况下静脉采
血 ,以 3 . 13%枸橼酸钠抗凝 (血与抗凝剂比例为 9∶
1) ,盛于塑料试管内 ,充分混匀 ,然后迅速在 4℃条件
下离心 ( 1000 r /min, 8 min)制备 PRP, 测得 PRP值
为 23万。 剩余部分同温下离心 ( 3500 r /min, 15
min)得 PPP,供仪器调零用。 PRP离心后 2 h内完成
实验 ,避免血小板自发凝聚 ,造成人为误差。
2　方　法
2. 1　三种提取物的动物体内活血化瘀作用
取 18～ 22 g小白鼠 (雄性 ) 80只 ,随即分为 8
组:对照组、组分Ⅰ 高剂量组、组分Ⅰ 低剂量组、组
分Ⅲ高剂量组、组分Ⅲ低剂量组、组分Ⅱ高剂量组、
组分Ⅱ低剂量组、阿斯匹林对照组。分别 ig生理盐
水、 50 g /kg、 100 g /kg菝葜水煎液 , 50 g /kg、 100
g /kg正丁醇萃取剩余物 , 50 g /kg、 100 g /kg正丁
醇萃取物 , 30 mg /kg阿斯匹林 0. 5%羧甲基纤维
素钠混悬液。连续 ig 7 d,于末次给药 1 h后腹腔注
射硫喷妥钠 0. 6 mg /kg ,麻醉后眼眶放血处死 ,取
血约 1. 3 ml,加入有 3. 8%枸橼酸钠抗凝剂 150μl
的试管中 ,混匀。 用 ACL-200型血凝仪器测量
APT T(部分活化凝血酶原时间 )、 PT(凝血酶原时
间 )、 FIB(纤维蛋白原含量 )。其中 PT、 APT T用凝
固比浊法 , F IB用 derive法即演算法。
2. 2　三种提取物体外对血小板聚集功能的影响 [8 ]
取“ 1. 5项”中富含血小板血浆 ( PRP) ,分别加
入 1∶ 8稀释的组分Ⅰ 组、组分Ⅱ组和组分Ⅲ组 ,以
ADP( 1μg /m l)为诱导剂 ,测定血小板聚集各项指
标。用 Chrono-Log 430血小板聚集仪利用比浊法
测量血小板 1 min内聚集率 M1及 5 min内最大聚
集率 Ma和第一步聚集速度 V 1 ,用 PPP给仪器调
零。
2. 3　三种提取物对血小板数目的影响
取部分“ 2. 2项”中血样 ,用血细胞记数仪测定
其血小板的数目 ,结果各组中血小板的个数分别为
(× 109 ,n= 10): 774± 73. 63, 851. 3± 78. 05, 883. 9
± 58. 8, 822± 56. 0, 808. 9± 100. 2, 876. 6± 67. 7,
835. 8± 125. 2, 735. 8± 104. 2。经统计学分析 ,没有
显著性差异 ,表明菝葜各提取物对血小板的数目没
有明显影响。
3　结　果
3. 1　三种提取物的动物体内活血化瘀作用
结果见表 1。 从表中可见 , 100 g /kg剂量的水
煎液和正丁醇萃取剩余物都能显著延长小鼠的
APT T, 50～ 100 g /kg剂量的正丁醇萃取剩余物并
能显著增加血中 FIB浓度 ,而 50 g /kg剂量的正丁
醇萃取物能显著降低血中 FIB浓度 ,但三者对 PT
无明显影响 ,表明菝葜中的有效成分能选择性抑制
内源性凝血 ,而对外源性凝血无明显影响 ,并同时
伴有对纤维蛋白原生成的影响。在实验过程中 ,有
8只小鼠不能在短时间内顺利得到足够的血量 ,故
有效数据为 72个。
Tab 1. Ef fect of the ex t ract s on APTT、 PT、 FIB in mice ( x-± s )
Group n
Dose
(g /k g)
APT T PT FIB
Con trol 9 30. 20± 3. 25 8. 27± 0. 29 1. 20± 0. 19
Ex tractⅠ 10 50 35. 85± 4. 42* 8. 31± 0. 66 1. 21± 0. 18
10 100 30. 57± 4. 13 8. 16± 0. 50 1. 31± 0. 34
Ex tractⅢ 7 50 44. 93± 12. 0* 8. 53± 0. 82 1. 44± 0. 49*
9 100 32. 63± 2. 38 8. 21± 0. 25 1. 34± 0. 22*
Ex tractⅡ 8 50 30. 66± 3. 85 8. 28± 0. 57 1. 19± 0. 31
9 100 30. 96± 2. 81 8. 52± 0. 52 1. 05± 0. 19*
Aspi rin 10 30 34. 52± 6. 50 8. 27± 0. 50 1. 26± 0. 31
*P < 0. 05, vs cont rol
3. 2　三种提取物体外对血小板聚集功能的影响
在体外血小板聚集功能测定中 ,各药经 1∶ 8
稀释后 ,菝葜水煎液和正丁醇萃取物对所测三项指
标都有所降低 ,特别是血小板第一步聚集速度 V 1
与对照组比较 ,具有明显差异 ,表明菝葜对血小板
聚集功能具有一定的抑制作用。其结果见表 2。
Tab 2. Th e effect of th e ext ract s on platelet agg retion of human
blood in vi tro (x-± s , n= 5)
Group M1 Ma V 1
Con trol 60. 34± 6. 22 76. 65± 9. 44 4. 77± 0. 73
Ex tractⅠ 55. 39± 6. 33 75. 43± 6. 46 3. 68± 0. 36*
Ex tractⅢ 59. 49± 4. 78 81. 07± 5. 28 4. 50± 0. 24
Ex tractⅡ 58. 54± 2. 65 75. 83± 5. 02 4. 03± 0. 42*
*P < 0. 01, vs cont rol
2. 3　三种提取物对血小板数目的影响
结果各组中血小板的个数分别为 (× 109 , n=
4496期　 吕永宁等: 菝葜三种提取物活血化瘀药理作用研究
10): 774± 73. 63, 851. 3± 78. 05, 883. 9± 58. 8, 822
± 56. 0, 808. 9± 100. 2, 876. 6± 67. 7, 835. 8± 125.
2, 735. 8± 104. 2。经统计学分析 ,没有显著性差异 ,
表明菝葜各提取物对血小板的数目没有明显影响。
4　讨　论
根据文献报道 [3 ] ,菝葜水煎煮提取物、水提醇
沉提取物、碱水渗漉醇沉提取物三种提取物中 ,碱
水渗漉醇沉提取物的抗炎作用远远大于其它两种
提取物。因此采用弱碱性氢氧化钠溶液煎煮药材 ,
使其酸性有效成分成为易溶性盐而溶解 ,提高了提
取率。
由实验结果可知 ,菝葜具有一定的活血化瘀作
用 ,其作用机制可能是通过抑制血小板聚集和内源
性凝血而实现的 ,并同时伴有对纤维蛋白原生成的
影响 ,对血小板的数目没有明显影响。菝葜水煎液
和正丁醇萃取物具有相似的药理作用 ,可推测其有
效成分位于正丁醇层。根据 PDEs抑制剂研究现状
和抗血小板药的研究可推测抑制血小板的聚集可
能是菝葜中的有效成分 (主要是甾体皂苷类物质 )
抑制了 PDEs活性 ,从而使血小板中 cAM P浓度
升高而产生的抗血小板活性作用。
参 考 文 献
[ 1 ]　 Yutaka Sashida, Satoshik ubo Yoshihi ro Mimaki, Tamotsu
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Study on the Pharmacological Action of the Extracts from Smilax
china . L . on Promoting Blood Circulation to Remove Blood Stasis
LU Yong-Ning , CHEN Dong-Sheng, FU Lei
1 , LI Yu-Qian
Tongji Medical University , Wuhan 430022 ; 1Wuhan University , Wuhan 430061 , China
ABSTRACT　 AIM　 The purpose is to study the pha rmacolo gical action of the ex t racts f rom Smilax
china L. on promo ting blood ci rculation to remove blood stasis. METHODS　 ig the high ( 100 g /kg )
and low ( 50 g /kg ) do se o f the ex tract w ith w ater f rom Smilax china L. ( I) , the ex t ract w ith n-butanol
f rom Ⅰ (Ⅱ ) and the remainder(Ⅲ ) to mice and draw ing blood from eyepit af ter sev en days. Activ ated-
partial thromboplastin time ( APTT) , pro thrombin time( PT) were measured by turbimetry method and
fibrinogen( FIB) w as determined by derive method. Platelet agg regation M1 , Ma , V1 was measured by
turbimetry method in vi tro. RESULTS　 The high do se of I,Ⅲ can prolong APT T obviously (P < 0. 05) ,
Ⅲ can increase FIB obv iously andⅡ can decrease FIB( P < 0. 05) . They all have no inf luence on PT and
the number of platelet.Ⅰ andⅡ ( 0. 84 g /ml) can inhibi t the platelet ag g regation, especially influence on
the veloci ty of agg regation ( V1 ) ( P < 0. 05 ) . CONCLUSIONS　 Sm ilax china L. has the
pha rmaco logica l action o f promo ting ci rculation to remove blood stasis. The mechanism may be
connected wi th inhibi ting the pla telet agg retion, prolonging the clo tting time and inf luencing on the
synthesis of FIB.
KEY WORDS　 Smilax china L. ; Promo te blood ci rculation to remove blood stasis; Pharmacological
action
450 　 　 中 国 药 科 大 学 学 报 　 　 32卷