全 文 ：第 22卷第 5期 华 夏 医 学 V ol. 22 No. 5
2009年 10月 Acta Medicinae Sinica Oct. 2009
滇桂艾纳香不同提取物急性毒性研究
姜建萍① ,刘喜华 ,杜 秀 ,陈 晨
(广西中医学院 ,广西 南宁 530001)
摘要: 目的:观察滇桂艾纳香药材用不同溶剂提取的浸膏灌胃给予小鼠后产生的急性毒性反应和死亡情况。 方法: 预
实验发现 50% 、 70%乙醇提取物毒性不明显 ,无法测定半数致死量 ( LD50 ) ,需改作最大耐受量 ( M TD )试验 ,并且初步
确定水提取物半数致死量 ( LD50 )试验用药剂量 ,正式实验采用小鼠灌胃给药的方法测定水提取物半数致死量 ( LD50 )
和 50% 、 70%乙醇提取物最大耐受量 ( M TD)。结果: 滇桂艾纳香水提取物的 LD50为 143. 1034g生药 /kg , 50% 、 70%乙醇
提取物 M TD分别 259. 60g生药 /kg、 309. 68g生药 /kg。结论:滇桂艾纳香毒性较小 ,临床用药安全 ,且水提取物毒性大
于醇提取物。
关键词: 滇桂艾纳香 ;提取物 ;急性毒性
中图分类号: R281. 4; R996. 2 文献标识码: A 文章编号: 1008-2409( 2009) 05-0808-03
The test of acute toxicity on diff erent Blumea riparia(Bl. ) DC extract /JIANG Jian-ping, LIU Xi-hua, DU Xiu, et al.∥
Guangxi Tradit ional Chinese Medical University,Nanning 530001, China
Abstract: Objec tiv e: To observ e the acute toxicity and the death status o f different solv ent ex tr acts of Blumea ripa ria
( Bl) DC. by ig in mice. Methods: Th e pre-experiment show s that 50% and 70% alcohol ex t racts can t de termine LD50
which have no obvious to xic effec t, so it is necessa ry to change it w ith the maximum to le rated do se ( M TD )
expe riment. And the aqueous ex tract o f LD50 of medicine do se is initially difined. The official test determines the
aqueous ex t ract o f LD50 , 50% and 70% alcohol ex tra cts of M TD by ig administra tion in mice. Results: The aqueous
ex trac t of Blumea riparia ( Bl) DC. o f LD50 , 50% and 70% alcoho l ex t racts o f M TD w ere r espectiv ely 143. 103g /kg ,
259. 60g /kg and 309. 68g /kg ( equiv alently to c rude drug ) . Conclusion: Blumea ripa ria ( Bl) DC. has very low to xicity
but w ide safe ty range in clinical applica tion, and the tox icity of aqueous ex tract is higher than tha t o f alcoho l ex tracts.
Key words: Blumea ripa ria ( Bl) DC. ; ex tract; a cute toxicit y
滇桂艾纳香又名百花九里明、华艾纳香 ,来源于
菊科植物假东风草 Blumea riparia( Bl. ) DC.的干燥全
草 ,为广西民间常用壮药 ,主要产于广西西南部和云
南东南部 [1 ]。滇桂艾纳香在广西有较长的临床应用历
史 ,壮医认为其味微苦淡、性微温 ,有活血调经、祛风
除湿、止血、利水等作用 ,用于经期提前、产后流血不
止、产后浮肿、不孕症、阴疮、风湿骨痛等证 [2-4 ]。 笔者
参照文献的方法 [5, 6 ] ,用滇桂艾纳香水提取物和 50% 、
70%乙醇提取物进行了急性毒性研究 ,为该药材的后
续研究做好基础。
1 材料与方法
1. 1 药物和动物
滇桂艾纳香药材采自广西龙州 ,经广西中医学院
药用植物教研室刘寿养副教授鉴定为菊科艾纳香属
植物滇桂艾纳香 Blumea riparia( Bl. ) DC全草。 健康
昆明种小鼠 ,体重 18～ 22g ,雌雄各半 ,由广西医科大
学实验动物中心提供 (合格证: SCX KG桂 2003～
2003)。
1. 2 药材不同提取物的制备
1. 2. 1 水提取物 滇桂艾纳香药材 500g ,剪碎 ,煎煮
3次 ,每次加水 3000ml,煎煮时间分别为 1. 5h、 1h、 1h,
·808·
① 作者简介:姜建萍 ( 1965- ) ,女 ,湖南中医药大学 2007级博士研究生 ,现任广西中医学院教授 ,从事中药、民族药质量分析教学与研究工作。
合并 3次煎液浓缩至 160ml,浓度 3. 125g生药 /m l。
1. 2. 2 70%乙醇提取物 滇桂艾纳香药材 435g ,粉
碎 ,加入 70%乙醇冷浸 2次 ,每次加入乙醇 5000ml静
置 2d,合并冷浸液 ,浓缩 ,得浸膏 55. 68g ,即相当于
7. 8g生药 /g。
1. 2. 3 50%乙醇提取物 滇桂艾纳香药材 435g ,粉
碎 ,加入 50%乙醇冷浸 2次 ,每次加入乙醇 5000ml静
置 2d,合并冷浸液 ,浓缩 ,得浸膏 68. 39g ,即相当于
6. 4g生药 /g。
1. 3 方法 [ 5, 6]
1. 3. 1 预试验 选用 18～ 22 g健康昆明种小鼠 ,重
量最大不能相差 4 g,雌雄各半。每组 4只 ,禁食不禁水
15h,配制不同浓度的药物 ,均按每只小鼠 0. 4 ml /10g
灌胃给药 ,摸索出使全部小鼠死亡的剂量和全部小鼠
不死亡的剂量 ; 50% 、 70%乙醇提取物以最大浓度灌
胃给药后未见死亡 ,改做小鼠最大耐受量 ( M TD)试
验。
1. 3. 2 LD50的测定 健康昆明种小鼠 60只 ,按性
别、体重随机分为 6组 ,每组 10只 ,雌雄各半。其中一
组为空白对照组 ,其余 5组根据预试验结果 ,药材水
提取物各组日受试剂量分别为 200. 00, 160. 00,
128. 00, 102. 40, 81. 92g生药 /kg ,两相邻剂量组间的
高低剂量比为 1∶ 0. 8。各组小鼠均按 0. 4 ml /10g分 2
次灌胃给药 , 2次灌胃间隔时间为 6h,空白组给予等
量饮用水。灌胃给药前禁食不禁水约 15 h,间隔期间
不供食 ,给药后常规饲养 ,给药后仔细观察并记录给
药后即刻至 14 d内小鼠出现的毒性反应与死亡情
况。
1. 3. 3 M TD的测定 健康昆明种小鼠 60只 ,随机
分为 50%乙醇提取物组、 70%乙醇提取物组和空白对
照组 ,每组 20只 ,雌雄各半。 50%乙醇提取物组:以药
材浸膏可供小鼠灌胃的最大浓度 ( 3. 245 g生药 /
m l) ,每次按 0. 4 m l /10g体重 ,分 2次灌胃给药 , 2次
灌胃间隔 6 h,日受试剂量为 259. 60g生药 /kg。 70%
乙醇提取物组:以药材浸膏可供小鼠灌胃的最大浓度
( 3. 871 g生药 /m l) ,每次按 0. 4 ml /10g体重 ,分 2次
灌胃给药 , 2次灌胃间隔 6 h,日受试剂量为 309. 68g
生药 /kg。对照组灌胃等量饮用水 ,余同各给药组。各
组小鼠灌胃前禁食不禁水 15 h ,间隔期间不供食 ,给
药后常规饲养 ,仔细观察并记录给药后即刻至 14d内
小鼠出现的毒性反应与死亡情况。
1. 3. 4 观察项目 ①给药前测量小鼠体质量 ,给药
后的第 3, 7, 10, 14天各测量小鼠体质量 1次。②观察
给药后小鼠的精神、活动、食量、饮水量、大小便及存
活情况 ;记录各组小鼠的死亡情况 ,死亡小鼠立即解
剖观察肝、心、脾、肺、肾、胃及小肠等器官的变化。
1. 3. 5 数据处理和统计分析 采用改良寇氏法计算
LD50采用 SPSS 13. 0软件统计分析处理各组数据。
2 实验结果
2. 1 LD50试验
给药后各组小鼠出现不同程度的毒性反应 ,相继
出现精神萎靡、活动减少、呆卧、刺激反应低下等中毒
症状 ,剂量越高出现越早 ,症状越明显 ,最后出现兴奋
状态 ,间隙性跳跃 ,最后死亡。小鼠于每次给药后0. 25
～ 1 h开始出现死亡 , 0. 5 h为死亡高峰期 ,且死亡小
鼠主要集中在第二次给药后 ,未见性别差异 ,空白组
未见死亡。死亡动物解剖后 ,肉眼未见脏器异常改变。
给药后第 2天开始以上症状逐渐消失 ,饮食恢复正
常 ,第 15天处死未死亡动物 ,解剖观察小鼠心、肝、
脾、肺、肾、胃、肠等脏器肉眼均未见异常。记录从给药
开始至第 14天动物死亡情况 (见表 1)。
表 1 滇桂艾纳香水煎提取物灌胃给药 LD50
组别 剂量 ( g生药 /kg) Log D 动物数 (只 ) 死亡数 (只 ) 死亡率 (% ) P LD50( g生药 /kg)
1 空白 - 10 0 0 0
2 200. 00 2. 3010 10 10 100 1
3 160. 00 2. 2041 10 7 70 0. 7 143. 1034
4 128. 00 2. 1072 10 3 30 0. 3
5 102. 40 2. 0102 10 1 10 0. 1
6 81. 92 1. 9117 10 0 0 0
·809·
第 5期 姜建萍等:滇桂艾纳香不同提取物急性毒性研究 第 22卷
结果显示灌胃给药水煎提取物 LD50为 143. 1034g生
药 /kg , 95%可信限为: 130. 023～ 157. 023g生药 /kg。
2. 2 MTD试验
小鼠灌胃 50%、 70%乙醇提取物药液后共观察
14d。在药后 2h内个别动物活动减少 ,表现较安静 ,其
余未见异常现象 ,给药第 2天起 ,所有受试动物饮食
正常 ,精神状态良好 ,活动灵活积极 ,体重增加正常 ,
活动未见异常 ,皮毛光滑 ,大小便未见异常 ,亦无异常
分泌物。 14d内无一动物死亡。第 15天处死动物后解
剖观察小鼠心、肝、肺、脾、肾、胃、肠等脏器肉眼未见
明显病理学改变。 故测得滇桂艾纳香 50%乙醇提取
物、 70%乙醇提取物对昆明种小鼠灌胃给药的日最大
给药剂量分别为 259. 60g生药 /kg、 309. 68g生药 /
kg。实验结果如表 2、表 3。
表 2 小鼠急性毒性试验给药前后动物体重变化 ( x-± s)
组别 剂量
( g生药· k g- 1· d- 1) 给药前体重 ( g)
给药后体重 ( g )
3d 7d 10d 14d
空白 - 19. 79± 1. 16 20. 00± 1. 15 20. 26± 1. 34 20. 93± 1. 47 21. 68± 1. 46
50%乙醇组 259. 60 20. 27± 1. 40 19. 99± 1. 37 20. 50± 1. 51 21. 30± 1. 57 22. 27± 1. 59
70%乙醇组 309. 68 20. 04± 1. 25 20. 03± 1. 54 20. 80± 1. 93 21. 65± 2. 20 22. 43± 2. 43
表 3 M TD试验小鼠反应情况
组别 剂量 ( g生药· kg- 1· d- 1 ) 四肢活动 体毛 饮食 /水 粪便 尿液 死亡 (只 )
空白 - - - - - - 0
50%乙醇组 259. 6 - - - - - 0
70%乙醇组 309. 68 - - - - - 0
注: - 代表正常
3 讨论
本实验通过比较 3种不同溶剂提取的滇桂艾纳
香药材浸膏发现不同溶剂提取的药材浸膏在毒性方
面有差别 ,水提取的要比 50% , 70%乙醇提取的毒性
大 ,说明该药材毒性成分主要集中在水煎提取物中 ,
为水溶性成分。
滇桂艾纳香人临床日用量为 15～ 30g[1 ] ,若人平
均体重按 60kg计算 ,人平均日用量按 30g计算 ,灌胃
给药水煎提取物的 LD50为 143. 1034g生药 /kg相当于
人口服日用量的 286倍 ; 50%乙醇提取物的最大耐受
量为 259. 6g生药 /kg相当于人口服日用量的 519倍 ;
70%乙醇提取物的最大耐受量为 309. 68g生药 /kg
相当于人口服日用量的 619倍。同时死亡动物肉眼观
察主要器官均未见明显异常 ,存活动物亦相同。 实验
结果显示滇桂艾纳香毒性非常低尤其是乙醇提取物 ,
但是总体来说该药材毒性不大 ,临床用药安全。
滇桂艾纳香乙醇提取物毒性较低但是是否药理
作用也较好 ,还有毒性成分主要是什么 ,有效成分主
要是什么 ,都未见文献报道 ,这些都有待于进一步研
究。
参考文献:
[1 ]广西壮族自治区卫生厅 .广西中药材标准 (第 2册 ) [ S ].南
宁: 广西科学技术出版社 , 1996: 274-278.
[2 ]国家中医药管理局《中华本草》编委会 .中华本草 (第七
册 ) [M ].上海: 上海科学技术出版社 , 1999: 745-746.
[3 ]广西壮族自治区革委会卫生局 .广西本草选编 (上册 )
[M ].南宁: 广西人民出版社 , 1974: 925.
[ 4 ]黄燮才 .广西民族药简编 [ M ].南宁: 广西壮族自治区卫
生局药品检验所 , 1980: 236.
[ 5]徐叔云 ,卞如濂 ,陈修 ,等 .药理实验方法学 [M ].北京: 人
民卫生出版社 , 2002: 227.
[ 6 ]陈奇 ,邓文龙 ,张世玮 ,等 .中药药理研究方法学 [ M ].北
京:人民卫生出版社 , 1993: 112-119.
(收稿日期: 2009- 07- 23)
[责任编辑 王慧瑾 邓德灵 ]
·810·
第 5期 华 夏 医 学 第 22卷