全 文 :响应面优化蒲公英多酚超声波辅助乙醇
提取工艺及其抗氧化性
刘 杨 1,2,赵 婧 1,2,梁 莉 1,2,于国泳 1,2,李全宏 1,2,*
(1.中国农业大学食品科学与营养工程学院,中国 北京 100083;2.国家果蔬加工重点实验
室,中国 北京 100083)
摘 要:本试验以蒲公英全草为原料,选取超声波提取时间、超声波功率、料液比、超声提取温度四个因
素为自变量,结合单因素实验结果,对蒲公英多酚超声波辅助提取工艺进行优化,最后对蒲公英不同部位
多酚抗氧化活性进行评估。结果表明:四因素对提取率的影响大小依次是提取温度>超声波功率>超声提
取时间>料液比;超声波辅助乙醇提取蒲公英多酚的最佳工艺条件为提取时间 37min、超声功率 380 W、
提料液比 1﹕48、温度42℃,多酚平均提取率为(3.6829±0.0507)%,与理论预测值3.71775%误差值仅为0.94%。
在优化条件下依次对蒲公英全草、叶片和根中的多酚进行提取并比较其抗氧化活性,三者均具有较强的抗
氧化能力,蒲公英不同部位的抗氧化活性大小依次为蒲公英叶片>蒲公英全草>蒲公英根。1
关键词:蒲公英;多酚;超声提取;响应面法;抗氧化性
Optimization of ultrasonic-assisted alcohol extraction of polyphenols from dandelion and their
antioxidant activity
LIU Yang1,2, ZHAO Jing1,2, LIANG Li1,2, YU Guoyong1,2, LI Quanhong1,2,*
(1.College of food science and nutritional engineering, China agricultural university, Beijing 100083, China;
2. Fruits and vegetables processing key laboratory, Beijing 100083 China)
Abstract: This study aimed to optimize the ultrasonic-assisted extraction of polyphenols from dandelion using
single-factor experiments and response surface methodology. The antioxidant activity of the extracted flavonoids
was evaluated. The optimal extraction conditions were determined as follows: the time of ultrasonic-assisted
extraction, 37 min; ultrasound power, 380W; solid-to-liquid ratio, 1:48 g/m L and temperature, 69℃. Under these
conditions, the predicted and experimental extraction yield of polyphenols was (3.6829 ± 0.0507)% and 3.71775%,
respectively. The good consistency indicated the mathematical model which was built could fit experimental data
well. Polyphenols compounds were extracted from the whole plants, leaves or roots of dandelions under the
optimal conditions, and their antioxidant activities were evaluated and compared. The polyphenols extracted from
both parts possessed high total reducing power. DPPH and hydroxyl free radical scavenging abilities. The
antioxidant activity of different parts of dandelion was in the decreasing order: leave> whole plant> root.
Key words: dandelion; polyphenols; ultrasonic-assisted extraction; response surface methodology; antioxidant
activity
中图分类号:TS201.1 文献标志码:A 文章编号:2016080082
蒲公英(Herba Taraxaci)为菊科多年生草本植物,叶子绿色,头状花序,种子上有白色冠毛结成的
绒球[1]。蒲公英味苦、甘、寒,为 101 种药食同源植物之一[2,3]。中医认为蒲公英有清热解毒、利尿缓
泻、保肝利胆等作用,药理研究也表明蒲公英具有广谱抗菌、提高免疫力、降脂降压和抗胃损伤等作
收稿日期:2016‐08‐08
作者简介:刘杨(1992—),女,硕士研究生,研究方向为天然产物与功能食品。E‐mail:Liuyangr@yeah.net
*通信作者:李全宏(1966—),男,教授,博士,研究方向为天然产物与功能食品。E‐mail:
liquanhong66@163.com
网络出版时间:2016-10-10 15:47:31
网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1759.TS.20161010.1547.025.html
用[4-6]。蒲公英的生物活性与植物体中的蒲公英醇、蒲公英素、酚酸类、黄酮类、三萜类和植物甾醇
类等物质有关[7,8]。中国蒲公英资源丰富,分布广泛,适应性强,人工栽培技术和产业化种植正在逐年
扩大[9],并且蒲公英在药品、食品、保健品等领域拥有非常广阔的应用前景。但目前,我国对蒲公英
的利用还处于鲜食或制备浸膏上,对蒲公英功能成分的分析和精深加工远远落后于发达国家 [10-12]。因
此,进一步深入研究蒲公英全草功能成分对促进蒲公英深加工相关产业的发展具有重要意义。
酚酸一般含有一个羧基官能团,是酚类物质中的一类[13]。在人体及其他动物体内,酚酸除了具有
清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抑菌等作用外,对抑制肥胖、提高免疫力、改善情绪等也体现出了一
定的生物活性[14]。自 1985 年 Wolbis M.等[15]从蒲公英中分得 7 种酚酸类物质开始,对蒲公英酚酸类物
质的研究逐渐开展。蒲公英中的酚酸主要有对羟基苯甲酸、对羟基苯乙酸、香荚兰酸、原儿茶酸、绿
原酸及咖啡酸等[16]。其中,绿原酸为蒲公英具有抑菌作用的主要成分,绿原酸的含量是中药蒲公英质
量的评价标准[8,17]。目前,对蒲公英多酚的研究主要集中蒲公英中单一酚酸提取,多酚的提取方式也
比较传统,对蒲公英植物中多酚总体的提取、性质及应用的研究还不多见。贾梅珍等[18]报道了采用乙
醇热回流法提取蒲公英中绿原酸的最佳工艺,此法耗时长、温度高。梁引库[19]采用热水浸提法提取蒲
公英中的绿原酸;杨岚等[20]75%乙醇提取蒲公英花中的总酚酸,得到总酚平均含量为 4.09%的提取液,
并且表明此提取液对超氧阴离子自由基、羟自由基和油脂自氧化均有较好的清除效果;普义鑫[21]比较
了甲醇、乙醇、丙酮、蒸馏水对槟榔多酚的提取效果,甲醇的提取率最高,蒸馏水最差,溶剂浸提法
成本低、适用性强,但甲醇等有机溶剂对人体有害,提取效率低,不适合工业化生产。邢少青[22]比较
了微波辅助及超声波辅助两种多酚提取方法,在正交优化条件下,超声提取法提取荷叶多酚的提取率
为 12.6%,而微波辅助法的提取率为 11.8%,超声波提取因操作简单快速,提取率高,不破坏生物结
构而显示出明显优势。
本研究以超声波辅助乙醇提取蒲公英全草中的多酚,利用提取过程中超声波产生的空化和震动作
用缩短乙醇提取时间,通过考察提取时间、超声波功率、超声提取温度和料液比四个因素的单因素试
验结果,响应面法优化蒲公英中多酚的提取工艺条件,并考察蒲公英全草、蒲公英叶片和蒲公英根的
3 个抗氧化指标,以揭示蒲公英不同部位的体外抗氧化活性,以期为蒲公英多酚的进一步功能性研究
提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
蒲公英样全草(Talraxacum mongolicum Hand.-Mass),于 2016 年 4 月采自中国农业大学校园,除
去土及枯黄叶,全草洗净,于-20℃预冷,真空冷冻干燥,粉碎后过 80 目筛,于避光处密封保存。
绿原酸标准品(纯度:HPLC≥98%),上海源叶生物科技有限公司;无水乙醇、甲醇、Folin-Ciocalteu
显色剂、无水碳酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、铁氰化钾、三氯乙酸、三氯化铁、水杨酸、过氧化
氢、硫酸亚铁,均为分析纯;6-羟基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸(6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-
carboxylic acid,Trolox)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)购于美国
Sigma 公司。
BP221S 电子天平 德国 Sartorius 公司;九阳料理机 九阳股份有限公司;KQ-500DE 型数控超
声清洗器 昆山市超声仪器有限公司;LGJ-18 冷冻干燥机 北京松源华兴科技发展有限公司;MVP 10
型旋转蒸发仪 德国 IKA 公司;TGL-16A 台式高速冷冻离心机 长沙平凡仪器仪表有限公司;
UV-2450 型紫外分光光度计 日本岛津公司。
1.2 实验方法
1.2.1 蒲公英多酚的提取
准确称取 0.3g 蒲公英全草冻干粉,以一定的料液比加入 70%的乙醇水溶液。在一定温度、功率
下超声提取一定时间后,于 10000g,5℃ 条件下离心 10min。上清液旋转蒸发至小于 25mL,转入 25
m L 容量瓶,用 70%的乙醇水溶液定容,备用。
1.2.2 单因素试验
根据文献报道和预实验的结果,影响多酚超声波提取效果的主要因子有超声时间、超声功率、料
液比和提取温度等。实验设置了提取功率(100、200、300、400 及 500(W))、提取时间(10、20、
30、40、50 及 60(min))、液料比(1:30、1:50、1:70、1:90 及 1:110(g/mL))以及提取温度(20、
30、40、50、60、70(℃))四个单因子,固定因素水平为超声提取功率 200W、提取时间 30min、料
液比 1:50 及提取温度 30℃,实验分别考察了这四个因素对蒲公英多酚提取率的影响,以蒲公英多酚
提取率为考察指标进行评价和分析,以确定各因子的影响效果和适宜的参数范围。
1.2.3 响应曲面优化实验设计
以 Design-Expert 8.0.6 为统计分析软件,根据 Box-Behnken 的中心组合实验设计原理,结合单因
素实验结果,以超声提取时间(A)、超声波功率(B)、料液比(C)和超声提取温度(D)为自变量,
蒲公英多酚提取率(Y)为响应值,采用四因素三水平的响应面分析法进行实验设计,因素水平设计
见表 1。
表 1 蒲公英多酚酸提取响应面分析实验设计因素与水平表
Table 1. Variables and levels in response surface design
水平
因素
A 提取时间
(min)
B 超声功率
(W)
C 料液比
(g/mL)
D 提取温度
(℃)
-1 20 300 1:40 30
0 30 400 1:50 40
+1 40 500 1:60 50
1.2.4 多酚含量的测定
多酚的测定采用 Folin-Ciocalteu 比色法[23]。
1.2.4.1 标准曲线的制作
以 70%乙醇水溶液分别配制 100、150、200、250、300、350、400、450 及 500 μg/mL 绿原酸标
准溶液。准确量取 1.0 mL 于 10 mL 容量瓶中,各加入 6 mL 蒸馏水,摇匀后加入 0.5 mL Folin-Ciocalteu
试剂,再次摇匀。5 min 之后,加入 1.5 mL 20%(m/V)Na2CO3 溶液,混匀后用蒸馏水定容至 10mL。
在 30℃下静置 2h,然后用分光光度计测定溶液在 765nm 处的吸光值。以绿原酸标准溶液的质量浓度
(μg/mL)为横坐标,吸光度为纵坐标,得线性回归方程 y=0.0214x+0.1614,R2=0.9994。
1.2.4.2 样品的测定
精密吸取蒲公英多酚酸提取溶液 1.0mL,按 1.2.4.1 方法进行操作并测定吸光度,每个实验重复三
次。按以下公式计算提取率:
蒲公英多酚酸提取率ሺ%ሻ ൌ ܥ ൈ 10
ି ൈ ܸ ൈ ܰ
ܹ ൈ 100
式中:C 提取液多酚酸的浓度(μg/mL);V 为粗提液体积(mL);N 为稀释倍数;W 为原料重量(g)。
1.3 抗氧化活性的测定
在响应面法优化提取工艺参数的基础上,分别对蒲公英的全草、叶子和根中的多酚进行提取、富
集,进行抗氧化活性的测定。
1.3.1 总还原能力的测定
取 1.0mL 不同质量浓度的样品溶液,分别加入 1.5mL 0.2 mol/L 的磷酸盐缓冲溶液(pH 6.6)和 1.5
mL 1% (m/V)的铁氰化钾溶液,混匀后于 50℃水浴锅中反应 20 min,立即冰浴冷却,加入 1.0 m L 10%
三氯乙酸溶液,于 4500 r/min 条件下离心 10 min。取其上清液 1 mL,加入 1mL 0.1% FeCl3溶液和 2 mL
蒸馏水,充分混匀,10 min 后测定 700 nm 处吸光值,以吸光值表示总还原能力的大小。以 70%无水
乙醇作空白参比,同时以 Trolox 作阳性对照[24]。
1.3.2 DPPH 自由基清除能力
DPPH 自由基清除法按照 Ardestani 等的方法进行测定[25]。吸取不同质量浓度梯度的样品溶液
1.0mL,加入 2.0mL 0.1mmol/L 无水乙醇配制的 DPPH 试剂,震荡混匀后避光反应 30 min,在 517 nm
处测定吸光值。以 70%无水乙醇作空白参比,同时以 Trolox 作阳性对照。
DPPH 自由基的清除率ሺ%ሻ ൌ ሺܣ െ ܣଵܣ ሻ ൈ 100
式中: A0为空白对照的吸光值;A1 为样品的吸光值。
1.3.3 羟自由基清除能力的测定
取 1.5 mL 不同质量浓度的样品溶液,分别加 1.0 m L 2.5 mmol/L 的水杨酸溶液、1.0 m L 5 mmol/L
的 FeSO4溶液和 2.0 mL 蒸馏水,充分混匀,加入 1.0mL 5 mmol/L 的 H2O2,置于 37 ℃恒温水浴锅中
反应 30 min,立即冰浴冷却,于 510 nm 波长处测定其吸光度,以 70%无水乙醇作空白参比,同时以
Trolox 作阳性对照[26]。
羟自由基清除率(%) ൌ ܣ െ ሺܣଶ െ ܣଵሻܣ ൈ 100
式中:A0为空白对照吸光度; A1为样品溶液吸光度(不加 H2O2);A2为样品溶液吸光度(加 H2O2)。
1.4 数据处理
所有数据均为 3 次重复实验的平均值,并表示为平均值±标准差,单因素实验数据运用 Origin7.5
软件绘制趋势曲线图;响应面实验采用 Design-Expert 8.0.6 软件进行方差分析,并优化出最佳提取工
艺。
2 结果与分析
2.1 单因子试验结果
2.1.1 超声提取时间的影响
图 1 提取时间对蒲公英多酚提取率的影响
Fig.1 Effects of extraction time on the extraction of dandelion polyphenols
2.00
2.20
2.40
2.60
2.80
3.00
3.20
3.40
0 10 20 30 40 50 60 70
总
酚
提
取
率
(%
)
提取时间 (min)
由图 1 可以看出,蒲公英多酚提取率在 30min 提取率达到峰值,此后多酚提取率下降明显。在一
定范围内,提取率随超声时间的延长而提升,但增高幅度有所下降[27]。但是,随着超声提取时间的延
长,热效应也会逐渐增强,温度的上升导致对热敏感的酚酸的转化降解[14],反而降低了提取率。因此,
最佳超声提取时间为 30min。
2.1.2 超声提取功率的影响
图 2 提取功率对蒲公英多酚提取率的影响
Fig.2 Effects of ultrasound power on the extraction of dandelion polyphenols
由图 2 可见,蒲公英多酚提取率随着超声功率的增大而呈现先上升后下降趋势,400 W 时达到最
大值,随后提取率下降。超声波在提取溶液中产生的空化效应和机械作用可以有效破碎植物细胞壁[28],
使蒲公英细胞中的结合酚类游离出来,因此,在一定范围内超声波功率的提高有利于多酚的提取。当
功率过高时,游离出来的多酚可能会在超声波的机械作用下分解,同时也会使细胞内的脂溶性物质更
多的溶入提取液中,影响多酚提取。
2.1.3 提取温度的影响
图 3 提取温度对蒲公英多酚提取率的影响
Fig.3 Effects of temperature on the extraction of dandelion polyphenols
由图 3 可知,在温度 20℃~40℃,随着温度的升高,分子运动加快,细胞壁渗透性增强,多酚的
溶解度升高,提取率随温度的上升而逐渐增加。40℃~70℃时,随着提取温度的进一步上升,蒲公英
中杂质的溶出量增加,不溶性杂质吸附了多酚类物质;并且过高的温度引起了酚类化合物的降解,提
取率缓慢下降[29]。因此,选定最佳提取温度为 40℃。
2.1.4 料液比的影响
2.00
2.20
2.40
2.60
2.80
3.00
3.20
3.40
0 100 200 300 400 500 600
总
酚
提
取
率
(
%
)
提取功率(W)
2.00
2.20
2.40
2.60
2.80
3.00
3.20
3.40
10 20 30 40 50 60 70 80
总
酚
提
取
率
(%
)
提取温度(℃)
图 4 料液比对蒲公英多酚提取率的影响
Fig.4 Effects of solid-liquid on the extraction of dandelion polyphenols
溶剂用量增加有利于多酚物质溶解析出,图 4 中,料液比在 1:30~1:50 的范围内,多酚的提取率
上升迅速。当料液比达到 1:50 后,进一步增加溶剂量提取率缓慢下降,可能原因是蒲公英中一些其
他物质如多糖溶解,妨碍了多酚的提取分离,并且过多的 70%乙醇液体稀释了提取出的多酚。因此,
选取最佳料液比为 1:50。
2.2 响应曲面优化试验
2.2.1 Box-Behnken 试验设计与结果
根据 Box-Behnken 响应面设计原理,在单因素试验基础上,以 70%乙醇为提取剂,以蒲公英多酚
提取率为响应值。响应面试验设计及结果见表 2。
表 2 响应面试验设计与结果
Table 2 Response surface experimental design and results
序号 A 时间(min) B 功率(W) C 料液比(g/mL) D 温度(℃) 提取率(%)
1 -1 -1 0 0 2.638
2 1 -1 0 0 3.454
3 -1 1 0 0 3.439
4 1 1 0 0 3.112
5 0 0 -1 -1 2.989
6 0 0 1 -1 2.875
7 0 0 -1 1 3.259
8 0 0 1 1 3.310
9 -1 0 0 -1 2.933
10 1 0 0 -1 3.233
11 -1 0 0 1 3.228
12 1 0 0 1 3.343
13 0 -1 -1 0 3.116
14 0 1 -1 0 3.183
15 0 -1 1 0 2.760
16 0 1 1 0 3.299
17 -1 0 -1 0 3.084
18 1 0 -1 0 3.496
19 -1 0 1 0 3.145
20 1 0 1 0 3.255
1:10 1:30 1:50 1:70 1:90 1:110 1:130
2.00
2.20
2.40
2.60
2.80
3.00
3.20
3.40
10 30 50 70 90 110 130
总
酚
提
取
率
(
%
)
料液比(g/mL)
21 0 -1 0 -1 2.867
22 0 1 0 -1 3.099
23 0 -1 0 1 3.190
24 0 1 0 1 3.508
25 0 0 0 0 3.783
26 0 0 0 0 3.790
27 0 0 0 0 3.390
28 0 0 0 0 3.822
29 0 0 0 0 3.825
2.2.2 模型的建立与显著性检验
应用 Design Expert 进行回归拟合分析,可得到四因素与多酚提取率之间的二次多项式模型为:
ܻ ൌ 3.72 0.12A 0.13B െ 0.040C 0.15D െ 0.29AB െ 0.076AC െ 0.046AD 0.12BC 0.021BD
0.041CD െ 0.22ܣଶ െ 0.31ܤଶ െ 0.30ܥଶ െ 0.29ܦଶ式中,Y 为蒲公英多酚提取率的预测值。
表 3 回归方程系数显著性检验表
Table 3 Test of significance for regression equation coefficients
方差来 平方和 自由度 均方 F 值 P 值 p-value 显著性
回归模型 2.46 14 0.18 12.94 < 0.0001 **
A-时间 0.17 1 0.17 12.49 0.0033 **
B-功率 0.22 1 0.22 16.02 0.0013 **
C-料液比 0.019 1 0.019 1.43 0.2512
D-温度 0.28 1 0.28 20.84 0.0004 **
AB 0.33 1 0.33 24.07 0.0002 **
AC 0.023 1 0.023 1.68 0.2158
AD 8.556E-003 1 8.556E-003 0.63 0.4404
BC 0.056 1 0.056 4.10 0.0623
BD 1.849E-003 1 1.849E-003 0.14 0.7175
CD 6.806E-003 1 6.806E-003 0.50 0.4904
A2 0.33 1 0.33 24.19 0.0002 **
B2 0.63 1 0.63 46.48 < 0.0001 **
C2 0.58 1 0.58 42.62 < 0.0001 **
D2 0.55 1 0.55 40.40 < 0.0001 **
残差 0.19 14 0.014
失拟性 0.051 10 5.079E-003 0.15 0.9936 not significant
纯误差 0.14 4 0.035
总和 2.65 28
R2 0.9283
Radj2 0.8566
Rpred2 0.8075
注: *差异显著(P<0.05),**差异极显著(P<0.01)
由表 3 可知,回归模型具有高度的显著性(P<0.0001),失拟性具有不显著性(P=0.9936>0.05),
R2=0.9283,Radj2 =0.8566,说明该模型能解释 97.84%响应值的变化,因而该模型的拟合程度比较好,
实验误差较小,可以用于不同变量条件下的响应值预测。回归方程各项方差分析表明,因素 A、B、
D、AB、A2、B2、C2、D2对蒲公英多酚提取率有极显著的影响(P<0.01),说明各试验因素对响应值
的影响不是简单的线性关系。因子 C、AC、AD、BC、BD、CD 对蒲公英提取率影响不显著(P>0.05)。
本模型中仅超声时间和超声功率之间交互作用显著,交互作用如图 2 所示,各因子对蒲公英全草多酚
提取率的影响依次是 D(超声提取温度)>B(超声波功率)>A(提取时间)>C(料液比)。
图 5 各因素交互作用影响多酚提取量的响应面图
Fig.5 Response surface graphs showing the interactive effects of various factors on the yield of polyphenols
由图 5 可见,响应面坡度比较陡峭,说明 A 提取时间和 B 超声波功率对蒲公英多酚提取率的影
响较大。在 A 提取时间在 23~40min、B 超声功率在 320~420W 的范围内存在极值,即两者之间存在
较好的交互作用。提取时间和超声功率的交互作用显著可能是因为功率越大提取效率越高,所需时间
越短,而在一定功率下处理较长时间则会引起提取效率下降,因此对蒲公英全草中多酚的提取率交互
作用显著。
2.2.3 最佳条件的预测及验证试验
通过回归模型的预测,得到超声波辅助提取蒲公英全草中多酚类物质的最佳提取工艺为:提取时
间 36.97 min、超声波功率 381.13 W、提料液比 1:48.03、超声提取温度 41.73℃,此时多酚类化合物
的理论提取率最大为 3.71775%。结合生产实际,将各因素进行调整为:提取时间 37min、超声波功
率 380W、料液比 1:48、超声提取温度 42℃。在此条件下进行 6 次平行试验进行验证,多酚平均提
取率为(3.6829%±0.0507%),与理论预测值 3.71775%误差值仅为 0.94%,且经 t 检验的结果差异不显
著(P>0.1),证实了该模型的有效性。
2.3 蒲公英不同部位的抗氧化活性分析
在最优提取工艺条件下分别对蒲公英全草、蒲公英叶片和蒲公英根中的多酚进行提取,测定其多
酚提取量分别为蒲公英全草(3.6638±0.0296)%、蒲公英叶片(3.9722±0.0169)%、蒲公英根
(3.3658±0.0173)%。进一步测定三者的总还原能力、DPPH 自由基和羟自由基的清除能力,结果如
图 3 所示。
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
1.8
2
0 10 20 30 40 50
总
还
原
能
力
(A
70
0)
多酚质量浓度(μg/mL)
A 全草叶子
根
Trolox
多
酚
提
取
率
(%
)
300.00
350.00
400.00
450.00
500.0020.00
25.00
30.00
35.00
40.00
2.6
2.8
3
3.2
3.4
3.6
3.8
A: A时时 B: B功功
图 6 蒲公英不同部位的总还原能力(A)、DPPH 自由基清除能力(B)和羟自由基清除能力(C)
Fig.6 Total reducing power, DPPH and hydroxyl free radical scavenging abilities of different parts of dandelion
由图 6 可知,蒲公英不同部位提取出的多酚均具有一定的抗氧化能力,且随质量浓度的升高呈递
增的趋势,表现出明显的量效关系。相同质量浓度条件下,不同部位蒲公英多酚的总还原能力、DPPH
自由基和羟自由基的清除能力依次为蒲公英叶子>蒲公英全草>蒲公英根。蒲公英不同部位多酚总还
原能力要明显高于 Trolox,而 DPPH 清除能力和羟自由基清除率要低于 Trolox,可能原因是 DPPH 与
Trolox 单电子配对效率不高,因此 DPPH 的褪色程度减慢。
3 结论
采用超声辅助乙醇提取蒲公英中的多酚物质,在单因素试验基础上,通过响应面 Box-Benhnken
试验设计,建立了蒲公英多酚得率的二次多项式数学模型,优化出超声辅助提取蒲公英全草中多酚的
最佳工艺条件为:提取时间 37min、超声功率 380W、料液比 1:48、提取温度 42℃。在此条件下进
行 6 次平行试验进行验证,多酚平均提取率为(3.6829±0.0507)%与接近预测值 3.71775%相差不大。
另外,蒲公英多酚具有较强的抗氧化作用,在一定范围内,随着质量浓度升高呈现抗氧化能力上升趋
势,通过对蒲公英不同部位的总还原能力、DPPH 自由基和羟自由基清除能力测定发现,抗氧化能力
由高到低依次为蒲公英叶片、蒲公英全草、蒲公英根。
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0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0 10 20 30 40 50
D
PP
H
自
由
基
清
除
率
(%
)
多酚质量浓度(μg/mL)
B
全草
叶子
根
Trolox
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 10 20 30 40 50
羟
自
由
基
清
除
率
(%
)
多酚质量浓度(μg/mL)
C 全草叶子
根
Trolox
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