全 文 ：基金资助：中国博士后基金资助（２０１３Ｍ５４１３１６）；吉林省卫生厅科研
课题（２０１３Ｚ０９７）
＊通讯作者
文章编号：１００７－４２８７（２０１５）０９－１４５０－０４
重楼皂苷通过内质网应激抑制荷瘤小鼠移植瘤生长
张嘉玲，郑长军，杨瑞琦，王　飞，范丽梅＊
（吉林大学第二医院，吉林 长春１３００４１）
摘要：目的　探讨重楼皂苷Ⅶ联合顺铂抑制荷瘤小鼠移植瘤生长的分子机制。方法　ＳＫＯＶ３细胞皮下接种
ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠，待移植瘤形成后，荷瘤小鼠随机分为４组（ｎ＝１０）：对照组、低剂量重楼皂苷Ⅶ组（ＬＤ组）、中剂量重
楼皂苷Ⅶ组（ＭＤ组）、高剂量重楼皂苷Ⅶ组（ＨＤ组）。１５天后，分离肿瘤组织，测定肿瘤体积和重量及抑瘤率；
ＴＵＮＥＬ染色和 Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测肿瘤细胞凋亡及其机制。结果　在 ＨＤ组中，肿瘤重量抑制率达５７．９８％，体积抑
制率达５５．１１％，细胞凋亡率达４２．３９％，与对照组相比有统计学差异。经重楼皂苷作用后，凋亡相关基因Ｂｃｌ－２表达
减少，Ｂａｘ蛋白表达增加；内质网相关基因ＧＲＰ７８和ＣＨＯＰ表达均增加。结论　重楼皂苷能有效促进肿瘤细胞凋
亡，并且这种凋亡是由内质网应激介导的。
关键词：重楼皂苷Ⅶ；移植瘤；凋亡；内质网应激
中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｂｙ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｉｎｓ　ｖｉａ　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ　ｓｔｒｅｓｓ　ＺＨＡＮＧ　Ｊｉａ－ｌｉｎｇ，
ＺＨＥＮＧ　Ｃｈａｎｇ－ｊｕｎ，ＹＡＮＧ　Ｒｕｉ－ｑｉ，ｅｔ　ａｌ．（Ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｊｉｌｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００４１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ
ｂｙ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｉｎⅦａｎｄ　ｃｉｓｐｌａｔｉｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＳＫＯＶ３ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｉｎｔｏ　ＮＯＤ／ＳＣＩＤ　ｍｉｃｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ
ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ（ｎ＝１０）：ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｌｏｗ－ｄｏｓｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｉｎⅦ
ｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ　ＬＤ），ｍｅｄｉｕｍ－ｄｏｓｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｉｎⅦｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ　ＭＤ），ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｉｎⅦｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ　ＨＤ）．
１５ｄａｙｓ　ｌａｔｅｒ，ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｖｏｌｕｍｅ　ａｎｄ　ｗｅｉｇｈｔ　ｔｏ　ｃａｌｃｕｌａｔｅ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ；ｔｈｅ
ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＴＵＮＥＬ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ａｎｄ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　ＨＤ，
ｔｈｅ　ｗｅｉｇｈｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　５７．９８％，ｖｏｌｕｍｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　５５．１１％，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　４２．３９％，ｔｈｅｒｅ
ｗａｓ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｉｎⅦ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ－２
ｗａｓ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂａｘ　ｗａｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ；ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＧＲＰ７８ａｎｄ　ＣＨＯＰ，ｔｈｅ　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕ－
ｌｕｍ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅ，ｗａｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｏｏ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｉｎｓ　ｃｏｕｌｄ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｓ
ｖｉａ　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ　ｓｔｒｅｓｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ＰｏｌｙｐｈｙｌｉｎⅦ；ｘｅｎｏｇｒａｆｔｅｄ　ｔｕｍｏｒ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ　ｓｔｒｅｓｓ
（Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇｎ，２０１５，１９：１４５０）
　　卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，
其发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三
位，严重威胁女性的健康。目前临床上卵巢癌的治
疗方案主要采用手术治疗联合化疗等综合治疗，但
其疗效也受到一定限制。研究表明，重楼皂苷作为
一种有效的中草药具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋
亡等作用，其主要有效成份是重楼皂苷Ⅶ ［１－３］。我
们前期研究表明重楼皂苷Ⅶ可有效抑制人肺腺癌细
胞Ａ５４９增殖和卵巢癌细胞ＳＫＯＶ３增殖，并诱导其
凋亡，表明重楼皂苷Ⅶ具有良好的抗肿瘤作用。本
研究联合重楼皂苷Ⅶ和顺铂对接种ＳＫＯＶ３细胞的
荷瘤小鼠进行灌胃给药，观察重楼皂苷Ⅶ在体内抑
制肿瘤的效果，并明确其机制。
１　材料和方法
１．１　细胞培养
ＳＫＯＶ３细胞购自美国 ＡＴＣＣ 细胞库，在含
１０％胎牛血清中的ＩＭＤＭ 培养液中，５％ＣＯ２，３７℃
细胞培养箱中培养。细胞在倒置显微镜下形态为细
胞较大，贴壁生长，核大，细胞生长速度较慢。每隔
３天传代一次，待传代细胞数量达到实验所需量时，
取对数生长期细胞配成细胞悬液，计数活细胞浓度
达到１×１０７ 个／ｍｌ，准备接种裸鼠。
１．２　荷瘤小鼠模型建立
５０只雄性ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠购自吉林大学实验
—０５４１— Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇｎ，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２０１５，Ｖｏｌ　１９，Ｎｏ．９
动物中心，在无菌通风环境中单笼饲养。接种部位
为裸鼠右侧腋部皮下，接种量为２００μｌ卵巢癌耐药
细胞ＳＫＯＶ３。接种后每天观察移植瘤生长状况，
当移植瘤长径长至１ｃｍ左右时，准备后续实验。
１．３　动物给药
在所有荷瘤小鼠中，挑选４０只移植瘤形成小
鼠，随机分为４组（ｎ＝１０）：对照组、低剂量重楼皂苷
Ⅶ（５０ｍｇ／ｋｇ）＋顺铂组（ＬＤ组）、中剂量重楼皂苷
Ⅶ（２５０ｍｇ／ｋｇ）＋顺铂组（ＭＤ组）、高剂量重楼皂
苷Ⅶ（５００ｍｇ／ｋｇ）＋顺铂组（ＨＤ组）。在所有组中，
顺铂用量为５０ｍｇ／ｋｇ，对照组用生理盐水代替。小
鼠灌胃给药，每天１次，共１５天。１５天后，处死小
鼠，分离肿瘤组织，测定肿瘤体积和重量及抑瘤率。
肿瘤体积等于Ｖ＝１／２（长径 × 短径２），重量抑瘤
率（％）＝（１－实验组平均瘤重／对照组平均瘤重）×
１００％，体积抑瘤率（％）＝（１－实验组平均体积／对
照组平均体积）×１００％。
１．４　ＴＵＮＥＬ染色
肿瘤组织用１０％福尔马林固定２４ｈ后，制成石
蜡切片，切片常规脱蜡入水后，用罗氏公司ＴＵＮＥＬ
试剂盒进行凋亡染色，具体操作按说明书进行。之
后，染色切片在４００倍的光学显微镜下，随机选取５
个视野计算凋亡百分数的平均数（ａｖｅｒａｇｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ
ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ＡＲＡ）。
１．５　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ
将１００ｍｇ肿瘤组织置于液氮中研磨至粉末，
加入裂解液，ＢＣＡ法蛋白定量，调整蛋白浓度至浓
度为 ２．５μｇ／μＬ，震荡混匀后，１００℃ 煮 ５ ｍｉｎ，
１２　０００ｇ离心５ｍｉｎ，上样５０μｇ，电泳条件：浓缩胶恒
压８０Ｖ，约２０ｍｉｎ；分离胶恒压１００Ｖ。半干电转膜
仪转膜（３０ｍＡ，９０ｍｉｎ）；５％脱脂奶粉封闭，之后加入
羊抗鼠Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２、兔抗鼠ＧＲＰ７８、ＣＨＯＰ一抗４℃过
夜，ＴＢＳＴ洗膜，添加 ＨＲＰ标记的二抗，室温轻摇３０
ｍｉｎ；然后加入ＥＣＬ发光液，Ｘ线胶片曝光。
１．６　统计学分析
所有检测数据以均数±标准差（ｘ—±ｓ）表示，应
用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行分析，所有数据采用
Ｓｔｕｄｅｎｔ　ｔ检验，Ｐ＜０．０５考虑为有统计学意义。
２　结果
２．１　重楼皂苷抑瘤率
所有小鼠在实验周期结束前均存活，存活率为
１００％。肿瘤剥离后称取重量，测量肿瘤长径和短
径，然后计算肿瘤体积。测量结果显示低剂量重楼
皂苷Ⅶ（ＬＤ组）能轻微抑制肿瘤生长，而中剂量和
高剂量（ＭＤ和 ＨＤ组）能有效抑制肿瘤生长，其重
量抑制率达５２％和５７．９８％，体积抑制率分别达
４５．１２％和５５．１１％，重量和体积与对照组相比具有
显著统计学差异（Ｐ＜０．０５，表１）。
表１　重楼皂苷Ⅶ处理荷瘤小鼠后肿瘤重量和体积变化
重量（ｇ） 重量抑制率（％） 体积（ｃｍ３） 体积抑制率（％）
对照组 ２．１３５６±０．３４５３　 ０．４３２８±０．０４５１
ＬＤ组 １．７６７２±０．２８９１　 １７．２５　 ０．３５３９±０．０７６９　 １８．２３
ＭＤ组 １．０２４９±０．２７８９＊ ５２．００　 ０．２３７５±０．０９８２＊ ４５．１２
ＨＤ组 ０．８９７３±０．２０３８＊ ５７．９８　 ０．１９４３±０．０６５３＊ ５５．１１
　　ＬＤ组：５０ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂组；ＭＤ组：２５０ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂组；ＨＤ组：５００ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂组。＊Ｐ＜０．０５。
２．２　重楼皂苷促进肿瘤细胞凋亡
ＴＵＮＥＬ染色检测肿瘤细胞凋亡发现，在 ＭＤ
和 ＨＤ组中，多数细胞核呈棕色颗粒，可见细胞表面
伪足出现，微绒毛等消失，细胞皱缩，变形，体积变
小，细胞核中染色质浓缩，早期染色质聚集于核膜边
呈新月形或环形，晚期碎裂。ＬＤ组中凋亡细胞相对
较少，与对照组相比没有明显差异。四组中细胞平
均凋亡率（ＡＲＡ）见图１，其中，ＭＤ和 ＨＤ组与对照
组相比有显著的统计学差异（Ｐ＜０．０５）。
ＬＤ组：５０ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂组；ＭＤ组：２５０ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷
Ⅶ＋顺铂组；ＨＤ组：５００ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂组。＊Ｐ＜０．０５。
图１　重楼皂苷Ⅶ处理荷瘤小鼠后肿瘤细胞凋亡率
—１５４１—中国实验诊断学　２０１５年９月　第１９卷　第９期
２．３　凋亡相关蛋白Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２表达变化
Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２基因是两个重要的凋亡基因，Ｂａｘ
促进细胞凋亡，Ｂｃｌ－２抑制细胞凋亡。Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ
结果显示随着重楼皂苷Ⅶ浓度的增加，Ｂｃｌ－２表达减
少，而Ｂａｘ蛋白表达增加（图２），提示经重楼皂苷Ⅶ
和顺铂联合作用后，肿瘤生长受到抑制，这也与
ＴＵＮＥＬ染色结果一致。
２．４　内质网应激相关蛋白ＧＲＰ７８和ＣＨＯＰ的表达
Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测了内质网应激途径相关蛋白
表达结果发现，重楼皂苷处理移植瘤后，ＧＲＰ７８表
达明显上调，且存在剂量依赖效应，引起内质网应
激，从而促进肿瘤细胞凋亡。同时，ＧＲＰ７８的上升
也会引起上调ＣＨＯＰ的表达（图３），从而介导凋亡，
提示重楼皂苷诱导的细胞凋亡是通过内质网应激介
导的。
ＬＤ：５０ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂；ＭＤ：２５０ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺
铂；ＨＤ：５００ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂
图２　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测凋亡相关基因Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的表达
ＬＤ：５０ｍｇ／ｋｇ重皂苷Ⅶ＋顺铂；ＭＤ：２５０ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂；ＨＤ：５００ｍｇ／ｋｇ重楼皂苷Ⅶ＋顺铂。
图３　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测内质网应激相关基因ＧＲＰ７８和ＣＨＯＰ的表达
３　讨论
本研究发现重楼皂苷Ⅶ联合顺铂能有效抑制移
植瘤生长，且没有任何副作用，提示重楼皂苷是一种
具有抗肿瘤效应的中药成份。移植瘤细胞凋亡是通
过内质网应激反应介导的，这也与我们体外实验相
一致。颜［４］等发现重楼皂苷对１０种肿瘤细胞株均
有细胞毒作用，如人肺癌细胞 Ａ５４９、人乳腺癌细胞
ＭＣＦ－７、人结肠腺癌细胞 ＨＴ２９，人肾腺癌细胞
Ａ４９８等等，提示重楼皂苷具有广谱的抗肿瘤效应。
重楼皂苷中活性成份较多，如重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ
等。有研究表明重楼皂苷Ｉ在体外能阻滞人肝癌
ＳＭＭＣ－７７２１细胞株的生长并诱导其凋亡，说明重楼
皂苷其中的单一成份也能有效抑制肿瘤生长［５］。我
们的研究则认为重楼皂苷Ⅶ是一种有效活性成份，
在随后的研究中，我们将比较重楼皂苷各成份之间
抗肿瘤效应的作用，确定最有效的成份。
目前研究表明，细胞凋亡和内质网应激有密切
关系。内质网功能损伤则会引起内质网应激，内质
网通过激活未折叠蛋白质反应（ＵＰＲ）来保护这种细
胞损伤，恢复细胞功能；但长期的内质网应激会诱导
内质网相关性细胞凋亡，消除受损细胞，诱导内质网
分子伴侣ｇｌｕｃｏｓｅ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ７８（ＧＲＰ７８）、转
录因子 ｇｒｏｗｔｈ　ａｒｒｅｓｔ　ａｎｄ　ＤＮＡ－ｄａｍａｇｅ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ
ｇｅｎｅ　１５３（ＧＡＤＤ１５３／ＣＨＯＰ）等内质网应激相关因
子的表达［６－８］。我们有研究结果表明重楼皂苷处理
移植瘤后，ＧＲＰ７８和ＣＨＯＰ的表达均明显上调，表
明内质网应激反应正在进行。Ｂｃｌ－２家族在内质网
应激反应性凋亡中起着重要的作用，Ｂｃｌ－２能够抑制
内质网应激引起的细胞凋亡，而Ｂａｘ的缺失可保护
由内质网应激引起的细胞凋亡［９－１１］。本研究结果也
表明随着重楼皂苷Ⅶ浓度的增加，Ｂｃｌ－２表达减少，
而Ｂａｘ蛋白表达增加，提示Ｂｃｌ－２家族参与了内质
网应激介导的细胞凋亡。本研究为临床上治疗卵巢
癌提供了动物实验依据，有一定的临床意义。
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ｄｕｃｅｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ　ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ　ｍｉｔｏ－
ｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｐａｔｈｗａｙ　ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ａｎｄ　ｏｖｅｒｃｏｍｅｓ　ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
ｃｏｎｆｅｒｒｅｄ　ｂｙ　Ｂｃｌ－２［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ａｃｔａ，２０１３，１８３３（６）：
１３５６．
（收稿日期：２０１４－０３－２２）
基金项目：吉林省中医药管理局（吉中医药发［２０１３］６１）
＊通讯作者
文章编号：１００７－４２８７（２０１５）０９－１４５３－０２
泽泻对高脂血症大鼠模型ＴＣ及ＬＤＬ－Ｃ的影响
王　璞１，刘明晖２＊，王长宏２，赵树华２，孔祥怡１
（１．吉林大学临床医学院２０１３级，吉林 长春１３００３３；２．吉林大学中日联谊医院 中医科）
　　高脂血症是临床上一类常见的以脂质代谢异常为病因
引起的临床综合征［１］。随着他汀类药物在心脑血管疾病预
防和治疗的应用，其有效性与安全性的问题亦倍受关注。他
汀类药物的诸多不良反应也是制约其临床应用的重要方
面［２、３］。而相对于西药，中药越来越多地应用于治疗高脂血
症中，中药降脂疗效肯定、持续、副作用小［４］。现代药理学发
现，中药的降脂作用主要从调节血脂代谢、抑制胆固醇的吸
收及促进排泄来实现［５］，为应用中药治疗高脂血症提供了理
论依据［６］。本文通过对泽泻药理作用的研究，探讨其对高脂
血症大鼠ＴＣ及ＬＤＬ－Ｃ的影响。
１　材料与方法
１．１　实验动物　健康成年雄性 Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，ＳＰＦ级，
体重２００±２０ｇ，由吉林大学基础医学院实验动物中心提供，
合格证号：ＳＣＸＫ（吉）２００７０００３，给予基础饲料（米粉３０％、玉
米粉３０％、麦麸２６％、黄豆粉１０％、盐１％、鱼肝油２％、核黄
素１％，由吉林大学基础医学院实验动物中心提供）喂养，通
风、光照良好，自由进食与饮水。
１．２　实验用药　高脂饲料：基础饲料９０％、胆固醇２％、猪
油７％、胆盐１％，由吉林大学中日联谊医院中心研究室配
制。泽泻：产地福建，由吉林大学中日联谊医院中药房提供。
辛伐他汀：杭州默沙东制药有限公司，规格：２０ｍｇ／片，批号：
１２１０２８。总胆固醇（ＴＣ）、低密度值蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）试剂
盒：长春迪瑞科技股份有限公司。
１．３　仪器设备　全自动生化分析仪（长春迪瑞科技股份有
限公司，型号：ＣＳ－６００Ｂ），台式高速冷冻离心机（无锡市瑞江
分析仪器有限公司，型号：ＲＪ－ＴＧＬ－１６ＧＡ）。
１．４　方法
１．４．１　中药制备　将泽泻生药加水浸泡３０ｍｉｎ，煎煮浓缩
至每亳升含生药０．５ｇ。
１．４．２　实验动物分组　雄性 Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，适应性饲养
７ｄ后，随机分为５组：正常血脂对照组８只（Ⅰ）、高脂血症
对照组８只（Ⅱ）、小剂量中药组８只（Ⅲ）、大剂量中药组８
只（Ⅳ）、西药组８只（Ⅴ）。
１．４．３　造模方法　后４组给与高脂饮食（配方如前述），造
模时间为１５ｄ，于造模前后分别取血，测定其血清中总胆固
醇（ＴＣ）、低密度值蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）含量，待血清中ＴＣ、
ＬＤＬ－Ｃ含量明显高于造模前（Ｐ＜０．０５）时，说明高脂血症动
物模型制备成功，正常血脂对照组继续给予基础饲料。
１．４．４　治疗给药　每日１次，上午９：００开始，正常血脂对
照组按５ｍｌ／ｋｇ给予泽泻水煎液灌胃给药，小剂量组与大剂
量组分别按５ｍｌ／ｋｇ、１０ｍｌ／ｋｇ给予泽泻水煎液灌胃给药，西
药组给予辛伐他汀水溶液，按２．５ｍｇ／ｋｇ灌胃给药，高脂血
症对照组给予等量蒸馏水灌胃。
１．４．５　标本采集与保存　于治疗给药后第２１ｄ对大鼠进行
眼眶静脉取血，分离血清，置－２０℃冰箱保存待测。
—３５４１—中国实验诊断学　２０１５年９月　第１９卷　第９期