全 文 ： ·610· Chin JMAP, 2013 June, Vol.30 No.6 中国现代应用药学 2013年 6月第 30卷第 6期
蒙药蓝盆花 HPLC指纹图谱研究

白玉霞 1，通拉嘎 2(内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028300)

摘要：目的 建立蒙药蓝盆花的 HPLC 指纹图谱，为该药材质量的科学评价和有效控制提供可靠方法。方法 采用
Hypersil-ODS柱( 4.6 mm×300 mm, 5 µm)；流动相为 0.1%磷酸水(A)-乙腈(B)，梯度洗脱；流速为 1.0 mL·min1；检测波长
254 nm；柱温：30 ℃，进样量 10 µL。结果 建立了不同产地蓝盆花的 HPLC指纹图谱，标定了 10个共有峰，计算了相
似度，方法学考察的各项参数符合有关规定。结论 该分析方法准确可靠，重复性好，为更好地控制蒙药蓝盆花内在质
量提供科学依据。
关键词：蒙药；蓝盆花；高效液相色谱法；指纹图谱
中图分类号：R965.1 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2013)06-0610-04

HPLC Fingerprint of the Flos of Scabiosa Comosa Fisch

BAI Yuxia1, TONG Laga2(Collage of Mongolian Medicine and Pharmacy, Inner Mongolia University for the Nationalities,
Tongliao 028300, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To establish HPLC fingerprints of Mongolian medicine of the flos of Scabiosa comosa Fisch.
METHODS Hypersil-ODS column(4.6 mm×300 mm, 5 μm) was adopted, gradient elution was applied with mobile phase A
(0.1% phosphoric acid solution) and mobile phase B(acetonitrile). The flow rate was 1.0 mL·min1, the detective wavelength was
254 nm, the column temperature was 30 ℃ and injection volume was 10 µL. RESULTS HPLC fingerprints of different source
of the flos of Scabiosa comosa Fisch were established. Ten peaks were observed on the HPLC fingerprints and the semblance
was calculated. The results of methodological study met the technical requirements for fingerprint. CONCLUSION This
method is accurate, reproducible and provides a scientific basis for quality evaluation of the flos of Scabiosa comosa Fisch.
KEY WORDS: Mongolian medicine; the flos of Scabiosa comosa Fisch; HPLC; fingerprint


基金项目：内蒙古科技计划重大项目(nmkjjhzd201015)
作者简介：白玉霞，女，博士，教授，硕导 Tel: (0475)8314242 E-mail: baiyuxia165@sina.com
蒙药蓝盆花(又称蒙古山萝卜花)为川续断科
植物窄叶蓝盆花(Scabiosa comosa Fisch. ex Roem.
et Schult)和华北蓝盆花 (Scabiosa tschilliensis
Gurnning)的干燥花序。蒙药名：套森-套日麻、胡
和-乌达巴拉、尼拉-乌达巴拉[1]。异名：乌赫日音
-叔鲁苏-乌布斯[2]、乌达巴拉-温布[3]，蒙古国蒙医
称布日特其其格[4]。《中华人民共和国卫生部药品
标准》[5]中规定 2者均作为正品药用。蓝盆花具有
甘、涩、钝、燥、腻、重、凉等性味，清热、清
“协日”之功能。用于肺热、肝热、咽喉热等病[6]。
本实验共收集了不同产地，不同批号 19个样品进
行分析，建立了蓝盆花药材的 HPLC 指纹图谱，
为其质量评价提供实验依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
LC-10AT 型高效液相色谱仪 (日本岛津 )；
AW120(Max=120 g，d=0.01 mg)型电子分析天平
(日本岛津)；KQ5200DB 型数控超声波清洗器(昆
山市超声仪器有限公司)；ZF-Ⅰ型紫外分析仪(上
海)；HH-S265型电热恒温水浴锅(上海)。
1.2 药品与试剂
对照品：木犀草素(中国食品药品检定所，供
含量测定用，批号：111520-201104)；乙腈(天津市
科密欧化学试剂有限公司，批号：20110416)；超
纯水；色谱甲醇(天津市科密欧化学试剂有限公司，
批号：20110830)；甲醇、乙醇、乙醚均为分析纯。
蓝盆花药材由内蒙古民族大学蒙医药学院吴
香杰教授鉴定为川续断科植物窄叶蓝盆花
(Scabiosa comosa Fisch. ex Roem. et Schult)和华北
蓝盆花(Scabiosa tschilliensis Gurnning)的干燥花
序，来源及收集时间见表 1。
1.3 处理软件
中国色谱指纹图谱相似度评价系统(国家药典
委员会，2004A版)。
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2013.06.013
中国现代应用药学 2013年 6月第 30卷第 6期 Chin JMAP, 2013 June, Vol.30 No.6 ·611·
表 1 样品来源及编号
Tab 1 Sample source and number
编号 产地 采集时间
Lph-1 辽宁阜新 2010.07
Lph-2 呼伦贝尔市新左旗乌布尔 2011.07
Lph-3 蒙古国 咖旗鼓热特 2011.07
Lph-4 赤峰罕山 2010.08
Lph-5 库伦蒙药厂提供 2011.07
Lph-6 蒙古国 特热勒吉 2011.08
Lph-7 牙克石 2011.08
Lph-8 呼伦贝尔红花尔自然保护区 2011.07
Lph-9 扎兰屯紫河镇 2011.07
Lph-10 巴林右旗 2010.08
Lph-11 锡盟苏尼特左旗 2011.08
Lph-12 扎鲁特旗 2011.07
Lph-13 锡盟阿巴嘎旗 2011.08
Lph-14 罕山(扎旗) 2011.08
Lph-15 阿旗 2011.07
Lph-16 罕山(扎旗) 2010.08
Lph-17 赤峰克旗 2011.07
Lph-18 通辽蒙药厂提供 2011.08
Lph-19 锡盟东乌旗 2010.08
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Hypersil-ODS( 4.6 mm×300 mm，
5 µm)；流动相 A 为 0.1%磷酸水，B 为乙腈，进
行梯度洗脱，洗脱程序：0.01~30 min，B 4%→10%，
30~50 min，B 10%→16%，50~100 min，B 16%→
18%，100~110 min，B 18%→7%，110~115 min，
B 7%→4%，115~120 min，B 4%→0。流速：1.0
mL·min1；检测波 254 nm；柱温：30 ℃；进样量
10 µL。
2.2 供试品溶液的制备
将蓝盆花去除杂物后粉碎，过 20目筛，称取
蓝盆花药材粉末 1 g，精密称定，置 50 mL锥形瓶
中，精密加入 20 mL 甲醇，称重，分别超声提取
30 min，恒重，补足减失的重量，过滤，取续滤液，
0.45 µm膜过滤，即得供试品并进样 10 µL。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取木犀草素对照品 3.30 mg，置于 100
mL量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即为
木犀草素对照品溶液(0.033 mg·mL1)。
2.4 测定方法
精密吸取对照品和供试品溶液各 10 µL，注入
液相色谱仪，记录色谱图。用“中药指纹图谱相
似度评价软件(2004A版)”进行数据处理比较得到
可全面反映多个色谱图特征的对照色谱图。以此
模式为基准，计算每个色谱图与之相比较的相似度。
2.5 方法学考察
2.5.1 仪器精密度考察 精密称取蓝盆花药材粉
末 1 g，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，吸取
10 µL，注入液相色谱仪，重复进样 5次，记录色
谱图，将得到的色谱图导入中药相似度评价系统
2004A 版，计算相似度。结果显示指纹图谱中的
共有峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD值均
<1.0%，表明仪器精密度良好。
2.5.2 重复性考察 精密称取蓝盆花药材粉末
1 g，按“2.2”项下方法制备供试品溶液 6份，吸
取 10 µL，注入液相色谱仪，进样 6次，记录色谱
图，将得到的色谱图导入中药相似度评价系统
2004A 版，计算相似度。结果显示，指纹图谱中
的共有峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD值
均<2.0%，表明该试验方法重复性良好。
2.5.3 稳定性考察 精密称取蓝盆花药材粉末
1 g，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，分别于
0，2，4，6，12，24 h吸取 10 µL，注入液相色谱
仪，重复进样 6 次，记录色谱图，将得到的色谱
图导入中药相似度评价系统 2004A 版，计算相似
度。结果显示，指纹图谱中的共有峰的相对保留
时间和相对峰面积的 RSD 值均<2.0%，表明供试
品溶液在 24 h内稳定性良好。
2.6 指纹图谱的建立
将 19批蓝盆花药材，按“2.2”项下方法制备
供试品溶液并测定，记录色谱图，采用 2004A 版
指纹图谱相似度评价系统进行数据分析，设定 S1
为参照图谱，将其它样品的色谱峰与参照图谱进
行自动匹配，以平均数法生成其对照图谱，并建
立蓝盆花药材指纹图谱叠加图，见图 1。

图 1 19批蓝盆花药材的 HPLC指纹图谱
Fig 1 HPLC fingerprints of 19 samples of the flos of
Scabiosa comosa Fisch
·612· Chin JMAP, 2013 June, Vol.30 No.6 中国现代应用药学 2013年 6月第 30卷第 6期
2.6.1 共有峰的标定 将 19批蓝盆花药材的指纹
图谱进行匹配，结果 1~10 峰在 19 批样品色谱图
中均出现，因此标定 10个峰为共有指纹峰，据此
建立蓝盆花药材的 HPLC指纹图谱，见图 2。相似
度分析结果见表 2。以 4号峰为参照峰，计算共有
峰相对保留时间和相对峰面积，结果见表 3和表 4。
表 2 19批蓝盆花药材相似度分析结果
Tab 2 The semblance of 19 different sources of the flos of Scabiosa comosa Fisch

表 3 蓝盆花药材指纹图谱共有峰相对保留时间
Tab 3 Relative retention time of common peaks from the flos of Scabiosa comosa Fisch
峰号
编号
1 2 3 4S 5 6 7 8 9 10
S1 0.52 0.60 0.75 1.00 1.21 1.40 1.40 1.50 1.51 1.60
S2 0.50 0.58 0.74 1.00 1.20 1.34 1.38 1.43 1.49 1.53
S3 0.51 0.60 0.70 1.00 1.25 1.43 1.46 1.53 1.60 1.64
S4 0.50 0.57 0.73 1.00 1.25 1.44 1.47 1.38 1.44 1.50
S5 0.51 0.60 0.74 1.00 1.25 1.43 1.47 1.53 1.60 1.65
S6 0.51 0.60 0.75 1.00 1.21 1.36 1.40 1.62 1.67 1.73
S7 0.51 0.60 0.74 1.00 1.23 1.41 1.44 1.50 1.56 1.61
S8 0.50 0.60 0.74 1.00 1.21 1.36 1.40 1.44 1.50 1.55
S9 0.51 0.60 0.74 1.00 1.20 1.35 1.38 1.43 1.50 1.54
S10 0.51 0.60 0.74 1.00 1.21 1.37 1.40 1.46 1.52 1.57
S11 0.51 0.60 0.74 1.00 1.21 1.36 1.40 1.45 1.50 1.55
S12 0.51 0.60 0.75 1.00 1.20 1.34 1.37 1.42 1.50 1.53
S13 0.54 0.62 0.75 1.00 1.30 1.41 1.44 1.51 1.56 1.62
S14 0.55 0.65 0.78 1.00 1.17 1.24 1.27 1.28 1.34 1.37
S15 0.47 0.56 0.71 1.00 1.18 1.30 1.32 1.37 1.43 1.47
S16 0.47 0.56 0.71 1.00 1.18 1.32 1.34 1.39 1.44 1.49
S17 0.54 0.62 0.76 1.00 1.24 1.41 1.43 1.51 1.56 1.61
S18 0.54 0.59 0.74 1.00 1.20 1.35 1.38 1.43 1.49 1.53
S19 0.53 0.60 0.76 1.00 1.22 1.39 1.43 1.48 1.52 1.58
平均值 0.51 0.60 0.74 1.00 1.22 1.37 1.40 1.46 1.51 1.56
RSD/% 4.00 3.48 2.53 0.00 2.54 3.67 3.67 5.13 4.82 5.01

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表 4 蓝盆花药材指纹图谱共有峰相对峰面积
Tab 4 Relative peak area comparison of common peaks from the flos of Scabiosa comosa Fisch
峰号 编号
1 2 3 4S 5 6 7 8 9 10
S1 0.50 2.00 1.00 1.00 1.17 0.25 1.01 1.22 3.10 6.30
S2 0.50 2.00 0.52 1.00 0.80 0.82 2.24 2.20 3.90 8.43
S3 0.50 2.10 0.03 1.00 1.76 0.70 1.30 4.50 7.40 9.40
S4 0.54 1.92 0.80 1.00 1.35 1.20 1.10 4.40 6.06 7.00
S5 0.20 1.20 0.50 1.00 1.17 1.44 1.22 1.20 3.40 5.00
S6 1.32 3.30 0.83 1.00 1.60 0.63 2.85 3.00 3.63 7.43
S7 0.32 2.12 0.14 1.00 0.93 0.38 1.90 0.88 1.60 2.73
S8 0.40 2.70 0.22 1.00 0.93 0.77 0.20 1.58 3.21 4.90
S9 0.32 0.18 0.22 1.00 1.35 0.45 1.95 1.66 4.12 8.18
S10 0.46 2.37 0.60 1.00 0.87 0.44 1.78 2.36 4.34 5.69
S11 0.35 1.60 0.51 1.00 1.14 1.10 1.42 1.37 3.12 5.06
S12 0.81 2.74 0.53 1.00 0.21 0.97 3.86 3.05 5.32 12.12
S13 0.27 1.05 0.48 1.00 0.77 1.16 1.15 1.49 2.81 3.68
S14 0.93 3.69 0.92 1.00 2.03 1.78 2.25 2.80 6.01 13.38
S15 0.15 1.35 0.42 1.00 1.05 0.84 0.60 0.84 2.30 4.25
S16 0.84 3.24 1.18 1.00 1.98 1.84 1.41 2.80 6.04 12.91
S17 1.66 16.36 4.10 1.00 15.19 12.42 15.00 14.76 31.59 46.57
S18 0.48 1.95 0.52 1.00 0.79 0.82 2.24 2.20 3.88 8.44
S19 0.45 2.34 0.69 1.00 1.45 1.65 1.79 1.79 4.56 8.35
平均值 0.58 2.85 0.75 1.00 1.92 1.56 2.38 2.85 5.60 9.46
RSD/% 66.38 118.35 115.55 0.00 168.69 171.08 132.79 107.81 115.40 100.14


图 2 蓝盆花指纹图谱
4S木犀草素对照品峰
Fig 2 The HPLC fingerprint of the flos of Scabiosa comosa
Fisch
4Sluteolin reference substance
3 讨论
3.1 供试品制备方法的考察
比较了甲醇，50%甲醇，75%甲醇，无水乙醇，
50%乙醇，75%乙醇，95%乙醇几种提取溶剂，超
声、索氏、回流 3 种提取方法，结果以甲醇超声
提取 30 min，所得提取液色谱峰多，峰面积较大，
提取方法简单。
3.2 色谱条件的考察
流动相的考察：比较了甲醇-磷酸水体系，乙
腈-磷酸水体系，结果表明，使用乙腈-0.1%磷酸水
体系洗脱条件下色谱峰分离效果较好。检测波长
的选择：考察了 220，254，242，340 nm 4个波长
对供试液进行测定。结果在 254 nm下各色谱峰均
有较好的紫外吸收，吸收强度高，色谱信息较丰
富，因此选择 254 nm波长作为检测波长。
3.3 相似度分析结果分析
19 批药材与共有模式对照指纹图谱的相似度
均在 0.9以上，说明不同产地蓝盆花药材化学组成
一致性较好，但同时也应看到各色谱峰的相对峰
面积还有一定的差异，因此应用过程中，蓝盆花
药材来源和产地均应该固定，这对保证产品质量
的稳定具有重要意义。
REFERENCES
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收稿日期：2012-09-18