全 文 :收稿日期:2008-07-10
基金项目:国家自然科学基金项目(30400307);辽宁省教育厅基金项目(2004F084,20060787)
作者简介:孙红梅(1972-),女,沈阳农业大学副教授,从事花卉栽培生理与生物技术研究。
锯木屑和草炭基质及 GA3和 IBA植物生长调节剂
对兰州百合鳞片扦插繁殖的影响
孙红梅,陶文玲,王春夏,李天来
(沈阳农业大学 园艺学院/辽宁省设施园艺重点实验室,沈阳 110161)
摘要:以兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)为试材,研究了 GA3和 IBA 两种植物生长调节剂以及锯木屑和草炭两种培养基质对
鳞片扦插繁殖的影响。 结果表明:锯木屑埋片处理的繁殖系数最高(2.4),锯木屑扦插处理可获得较大的小鳞茎(Φ=5.24mm),并有利
于生根。 植物生长调节剂种类的影响效力高于处理浓度和处理时间。 IBA 显著提高了小鳞茎数量,GA3与 IBA 等体积混合溶液显
著促进了小鳞茎生根,但使 IBA 促进小鳞茎增殖的效应减弱。 对 IBA 的不同浓度而言,培养前期(30d, 45d),低浓度(100 mg·L-1)
处理的繁殖系数较高(3.85, 4.06);而培养后期(60d, 75d),高浓度(200 mg·L-1)处理的繁殖系数较高(3.81, 3.76)。 GA3处理有利于
获得个体较大的小鳞茎。 各处理的小鳞茎萌发率均很低,小鳞茎休眠的生理机制有待于进一步研究。
关键词:兰州百合;鳞片扦插;植物生长调节剂;基质
中图分类号:S682.2 文献标识码: A 文章编号: 1000-1700(2009)02-0160-05
Effects of Sawdust, Peat, GA3 and IBA on Scale Cutting Propagation in
Lilium davidii var. unicolor
SUN Hong-mei, TAO Wen-ling, WANG Chun-xia, LI Tian-lai
(College of Horticulture, Shenyang Agricultural University/Key Laboratory of Protected Horticulture of Liaoning Province,Shenyang 110161, China)
Abstract: In order to improve the techniques of scale cutting in Lilium , the effects of GA3, IBA and two media on Lilium
davidii var. unicolor were studied. The results indicated that the propagation coefficient of mother scales of imbedded in sawdust
was the highest(2.4), but cutting in sawdust produced his bulblets(Φ=5.24mm) and more roots. The effect of growth regulator type
was much higher than that of the concentrations and the duration of treatments. IBA increased the number of bulblets
significantly, and the mixture of equal volumes of GA3 and IBA contributed to root genaration of bulblets, however, IBA reduced
the on bulblets propagation. Lower IBA concentration (100 mg·L-1) made higher propagation coefficient (3.85, 4.06) during the
early culture periods (30d, 45d), but higher concentration had higher propagation coefficient (3.81, 3.76). GA3 was beneficial to
obtain the bigger bulblets. In this experiment, the germination rate of bulblets in all treatments was very low, and the
physiological mechanisms of bulblets dormancy need to be futther studied.
Key words: Lilium davidii var. unicolor; scale cutting; growth regulator; medium
鳞片繁殖是百合种球产业化生产的重要步骤,是目前国内外种球生产的重点和难题[1,2]。国内外对百合鳞片
繁殖的培养条件作了大量研究,有关植物生长调节剂对鳞片繁殖的影响结论尚不一致 [3-8]。 目前百合鳞片扦插
的主要研究对象集中在东方百合杂种系和亚洲百合杂种系百合上,而形成小鳞茎的生理状态难以控制是其中
的关键问题之一 [9]。 小鳞茎的形态发生起源于鳞片近轴面基部的薄壁细胞 [10],鉴于目前鳞片繁殖小鳞茎的生理
机制尚不清楚,尚未建立全面而系统的百合鳞片繁殖体系,本研究选择自然休眠期较长、鳞茎膨大速度较慢的
兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)为试材[11],研究锯木屑和草炭两种简易基质以及 GA3和 IBA 两种植物生长
调节剂对繁殖小鳞茎的影响,以期为优质百合种球的产业化生产提供技术依据,为深入研究小鳞茎的发育机
制奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料
试验于 2007 年 10 月至 2008 年 4 月在沈阳农业大学园艺科研基地进行。 供试兰州百合种球重为 (25.6±
沈阳农业大学学报,2009-04,40(2):160-164
Journal of Shenyang Agricultural University,2009-04,40(2):160-164
第 2期
图 1不同基质和培养方式对小鳞茎诱导的影响
Figure 1 Effects of media and cutting methods
on derivational bulblets
表 1 正交设计因素和水平
Table 1 Factors and levels of orthogonal design
处理编号
No. of treatment
1
2
3
4
5
6
7
8
9
A 植物生长调节剂
Growth regulator
GA3
GA3
GA3
IBA
IBA
IBA
GA3/IBA(1:1)
GA3/IBA(1:1)
GA3/IBA(1:1)
B 浓度/mg·L-1
Concentration
50
100
200
50
100
200
50
100
200
C 处理时间/h
Treatment duration
2
5
8
5
8
2
8
2
5
4.6)g,周径为(11.9±1.2)cm。 取健康鳞茎的外、中层无损伤饱满程度一致的鳞片,将鳞片沿基部小心地剥下,保护
基部不受损伤。 用 50%多菌灵可湿性粉剂 500倍溶液浸泡 30min,阴干后备用。 供试锯木屑和草炭基质用 500
倍多菌灵溶液消毒,试验过程中保持基质含水量为 60%~70%。
1.2 方法
1.2.1 锯木屑和草炭基质及传统扦插和埋片扦插对鳞片扦插繁殖的影响试验 2007 年 10 月至 2008 年 1 月在
日光温室内分别以锯木屑和草炭为基质,分别采用传统扦插和埋片扦插两种培养方式,设计锯木屑扦插、锯木
屑埋片、草炭扦插、草炭埋片 4个处理,每处理 100片鳞片,3次重复。 传统扦插法的鳞片间距为 3cm,将鳞片的
2/3 插入基质中;埋片扦插法在育苗盘底部先铺一层 2cm 厚的基质,将鳞片凹面朝上平放,然后覆盖 2cm 厚的
基质。 平均培养温度为 13℃,处理 30,55,80d 时,调查小鳞茎诱导率和繁殖系数,鳞片诱导率(%)=(产生小鳞茎
的鳞片数/调查鳞片总数)×100%;繁殖系数=小鳞茎总数/鳞片总数。处理 80d时,调查小鳞茎重量、直径、平均生
根数、鳞片腐烂率。 小鳞茎平均生根数=生根总数/小鳞茎总数;鳞片腐烂率(%)=(腐烂鳞片数/处理鳞片总数)×
100%。
1.2.2 GA3和 IBA对鳞片扦插繁殖的影响试验 选用 GA3、IBA 以及两者的等体积混合溶液作为处理溶液,处
理方式为浸泡。根据 L9(34)正交表,进行试剂种类、浓度和处理时间三因素三水平的试验设计(表 1),每处理 30
片鳞片,3次重复。以同体积清水浸泡鳞片 2,5,8h的处理作为对照,分别记作 CK1、CK2和 CK3。处理后以锯木
屑作为基质,将鳞片与基质充分混合后装入事先打孔的塑料袋,在平均室温 16℃下保湿培养,80d 后统计小鳞
茎的繁殖情况。
2008 年 2~4 月,根据上述试验结果,选择 4 个较
优的处理,即处理Ⅰ(100 mg·L-1 IBA)、处理Ⅱ(200 mg·
L-1 IBA)、处理Ⅲ(50 mg·L-1 GA3 )和处理Ⅳ(100 mg·L-1
GA3 ),以清水处理为对照(CK),浸泡鳞片时间均为 2h。
每处理取 115 片鳞片,3 次重复, 以锯木屑作为基质,
鳞片与基质充分混合后装入事先打孔的塑料袋, 在平
均室温为 20℃下培养。处理 30d开始,每隔 15d调查繁
殖系数、 小鳞茎直径, 直至 75d 统一调查小鳞茎萌发
率、平均生根数和鳞片腐烂情况,小鳞茎萌发率(%)=
长叶小鳞茎数/小鳞茎总数×100%。 所得数据利用 DPS
数据处理软件做方差分析和差异显著性分析。
2 结果与分析
2.1 锯木屑和草炭基质及传统扦插和埋片扦插处理对兰州百合鳞片扦插繁殖的影响
2.1.1 对小鳞茎诱导的影响 处理 30d 时,草炭埋片处理的鳞片诱导率略低,其他 3 个处理均为 100%,培养
55d 时,草炭埋片处理的鳞片诱导率也达 100%。 由图 1
可知,处理 30d 时,锯木屑扦插处理的繁殖系数显著高
于其他处理;培养中后期,即处理 55,80d,锯木屑埋片处
理的繁殖系数最大(1.9,2.4);整个培养过程中,草炭埋
片处理的繁殖系数最低,均低于 1.8。 可见,以锯木屑为
基质培养小鳞茎的效果好于以草炭为基质,其中锯木屑
埋片处理是有利于获得更多小鳞茎的处理方式。
2.1.2 对小鳞茎大小、生根及鳞片腐烂率的影响 鳞片处
理 80d 时,扦插处理形成的小鳞茎重量明显高于埋片处
理形成的小鳞茎(表 2),其中草炭埋片处理的小鳞茎重
量显著低于其他处理。 锯木屑埋片处理产生的小鳞茎直
径最大(Φ=5.32mm),但与锯木屑扦插处理差异不显著。
孙红梅等:锯木屑和草炭基质及 GA3和 IBA植物生长调节剂对兰州百合鳞片扦插繁殖的影响 161· ·
第 40卷沈 阳 农 业 大 学 学 报
表 2 小鳞茎大小与生根数及鳞片腐烂率的比较
Table 2 The size of bulblets and root numbers and percentage of rotten scales among different treatments
处理
Treatment
锯木屑扦插
Cutting in sawdust
锯木屑埋片
Imbedded in sawdust
草炭扦插
Cutting in peat
草炭埋片
Imbedded in peat
小鳞茎重/mg
Weight of bulblets
134.72±2.81aA
101.76±2.02aA
126.42±2.44aA
95.34±1.82bA
小鳞茎直径/mm
Diameter of bulblets
5.24±0.29aA
5.32±0.37aA
5.11±0.09aA
4.96±0.43aA
≥5mm 的小鳞茎 /%
Percentage of bulb lets≥5mm
65.20±0.12aA
53.90±0.31cC
59.60±0.29bB
51.50±0.28dD
平均根数/条
Amount of roots
7.50±0.09aA
5.90±0.14bB
5.00±0.12cC
4.60±0.17cC
鳞片腐烂率/%
Percentage of rotten scales
2.50±2.50bAB
0.75±0.75bB
7.50±4.80bAB
30.00±1.12aA
注:表中数据为平均值±标准误,大写字母在 0.01 水平上显著相关, 小写字母在 0.05 水平上显著相关, 下同。
Note: Data in the table are mean ± SE, capital letter means significance at p<0.01, small letter means significantce at p<0.05, the same as below.
表 3 试验结果的方差分析
Table 3 Variance analysis of experiment results
变异来源
Variation source
区组 Block
植物生长调节剂 Growth regulators
浓度 Concentration
处理时间 Treatment duration
F 值 F value
鳞片诱导率
Percentage of scale inducement
1.73
197.50**
36.75**
46.25**
繁殖系数
Propagation coefficient
1.05
13.73**
2.49
0.83
生根数
No. of roots
2.35
79.45**
12.01**
5.53*
F0.05
3.55
F0.01
6.01
注:** 和 * 分别表示 0.01 和 0.05 水平的差异显著性。
Note: **and﹡indicate the significance of p<0.01 and p<0.05, respectively.
表 4 不同植物生长调节剂对繁殖系数、小鳞茎直径及生根数的影响
Table 4 Effects of different growth regulators on propagation coefficient and diameter of small bulblets and
number of roots
处理
Treatment
1
2
3
4
5
6
7
8
9
CK1
CK2
CK3
鳞片诱导率/%
Percentage of scale inducement
93.33±0.04aA
90.00±0.01aA
83.33±0.04abA
83.33±0.04abA
86.67±0.04aA
86.67±0.04aA
66.67±0.04bAB
80.00±0.01abA
40.00±0.01cB
86.67±0.04aA
90.00±0.01aA
86.67±0.02aA
繁殖系数
Propagation coefficient
1.43±0.04cdeABCD
1.50±0.20bcdABCD
1.13±0.22deCD
2.07±0.62abcABC
2.30±0.20aA
2.13±0.22abAB
1.37±0.18deBCD
1.57±0.42bcdABCD
0.83±0.18eD
1.43±0.31cdeABCD
1.47±0.16cdeABCD
1.63±0.18bcdABCD
小鳞茎直径/mm
Diameter of bulblets
5.19±0.07bB
5.76±0.09aA
5.14±0.03bcBC
4.24±0.06dD
3.15±0.02gG
2.89±0.06hH
3.94±0.03fF
3.93±0.04fF
2.51±0.03iI
5.08±0.06cC
4.10±0.06eE
4.18±0.09dDE
生根数/条
No. of roots
4.34±0.34eD
4.03±0.38eD
3.40±0.21eD
10.0±0.79dC
11.74±0.62cdC
13.32±1.84bcBC
15.97±1.70bB
9.70±1.38dC
23.05±1.93aA
4.47±0.46eD
4.02±0.38eD
3.98±0.26eD
2.2 不同浓度 GA3和 IBA处理对兰州百合鳞片繁殖的影响
由表 3 可知,对于鳞片繁殖的效果,不同植物生长调节剂对小鳞茎发生率、繁殖系数和生根数的影响差异
达到极显著水平(p<0.01);处理浓度和处理时间虽然对鳞茎发生率和生根数的影响也达到显著水平,但对繁殖
系数和平均级数的影响不显著(p<0.05)。 进一步多重比较(表 4)可知,单一植物生长调节剂的不同浓度处理以
及 3 个不同浸泡时间的对照处理,均获得了较高的鳞茎发生率;而 GA3与 IBA 等体积混合溶液处理导致鳞茎
发生率显著降低,尤其是较长时间浸泡鳞片的效果更为显著。 从繁殖系数和平均级数可以看出,IBA 处理显著
另外,锯木屑扦插处理显著促进了鳞茎生根。 草炭埋片处理的鳞片腐烂率达 30%,草炭扦插与锯木屑扦插处理
的鳞片腐烂率较低,锯木屑埋片处理的鳞片腐烂情况最低(0.75%)。 因此,从小鳞茎大小、生根及鳞片腐烂率综
合情况来看,锯木屑扦插为较优处理。
162· ·
第 2期
表 5 不同处理小鳞茎繁殖系数及直径的比较
Table 5 Comparison of different treatments on propagation coefficient and diameter of bulblets
处理
Treatments
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
CK
繁殖系数 Propagation coefficient 小鳞茎直径 Diameter of bulblets/mm
30d
3.85±0.07aA
3.55±0.25aA
2.55±0.31bB
2.25±0.09bcB
2.2±0.11cB
45d
4.06±0.15aA
3.26±0.14bB
2.49±0.11cC
2.11±0.14cC
2.36±0.07cC
60d
2.88±0.31abA
3.81±0.31aA
2.70±0.44abA
2.74±0.76abA
2.13±0.38bA
75d
3.00±0.09bB
3.76±0.12aA
1.90±0.07dD
2.32±0.07cCD
2.49±0.15cC
30d
2.90±0.13bcAB
2.31±0.06cB
3.26±0.04abAB
3.85±0.05aA
3.71±0.06aA
45d
4.76±0.17bcAB
4.52±0.05cB
5.17±0.06abAB
5.52±0.08aA
5.14±0.04abAB
60d
5.43±0.06cC
5.32±0.05cC
7.19±0.07aA
7.07±0.09aA
6.35±0.04bB
75d
6.02±0.18cCD
5.99±0.06cD
7.58±0.10abAB
7.93±0.05aA
6.96±0.08bBC
提高了小鳞茎的数量,但与 GA3的混合溶液导致 IBA 的效应减弱,与单一 GA3处理以及清水处理的效果无明
显差异。 另外,IBA 处理显著促进了鳞茎生根,与 GA3混合溶液的效果更为显著。 由表 3可知,GA3处理获得了
较大的小鳞茎,其中以处理 2(100mg·L-1GA3处理 5h)的效果最为显著。 试验中鳞片无腐烂现象,产生的小鳞茎
全部处于休眠状态。
2.3 优化激素组合处理对鳞片繁殖的影响
2.3.1 对小鳞茎繁殖系数及小鳞茎直径的影响 鳞片培养 30d 后,各个处理的鳞片诱导率均为 100%。 由表 5
可知,与 GA3处理以及对照相比,IBA 处理显著提高了小鳞茎数量。 培养前期(处理后 30d 和 45d),100mg·L-1
IBA 处理的繁殖系数较高;而培养后期(处理后 60d和 75d),200 mg·L-1IBA 处理的繁殖系数较高。 随着培养天
数增加,小鳞茎直径有所增加,且处理Ⅰ、Ⅱ显著低于 CK,处理Ⅲ、Ⅳ显著高于 CK,可见,GA3处理有利于获得
个体较大的小鳞茎,且不同浓度处理的差异不显著。
2.3.2 对小鳞茎萌发、生根和鳞片腐烂的影响 各处理
的小鳞茎萌发率均很低, 处理Ⅰ为 2.64%, 处理Ⅱ为
2.25%,处理Ⅲ、Ⅳ和 CK 的萌发率均为 0,影响小鳞茎
萌发的环境因素以及小鳞茎休眠的生理机制有待于
进一步研究。IBA 促进了小鳞茎生根,随着培养天数增
加,小鳞茎的生根数量也有所增加(表 6)。 处理 75d
时,处理 I的小鳞茎生根数最大,为 4.76条。 由图 2可
知,各处理的鳞片腐烂率均在 10%以下,其中处理Ⅱ
的鳞片腐烂率最高,为 8.88%。
3 结论与讨论
试验结果表明, 锯木屑埋片处理的繁殖系数最
高,达 2.4,锯木屑扦插处理有利于生根,同时还可获
得较大的小鳞茎(Φ=5.24mm)。 植物生长调节剂种类的
影响效力最大, 高于处理浓度和处理时间。 其中 IBA
显著地增加了小鳞茎数量,GA3与 IBA 等体积混合溶
液显著地促进了小鳞茎生根,但使 IBA 促进小鳞茎增
殖的效应减弱。 对于 IBA 的不同浓度而言,培养前期
(30d,45d),低浓度(100mg·L-1)处理的繁殖系数较高
(3.85,4.06);而培养后期(60d,75d),高浓度(200mg·L-1)处理的繁殖系数较高(3.81,3.76)。 GA3处理有利于获得个
体较大的小鳞茎,不同浓度间差异不显著。 试验中各处理繁殖的小鳞茎萌发率均很低。
研究发现,草炭不适合单独作为百合鳞片扦插的基质,这与杨贺等[12]对基质影响百合埋片繁殖的研究结果
相符,草炭导致鳞片腐烂率很高,繁殖系数下降,可能与其保水性强、透气性差有关,这也与赵宇对青岛百合扦
插繁殖[13]的研究结果基本一致。 但齐鑫等[5]对新铁炮百合研究表明繁殖系数及扦插成活率方面,草炭土均大于
等体积混和的草炭土和河沙基质。 因此,不同种类百合的适宜扦插基质有所不同 [12]。 锯木屑埋片处理最有利于
图 2不同激素处理的鳞片腐烂率
Figure 2 Effects of different treatments on
percentage of rotten scales
表 6 不同激素处理小鳞茎生根数(条)比较
Table 6 Effects of different treatments on number of roots
处理
Treatment
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
CK
30d
3.47±0.08aA
4.27±0.76aA
1.20±0.01bB
1.22±0.04bB
1.29±0.29bB
45d
3.14±0.11aA
3.27±0.05aA
2.43±0.08bB
2.44±0.20bB
2.40±0.06bB
60d
4.77±0.68aA
4.08±0.14bB
3.15±0.10bcB
2.92±0.26cB
3.21±0.12bcB
75d
4.76±0.53aA
4.60±0.19abA
3.96±0.11abcA
3.71±0.25bcA
3.56±0.17cA
鳞
片
腐
烂
率
/%
Pe
rc
en
ta
ge
of
ro
tte
n
sc
al
es
孙红梅等:锯木屑和草炭基质及 GA3和 IBA植物生长调节剂对兰州百合鳞片扦插繁殖的影响 163· ·
第 40卷沈 阳 农 业 大 学 学 报
提高繁殖系数和生根数量,且操作简单,易于获得,成本低,可在生产中广泛推广。 本试验研究表明,植物生长
调节剂种类对形成小鳞茎的影响效力最大。桑林等研究也表明不同植物生长调节剂对小鳞茎形成影响不同[14],
IBA处理显著提高了小鳞茎的数量,并促进了鳞茎生根,但其效果与鳞片培养温度有较大关系。 本试验中,16℃
培养的鳞片繁殖系数最高为 2.4,而将培养温度提高到 20℃,绝大多数处理的繁殖系数在 2.0 以上,最高可达
4.0。因此,保证适宜的培养温度是生产中应注意的问题。无病毒原种扩繁阶段,由于原始材料成本较高,提高繁殖
系数应作为主要目标,可用锯木屑为基质埋片处理,培养前 200mg·L-1 IBA浸泡鳞片 2h可显著提高繁殖系数和
生根数量;而商品种球繁育阶段,繁殖材料相对充足,提高小鳞茎的个体质量是主要目标,使用 50~100mg·L-1GA3
处理鳞片 2h 可获得显著效果。 鳞片繁殖过程中,小鳞茎的生理状态难以控制是目前生产中的难题,哪些条件
可能导致小鳞茎萌发、小鳞茎萌发对于鳞茎的进一步发育有利还是有弊目前均无定论。宁云芬等[15]对新铁炮百
合研究表明,如果鳞片上形成 2个以上小鳞茎,则其个体较小,萌叶能力较弱。 本试验中,各处理产生的小鳞茎
萌发率均很低,小鳞茎几乎全部处于休眠状态,这可能与形成小鳞茎的数量及兰州百合本身休眠期长有关,本
课题组将深入研究。 两种植物生长调节剂处理的结果表明,IBA显著提高了小鳞茎数量并促进了鳞茎生根,这
与桑林等[14]的研究结果基本一致;与 GA3的混合溶液导致 IBA提高繁殖系数的效应减弱,却使其促进生根的效
果更为显著,其生理机制有待进一步研究。通过优化试验处理研究发现,IBA的不同浓度处理,在鳞片培养的不
同阶段促进小鳞茎增殖的效果不同,前期低浓度处理繁殖系数较高,而后期高浓度处理的繁殖系数较高,不同
浓度的 IBA如何影响鳞片的碳水化合物等贮藏物质的代谢有待进一步探讨。
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[责任编辑 马迎杰]
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