全 文 ：2014年 云南中医学院学报 第37卷
不同层积处理滇重楼种子内源激素变化的研究 *
赵俊凌 1，罗承彬 2，李 戈 1△
（1.中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所云南分所，云南景洪 666100；
2.西双版纳州农机学校，云南景洪666100）
摘要：目的 研究滇重楼种子在萌发过程中内源激素变化，为滇重楼种苗繁育提供理论依据。方法 以室外
与室内两种不同处理的滇重楼种子为材料，采用高效液相法测定滇重楼种子内源激素含量。 结果 经层积处理
120d后，滇重楼种子开始萌发；整个萌发过程中，滇重楼种子内源激素 GA显著升高，ABA显著降低，IAA含量变化
不明显；室外处理的滇重楼种子萌发整体水平优于室内处理。结论 在滇重楼种子育苗过程中，内源激素 ABA 和
GA起着重要的作用。
关键词：滇重楼；种子；层积处理；内源激素
中图分类号：R282.6文献标志码：A 文章编号：1000-2723（2014）03-0028-02
*基金项目：中央级公益性科研院所基本科研业务专项（YZYN 2012-02），中央级公益性科研院所基本科研业务专项
（YZYN 2013-01）
收稿日期：2014-03-04
作者简介：赵俊凌（1981-），男，四川三台人，助理研究员，主要从事药用植物化学成分分析。
△通信作者：李戈，E-mail：lige@163.com
JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine
云南中医学院学报第37卷第3期
2014年6月
Vol. 37 No. 3
6. 2014
重楼（Paris polyphylla Smith var. yunnanensis）
是云南白药的主要原料，也是宫血宁、夺命丹、总皂
苷片、季德胜蛇药片、热毒清等 65个重要中成药的
主要组方原料[1]。重楼药材多年来完全依赖野生采
挖，连年的乱采滥挖使我国野生资源日趋枯竭，据
云南白药集团调查，全国年需求量在 3 000以上，国
产野生重楼已开发 90%.
滇重楼种子具有“二次休眠”现象[1-2]，且出苗率
很低，仅为 46.2%[2]。种子繁殖一直未能在生产上应
用，成为制约重楼依靠种子繁育种苗速度的一个重
要瓶颈。本文以滇重楼种子胚率与内源激素为指
标，研究不同层积条件对重楼种子发育的影响，为
重楼种苗繁育提供理论依据。
1 材料与方法[3-6]
1.1 材料
白药种子于 2012年 12月 20日采自云南白药
集团云南省楚雄市武定栽培基地。
1.2 种子处理
将新鲜的重楼种子去皮后，清水冲洗，分别放
置于室内环境（恒温 20℃）与室外环境（药用植物研
究所云南分所内试验田）中进行沙藏保存，保持湿
润条件，分别于 20d，40d，60d，80d，100d，120d，
140d，160d，180d取样，样品经液氮冷冻后贮藏于低
温冰箱中（-80℃）保存，以备测试。
1.3 胚率测定
分别取不同时间段的 20粒种子，沿种胚中央
将胚乳切成两半，利用体式显微镜和游标卡尺分
别测量胚长与胚乳长，并计算胚率。（胚率＝胚长／
胚乳长）
1.4 内源激素提取
精密称取样品 3份，每份 1.00g，加入液氮磨
碎，加 8倍 80%冰冻甲醇 4℃低温避光浸提 12 h，
离心取上清液；将残渣再用 80%的冰冻甲醇（1∶5）浸
提 2 次，每次 2 h，离心，合并上清液，40℃下氮气吹
干，加水定容至 5mL，作为供试液 1备用；用 10 mL
80%甲醇平衡 C18 小柱→取 1mL 供试液 1 至 C18
小柱→10 mL甲醇淋洗 C18小柱→收集洗脱液，将
洗脱液用氮气吹干，甲醇定容至 1mL，过 0.45um有
机膜，作为供试液 2备用。
1.5 激素含量测定
1.5.1 仪器与试剂
Waters 高压液相色谱系统（600-2707-2998，
on-line degasses AF Empower station）；色谱柱：Wa－
ters XTerra C18柱（250×4.6，5.0μm，）；
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第3期
甲醇（Fisher，美国）、乙腈（Fisher，美国）为色谱
纯，磷酸为分析纯，（赤霉素，SIGMA）、IAA（吲哚乙
酸，ALORICH）、ABA（脱落酸，SIGMA）
1.5.2 色谱条件
流动相：A泵：甲醇，B泵：乙腈，C泵：0.05%磷
酸缓冲液，D 泵：去离子水；梯度洗脱，程序如表 1
所示；检测波长：210nm；流速：1mL/min；柱温：35℃。
2 结果与分析
2.1 滇重楼种子层积过程中胚率变化
种胚生长速率与层积时间有密切关系，胚率
随着时间推移而增大，见图 1。在 80d 后，室外条
件下胚率显著增加，说明室外条件更有利于重楼
种子萌发。
2.2 重楼种子层积过程中内源激素动态变化
由图 2可知，在滇重楼种子萌发过程内源 ABA
与 GA变化显著，而内源 IAA含量总体变化趋势明
显，表明 ABA与 GA是影响滇重楼种子发育的重要
因素。
随着时间的延续，层积 40d后滇重楼种子内源
ABA 含量明显下降，120d后含量最低，表明较高
ABA含量可能是种子休眠的重要原因；滇重楼种子
内源 GA 含量随着层积时间的延续逐渐升高，在
160d时达到最高值，然后呈现降低趋势；滇重楼种
子内源 IAA含量没有显著变化。
3 讨论
种子萌发受环境因素影响（光照、水分及温度
等），环境改变引发种子各内源激素量发生变化而
最终导致种子萌发。由于滇重楼种子存在二次休眠
的现象中，多采用变温层积处理缩短种子发芽时
间，提高出苗率。滇重楼种子最适合温度为 18～
20℃，本试验选择室内（20℃恒温）及室外（大田）两
种处理方法。结果表明，滇重楼种子处理时间 120d
后，室外条件下的胚率明显高于室内恒温条件，说
明室外处理促进了种子的萌发，提前解除滇重楼种
子的休眠期，提高了种子的利用度。
文献报道 ABA 是控制种子休眠的主要因素，
而 GA 可通过对 ABA 的拮抗作用来打破种子休
眠，促进种子胚的发育及种子的萌发。实验结果显
示，在萌发过程中，随着时间推移，滇重楼种子内源
ABA 含量持续降低，而 GA 量逐渐增加，IAA量上
下波动不明显。结果表明，ABA 及 GA 是控制滇重
楼种子萌发的主要内源激素，因此，增加环境中 GA/
ABA 值将可能缩短滇重楼种子萌发时间，增加种子
的出苗率。从图 2的变化趋势分析，室外条件下滇
重楼种子内源激素的变化总体水平明显高于室内
恒温条件，说明室外处理比室内处理更有利于种子
的萌发。
T /min A /% B /% C /% D /% Curve
0.00 0 25.00 75.00 0
30.00 0 25.00 75.00 0 6
10.00 0 40.00 60.00 0 6
25.00 0 25.00 75.00 6 6
表 1 梯度洗脱程序表
图 1 滇重楼种子萌发过程中胚率变化
图 2 重楼种子萌发过程中内源激素的动态变化 （下转第 41页）
赵俊凌等：不同层积处理滇重楼种子内源激素变化的研究
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第3期 汪 瑛等：合谷透后溪治疗脑卒中后腕手功能障碍80例
Research on the Change of Endogenous Hormone of the Paris polyphylla var. yunnanensis
under Different Stratification Conditions
ZHAO Jun-ling，LUO Cheng-bin，LI Ge
（Institute of Midicinal Plant Development Yunnan Branch，Chinese Academy of Medical Sciences and
Peking Union Medical College，Jinghong 666100，China）
ABSTRACT：Objective To study the change of endogenous hormone of the Paris polyphylla var in the course of seed
germination and provide theory basis for seed breeding of Paris polyphylla. Methods After the seeds were treated by two different
conditions including indoors and outdoors，the content of endogenous hormone （GA、IAA and ABA）was mensurated by RP-HPLC.
Results After being treated for 120 days，the seed of Paris polyphylla var breed；During germination，the content of GA rose，the
content of ABA reduced，the content of IAA remained；The germination level of the seed treated by outdoor conditions was higher
than that of the seed treated by indoor conditions. Conclusion ABA and GA have a significant impact on the germination of Paris
polyphylla var yunnanensis seeds.
KEY WORDS：Paris polyphylla var yunnanensis；seed；stratification；endogenous hormone
参考文献：
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国农学通报，2008，24（12）：242-246.
[4] 陈翠，康平德，杨丽云，等. 云南重楼种苗繁育技术[J]. 中
国现代中药，2010，12（2）：23-24.
[5] 陈疏影，尹品训，杨艳琼. 变温层积对解除滇重楼种子休
眠及其内源激素变化的研究 [J]. 中草药，2011，42（4）：
793-795.
[6] 王艳芳，唐玲，李戈，等. 影响滇重楼种子萌发及胚根生长
因素的研究[J]. 云南中医学院学报，2012，35（2）：28-31.
（编辑：岳胜难）
80 Cases of Hegu through Houxi Acupuncture in Treating Wrist Hand Dysfunction due to Stroke
WANG Ying，WANG Jie，JIANG Liu-shun
（Anhui University of Traditional Chinese Medicine Second Affiliated Hospital，Hefei 230061，China）
ABSTRACT：Objective Observation Hegu through Houxi acupuncture treatment in wrist hand dysfunction after stroke clinical
efficacy. Methods The 80 cases diagnosed in the wrist hand dysfunction after stroke were randomly divided into treatment group and
control group 40 cases. Through the use of the treatment group Hegu through Houxi acupuncture treatment，The control group
underwent routine acupuncture Hegu and Houxi acupoints. Treatment once a day，10 times as a course of treatment，rest two days
before making the next l treatment. 1，2，3 observed after treatment of patients with Fugl-Meyer motor function and Barthel ADL
Index score situation. Results The treatment group and the control group of patients with wrist hand function were improved，the
scores were improved. Wrist and hand function，but the treatment group improved more significantly，compared with the control
group was statistically significant. Conclusion Hegu through Houxi acupuncture treatment of post -stroke hand wrist dysfunction
efficacy，superior to conventional acupuncture.
KEY WORDS：stroke；Hegu through Houxi；wrist hand dysfunction
近侧或远侧端。合谷透后溪，针刺穿透掌浅弓与掌深
弓之间，可直接刺激尺神经深支、正中神经的分支、
无名指、桡侧中食指及拇指肌肉的正中神经运动支，
亦有利于局部痉挛的缓解。合谷透后溪为重刺法，针
刺时刺激力强，且有取穴少、见效快、疗效好的特点。
参考文献：
[1] 王东岩，卫哲，曹东辉. 低频脉冲电穴位治疗改善中风后
手腕部功能的研究[J]. 中医药信息，2008，25（3）：51-52.
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175.
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夏出版社，1996：14-15.
[4] 王拥军. 卒中单元[M]．北京：科学技术文献出版社，2004：
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[5] 孙思凡，牛红月. 针刺四渚穴治疗脑卒中后手指功能障碍
66例[J]. 针灸临床杂志，2012，28（5）：16-17.
[6] 陈希，徐照，朱丽. 后溪透合谷的解剖学基础[J]. 上海针灸
杂志，2012，31（7）：530-531.
（编辑：徐建平）
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（上接第 29页）
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