全 文 ：不同提取方法对艾纳香挥发油化学组成的影响及其体外抗氧化活性
夏 嬿， 李 祥， 陈建伟*
(南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023)
收稿日期:2013-08-12
基金项目:江苏高校优势学科建设工程资助项目 (ysxk-2010)
作者简介:夏 嬿 (1989—) ，硕士生，主要从事中药品质评价研究工作。Tel:13645158167，E-mail:aisha2008@ sina． com
* 通信作者:陈建伟 (1955—) ，教授，主要从事中药鉴定、品质评价、中药资源及中药生物技术研究工作。Tel: (025)85811280，
E-mail:chenjw695@ 126． com
摘要:目的 研究不同提取方法制取艾纳香挥发油的化学组成的差异，以及挥发油与提取挥发油后的水提液的生物活
性。方法 采用水蒸气蒸馏装置和挥发油测定器两种提取方法，以干燥的艾纳香叶为原料分别提取挥发油，将所得的
挥发油进行气相色谱-质谱联用 (GC-MS)技术化学组成分析;采用 DPPH 法比较艾纳香挥发油与提取挥发油后的水
提液的体外抗氧化活性。结果 挥发油测定器制得艾纳香挥发油不论从挥发油得率还是 L-龙脑的量均优于水蒸气蒸馏
装置。从艾纳香挥发油 GC-MS离子流图谱中鉴定出 50 种成分，占挥发油总量的 90%以上，其中主成分均为 L-龙脑，
含有量分别达 76. 39%和 61. 57%;艾纳香挥发油质量浓度在 100 mg /mL 时，自由基清除率为 17. 42%，其水提液
IC50 = 1. 003 mg /mL。结论 制取艾纳香挥发油，采用挥发油测定器法优于水蒸气蒸馏法。艾纳香挥发油具有较弱的
抗氧化活性，而其水提液具有较好的抗氧化活性。
关键词:艾纳香;挥发油;GC-MS;L-龙脑;抗氧化
中图分类号:Ｒ284. 2 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2014)10-2221-04
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2014. 10. 052
艾纳香是菊科植物艾纳香 Blumea balsamifera (L．)DC．
的干燥全草［1］。别名:大风艾、冰片艾、家风艾、大毛药、
大艾等。艾纳香始载于宋·《开宝本草》，药用为艾纳香的
叶、枝、根;主治感冒、风湿关节炎、产后风痛、痛经;
外用治跌打损伤、疮疖痛肿、湿疹、皮炎。全草含挥发油，
主要成分为左旋龙脑［2］。现野生分布和栽培于贵州、云
南、广西。艾纳香亦为制取艾片的重要原料，主产区通常
采其鲜叶和嫩枝用传统的土制水蒸汽蒸馏法提取 “艾粉”
(为艾纳香制取冰片的粗级产品)，再经提炼后可制得精制
“艾片 (天然左旋冰片)”。
艾纳香挥发油大多为单萜类成分［3-5］，但用何种方法制
取艾纳香挥发油为好以及不同提取方法对所得挥发油成分
的影响尚未见报道，本实验采用 GC-MS 法比较了水蒸气蒸
馏法与挥发油提取器提得的艾纳香挥发油化学组成的差异，
并采用 DPPH法对艾纳香挥发油及提取挥发油后的水提液
进行了体外抗氧化活性研究，对评价艾纳香挥发油品质及
其废弃液的利用具有一定参考价值。
1 材料和仪器
1. 1 材料 艾纳香干燥的叶，采自贵州罗甸。由南京中医
药大学陈建伟教授鉴定为菊科植物艾纳香 B． balsamifera。
1. 2 仪器 Agilent 7693 /5975 气相色谱-质谱联用仪 (美
国 Agilent公司);水蒸气蒸馏装置、挥发油提取器 (符合
《中国药典》2010 年版有关标准［6］);电热套 (南通市通
州申通电热器厂) ;96 孔板酶标仪 (BIO-ＲAD680，美国
BIO-ＲAD公司)。
甲醇(AＲ，广东华光科技股份有限公司)，1，1-二苯-2-
苦基肼(2，2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH，购自于阿拉
丁，货号 1106195)，96孔板 (江苏海门博阳实验器材厂)。
2 方法和结果
2. 1 挥发油成分分析
2. 1. 1 挥发油提取 称取两份艾纳香叶 35 g，粉碎，过 40
目筛，分别放入两个 1 000 mL 圆底烧瓶中，加入 10 倍的
纯水，浸泡 1. 5 h，然后分别用水蒸气蒸馏装置和挥发油提
取器两种不同的方法加热提取 5 h，得到黄色挥发油。水蒸
气蒸馏装置更加贴近产地传统提取工艺［7］，比较传统水蒸
气蒸馏装置和挥发油提取装置所得到的艾纳香挥发油在得
率和成分上的区别。
2. 1. 2 GC-MS 分析
2. 1. 2. 1 色谱条件 HP-5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane
(30 m × 0. 25 mm × 0. 25 μm)弹性石英毛细管柱;柱温升
温程序为 80 ℃ 保持 5 min，以 10 ℃ /min 快速升温至
220 ℃［8］，然后保持至完成分析;汽化室温度 250 ℃;载气
为高纯 He(U =99. 999%) ;柱前压 52. 5 kPa;载气体积流量
1. 0 mL/min;进样量 1 μL (乙醚溶液);分流比 40 ∶ 1。
2. 1. 2. 2 质谱条件 离子源为 EI源;离子源温度 230 ℃;
四极杆温度 150 ℃;电子能量 70 eV;发射电流 34. 6 μA;
倍增器电压 1400 V;接口温度 280 ℃;溶剂延迟 4 min。
2. 2 体外清除 DPPH自由基活性试验［9］ 将所提取艾纳香
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挥发油加甲醇配成不同质量浓度的样品溶液;将提取艾纳
香挥发油后剩余水提液浓缩得水提干浸膏，亦加甲醇配成
不同质量浓度。精密移取不同质量浓度样品溶液 20 μL 置
96 孔板中，再加入 0. 2 mmol /L 的 DPPH 对照品液 80 μL，
振荡后反应 30 min，每样品平行测定 3 复孔，于 517 nm处
测定吸光度 (Ai);以甲醇代替样品溶液做空白对照，在
517 nm处测定吸光度 (Ac);分析比较不同质量浓度挥发
油溶液供试品的 DPPH 自由基清除能力。清除率 = ［1 －
Ai /Ac］ × 100%。
3 结果
3. 1 挥发油成分分析 水蒸气蒸馏装置挥发油得率
1. 471%，挥发油提取器挥发油得率 2. 359%，然后将所得
的挥发油用乙醚稀释 6 倍，按上述实验条件进行 GC-MS分
析鉴定，通过 HPMSD化学工作站，结合 Nist 5 标准质谱图
库，参考有关文献进行人工检索解析，对艾纳香叶挥发油
中的化学成分进行鉴定，从中共分离得到 92 个峰，解析出
50 个峰，主要成分有 L-龙脑、樟脑、g-桉叶油醇等，结果
见表 1。
表 1 两种提取方法所得挥发油成分比较
中文名 英文名 分子式
相对质量分数 /%
挥发油测定
器提取法
水蒸气
蒸馏法
(1S)-(-)-α-蒎烯 (1S)-(－)-alpha-Pinene C10H16 0. 16 ———
莰烯 Camphene C10H16 0. 21 0. 03
1-辛烯-3 醇 1-Octen-3-ol C8H16O 0. 42 0. 11
β-蒎烯 (1S)-(1)-beta-Pinene C10H16 0. 48 0. 07
3-辛醇 3-Octanol C8H18O 0. 13 0. 06
柠檬烯 (+)-Limonene C10H16 0. 04 ———
苯甲醇 Benzyl alcohol C7H8O ——— 0. 03
桉叶素 Cineole C10H18O 0. 01 ———
(Z)-3，7-二甲基-1，3，6-十八烷三烯 (Z)-13，7-dimethyl-3，6-octatriene C10H16 0. 05 0. 03
1，6-二甲基庚-1，3，5-三烯 1，6-Dimethyl hepta-1，3，5-triene C10H16 ——— 0. 09
樟脑 Camphor C10H16O 1. 05 1. 02
L-龙脑 L(-)-Borneol C10H18O 76. 39 61. 57
α -松油醇 alpha-Terpineol C10H18O 0. 09 0. 04
甲酸冰片酯 Bicyclo(2. 2. 1)heptan-2-ol，1，7，7-trimethyl-，formate，endo C11H18O2 0. 03 ———
4-(1-甲基乙烯基)-1-环己烯-1-甲醛 4-(1-methylethenyl)-1-Cyclohexene-1-carboxaldehyde C10H14O 0. 17 0. 09
L-乙酸龙脑酯 L-Borneol acetate C12H20O2 0. 09 0. 07
对异丙基苯甲醇 Benzenemethanol，4-(1-methylethyl)- C10H14O 0. 06 0. 03
紫苏醇 Perilla alcohol C10H16O 0. 07 0. 04
香树烯
1，1，7-Trimethyl-4-methylenedecahydro-1H-cyclopropa［e］
azulene，AlloaroMadendrene
C15H24 0. 03 0. 05
a -古芸烯 a-Gurjunene C15H24 0. 16 0. 16
l-石竹烯 l-Caryophyllene C15H24 4. 21 7. 48
a -石竹烯 a-Caryophyllene C15H24 0. 67 0. 70
香橙烯 Aromadendrene C15H24 0. 85 0. 91
10 s，11 s-雪松烷-3(12) ，4-二烯 10s，11s-Himachala-3(12) ，4-diene C15H24 — 0. 61
长叶烯 d-Longifolene C15H24 0. 05 0. 05
2-叔丁基-4-羟基茴香醚 Phenol，3-(1，1-dimethylethyl)-4-methoxy- C11H16O2 0. 04 0. 04
2，6-二叔丁基对甲苯酚 2，6-Di-tert-butyl-4-methylphenol C15H24O 0. 19 1. 49
杜松烯 d-Cadinene C15H24 0. 07 0. 09
S-(Z)-3，7，11-三甲基-1，6，10-十二烷三
烯-3-醇，顺-橙花叔醇
cis-nerolidol C15H26O 0. 08 0. 09
［1Ｒ-(1Ｒ* ，4Ｒ* ，6Ｒ* ，10S* ) ］-4，12，
12-三 甲 基-9-亚 甲 基-5-氧 杂 三 环
［8. 2. 0. 04，6］十二烷
［1Ｒ-(1Ｒ * ，4Ｒ * ，6Ｒ * ，10S * )］-4，12，12 - three-9 -
alkylene-5 -oxa-tricyclo［8. 2. 0. 04，6］dodecane
C15H24O 1. 05 1. 64
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续表 1
中文名 英文名 分子式
相对质量分数 /%
挥发油测定
器提取法
水蒸气
蒸馏法
薁，1，2，3，3a-1，4，5，6，7-八氢-4，4 -二甲
基-7- (1-甲基乙烯基)-(1Ｒ，3AＲ，4Ｒ，
7Ｒ)-
Azulene，1，2，3，3a，4，5，6，7-octahydro-1，4-dimethyl-7-(1-meth-
ylethenyl)-，(1Ｒ，3aＲ，4Ｒ，7Ｒ)-
C15H24 0. 07 0. 07
［3S-(3α，5α，8α) ］-1，2，3，4，5，6，7，8-八
氢化-α，α-3，8-四甲基-5-奥甲醇
［3S-(3α，5α，8α) ］-1，2，3，4，5，6，7，8 -octahydro-α，α-3，8 -
tetramethyl-5 -Austrian methanol
C15H26O 0. 50 1. 01
喇叭茶醇 Ledol C15H26O 0. 40 0. 45
(1aＲ)-1αβ，2，3，3a，4，5，6，7αβ-8H-1，1，
3αβ，7-四甲基-1H-环丙基［a］萘
(1aＲ)-1aβ，2，3，3a，4，5，6，7bβ-Octahydro-1，1，3aβ，7-tetrameth-
yl-1H-cyclopropa［a］naphthalene
C15H24 0. 50 0. 89
三环［6. 3. 0. 0(1，5) ］十一碳-2-烯-4-酮，
2，3，5，9-四甲基
Tricyclo［6. 3. 0. 0 (1，5) ］undec -2 -en-4 -one，2，3，5，9 -tet-
ramethyl-
C15H22O 0. 07 0. 06
g-桉叶油醇
2-Naphthalenemethanol，1，2，3，4，4a，5，6，7-octahydro-a，a，4a，8-
tetramethyl-，(2Ｒ，4aＲ)-;g-Eudesmol
C15H26O 0. 68 2. 18
双环［7. 2. 0］-5-开环，10，10-二甲基-2，6-
二亚甲基
Bicyclo［7. 2. 0］-5 -open loop，10，10 -dimethyl -2，6 -dimethyl-
ene
C15H24O 0. 70 0. 65
萘，1，2，3，5，6，7，8，8a-8H-1-甲基-6-亚甲
基-4-(1-甲基乙基)
Naphthalene，1，2，3，5，6，7，8，8a-octahydro-1-methyl-6-methylene-
4-(1-methylethyl)-
C15H24 — 0. 04
β-桉叶油醇 β-Eudesmol C15H26O 0. 82 0. 75
β-人参烯 β-Panasinsene C15H24 0. 84 1. 61
雅榄蓝烯
Naphthalene，1，2，3，5，6，7，8，8a-octahydro-1，8a-dimethyl-7-(1-
methylethenyl)-，(1S，7Ｒ，8aＲ)-
C15H24 0. 11 0. 07
2-羟基-4，6-二甲氧基苯乙酮 Ethanone，1-(2-hydroxy-4，6-dimethoxyphenyl)- C10H12O4 — 2. 60
十四醛 Tetradecanal C14H28O 0. 35 1. 31
亚麻酸甲酯 Methyl linolenate C19H32O2 0. 04 —
6，10，14-三甲基-2-十五烷酮 2-Pentadecanone，6，10，14-trimethyl- C18H36O 0. 07 0. 06
环十五内酯 Oxacyclohexadecan-2-one C16H30O2 0. 07 —
11，14，17-顺-二十碳三烯酸甲酯 11，14，17-Eicosatrienoicacid，methyl ester C21H36O2 0. 75 1. 93
棕榈酸 Palmitic acid C16H32O2 0. 16 0. 34
棕榈酸乙酯 Ethyl palmitate C18H36O2 0. 07 0. 07
亚麻酸乙酯 (Z，Z，Z)-9，12，15-Octadecatrienoic acid，ethyl ester C20H34O2 0. 17 0. 10
合计 93. 22 90. 78
3. 2 体外清除 DPPH自由基活性试验 结果见表 2。
4 讨论与小结
4. 1 本实验挥发油提取器法与水蒸气蒸馏法比较研究表
明，挥发油的质和量均以挥发油提取器为优，挥发油得率
前者是后者的 1. 6 倍;两者挥发油经 GC-MS化学组成分析
可见，已鉴定的 50 种成分占挥发油总量的 90%以上，主要
为萜类成分，其中标志成分左旋龙脑 (L-borneol)相对含
有量前者 (76. 39%)比后者 (61. 57%)高 14. 82%，提
示挥发油提取器法有利于提高艾纳香挥发油品质。
4. 2 由表 2 可见，本实验条件下，艾纳香挥发油提取后的
水提液具有较好的体外清除 DPPH 自由基活性，其 IC50 =
1. 003 mg /mL，并呈量效关系，而挥发油的活性则较弱
(质量浓度在 100 mg /mL时，自由基清除率仅为 17. 42%) ，
提示提取艾纳香挥发油废弃的水提液具有综合利用的价值，
值得进一步深入研究。
4. 3 罗甸艾纳香为贵州特色优势生物资源和地理标志产品
表 2 艾纳香挥发油及其水提取液对 DPPH 自由基的清除
能力
组别 质量浓度 /(mg·mL －1) 清除率 /% IC50 /(mg·mL －1)
水提液 2. 5 66. 56 1. 003
2 66. 23
1. 5 63. 80
1 46. 92
0. 5 29. 22
0. 25 22. 46
0. 125 19. 36
0. 0625 15. 33
0. 03125 8. 78
挥发油 100 17. 42 —
2. 5 14. 89
2． 13. 48
1. 5 10. 35
1 9. 65
0. 5 10. 35
0. 25 10. 07
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保护品种，现列为贵州 10 大苗药之一，收载于民族药专
著［10-11］，已开发的艾纳香油和艾片等产品具有较高的经济
效益和药用价值。本实验为艾纳香挥发油提取工艺的优化
奠定基础，同时本研究发现提取挥发油之后所剩的水提液
具有一定的抗氧化活性，为艾纳香资源的综合利用开拓了
思路，为艾纳香资源的进一步开发利用提供了实验依据。
参考文献:
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分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定中成药中展青霉素
邓 鸣1， 朱 斌1* ， 宾春燕2
(1． 广西食品药品检验所，广西 南宁 530021;2． 广西医科大学，广西 南宁 530021)
收稿日期:2013-08-22
基金项目:广西民族医药创新研究与产业化技术平台的建设 (桂科能 10124008-15)
作者简介:邓 鸣 (1981—)，女，主管药师，硕士，从事药品检验、药品质量标准的研究工作。E-mail:dengming106@ 163． com
* 通信作者:朱 斌 E-mail:zhubin1226@ sina． com
摘要:目的 建立山楂麦曲颗粒和大山楂颗粒中展青霉素的分子印迹固相萃取-高效液相色谱测定方法。方法 样品
采用 1%醋酸溶液提取，提取液经展青霉素分子印迹固相萃取柱净化，以乙腈-水作为流动相，Kromasil 100-5 C18色谱
柱分离，紫外检测波长为 276 nm。结果 展青霉素在 4. 83 ～ 96. 59 ng /mL 质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关
系，相关系数 r为 0. 999 9，方法检测限为 3 μg /kg，回收率在 72. 9% ～ 86. 0%之间，相对标准偏差在 3. 3% ～ 7. 1%之
间。结论 该方法准确、灵敏、快速，可用于中成药中展青霉素的测定。
关键词:中成药;展青霉素;高效液相色谱法;分子印迹固相萃取柱
中图分类号:Ｒ927. 2 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2014)10-2224-03
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2014. 10. 053
展青霉素是扩展青霉、展青霉、圆弧青霉等真菌的次
级代谢产物，是一种遗传毒性化合物，存在致畸性、致癌
性和免疫毒性［1］。由于展青霉素对人类可能造成的危害，
世界上许多国家都规定了食品中展青霉素的限量值，我国
国标 GB 2761 － 2011《食品中真菌毒素限量》中规定展青
霉素的限量为 50 μg /kg。展青霉素主要存在酸性果实中，
在苹果、山楂及其制品中检出较多［2-3］。中药及中成药中亦
有许多酸性果实类药材入药，但目前展青霉素检测研究报
道多集中于果实类食品而关于中药相应检测方法报道较少。
山楂麦曲颗粒和大山楂颗粒的主要原料均为山楂、麦芽及
六神曲，这些中药材有可能受到真菌毒素污染，因此有必
要检查其中展青霉素量，保证用药安全。
近几年来测定展青霉素的方法主要有高效液相色谱
法［4-7］以及高效液相色谱-质谱联用法［8-10］，前处理方法有
液液萃取法［4，7］、固相萃取法［8，11］、多功能净化柱净化
法［5，10］等。液液萃取法的提取溶剂为乙酸乙酯，需消耗较
多有机溶剂，操作步骤较为繁琐。固相萃取法常用 C18或
HLB小柱进行提取液的净化，与液液萃取方法相比，样品
用量和溶剂用量均明显减少，样品的纯化和富集过程可同
时完成，缩短样品处理时间。多功能净化柱可选择性吸附
样液中的杂质，而待测组分真菌毒素不被吸附而直接通过，
该方法操作步骤简单，净化过程一步完成，已越来越多地
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Vol． 36 No． 10