全 文 ：蝴蝶兰类原球茎分化苗生根培养基的筛选
陈尚平 1 , 汤久顺2 , 何小弟 2 , 苏家乐 1
(1.江苏省农业科学院园艺研究所 ,江苏南京 210014;2.扬州大学农学院 ,江苏扬州 225009)
　　摘要:以银斑蝴蝶兰(Phalaenopsisschileriana)花梗切段诱导并增殖后的类原球茎分化苗为材料 , 以培养基
种类 、NAA、IBA、pH值 、蔗糖为试验因子 ,每因子设置 4个水平 , 以不同培养基的原球茎生根数为测定指标 , 通过
L16(45)正交试验 , 筛选出适宜蝴蝶兰类原球茎分化苗生根的培养基 , 即 White基本培养基附加 NAA0.3 ～ 0.5
mg/L、IBA0.3 mg/L、蔗糖 30 ～ 40 g/L, pH值调至 4.0 ～ 4.5。
　　关键词:蝴蝶兰;生根培养;正交试验
　　中图分类号:Q943　　文献标志码:A　　文章编号:1002-1302(2008)04-0154-02
收稿日期:2008-02-19
基金项目:江苏省农业科技自主创新基金 [编号:CX(07)610] 。
作者简介:陈尚平(1964—),男 ,江苏南京人 ,副研究员 ,从事花卉研
究。 Tel:(025)84390223;E-mail:chen3sp@yahoo.com.cn。
　　蝴蝶兰属(Phalaenopsis)植物生长于热带与亚
热带 ,属兰科中的气生兰类 ,其花大 、色艳 、花期长 ,
在洋兰中素有 “兰花皇后 ”的美称 [ 1-2] 。蝴蝶兰是
单茎气生兰 ,植株上极少发育侧枝 ,难以进行常规无
性繁殖 ,组织培养则是建立蝴蝶兰快速繁殖无性系
的重要手段 [ 3-4] 。其中瓶苗的生根数是瓶苗质量评
价的重要标准之一 。目前 ,有关蝴蝶兰试管快繁的
研究较多 ,但对类原球茎分化苗的生根研究较少 。
本研究通过正交试验 ,旨在为蝴蝶兰类原球茎分化
苗生根筛选合适的生根培养基 。
1　材料与方法
1.1　材料选取
供试材料为银斑蝴蝶兰(Phalaenopsisschileri-
ana)花梗节间切段诱导出来的类原球茎分化苗 。
类原球茎诱导培养基为 N6 +6-BA5.0 mg/L+KT
0.2mg/L+活性炭 2 g/L,分化培养基为 MS+6-
BA3.0mg/L+NAA1.0 mg/L[ 5] 。选取具 2 ～ 3片
叶的分化苗分别接种于各生根培养基中 ,每瓶接种
3株。试验于 2007年 5 ～ 7月在江苏省农业科学院
园艺研究所进行 。
1.2　试验方法
1.2.1　试验设计　选用 L16(45)设计进行 5因素 4
水平正交试验(表 1),以不同试验因子组合下的类
原球茎分化苗的生根数为考察指标。根据设计安排
16组试验 ,每组接种 10瓶 ,每瓶接种 3株分化苗 ,
重复 2次 。
1.2.2　生根培养基的筛选　接种 60d后统计各处
理分化苗的根数 ,以根长≥0.5 cm计数 ,所得数据
作统计分析。
表 1　生根培养基 L16(45)正交试验因子水平
水平 A:基本培养基
B:NAA
(mg/L)
C:IBA
(mg/L) D:pH值
E:蔗糖
(g/L)
1 N6 0 0 4 10
2 MS 0.1 0.1 4.5 20
3 1/2MS 0.3 0.3 5 30
4 White 0.5 0.5 5.5 40
　　注:培养室温度(25±2)℃,日光灯照明 ,光强 2 000lx,光照 14
h/d,各处理均附加活性炭 1.0g/L。
2　结果与分析
2.1　最佳因子组合的选择
从 R值(极差)(表 2)直观分析 , A因子 R(极
差)最大 ,这反映基本培养基种类对生根数的影响
最大;其次是 C因子;D因子 R值最小 ,说明 D因子
(pH值)对生根数的影响最小 ,也说明不同因子对
类原球茎分化苗生根的影响程度是不同的。
　　从表 3的方差分析结果可见 , A、B、C、D、E因素
均对试验结果有极显著(P<0.01)影响 ,即基本培
养基类型 、NAA、IBA、pH、蔗糖因子的用量或水平均
能明显影响蝴蝶兰类原球茎分化苗生根 。
　　从多重比较结果分析 ,所选择的 5因子中 , A因
子(基本培养基)对生根数影响为 White>1/2MS>
MS>N6 ,且 4者之间有显著差异。随 B因子(NAA
含量)水平的上升 ,生根数呈高 —低 —高趋势 , B3、
B4显著高于B1 、B2 , B3 、B4之间无显著差异 。随 C
—154— 江苏农业科学　2008年第 4期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2008.04.065
表 2　蝴蝶兰类原球茎分化苗在不同培养基上的生根数
组合号 A B C D E 生根数(条)
1 1(N6) 1(0) 1(0) 1(4) 1(10) 0.30±0.03kI
2 1(N6) 2(0.1) 2(0.1) 2(4.5) 2(20) 0.90±0.07jkHI
3 1(N6) 3(0.3) 3(0.3) 3(5) 3(30) 2.55±0.12efCDE
4 1(N6) 4(0.5) 4(0.5) 4(5.5) 4(40) 1.76±0.05gEFGH
5 2(MS) 1(0) 2(0.1) 3(5) 4(40) 1.18±0.15ijGH
6 2(MS) 2(0.1) 1(0) 4(5.5) 3(30) 1.33±0.20hijFGH
7 2(MS) 3(0.3) 4(0.5) 1(4) 2(20) 2.14±0.07efgDEF
8 2(MS) 4(0.5) 3(0.3) 2(4.5) 1(10) 2.02±0.12fghDEFG
9 3(1/2MS) 1(0) 3(0.3) 4(5.5) 2(20) 4.08±0.15bcAB
10 3(1/2MS)2(0.1) 4(0.5) 3(5) 1(10) 2.41±0.12efgDE
11 3(1/2MS)3(0.3) 1(0) 2(4.5) 4(40) 3.39±0.09cdBC
12 3(1/2MS)4(0.5) 2(0.1) 1(4) 3(30) 4.00±0.20bcB
13 4(White) 1(0) 4(0.5) 2(4.5) 3(30) 4.23±0.10abAB
14 4(White)2(0.1) 3(0.3) 1(4) 4(40) 4.89±0.12aA
15 4(White)3(0.3) 2(0.1) 4(5.5) 1(10) 2.77±0.14deCD
16 4(White)4(0.5) 1(0) 3(4) 2(20) 3.64±0.04bcB
k1 1.38dC 2.45bBC 2.16cC 2.83aA 1.87cC
k2 1.67cC 2.38bC 2.21cC2.63abAB2.69bB
k3 3.47bB 2.71aAB 3.38aA 2.44bB 3.03aA
k4 3.88aA 2.85aA 2.63bB 2.48bB2.80abAB
R 2.50 0.47 1.22 0.39 1.16
　　注:同列数据后不同小 、大写字母不同者表示差异显著 、极显著。
表 3　正交设计方差分析(完全随机模型)
变异来源 平方和 自由度 均方 F值 显著水平
A(基本培养基) 38.093 5 3 12.697 8 443.640 7 0.000 0
B(NAA) 1.168 2 3 0.389 4 13.605 4 0.000 1
C(IBA) 7.646 9 3 2.549 0 89.056 7 0.000 0
D(pH值) 0.737 2 3 0.245 7 8.585 0 0.001 3
E(蔗糖) 6.081 1 3 2.027 0 70.821 2 0.000 0
误差 0.458 0 16 0.028 6
因子(IBA含量)水平的上升 ,类原球茎分化苗生根
数呈低 —高 —低趋势 ,且 C3极显著高于 C1、C2 、C4。
随着 D因子(pH值)的上升 ,生根数基本呈减少趋
势 , D1极显著高于 D3 、D4 ,且 D1 、D2之间无显著差
异 。随 E因子(蔗糖含量)的上升 ,生根数呈先高后
低的趋势 , E3极显著高于 E1 、E2 ,且 E3 、E4之间无显
著差异(表 2)。这说明不同基本培养基及激素含量
水平对类原球茎分化苗生根数的影响趋势是不
同的。
　　考察各因子水平平均值发现 , A因子第 4水平 ,
B因子第 3、4水平 , C因子第 3水平 , D因子第 1、2
水平 , E因子第 3、4水平同等 ,即类原球茎分化苗的
适宜生根培养基为:White培养基 +NAA0.3 ～ 0.5
mg/L+IBA0.3 mg/L+蔗糖 30 ～ 40 g/L, pH值为
4.0 ～ 4.5。
2.2　最佳因子组合生根效果的验证
以筛选出的最佳因子组合配制培养基 ,对增殖
后的类原球茎分化苗进行生根培养 ,接种 10瓶 ,每
瓶接类原球茎分化苗 3株 。 60d后统计平均生根数
为 4.7条 /株 ,可见类原球茎分化苗生根培养基的筛
选是有效的。
3　讨论
张启香等[ 6]研究表明 ,低无机盐培养基 1 /4MS
有利于类原球茎生根培养。而林宗铿等 [ 7] 对蝴蝶
兰丛生芽生根的研究结果却认为 ,高无机盐培养基
有利于生根生长 ,且是决定性因子 。本试验结果表
明 ,低无机盐培养基 White有利分化苗生根 ,且是各
试验因子中影响最大的因子 ,这与张启香等的研究
结果一致 。本试验中培养基 pH值的影响与前人研
究结果有所差异[ 7] ,还须对此深入研究。
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