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毛瓣绿绒蒿的化学成分研究



全 文 :• 实验研究 • 2472011 年 7 月第 9 卷 第 21 期 中 国 医 药 指 南
毛瓣绿绒蒿的化学成分研究
达娃卓玛1,3 格桑索朗3 扎西次仁3 杨 雁3 吴海锋2 朱华结4 张晓峰2 丁立生1
(1中国科学院成都生物研究所,四川 成都 610041;2 中国科学院西北高原生物研究所,青海 西宁 810001;
3 西藏自治区食品药品检验所,西藏 拉萨 850000;4 中国科学院昆明植物研究所,云南 昆明 650204)
【摘要】目的 对西藏产毛瓣绿绒蒿(Meconopsis torquata Prain)全草的化学成分进行分离鉴定。方法 采用硅胶柱色谱法进行分离纯化,通
过波谱解析进行结构鉴定。结果 从该藏药材乙醇提取物中分离纯化出 5 个化合物,其结构分别鉴定为芹菜素、木樨草素、5,7- 二羟基色
原酮、5,7,4′ - 三羟基二氢黄酮和乌苏酸。结论 本实验为首次对该植物的化学成分进行研究,其中化合物 4 系首次从该属植物中发现。
【关键词】毛瓣绿绒蒿;罂粟科;化学成分;分离鉴定
中图分类号:R917 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2011)21-0247-02
罂粟科绿绒蒿属植物共49种。主要分布于东亚中国境内喜马拉雅
地区的有38种,集中分布于青藏高原地区。常用传统藏药“欧贝”系
多种绿绒蒿的总称,其性凉,味甘、涩,具有清热解毒、利尿、消
炎、止痛的功效,用于治疗肺炎、肝炎、头痛、水肿、皮肤病及肝与
肺的热症[1]。作为“欧贝”使用的五脉绿绒蒿等几种绿绒蒿属植物的
化学成分已有研究[2-12],但还未见毛瓣绿绒蒿的化学成分报道。我们
首次从西藏产毛瓣绿绒蒿的乙醇提取物中分离鉴定出5个化合物,其
中化合物4系首次从该属植物中发现。
1 仪器与材料
Bruker AV-600核磁共振仪(TMS为内标);Finnigan LCQDECA
质谱仪;薄层色谱硅胶(GF254)和柱色谱硅胶(160~200目,
200~300目)均为青岛海洋化工厂产品。毛瓣绿绒蒿全草采自西藏日
喀则亚东。凭证标本经西藏自治区食品药品检验所格桑索朗主任药师
鉴定为毛瓣绿绒蒿Meconopsis torquata Prain.。
2 提取和分离
取毛瓣绿绒蒿全草15kg,粉碎后用90%乙醇室温提取3次,合并滤
液并减压浓缩之后依次用石油醚和乙酸乙酯。乙酸乙酯萃取部分 146
g 上MCI树脂色谱柱除去色素,所得38 g浸膏经硅胶柱色谱(石油醚-
丙酮梯度洗脱)分离得到化合物1(100mg)和2(200mg)。其余不
纯部分以TLC检测为指导,合并成分相似组分,进一步反复硅胶柱色
谱分离,分别得化合物3(10mg)和4(15mg)。石油醚萃取部分 106
g 上MCI树脂色谱柱除去色素得26 g浸膏,上硅胶柱色谱(石油醚-丙
酮梯度洗脱)分离得到化合物5(10 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 黄色粉末(甲醇)。ESI-MS给出准分子离子峰m/z
269 [MňH]-,结合NMR数据推测分子式为C15H10O5。 1H-NMR
(DMSO-d6) δ: 12.95 (1H,s,5-OH),10.87 (1H,s,7-OH),
10.38 (1H,s,4′-OH),7.92 (2H,d,J = 8.7 Hz,H-2′,
6′),6.93 (2H,d,J = 8.7 Hz,H-3′,5′),6.77 (1H,s,
H-3),6.49 (1H,d,J = 1.9 Hz,H-8),6.20 (1H,d,J =1.9 Hz,
H-6)。以上数据与芹菜素 (apigenin) 的文献值相符[4]。
化合物 2 黄色粉末(甲醇)。ESI-MS给出准分子离子峰m/z
285 [MňH]-,结合NMR数据确定分子式为C15H 10O6。 1H-NMR
(DMSO-d6) δ : 12.97 ( 1H,s,5-OH),7.42 ( 1H,bra,
H-2′),7.40 (1H,bra,H-6′),6.89 (1H,d,J = 7.8 Hz,
H-5′),6.66 (1H,s,H-3),6.45 (1H,bra,H-8),6.19
(1H,bra,H-6)。 13C-NMR (DMSO-d6) δ: 182.1 (C-4),
164.7 (C-7),164.4 (C-2),161.9 (C-5),157.8 (C-9),
150.2 (C-4′),146.2(C-3′),121.9 (C-1′),119.4
(C-6′),116.5 (C-5′),113.8 (C-2′),104.1 (C-10),
103.3 (C-3),99.3 (C-6),94.3 (C-8)。以上数据与木樨草素
(luteolin) 的文献值相符[6]。
化合物 3 白色针状结晶(丙酮)。ESI-MS给出准分子离子峰
m/z 177 [MňH]-,结合NMR数据确定分子式为C9H6O4。 1H-NMR
(DMSO-d6) δ: 12.67 (1H,s,5-OH),10.85 (1H,s,7-OH),
8.17 (1H,d,J = 6.0 Hz,H-2),6.36 (1H,d,J = 1.9 Hz,H-8),
6.26 (1H,d,J = 6.0 Hz,H-3),6.20 (1H,d,J = 1.9 Hz,H-6)。
13C-NMR (DMSO-d6) δ: 181.7 (C-4),164.8 (C-7),162.1
(C-5),158.3 (C-9),157.9 (C-2),111.0 (C-3),105.4
(C-10),99.5 (C-6),94.4 (C-8)。以上数据与5,7-二羟基色原
酮 (5,7- dihydroxychromone) 的文献值吻合[7]。
化合物4白色粉末(丙酮)。ESI-MS给出准分子离子峰m/z
271 [MňH]-,结合NMR数据确定分子式为C15H12O5。 1H-NMR
(CD3OD) δ: 7.30 (2H,d,J = 8.5 Hz,H-2′,6′),6.81
(2H,d,J = 8.5 Hz,H-3′,5′),5.90 (1H,d,J = 2.0 Hz,
H-8),5.88 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),5.32 (1H,dd,J = 3.0,
12.6 Hz,C2a-H),3.10 (1H,dd,J =12.6,17.2 Hz,C
3a-H),
2.70 (1H,dd,J = 3.0,17.2 Hz,C
3e-H)。13C-NMR (CD3OD)
δ: 196.4 (C-4),167.0 (C-7),164.0 (C-5),163.5 (C-9),
157.6 (C-4′),129.7 (C-1′),127.6 (C-2′,6′),115.0
(C- H-3′,5′),102.0 (C-10),95.7 (C-6),94.8 (C-8),
79.1 (C-2),42.6 (C-3)。 以上数据与5,7,4′-三羟基二氢黄酮
(5,7,4′-trihydroxyflavonone) 的文献值相符[13]。
化合物5 白色粉末(甲醇)。1H-NMR (C5D5N) 谱给出烯质
子信号5.49 (1H,m,H-12) 且为环内双键;叔碳氢信号为3.45
(1H,m,H-3),2.63 (1H,d,J = 11.4 Hz,H-18);7个角甲基
信号为:5个甲基单峰 (1.24,1.22,1.06,1.02,0.88) 和两个甲
基双峰0.99 (3H,d,J = 6.6 Hz),0.95 (3H,d,J =5.4 Hz)。
13C-NMR (C5D5N) δ: 37.1 (C-1),27.8 (C-2),77.9 (C-3),
39.3 (C-4),55.6 (C-5),18.6 (C-6),33.4 (C-7),38.9
基金项目:国家科技支撑计划(2007BAI31B02)及中国科学院-西
藏自治区科技合作项目(YZ-06-01)
*通讯作者:E-mail: lsding@cib.ac.cn
DOI:10.15912/j.cnki.gocm.2011.21.039
248 • 实验研究 • July 2011, Vol.9, No.21 Guide of China Medicine
(C-8),47.8 (C-9),37.2 (C-10),23.7 (C-11),125.4
(C-12),139.1 (C-13),42.3 (C-14),28.5 (C-15),
24.7 (C-16),47.8 (C-17),53.3 (C-18),39.8 (C-19),
39.2 (C-20),30.9 (C-21),37.2 (C-22),28.6 (C-23),
15.4 (C-24),16.3 (C-25),17.3 (C-26),23.4 (C-27),
179.6 (C-28),17.2 (C-29),21.2 (C-30)。以上数据与乌苏酸
(ursolic acid) 的文献值相符[10]。通过co-TLC 与乌苏酸标准品对照,
Rf值一致。
参考文献
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蛞蝓冻干粉对急性支气管炎的治疗作用
林广庆1 严鹏科2* 罗其富2 谢金魁2*
(1 广州医学院第三附属医院药剂科,广东 广州 510150;2 南华大学药理研究所,湖南 衡阳 421000)
【摘要】目的 研究蛞蝓冻干粉对急性支气管炎的治疗作用。方法 用二氧化硫(SO2)刺激法建立小鼠急性支气管炎模型,观察蛞蝓冻干粉
的镇咳作用;采用气管段酚红法观察蛞蝓冻干粉的祛痰作用;采用兔离体气管纤毛粘液流运动法观察蛞蝓冻干粉对家兔气管纤毛运动的影
响。结果 蛞蝓冻干粉能明显延长急性支气管炎模型小鼠的咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数(P < 0.05);使急性支气管炎小鼠的酚红排出量明
显增加(P < 0.05),蛞蝓冻干粉 300mg/kg 给药,与氯化铵具同样效果。中、高剂量的蛞蝓冻干粉能明显促进兔离体气管纤毛运动的活跃
程度,加快纤毛粘液运送速度(P < 0.05)。结论 蛞蝓冻干粉对急性支气管炎有较强的镇咳和祛痰作用。
【关键词】蛞蝓冻干粉;急性支气管炎
中图分类号:R562.2 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2011)21-0248-03
蛞蝓(Limax)为有肺的软体动物,属腹足类腹足纲蛞蝓科,我
国各地有产。因其体表布满粘液,形似蜗牛而无壳,故又俗称“黏
虫、鼻涕虫”。作为传统中药蛞蝓,“味咸寒,人肺、肝、大肠
经。无毒。功能清热祛风,消肿解毒,破瘀通经。主治中风,筋脉
拘挛,惊痫,喘息,喉痹,咽肿,痈肿,丹毒,经闭,症瘕,蜈蚣
咬伤等症”。
蛞蝓冻干粉是以广西百色地区出产的足襞蛞蝓新鲜全虫,经匀
浆、冻干后制备的胶囊剂,属中药2类新药。本文旨在按《中药新药
研究指南》和《药物研究技术指导原则》开展蛞蝓冻干粉治疗急性支
气管炎的临床前药效学研究,探讨蛞蝓冻干粉在镇咳、化痰方面的作
用,为开发新型具有治疗急性支气管炎等肺系疾病的临床用药提供实
验依据。
1 实验材料
1.1 药品
蛞蝓冻干粉:由南华大学药物药理研究所研制提供,预期人临
床日用量为700mg,批号:20050012。原料样品为淡黄色粉末,气微
腥,味微苦腥。实验时药物用0.9%生理盐水溶液配制,置冰箱中冷藏
保存,临用时摇匀。
实验动物的高剂量按体重折算为成人临床日用量的3倍,高、中、低
剂量以3为等比递减,小鼠高、中、低剂量分别为300、100、33mg/kg,
给药浓度分别为30、10、3.3mg/mL,给药体积为10mL/kg;家兔高、
中、低剂量分别为108、36、12mg/kg,给药浓度分别为10.8、3.6、
1.2mg/mL,给药体积为10mL/kg。
1.2 试剂
氯化铵(北京制药厂生产,批号021018);苯酚红(北京化工厂
生产,批号980820);碳酸氢钠(北京化工厂生产,批号031012);
二氧化硫(购于北京利科药物公司);氯化乙酰胆碱(上海国药集团
化学试剂有限公司,批号040910)。
1.3 实验对象与环境
昆明种小鼠,雌雄各半,体重18~22g。由湖南农业大学动物科技
学院实验动物中心提供,合格证号:SCXK (湘):2003-0003。
新西兰白兔,清洁级。体重1.8~2.2kg,雌雄兼用,由湖南农业
大学动物科技学院实验动物中心提供,合格证号:SCXK (湘):
2003-0003。
动物置于符合中国实验动物质量国家清洁级标准的实验室中饲
基金项目:广州市科技攻关重点项目(No.2003A30904)资助
*通讯作者:E-mail:yanpk@tom.com