全 文 ：蝴蝶兰不定芽途径快繁技术研究
李成慧1，蔡 斌2 (1．苏州农业职业技术学院，江苏苏州 215008;2．南京农业大学园艺学院，江苏南京 210095)
摘要 ［目的］优化蝴蝶兰不定芽快繁技术中增殖培养基的成分及其浓度，完善蝴蝶兰快速繁殖技术。［方法］利用组织培养的手段，在
增殖培养基上诱导出蝴蝶兰不定芽，研究 6-BA、PVP的浓度以及不定芽大小对增殖效果的影响。［结果］培养基 1 /2 MS + 0． 2 mg /L
NAA +10 mg /L 6-BA +2 g /L PVP +1 g /L水解酪蛋白 + 20 g /L蔗糖 + 8 g /L琼脂(pH 5． 4)是不定芽增殖的最佳培养基，增殖系数达
10;以长为 1． 0 ～1． 5 cm的不定芽作为蝴蝶兰扩繁材料较为合适。［结论］结果表明该研究优化的培养基配方和快繁技术可用在蝴蝶兰
种苗快繁生产中。
关键词 蝴蝶兰;快速繁殖;不定芽
中图分类号 S682． 31 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)20 －10368 －02
Study on the Micropropagation of Phalaenopsis through Adventitious Shoots Propagation
LI Cheng-hui et al (Suzhou Polytechnic Institute of Agriculture，Suzhou，Jiangsu 215008)
Abstract ［Objective］To optimize the components and their concentration in the propagation medium of Phalaenopsis，so as to improve its rapid
propagation technology．［Method］The adventitious shoots of Phalaenopsis were induced on the propagation medium with the method of tissue cul-
ture，and then the impact of the concentrations of 6-BA，PVP and the size of advantitious shoots on the propagation results was studied．［Result］
The best propagation medium was 1 /2 MS +0． 2 mg /L NAA +10 mg /L 6-BA +2 g /L PVP +1 g /L casein hydrolysate +20 g /L sucrose + 8 g /L
agar(pH 5． 4)with the propagation coefficient of 10;the advantitious shoots with 1． 0 －1． 5 cm length were the ideal materials for the propagation
of Phalaenopsis．［Conclusion］The optimized medium and propagation technology in this study were applicable to the rapid propagation of Phalae-
nopsis．
Key words Phalaenopsis;Rapid propagation;Adventitious shoots
作者简介 李成慧(1979 － ) ，女，江苏启东人，硕士，讲师，从事园艺植
物栽培应用与育种方面的教学与科研工作，E-mail:
409794994@ qq． com。
收稿日期 2012-03-15
蝴蝶兰(Phalaenopsis)形态优美，花色多样，花期可达 3
个月，在国内外花卉市场上极受欢迎，具有很高的观赏价值
和经济价值。对于国内蝴蝶兰产业化的发展，建立和完善快
速繁殖技术是当务之急。
蝴蝶兰的快速繁殖可通过其类原球茎和不定芽的扩繁
来实现［1 －3］。利用不定芽进行快速繁得到的苗后代变异率
相对较小，有利于品种特性的保持，使商品化的蝴蝶兰生产
建立在更为可靠的基础之上;对一些不易诱导类原球茎的蝴
蝶兰品种来讲，更有赖于采用该方法进行快速繁殖。在利用
不定芽进行快繁时，不定芽的增殖速率及如何将这些芽体培
育成适于移栽的健壮芽是能否进行蝴蝶兰产业化生产的 2
个关键环节。在不定芽增殖培养基中，细胞分裂素 6-BA 的
浓度起着特别重要的作用，根据已有报道，对于培养基中 6-
BA的浓度还没有一致的结论［4–6］。不定芽在培养过程中会
出现褐化，褐化对外植体的生长有抑制作用，一般通过添加
吸附剂来抑制褐化［7］。另外，在扩增繁殖过程中得到的不定
芽大小不一，这些不定芽的分化能力可能存在差异。该研究
着重对不定芽增殖培养基中的 6-BA、PVP 的浓度以及不定
芽大小对增殖效果的影响进行研究，旨在完善蝴蝶兰快速繁
殖技术。
1 材料与方法
1． 1 材料 供试材料为蝴蝶兰“迷你红”品种。
1． 2 方法
1． 2． 1 试验设计。按单因素随机区组设计，分别分析 6-BA
浓度、PVP等因素对不定芽增殖的影响以及各种大小不定芽
的增殖能力。每个处理用 5 管培养基，每管接一个不定芽，
重复 3次，观察每个周期内增殖的不定芽数目，试验数据用
常用统计方法分析。
1． 2． 2 处理因素。在培养基(1 /2 MS + 20 g /L蔗糖 + 1 g /L
水解酪蛋白 +8 g /L琼脂，pH 5． 4)中分别添加 1、5、10和 15
mg /L 6-BA，分析以上 4种浓度 6-BA 对不定芽增殖的影响;
PVP浓度设计为 1和 2 g /L，考查不同浓度 PVP对不定芽增
殖的效果;选取长度分别为 1． 0、1． 5和 2． 0 cm的不定芽进行
增殖培养，比较不同长度不定芽的增殖能力差异。
1． 2． 3 培养条件。培养温度为 25 ℃，光照强度为 1 300 ～
1 500 Lux，50 d后观察不定芽增殖的情况。
2 结果与分析
2． 1 6-BA浓度对不定芽增殖的影响 试验中发现，在添加
有 6-BA的培养基上，经过一段时间培养后，接种的不定芽基
部陆续新生几个不定芽突起，50 d 后，这些突起发育为若干
新的芽。新形成的不定芽由于分化和发育形成的时间不同
而芽体的长短不一，这些不同大小的不定芽在以后进一步用
于增殖培养时很可能有差异，按照长度不同将其分为Ⅰ类、Ⅱ
类、Ⅲ类，其中Ⅰ类茎芽的长度大于 1． 0 cm，Ⅱ类的长度在 0． 5
～1． 0 cm，Ⅲ类的长度小于 0． 5 cm。
研究结果显示，新生不定芽的数目随 6-BA 浓度的不同
而不同，培养50 d后统计Ⅰ类和Ⅱ类的总数。在6-BA浓度为1
mg /L时，从单个不定芽基部分化 1． 33 个不定芽，与对照相
比差异不显著;6-BA 浓度为 5 mg /L 时，新生不定芽数显著
增加，为7． 27个;浓度增为10 mg /L时，平均每个不定芽基部
可长出 10个不定芽;继续提高 6-BA 浓度至 15 mg /L 时，不
定芽数目并不显著增加，且所得的芽较为细小。由此可见，
6-BA能促使不定芽基部分化出新的不定芽，其浓度是影响
新生不定芽增殖的关键因子，当 6-BA浓度为 10 mg /L时，不
责任编辑 王春艳 责任校对 卢瑶安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(20):10368 － 10369
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.20.116
定芽的数目和质量均较为理想。
2． 2 PVP对不定芽增殖的影响 试验结果显示，PVP浓度
为 1 g /L时，3类不定芽的增值数目分别与其对照相比都没
有显著的差异;当 PVP浓度提高到 2 g /L时，3类不定芽数均
显著高于对照。就这 3类不定芽的总数而言，培养基中添加
2 g /L PVP时，单个不定芽基部形成的不定芽数目显著多于
对照。同时，添加 2 g /L PVP和 1 g /L PVP相比，新生不定芽
数也有显著增加(表 1) ，这表明培养基中添加 2 g /L 的 PVP
是较为适宜的剂量。
表 1 PVP对不定芽增殖的影响
PVP
浓度
g /L
不定芽数
Ⅰ类
(＞1． 0 cm)
Ⅱ类(0． 5 ～
1． 0 cm)
Ⅲ类
(＜0． 5 cm)
总数
2 1． 51aA 3． 11aA 7． 16aA 11． 78aA
1 0． 33bB 1． 84bB 5． 22bAB 7． 40bB
0 0． 31bB 2． 04bAB 4． 96bB 7． 31bB
注:右上角不同小写字母表示数值间差异显著(P ＜ 0． 05) ，不同大写
字母表示数值间差异极显著(P ＜0． 01)。
2． 3 同大小不定芽的扩增繁殖能力差异 结果显示，长度
为 1． 0、1． 5和 2． 0 cm 的不定芽，在增殖培养基上培养 50 d
后，基部形成的Ⅱ类不定芽数之间无显著差异，形成的Ⅰ、Ⅲ类
不定芽的数目则存在着明显的差异。所用的不定芽长度为
1． 0 cm时，形成的Ⅰ类茎芽数目最少，而Ⅲ类不定芽数目最
多，与长度为 1． 5和 2． 0 cm的相比，差异达极显著水平;长度
为 1． 5 cm的不定芽和长度为 2． 0 cm的相比，前者新生的Ⅲ
类不定芽数目比后者多，达极显著水平，两者形成的Ⅰ类不定
芽数目相等(表 2)。就形成的不定芽总数而言，随着接种用
不定芽长度的增加，基部得到的芽数目逐渐减少。
表 2 不同长度的不定芽扩繁能力的差异
接种不
定芽长
度∥cm
不定芽数
Ⅰ类
(＞1． 0 cm)
Ⅱ类(0． 5 ～
1． 0 cm)
Ⅲ类
(＜0． 5 cm)
总数
2． 0 0． 89aA 2． 62a 3． 16C 6． 67bB
1． 5 0． 89aA 2． 60a 5． 87B 9． 36aAB
1． 0 0． 38bA 1． 78a 8． 31A 10． 47aA
注:右上角不同小写字母表示数值间差异显著(P ＜ 0． 05) ，不同大写
字母表示数值间差异极显著(P ＜0． 01)。
2． 4 成苗和移栽 长度 1． 5 cm左右的不定芽在生根培养
基(3 g /L花宝 1号 + 30 g /L蔗糖 + 1 g /L水解酪蛋白 + 2
mg /L NAA +1 mg /L IAA + 8 g /L琼脂，pH 5． 4)上经过 20 d
培养后，基部有幼根长出，2个月后，形成的小苗具 3 ～ 4张展
开叶和 2 ～3条根，这样的小苗即可出瓶，在 25 ℃ /20 ℃条件
下，培养 1个月后长出新叶，此时再换到 28 ℃ /25 ℃的光照
条件下培养。以该方式炼苗，移栽后苗的成活率在 95%
以上。
3 结论与讨论
该研究结果显示，在蝴蝶兰的快繁中，6-BA是一种很关
键的激素类物质［8］，6-BA 的浓度影响蝴蝶兰不定芽的增殖
效率和不定芽的健壮程度。刘荣维［1］和林宗铿［2］报道 6-BA
浓度为 10 ～20 mg /L时，不定芽的增殖率较高。该研究表明
6-BA浓度为 10或 15 mg /L时，单个不定芽基部分化形成的
芽数较多，但浓度为 10 mg /L时，培养 50 d后形成的不定芽
中，有 4 ～5个长度在 1． 0 cm 以上粗壮的不定芽，而浓度在
15 mg /L时，新生的芽较小，不利于进一步的继代培养，故对
于“迷你红”而言，6-BA浓度为 10 mg /L时，最易增殖得到粗
壮的不定芽。
外植体在培养过程中，会向培养基分泌褐色的物质，这
是外植体切口分泌的酚类物质与多酚氧化酶作用后生成的
醌类物质，其对外植体的生长有抑制作用。PVP是一种高分
子物质，能专一吸附酚类物质［9］。该试验表明，于培养基中
添加 2 g /L的 PVP能促进不定芽的增殖，这可能是由于 PVP
吸附了不定芽分泌的酚类物质所致。
据报道，蝴蝶兰叶片诱导类原球茎时，外植体大小对诱
导效率有影响［10］。该研究中，利用不定芽进行扩繁时，不同
大小芽体间分化新芽的能力也存在差异，在继代培养时，应
区别对待。长度小于 1． 0 cm的不定芽在转移培养时容易褐
化死亡，而芽发育的过大，在增殖培养时分化的能力较低。
1． 0 cm长的不定芽分化能力比 1． 5 和 2． 0 cm的要强，并且
继代培养时也不易褐化死亡，因此，大小为 1． 0 cm的不定芽
比较适合用来作继代培养。
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