全 文 :第 43 卷第 6 期 吉 林 林 业 科 技 Vol. 43 No. 6
2014 年 11 月 JOURNAL OF JILIN FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY Nov.,2014
文章编号:1005 - 7129(2014)06 - 0008 - 03 中图分类号:S663. 9 文献标识码:A
野生蓝靛果忍冬组培苗继代增殖和生根培养的研究
李金英1,赵春莉1,谭 莎1,段加红2
(1.吉林农业大学,吉林 长春 130118;2.吉林森林工业集团有限责任公司,吉林 长春 130021)
摘要:以野生蓝靛果忍冬组培苗为材料进行继代增殖和生根培养研究,结果表明:继代增殖最适培养基为 MS +
BA2. 0 mg·L -1 + IBA0. 2 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1,增殖系数为 5. 5;适宜的生根培养基为 1 /2MS + IBA1. 0 mg
·L -1,生根率达到 100%。
关键词:蓝靛果忍冬;继代增殖;生根培养
Study on subculture multiplication and rooting culture of
wild Lonicera edulis Turcz tissue culture seedling
LI Jin - ying1,ZHAO Chun - li1,TAN Sha1,DUAN Jia - hong2
(1. Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;2. Jilin Forest Industry Group Limited Liability Company,
Changchun 130021,China )
Abstract:The subculture multiplication and rooting culture study was carried on wild Lonicera edulis Turcz tissue culture
seedling. The result showed that the proper culture medium for subculture multiplication was MS + BA2. 0 mg·L -1 +
IBA0. 2 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1 . The multiplication factor was 5. 5. Moreover,the proper rooting culture was 1 /2MS
+ IBA1. 0 mg·L -1 . The rooting ratio was 100% .
Keywords:Lonicera edulis Turcz;subculture multiplication;rooting culture
收稿日期:2014 - 08 - 22
作者简介:李金英(1978 -) ,女,吉林长春人,实验师,
主要从事植物组织培养方面的研究.
蓝靛果忍冬(Lonicera edulis Turcz.)为忍
冬科(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera)的落叶
小灌木,是继越橘(Vaccinium uliginosum)、黑穗
醋栗(Ribes nigrum)、树莓(Rubus spp.)等之后
的又一新兴小浆果树种,在国际上享有“第三
代水果”的美誉。蓝靛果忍冬果实含有丰富的
花青素、维生素、矿质元素和氨基酸等物质,具
有抗疲劳、稳定血压、清热解毒、改善肝脏的解
毒功能和抗肿瘤、促进身体良好发育等功效。
可鲜食,亦可加工成果酒、饮料、果糕和果酱等
产品,具有极高的营养与保健价值。此外,蓝靛
果忍冬具有很高的观赏价值,可作为观赏树种,
经济价值很大 [1 ~ 6]。
我国拥有丰富的野生蓝靛果忍冬资源,但
分布不均衡,生产力低下,而且人类对其进行无
计划掠夺式的采摘,致使野生资源遭到严重破
坏,自然修复能力降低,蕴藏量和可采量锐减,
供需矛盾日趋加剧。植物组织培养技术是野生
植物资源种质保存和扩繁的重要途径,因此,有
必要建立优化蓝靛果忍冬继代增殖和生根培养
体系,为其快速繁殖提供一条有效途径。我国
对于蓝靛果亚组植物的组织培养研究仅有少数
相关报道[7 ~ 9],但研究得并不十分全面。作者
以蓝靛果忍冬组培苗为材料进行继代增殖和生
根培养研究,旨在筛选出适宜的增殖和生根培
养基配方,从而为蓝靛果忍冬的种质保存和规
模化培育优质组培苗木提供借鉴,并为今后进
一步研究奠定基础。
—8—
1 材料与方法
1. 1 试验材料
以吉林农业大学园林生物技术组培室现有
的野生蓝靛果忍冬组培苗为试材。
1. 2 试验方法
在培养基中添加琼脂 10 g·L -1、蔗糖 30 g
·L -1,高压蒸汽灭菌前 pH 值调至 5. 8。培养
室内温度均为(25 ± 1)℃,光照周期 12 h·
d -1,光照强度 2 000 ~ 3 000 Lx[10]。
1. 2. 1 增殖培养
增殖培养的基本培养基为 MS 培养基,将
初代培养诱导的无菌丛生芽苗接种于添加不同
种类和质量浓度激素的增殖培养基上,每种处
理接种 10 瓶,每瓶接种 2 个无菌芽苗。30 d左
右统计其增殖系数。增殖系数 = 增殖后的芽
数 /接种芽的数量。
1. 2. 2 生根培养
将继代增殖培养获得的健壮无根苗切成
2 cm左右的茎段,接种在不同处理组合的生根
培养基上,每个处理 10 瓶,每瓶接种 4 株。
20 d后观测生根率。生根率 =(生根株数 /接种
株数)× 100%。
2 结果与分析
2. 1 不同细胞分裂素对增殖的影响
不同激素组合对蓝靛果忍冬组培苗继代增
殖培养的影响见表 1。
表 1 不同激素组合对蓝靛果忍冬组培苗继代增殖培养的影响
处理编号 ZT /mg·L -1 KT /mg·L -1 BA /mg·L -1 NAA /mg·L -1 IBA /mg·L -1 增殖系数
1 1. 0 0 0 0 0 2. 0
2 0 1. 0 0 0 0 1. 5
3 0 0 1. 0 0 0 2. 5
4 0 0 2. 0 0. 2 0 2. 0
5 0 0 0. 5 2. 0 0. 5 1. 5
6 0 0 2. 0 0 0. 2 3. 5
从表 1 中可以看出,不同细胞分裂素(ZT、
KT、BA)对芽增殖的效果不同,但增殖系数均
未达到 3,且苗生长较细弱。
在 6 个处理的培养基上,增殖系数最低为
1. 5,处理 6 添加 IBA的增殖效果明显高于处理
4 添加 NAA 的处理,其平均增殖系数达到了
3. 5。
2. 2 IBA不同质量浓度对增殖状况的影响
不同质量浓度 IBA 对蓝靛果忍冬组培苗
继代增殖培养的影响见表 2。
表 2 不同质量浓度 IBA对蓝靛果忍冬组培苗继代增殖培养的影响
处理 增殖系数
① MS + BA2. 0 mg·L -1 + IBA0. 1 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1 2. 5
② MS + BA2. 0 mg·L -1 + IBA0. 2 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1 5. 5
③ MS + BA2. 0 mg·L -1 + IBA0. 3 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1 4. 0
④ MS + BA2. 0 mg·L -1 + IBA0. 4 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1 1. 5
⑤ MS + BA2. 0 mg·L -1 + IBA0. 5 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1 1. 5
从表 2 中可以看出,增殖情况是处理② >
③ >①,而处理④、⑤苗生长缓慢,增殖倍数较
低。添加 IBA0. 2 mg·L -1的处理②中,组培苗
长势最好(见图 1) ,增殖系数最高,为 5. 5。
2. 3 不同处理对蓝靛果忍冬组培苗生根培养的
影响
不同处理组合对蓝靛果忍冬组培苗生根的
影响见表 3。
—9—
表 3 不同处理组合对蓝靛果忍冬组培苗生根的影响
激素组合 生根率 /% 根生长情况
1 1 /4 MS + IBA0. 5 mg·L -1 75 生根率低,苗和根生长状态一般。
2 1 /2 MS + IBA0. 5 mg·L -1 90 生根率比较高,可达 90%,而且根粗壮,组培苗生长状态良好。
3 MS + IBA0. 5 mg·L -1 85 生根率相对高些,但初期生根培养过程中,茎基部有膨大现象。
4 1 /2MS + NAA1. 0 mg·L -1 85 生根率可达 85%,但生根处形成大量愈伤组织,根生长状态不好。
5 1 /2MS + IBA1. 0 mg·L -1 100 生根率比较高,可达 100%,而且根粗壮,组培苗生长状态良好。
6 1 /2MS + IAA1. 0 mg·L -1 90 生根率较高,但组培苗长势较弱。
图 1 添加不同质量浓度 IBA培养基的蓝靛果忍冬组培苗生长情况
图 2 蓝靛果忍冬组培苗生根状况
从表 3 中的 1 ~ 3 处理可以看出,在添加
激素 IBA0. 5 mg·L -1的情况下,无机盐质量浓
度降低有利于生根,但并不是质量浓度越低越
好。试管苗接种在 MS 培养基上,虽然生根率
为 85%,但是幼苗茎基部在初期培养中有膨大
现象;接种在 1 /4MS培养基上,生根率最低,为
75%;接种在 1 /2MS 培养基上,茎基部不膨大,
且生根率达到了 90%,生根效果最好。在添加
不同种类生长素的处理中(处理 4 ~ 6) ,使用
NAA时,试管苗基部与根连接处易生成大量的
愈伤组织,并且根系脆弱、较易断;使用 IBA
时,未见愈伤组织形成,并且生根率较高,可达
100%,而且根粗壮,生根状态良好;使用 IAA
时,虽然生根率较高,达 90%,但苗长势较弱。
总体而言,生根培养的适宜培养基为 1 /2MS +
IBA1. 0 mg·L -1,苗木生根及生长状况见图 2。
3 结论与讨论
野生蓝靛果忍冬组培苗继代增殖和生根培
养的研究结果表明:蓝靛果忍冬适宜的继代增
殖培养基配方为 MS + BA2. 0 mg· L -1 +
IBA0. 2 mg·L -1 + GA30. 3 mg·L -1,增殖系数
为 5. 5。基本培养基中大量元素含量降低能促
进不定根的产生,以 1 /2MS 为最佳;生根培养
过程中,IBA具有较好的根诱导作用,产生的根
粗壮、数量多,适合炼苗移栽。最适宜的生根培
养基配方为 1 /2MS + IBA1. 0 mg·L -1,生根率
可达 100%。 (下转第 13 页)
—01—
年平均苗高为 25. 31 cm,平均主根长为
11. 37 cm。ABT 生根粉处理的生根效果好于
IBA,但两者对苗高与主根生长均无作用。
柽柳在吉林市城区引种,丰富了吉林市园
林绿化树种。柽柳枝条细柔,姿态婆娑,开花如
红蓼,颇为美观,适于水滨、池畔、桥头、河岸、堤
防种植。柽柳适应性强,抗干旱、耐瘠薄、耐盐
碱、病虫害少,是优良的园林观赏树种。嫩枝扦
插可作为柽柳的繁育手段之一,在引种区推广
应用。
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44.
(上接第 10 页)
植物组织培养技术是传统营养繁殖方法的
扩展,具有繁殖速度快、繁殖系数大的优点。越
来越多的试验已经证明 Skoog 等[11]提出的“激
素平衡”理论的正确性,生长素和细胞分裂素
对组培苗芽的诱导和生长发育均起着重要作
用。张启昌等[3]对蓝靛果忍冬继代培养的研
究结果显示,IBA含量对其影响达到显著水平,
且最佳继代增殖培养基为 6 - BA0. 5 mg·L -1
+ IBA0. 3 mg·L -1 + KT1. 5 mg·L -1。李桂君
等[12 ~ 13]在俄罗斯耐寒蓝靛果忍冬组培苗生根
试验中,对 MS、1 /2MS培养基进行比较,结果显
示,1 /2MS比 MS培养基生根效果要好,这与本
试验的研究结果一致。MS无机盐含量比较高,
可能对诱导生根产生抑制作用。在蓝靛果增殖
培养中,单一激素处理明显不如不同激素组合
处理的效果好。可见,在植物组织培养过程中,
培养基的选择,营养元素、激素的添加都需要综
合考虑,并需通过试验探索进行选择和添加。
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