全 文 ：栒子试管苗的土壤支撑生根培养和带坨移栽
柴慈江 ,史燕山 ,骆建霞 ,卢兴霞 ,武旭娜 ,国怡然　(天津农学院园艺系 ,天津 300384)
摘要　[目的 ]完善栒子试管苗的生根与移栽技术。 [方法 ]以粘壤土为培养基支撑物 ,选用不含大量元素并附加 0.75mg/LIBA和 15
g/L蔗糖的MS液体培养基对栒子试管苗茎段进行生根培养 ,以琼脂支撑培养为对照 ,研究不同培养方法栒子试管苗的生根情况及其带
坨移栽效果。 [结果]土壤支撑培养栒子试管苗的生根率(95.0%)、根长(54.3mm)、根数(2.8条)及叶数(7.0片)均显著高于琼脂支撑
培养;土壤支撑培养和琼脂支撑培养的栒子试管苗均具有根毛;土壤支撑培养生根栒子试管苗开瓶炼苗 21d后带坨移入营养钵中 ,在移
栽后不喷雾、不覆膜 、空气相对湿度低至 50%的条件下 ,其成活率高达 96.7%。 [结论 ]以粘壤土为培养基支撑物可显著提高栒子试管
苗的生根及带坨移栽效果。
关键词　栒子;试管苗;生根培养;带坨移栽
中图分类号　S688.4　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)12-06116-02
Soil-supportingRootingCultureandLump-transplantingofCotoneasterhjelmqvistiTest-tubePlantlets
CHAICi-jiangetal　(DepartmentofHorticulture, TianjinAgriculturalColege, Tianjin300384)
Abstract　 [ Objective] ThepurposewastoimprovetherootingandtransplantingtechniquesofCotoneasterhjelmqvistitest-tubeplantlets.
[ Method] Withclayloamasmediumsupporter, theliquidMSmediumwithoutmacro-elementandwith0.75 mg/LIBAand15g/Lsucrose
wasselectedforrootingcultureofstemsegmentsofC.hjelmqvistitest-tubeplantlets.Withagar-supportingcultureasCK, therootingcondi-
tionsofC.hjelmqvistitest-tubeplantletsculturedbydifferentmethodsandtheirlump-transplantingefectswerestudied.[ Result] Therooting
rate, rootlength, rootnumberandleafnumberofC.hjelmqvistitest-tubeplantletsintreatmentofsoil-supportingculture(being95.0%,
54.3mm, 2.8and7.0resp)weresignificantlyhigherthanthoseofagar-supportingculture.TheC.hjelmqvistitest-tubeplantletsintreat-
mentofsoil-supportingcultureandagar-supportingculturealhadroothair.WhentherootedC.hjelmqvistitest-tubeplantletsintreatmentof
soil-supportingcultureweretransferedwithlumpintonutrientbodyafteropen-bottleacclimationfor21 d, theirsurvivalratecouldreach
96.7% undertheconditionwithoutsprayandfilmcoveringandwithlowrelativeairhumidityof50%.[ Conclusion] Withclayloamasmedi-
umsupporter, therootingandlump-transplantingeffectsofC.hjelmqvistitest-tubeplantletscouldbeenhancedsignificantly.
Keywords　 Cotoneasterhjelmqvistii;Test-tubeplantlets;Rootingculture;Lump-transplanting
基金项目　国家科技部星火计划(2008GA610015);天津市科委项目
(08ZHXHNC07000)。
作者简介　柴慈江(1960-),男 ,天津人 ,硕士 ,副教授 ,从事园艺植物
组织培养技术研究。
收稿日期　 2010-01-13
　　栒子(Cotoneasterhjelmqvisti)是近年由国外引入的优良
观赏地被植物 ,为加快其推广应用 ,柴慈江等对其组织培养
快繁技术进行了初步研究 [ 1-2] 。笔者探讨了以粘壤土为培
养基支撑物对栒子试管苗生根培养与带坨移栽的影响 ,以期
进一步完善栒子试管苗的生根与移栽技术并促进栒子组织
培养育苗技术的规模化应用。
1　材料与方法
1.1　材料　试材为在附加 0.75 mg/L6-BA、30 g/L蔗糖的
MS培养基上继代培养的栒子试管苗;试验用土为粘壤土 ,全
盐含量 0.405‰, pH值 8.12,水解氮含量 74.27 mg/kg,速效
磷含量 38.27mg/kg,速效钾含量 228.00mg/kg。
1.2　方法
1.2.1　土壤为培养基支撑物对栒子试管苗进行生根培养 。
以大口瓶为培养瓶 ,先在培养瓶中加入上述粘壤土 ,再加入
液体培养基 ,培养基成分为不含大量元素的 MS培养基附加
0.75 mg/LIBA和 15 g/L蔗糖 ,常规灭菌后每瓶内接种 4个
约 1.5cm长的栒子试管苗茎段。以琼脂支撑培养为对照 ,
将含有 7 g/L琼脂的培养基加入培养瓶 ,培养基成分为大量
元素减半的 MS培养基附加 0.75mg/LIBA和 15 g/L蔗糖 ,
常规灭菌后每瓶内接种 4个约 1.5cm长的栒子试管苗茎段 。
试验按完全随机法设计 ,每处理接种 100个试管苗茎
段 ,接种后于培养室内培养 ,培养温度为 23 ～ 27 ℃,光照强
度为 2 000 ～ 3 000lx,光照时间为 14 h/d。培养 40 d后调查
全部接种茎段所形成试管苗的根茎生长状况。同时切取 2
处理试管苗的根段 ,在载玻片上压平后于光学显微镜下观察
根毛的发生情况 。
1.2.2　土壤支撑培养栒子试管苗的带坨移栽。以大口瓶为
培养瓶 ,先将 4片提苗片 [ 3]放入瓶底部 ,然后按上述土壤支
撑培养的方法培养试管苗 ,培养 40 d后移入移栽室 ,去除封
口膜后盖上具孔的玻璃罩 , 14 d后去除玻璃罩 ,再完全开瓶
炼苗 7 d,然后用提苗片将试管苗带坨移入营养钵中(图
1A)。营养土配比为土∶蛭石 =1∶2。以琼脂支撑培养 ,并采
用常规移栽方法移栽的试管苗为对照(常规移栽方法即洗去
试管苗根上的琼脂后将其裸根移入营养钵中)。
每处理移栽 40株为 1次重复 ,共重复 3次。移栽后不
采取覆膜 、喷雾等保湿措施 ,只在营养钵土过干时浇水。以
周记型温 、湿度自记仪测定环境空气温度和湿度 。移栽 30 d
后调查移栽成活率。
2　结果与分析
2.1　土壤支撑培养对栒子试管苗生根的影响　栒子试管
苗在琼脂支撑培养基中的生根率较低 ,用蛭石取代琼脂为培
养基支撑物可明显提高其生根率 [ 1-2] 。由表 1可知 ,该试验
中琼脂支撑培养的栒子试管苗生根率仅为 51.0%,土支撑培
养试管苗的生根率 、根长及根数均显著高于琼脂支撑培养。
土支撑培养试管苗的茎长与琼脂支撑培养无明显差异 ,但前
者叶数显著多于后者 ,说明土支撑培养的栒子试管苗茎生长
节间较短(图 1B)。 2处理试管苗均有根毛发生(图 1C、图
1D)。
　　上述结果表明 ,粘壤土支撑培养的栒子试管苗生根与生
长情况均优于琼脂支撑培养 。蛭石支撑培养的栒子试管苗
的根数与琼脂支撑培养无明显差异 ,但根长明显小于琼脂支
责任编辑　常俊香　责任校对　卢瑶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(12):6116-6117, 6133
撑培养 [ 2] 。粘壤土支撑培养利用了土壤中的无机营养 ,因此 可使栒子试管苗的培养成本较蛭石支撑培养更低 。
表 1　土支撑培养对栒子试管苗生根的影响
Table1　EffectofsoilsupportingcultureontherootingofCotoneasterhjelmqvistiplantletsinvitro
培养基支撑物
Materialsupportingmedium
生根率∥%
Rootingrate
根长∥mm
Rootlength
根数∥条
Rootnumber
茎长∥mm
Stemlength
叶数∥片
Leafnumber
土壤 Soil 95.0a 54.3a 2.8a 24.2a 7.0a
琼脂 Agar 51.0b 11.9b 1.5b 22.9a 5.9b
　注:同列字母不同表示 5%水平差异显著。
　Note:Diferentletersbehindthedatainthesamecolumnmeansignificantdiferenceat0.05level.
注:A.左为提苗片(专利号 ZL200820075225.3),右为刚移出瓶的带坨试管苗;B.左为琼脂支撑生根培养的试管苗 ,右为土支撑生根培养的试管
苗;C.土支撑生根培养试管苗的根毛;D.琼脂支撑培养试管苗的根毛。
Note:A, Theleftisthetoolfortakingplantletwithlumpoutofculturalbotleandtherightistheplantletwithlumptransplantedjustfromculturalbotle;
B,Theleftistheplantletculturedinagarmediumandtherightistheplantletculturedinsoilsupportingmedium;C,Theroothairsoftheplantlet
culturedinsoilsupportingmedium;D, Theroothairsoftheplantletculturedinagarmedium.
图 1　栒子试管苗带坨移栽方法及 2种培养基支撑物生根培养效应比较
Fig.1　Methodoftransplantingwithlumpandcomparisonofthecultureeffectoftwokindsofmediumsupportingmaterialsontherootingof
Cotoneasterhjelmqvistiplantletsinvitro
2.2　土壤支撑培养栒子试管苗的带坨移栽效果　在移栽后
不覆膜 、不喷雾的条件下 ,带坨移栽的栒子试管苗成活率为
96.7%,常规移栽试管苗的成活率为 43.3%,两者差异显著 。
这与以往对葡萄 、枣和栒子(蛭石支撑培养)试管苗的带坨移
栽试验结果基本一致 [ 2 , 4-6] 。
一般认为 ,采用常规方法移栽的试管苗移栽后环境空气
湿度应保持在 90%以上 [ 7] 。该研究中 ,温室通风条件下移栽
后室内空气相对湿度午后可降至 50%。因此认为 ,空气湿度
偏低可能是该试验中常规移栽试管苗成活率较低的主要原
因之一。但在相同条件下 ,带坨移栽试管苗的成活率高达
96.7%,说明带坨移栽的试管苗对低湿环境具有较强的适应
能力 。其原因可能是带坨移栽的试管苗移栽后根际环境变
化较小 ,根系可保持较强的吸收能力;同时 ,带坨移栽的试管
苗移栽前经历了长达 21 d的开瓶练苗 ,其地上部得到了较充
分的锻炼。研究表明 ,开瓶炼苗可促进蛭石支撑培养的栒子
试管苗气孔关闭功能的恢复 [ 2] ,据观察 ,开瓶炼苗 21d后 ,土
支撑培养的栒子试管苗的气孔在黑暗中的关闭率由 45.2%
增加到 92.0%,标志着其气孔关闭功能得到恢复 ,这对增强
其地上部的保水能力和提高其移栽成活率十分有利。
3　小结
生根和移栽是植物组织培养快速繁殖技术的关键 。以
蛭石取代琼脂为培养基支撑物可提高栒子试管苗的生根率 ,
实现试管苗的带坨移栽 ,提高其移栽成活率并降低培养成
本 [ 2] 。该研究结果表明 ,用粘壤土为培养基支撑物对栒子试
管苗进行生根培养的效果优于琼脂支撑培养和蛭石支撑培
养 。粘壤土为培养基支撑物因为不需添加大量元素 ,可进一
步降低栒子试管苗的培养成本。土支撑培养的栒子试管苗
移栽前可经过长达 21 d的开瓶练苗 ,带坨移栽后不喷雾 、不
覆膜 ,午后空气相对湿度低至 50%的条件下移栽成活率可达
到 96.7%。该研究结果对完善栒子组织培养快繁技术并促
进其在生产中的应用具有十分重要的意义。
参考文献
[ 1] 柴慈江 ,史燕山 ,骆建霞,等.栒子的组织培养与快速繁殖 [ J].植物生
理学通讯, 2006, 42(3):484.
[ 2] 柴慈江 ,史燕山 ,骆建霞,等.栒子试管苗蛭石支撑生根培养及炼苗移
栽研究 [ J] .安徽农业科学 , 2009, 37(17):7860-7861, 7871.
[ 3] 柴慈江.用于试管苗带坨移栽的提苗片:中国 , ZL200820075225.3[ P].
2009-05-13.
[ 4] 柴慈江,严仁玲 ,王震星, 等.葡萄试管苗土支撑培养带坨移栽研究
[ J].华北农学报 , 1995(1):116-119.
[ 5] 柴慈江 ,宁保生,陈桂玲.枣试管苗带土坨移栽成活率高 [ J].中国果
树, 1998(4):53-54.
[ 6] 柴慈江 ,魏志勇.晚红葡萄试管苗快速繁殖技术研究 [ J].北方园艺,
2005(1):61-62.
[ 7] 涂艺声.经济植物大规模快速繁殖技术 [ M] .北京:化学工业出版社,
2009:126-280.
[ 8] 文纲,赵致 ,廖晓康 ,等.不同移栽基质对金钗石斛试管苗成活和生长
的影响 [ J] .安徽农业科学 , 2009, 37(14):117-118, 257.
[ 9] 蒙爱东,王东兰 ,胡东南, 等.多效唑对铁皮石斛试管苗培养的影响
[ J].安徽农业科学, 2009, 37(14):50-51, 174.
[ 10] LIUHM, LINGHUKY,FANGXB.Thestudyoninductionandprolifer-
ationoftubebulbsLiliumbrowni[J] .AgriculturalScience＆Technolo-
gy, 2008, 9(1):18-20, 53.
[ 11] GAOY, ZHAOSZ, CHENM, etal.Efectsofsodiumchloridestresson
growthofsweetpotatoplantletsinvitroandioncontent[ J].Agricultural
Science＆Technology, 2008, 9(5):27-30, 30.[ 12] TANGR, GONGWH, SHIWX, etal.Comparativestudyonthestructur-
alandmoisturecharacteristicsofleaffromtheplantletsofthreetypesof
ornamentalLiliumbrowni[ J].AgriculturalScience＆Technology, 2009,
10(2):93-96.
(下转第 6133页)
611738卷 12期　　　　　　　　　　　　　　　　柴慈江等　栒子试管苗的土壤支撑生根培养和带坨移栽
个后代 ,其数量也完全能满足人们的需要。因此 ,不论是在
龙胆草的保护上 ,还是在生产上都应采用生根继代的方法对
龙胆草试管苗进行繁殖。
表 2　不同浓度和不同激素对愈伤组织分化的影响
Table2　Theefectofdifferentconcentrationsanddifferentkindsofhormonesoncalusdiferentiation
激素及浓度∥mg/LHormoneanditsconcentration
IAA IBA IAA NAA
分化数Diferentiatednumber
分化率∥%Differentiationrate
每块平均分化芽数Averagediferentiatedbudspercalus
分化苗长势Growthvigorofdiferentiationseedlings
0 0 0 0 0 0 0 -
0 0.5 0 0 0 0 0 -
0 1.0 0 0 0 0 0 -
0 0 0.5 0 0 0 0 -
0 0 1.0 0 0 0 0 -
0 0 0 0.5 0 0 0 -
0 0 0 1.0 0 0 0 -
0.6 0 0 0 0 0 0 -
0.6 0.1 0 0 0 0 0 -
0.6 0.5 0 0 0 0 0 -
0.6 0.5 0 0 0 0 0 -
0.6 0 0.1 0 54 54 0 ++
0.6 0 0.5 0 40 40 0 +
0.6 0 0 0.1 93 93 0 ++
0.6 0 0 0.5 42 42 0 +
1.2 0 0 0 0 0 0 -
1.2 0.1 0 0 0 0 0 -
1.2 0.5 0 0 0 0 0 -
1.2 0 0.1 0 13 13 0 +
1.2 0 0.5 0 11 11 0 +
1.2 0 0 0.1 50 50 0 +
1.2 0 0 0.5 27 27 0 +
　　现在许多相关研究指出 ,通过继代培养的愈伤组织分化
培养的试管苗容易发生变异 [ 7-8] ,而笔者将试管苗移植到山
坡上后 ,连续 5年观察都证明:除了出现长势整齐旺盛 、根系
发达的特点外 ,试管苗的其他各种植物学性状与野生植株一
致 。这不仅说明通过龙胆草嫩茎愈伤组织诱导的方法所获
得的试管苗能够保持该植物的遗传特性外 ,还说明采用此方
法所获得的试管苗能够达到保护该物种的目的 。
参考文献
[ 1] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴:第 3册[ M].北京:科学出
版社 , 1987:398.
[ 2] 韩全忠 ,王正兴.大连地区植物志:中册[ M].大连:大连理工大学出版
社, 1993:588.
[ 3] 南京中医药大学.中药大辞典:上册 [ M].上海:上海科学技术出版社,
2006:869-872.
[ 4] 李书心.辽宁植物志:下册 [ M].沈阳:辽宁科学技术出版社, 1992:1179.[ 5] 邹翠霞,王艳杰,陈晓宁,等.甜菜心嫩茎无性系建立的研究 [ J].大连工
业大学学报, 2009, 28(2):66-68.
[ 6] 安利佳 ,姜长阳.植物组织培养导论 [ M].大连:辽宁师范大学出版社,
1996:61-62.
[ 7] 张俊莲 ,张志豪.当归愈伤组织低温保存试验 [ J] .甘肃农业大学学报,
1996, 31(2):175-177.
[ 8] 王国平 ,洪霓.果树的脱毒与组织培养 [ M].北京:化学工业出版社,
2005:44.
(上接第 6117页)
[ 13] JIANGQ, DONGL, NINGZY, etal.Establishmentofsomaticcelclones
inThesiumchinenseturczanditsinvitrorootingtechnique[J].Agricul-turalScience＆Technology, 2008, 9(5):47-49.
[ 14] YANGXF, LIFL, SUNXH, etal.Studyontheinfluencingfactorsand
therootmechanismincutingprocessofPrunushumilis(Bge).Sok[J] .
AgriculturalScience＆Technology, 2009, 10(2):113-117.
[ 15] 客绍英,张胜珍,刘玉军.菘蓝试管苗玻璃化过程中抗氧化物酶活性
的变化 [ J].华北农学报 , 2009, 24(3):158-162.
[ 16] 孙宁 ,张磊,赵新海,等.离子注入对凤仙试管苗组织培养和成花的影
响 [ J].华北农学报, 2009, 24(3):163-165.
613338卷 12期　　　　　　　　　　　　　　　　文伟等　龙胆草组织培养及其无性系的研究