全 文 ：质0. 1 mol L-1盐酸溶液中累积释放度相对较小 。
3. 4　桨叶转速的选择　不同的桨叶转速条件对渗
透泵片释药速率并无较大影响 ,释药特性也无明显
变化 。通常桨叶转速会对以扩散机制释药的制剂产
生影响 ,而对以渗透压为主要释药动力的渗透泵制
剂影响较小 ,因此证明了该渗透泵制剂以渗透释药
机制为主 ,扩散机制所占比例较小[ 7] ,从而也体现出
渗透泵制剂受环境的影响较小的优点。
参考文献:
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[收稿日期] 2011-01-19
[ 基金项目] 河南省科技厅重点科技攻关资助项目(编号:062306100)　[ 作者简介] 李喜凤 ,女 ,本科 , 教授 ,电话:0371-65575823 , E-mail:hz-
sunshine@126. com
不同品种蒲公英高效毛细管电泳法特征图谱分析
李喜凤 ,郝哲 ,邱天宝 ,余云辉 ,杜云锋　(河南中医学院 , 河南 郑州 450008)
[ 摘要] 　目的:建立不同品种蒲公英药材高效毛细管电泳法(H PCE)特征图谱分析方法。 方法:采用 H PCE ,以 20 mmol L - 1
硼砂为缓冲溶液(pH 9 . 18),分离电压为 15 kV , 检测波长为 244 nm ,分析时间为 30 min ,柱温为 25 ℃。结果:建立了不同品
种蒲公英药材 H PCE 特征图谱 ,标定 13 个共有峰 ,不同品种蒲公英药材差异性较小。结论:方法操作简便 、准确可靠 , 重复性
好 ,可作为蒲公英药材鉴别和质量控制方法。
[ 关键词] 　蒲公英;高效毛细管电泳法;特征图谱
[中图分类号] R927. 7　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2011)11-0895-04
Study on the fingerprint of different kinds of dandelion by HPCE
LI Xi-feng , HAO Zhe , QIU Tian-bao , YU Yun-hui , DU Yun-feng(H enan Co llege of T raditional Chinese Medi-
cine , Henan Zhengzhou 450008 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To research and construct the HPCE characteristic fing erprint o f dandelion;to prov ide a new meth-
od fo r quality of dandelion. METHODS　The separa tion on capillary zone electropho resis(CZE) was used to determine the fin-
gerprints. The buffer w as 20 mmol L - 1 bor ate solution(pH =9 . 18);the applied voltage was 15 kV and the de tection w ave-
leng th wa s 244 nm. The caffeic acid w as used a s a reference standard. The results w ere analy zed by Hie rarchical Cluster and
diffe rent Simila rity Eva luation Sy stems.RESULTS　Fingerprint w as established w ith 13 common peaks of 10 samples w ith sim-
ilarity of 0. 926-0 . 983 . CONCLUSION　The method is simple , accur ate , good reproducibility , and suitable to the quality con-
trol of dandelion.
KEY WORDS:dande lion;H PCE;finge rprint
　　蒲公英为药典收载的常用中药 ,具清热解毒 、抗
菌消炎之功效。蒲公英属植物种类繁多 ,全世界约
有近1 000种 ,我国有 75 种以上[ 1-3] ,临床药用最常
用的有 6种 ,河南植物志上记载有 4 种:碱地蒲公
英 、药用蒲公英 、蒲公英 、白缘蒲公英。目前河南市
场上均以蒲公英入药 ,不同种属蒲公英药材化学成
分及临床功效是否一致 ,目前没有统一的质量标准 。
因咖啡酸为其主要有效成分 ,对蒲公英药材的质量
评价多以咖啡酸含量为指标 ,但单一成分的含量不
能全面反映蒲公英的整体特征 ,毛细管电泳法以其
高效 、低耗 、快速 、应用广泛及绿色环保等特点[ 4] ,在
中药有效成分分析及特征图谱研究方面具有显著的
优势 。本实验运用高效毛细管电泳法(HPCE),建
立河南不同品种蒲公英药材特征图谱 ,并进行差异
性和整体相似性评价 ,为进一步完善蒲公英药材的
质量标准提供依据 。
895 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 11期 Chin H osp Pharm J , 2011 Ju n , Vol 31 , No. 11
1　材料
P /ACETM MDQ 毛细管电泳仪(美国 Beckman
公司);DAD 检测器 ,未涂层弹性石英毛细管柱 75
μm ID×50 /57 cm(分离长度 /总长 ,河北永年锐沣
色谱器件有限公司);蒲公英药材采于河南省内不同
地区 ,均经河南中医学院药学院生药学科陈随清教
授鉴定 ,样品品种及来源见表 1。咖啡酸对照品(批
号 110885-200102) ,绿原酸对照品(批号 110753-
200413)均由中国药品生物制品检定所提供;水为纯
化水;试剂均为分析纯。
表 1　不同品种蒲公英药材来源
Tab 1　The source of differ ent v arie ties o f dande lion
编号 产地 品种 编号 产地 品种
S 1 南阳内乡-1 蒲公英 S6 郑州市 药用蒲公英
S 2 南阳内乡-2 蒲公英 S7 济源市-1 蒲公英
S 3 驻马店正阳县 蒲公英 S8 济源市-2 碱地蒲公英
S 4 焦作博爱县 蒲公英 S9 济源市-3 碱地蒲公英
S 5 南阳内乡-3 白缘蒲公英 S10 周口市 蒲公英
2　方法与结果
2. 1　电泳条件　电压:15 KV;压力进样:0. 5 psi;进
样时间:5 s;检测波长:244 nm;温度:25 ℃;硼砂浓
度:20 mmol L-1(pH 9. 18)。实验前依次用0. 1 mol
L
- 1氢氧化钠溶液 、水 、缓冲液依次冲洗 10 , 10 , 20
min ,样品分析间隔依次用0. 1 mol L-1氢氧化钠溶
液 、水 、缓冲液依次冲洗 3 ,2 ,3 min ,实验结束后用0. 1
mol L-1氢氧化钠溶液 、水冲洗 10 min。所用溶液进
样前均用0. 45 μm 的滤膜滤过 ,超声脱气 3 min。
2. 2　供试品溶液制备　称取0. 5 g 蒲公英细粉 ,置
100 mL 平底烧瓶中 ,精密加入 10 mL 乙醇 ,精密称
定 ,回流提取 1 h , 放至室温 ,用乙醇补足质量 , 滤
过 ,取续滤液 ,过0. 45μm 微孔滤膜备用。
2. 3　对照品溶液制备　精密称取咖啡酸 、绿原酸对
照品适量加 70%甲醇溶解并制成质量浓度分别为
0. 0976 ,0. 0848 g L- 1的溶液 ,过 0. 45 μm 微孔滤
膜备用。
2. 4　方法学考察
2. 4. 1　精密度与重复性试验　取同一供试品(S1)
溶液 , 连续进样 5 次 , 测得日内精密度 RSD <
3. 0%,于 5 d内连续进样 ,测得日间精密度 RSD<
4. 1%;另取同一产地样品 6份 ,按“2. 2”项制备供试
品溶液 ,按照“2 . 1”项下电泳条件进样测定 ,计算各
共有峰的相对保留时间和相对峰面积 RSD均小于
5%,表明该方法重复性好 。
2. 4. 2　稳定性试验　取同一供试品(S1)溶液 ,在
0 ,2 ,4 ,6 ,8 ,12 h进样 ,记录各共有色谱峰的保留时
间和峰面积 ,相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均
小于 5%,表明供试品溶液在 12 h内性质稳定。
2. 5　特征图谱分析及评价
2. 5. 1　不同品种蒲公英药材特征图谱的建立　取
蒲公英药材 10批 ,按“2. 2”项方法制备供试品溶液 ,
将供试品溶液和对照品溶液按“2. 3”项下电泳条件
分别进样 ,进行分析测定。对照品图谱见图 1 ,不同
品种特征图谱见图 2 。
2. 5. 2　不同品种蒲公英药材共有模式特征图谱的
建立　将 10批药材的色谱数据导入“中药色谱特征
图谱相似度评价系统(2004A 版)”软件进行数据处
理 ,以 S2为参照图谱 ,以中位数法生成不同品种蒲
公英共有模式特征图谱 ,见图 3。
图 3　共有模式图
Fig 3　common pat tern
2. 5. 3 　共有特征峰的标定 　经对所有供试品
HPCE 图的分析 、比较 ,共标定 13 个共有峰作为特
征图谱的特征峰 ,其中 9 , 12号峰与对照品对照及加
标试验 ,分别鉴定为绿原酸 、咖啡酸。以 12号峰咖
896 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 11期 Chin H osp Pharm J , 2011 Jun , Vol 31 , No. 11
啡酸峰为参照峰 ,分别求出各共有峰的相对迁移时
间 a值和相对峰面积值 ,见表 2。
2. 5. 4　相似度评价　利用“中药色谱指纹图谱相似
度评价系统(2004A 版)”软件 ,对上述 10批样品进
行相似度评价 ,以共有模式为标准 ,进行色谱峰差异
性和整体相似性评价。另利用 SPSS 16. 0 软件中
Pearson Correlation法对不同产地蒲公英药材相似
度进行评价 ,结果见表 3。
表 2　蒲公英高效毛细管电泳特征图谱中共有峰的相对迁移时间 a值和相对峰面积
Tab 2　Relative migr ation time and peak area o f common peaks in H PCE fingerprint of dandelion
编号 a 相对峰面积
S1 S 2 S 3 S4 S5 S6 S 7 S 8 S9 S10
1 0. 390 8 0. 804 6 0. 750 3 0. 580 9 0. 532 9 0. 941 9 0. 687 4 0. 601 3 0. 778 6 0. 607 7 1. 078 5
2 0. 448 8 0. 969 1 0. 351 2 0. 445 4 0. 446 6 0. 355 5 0. 258 3 0. 299 9 0. 513 0 0. 334 8 0. 694 3
3 0. 468 0 2. 354 5 1. 846 3 0. 981 4 0. 830 5 1. 331 1 1. 407 2 1. 242 7 0. 941 1 1. 297 0 1. 295 7
4 0. 488 4 0. 220 8 0. 370 2 0. 295 2 0. 627 6 0. 443 1 0. 406 3 0. 278 0 0. 248 6 0. 171 5 0. 534 4
5 0. 540 7 0. 592 2 0. 516 5 0. 528 4 1. 168 1 0. 751 4 0. 084 4 0. 624 6 0. 161 1 0. 131 0 1. 774 1
6 0. 558 3 0. 267 5 0. 314 2 0. 234 2 0. 442 3 0. 337 5 0. 311 2 0. 275 0 0. 198 5 0. 148 1 0. 301 8
7 0. 595 8 0. 875 4 0. 365 6 0. 524 2 0. 310 2 0. 852 5 0. 288 0 0. 372 6 0. 451 0 0. 367 7 1. 269 9
8 0. 620 1 0. 720 1 0. 400 1 0. 262 3 0. 329 3 0. 297 1 0. 185 5 0. 232 6 0. 135 0 0. 149 8 0. 483 3
9 0. 677 3 2. 581 1 1. 129 8 1. 674 3 0. 527 1 0. 491 1 1. 289 4 0. 404 8 1. 393 9 1. 034 7 3. 241 3
10 0. 737 1 2. 532 5 1. 134 6 1. 371 4 0. 690 5 0. 960 1 2. 026 9 0. 965 6 1. 536 5 1. 155 4 3. 568 9
11 0. 770 6 0. 442 1 1. 217 3 0. 577 1 0. 947 0 0. 333 8 1. 057 1 0. 804 8 2. 567 5 2. 264 3 0. 442 1
12 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0
13 1. 146 1 21. 989 2 5. 046 2 17. 437 6 4. 820 0 5. 849 6 8. 128 9 5. 376 9 7. 335 9 9. 034 9 10. 919 9
表 3　样品相似度
Tab 3　Similarity o f samples
编号 相似度 相关系数法 编号 相似度 相关系数法
S 1 0. 945 0. 996 S6 0. 929 0. 990
S 2 0. 946 0. 971 S7 0. 953 0. 989
S 3 0. 929 0. 996 S8 0. 954 0. 964
S 4 0. 956 0. 978 S9 0. 956 0. 985
S 5 0. 958 0. 982 S10 0. 956 0. 963
　　由以上结果可以看出 ,不同品种蒲公英药材的
相似度均在0. 920以上 ,表明各样品间差异性较小 ,
为对蒲公英各药材进一步评价样品差异 ,进行图谱
模式识别分类 ,以便建立更加真实可靠的蒲公英药
材标准特征图谱 。
2. 6　系统聚类分析　选择蒲公英特征图谱中 13个
比较明显的共有峰 ,根据表 2的数据 ,用 SPSS 16. 0
软件中的系统聚类分析对 10 个蒲公英样品进行聚
类分析 ,所用聚类方法为组间距离法 ,距离测度方法
为欧氏距离平方 ,得不同样品的聚类分析图 ,见图
4。
图 4　不同品种蒲公英样品聚类分析图
Fig 4　Clu ster analysi s graph of dif f erent varieties dandelion
　　结果显示 ,当距离标尺在 1时 ,样品 S5 ,S7 , S4 ,
S2归为一类 ,样品 S6 ,S9 ,S8归为一类;在 2时 ,S5 ,
S7 ,S4 ,S2和 S6 ,S9 ,S8归为一类;在 4 时 , S1 和 S3
归为一类;在 6时 ,S5 ,S7 , S4 , S2 S6 , S9 , S8和 S10
归为一类;当距离标尺在 25 时 ,所有样品才归为一
类。
3　讨论
考察结果显示 ,在硼砂缓冲溶液中 ,各色谱峰峰
形和分离度均较好 ,而其他缓冲体系中 ,部分峰分离
度很差 ,且峰形不好 ,有明显拖尾现象 ,故选择硼砂
缓冲体系 。
考察 10 ～ 50 mmo l L-1不同浓度的缓冲溶液 ,
结果显示 ,随着缓冲溶液浓度的增加 ,各组份迁移时
间和分离度均增大 ,当硼砂浓度为 20 mmo l L-1时 ,
样品各组份分离较好 ,咖啡酸峰形和分离度均较好 ,
故选择 20 mmol L-1硼砂溶液。
分离电压在 10 ～ 18 kV 的条件下对各组份迁
移时间的影响 ,随着分离电压的升高 ,各组份迁移时
间缩短 ,但分离效果较差 ,当分离电压为 15 kV 时 ,
样品各组份分离效果较好 ,故选择分离电压为 15
kV 。
采用二极管阵列检测器对检测波长进行考察 ,
比较不同波长下的色谱图 ,结果在 244 nm 波长处 ,
色谱图中色谱峰较多 ,信息丰富 ,故选择 244 nm 为
检测波长 。
不同品种蒲公英 HPCE 特征图谱分析 ,结果表
明对照特征图谱(图 3)中峰 a 为蒲公英与白缘蒲公
英所共有的峰 ,而对于药用蒲公英和碱地蒲公英均
无此峰 ,说明不同品种蒲公英的化学成分有一定差
异。但不同品种蒲公英样品相似度均在 0. 9以上 ,
说明不同品种药材之间差异性较小 ,质量稳定 ,可为
蒲公英药材质量标准的制订提供一定的依据。
897 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 11期 Chin H osp Pharm J , 2011 Ju n , Vol 31 , No. 11
由聚类分析结果可知 ,蒲公英与白缘蒲公英在
距离标尺为 1 时 ,即归为 1 类 ,表明二者相似度很
高 ,药用蒲公英和碱地蒲公英亦在距离标尺为 1 时
归为 1类 , 表明二者相似度很高。样品 S7 , S8 , S9
为同一产地不同品种蒲公英药材 ,在距离标尺为 6
时 ,才归为 1类 ,说明同一产地不同品种药材有一定
差异性。
通过对同一品种不同产地的蒲公英 HPCE 特
征图谱地区分析 ,结果表明同一品种之间所含化学
成分的种类没有明显差异 ,但含量各有不同 ,这可能
与地域 、药材生长年限及采收时生长阶段有关 ,具体
原因有待进一步研究 。
参考文献:
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[ 作者简介] 刘东 ,男 ,副主任药师 ,电话:027-83663643 , E-mail:ld- 2069@yah oo. cn
呱氨托美丁及其代谢产物在大鼠体内药动学
刘东 , 刘宇 , 向道春 , 张程亮　(华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部 ,湖北 武汉 430030)
[ 摘要] 　目的:研究呱氨托美丁(MED-15)单剂量灌胃给药及静脉注射在 SD大鼠体内的药动学。方法:12 只大鼠随机分为 2
组 ,分别灌胃给药 M ED-15(100 mg kg - 1)或静脉注射 MED-15(8 mg kg - 1), 采用 HPLC 法测定给药后大鼠血浆内 M ED-15
代谢产物托美丁-甘氨酰胺衍生物(M ED-5)及托美丁的浓度 ,应用 DAS 2. 0 软件进行非房室模型拟合及参数计算。结果:血
样中未检测到 MED-15 ,只能检测到其代谢产物 MED-5 及托美丁。灌胃组大鼠托美丁的 Cmax为(2 . 8±1 . 1) mg L -1 , tmax为
(7 . 9±1 . 1)h , AUC 为(20 . 2±7. 0) mg h L - 1 ,静脉注射组大鼠托美丁的 Cmax为(17 . 0±1 . 2) mg L -1 , AUC 为(59 . 9±4 . 2)
mg h L - 1 。结论:原药 M ED-15 在大鼠胃肠道内有较强的首过代谢 ,导致生物利用度低。
[ 关键词] 　呱氨托美丁;托美丁-甘氨酰胺衍生物;托美丁;药动学;高效液相色谱法
[中图分类号] R969. 1　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2011)11-0898-04
Pharmacokinetics of amtolmetin guacil and its metabolites in rat
LIU Dong , LIU Yu , XIANG Dao-chun , ZHANG Cheng-liang (Depar tment o f Pharmacy , Tong ji Hospita l A ffilia-
ted with Tong ji Medical Co llege , Huazhong Univer sity o f Science and Techno lo gy ,H ubei Wuhan 430030 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To inve stigate the pha rmacokinetics of amtolmetin guacil and its me tabolites MED-5 and tolme tin
after a single or ally g avaged o r intrav enous injection of amto lmetin guacil in ra ts. METHODS　A to tal o f 12 SD rats wer e ran-
domly divided into four g roups and a ssigned to receive a single dose o f 100 mg kg -1(ig) and 8 mg kg - 1(iv) of amtolme tin
guacil. H PLC w as used fo r the de te rmination of am to lme tin guacil and its metabolites in rat plasma. Pharmacokinetic parame-
te rs of these two me tabo lite s we re calculated by DAS 2. 0 softw are (Non-compa rtment model). RESULTS　No amtolme tin
guacil but its metabolites(M ED-5 and tolmetin) w ere identified in the plasma o f rats. The Cmax va lue s o f tolme tin w as(2 . 8±
1 . 1) mg L- 1 , the tm ax values w as(7. 9±1 . 1)h , and the AUC values wa s(20. 2±7 . 0) mg h L - 1 in ig g roup. The Cmax values
of tolmetin w as(17 . 0±1. 2) mg L- 1 , and the AUC values w as(59 . 9±4 . 2) mg h L- 1 in iv g roup. CONCLUSION　The re is
strong fir st pass effect o f MED-15 in gastr ointestinal tract , and tha t may cause the low bioavailability of the drug.
KEY WORDS:amtolmetin guacil;MED-5;to lmetin;pharmacokinetics;HPLC
　　新型非甾体抗炎药呱氨托美丁(am tolmetin
guacil , MED-15)是托美丁(tolmetin)的前药 。口服
该药后在体内经肠壁内酶水解转化为托美丁-甘氨
酰胺衍生物(MED-5)进而在组织中转化为托美丁
发挥解热镇痛抗炎作用[ 1] 。MED-15本身不含有刺
激肠道黏膜的酸性基团 ,且能在代谢过程中促进具
胃肠道黏膜保护作用的 NO 产生 ,与同类药物比较
优势显著[ 2] 。本实验通过灌胃及静脉注射给予大鼠
898 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 11期 Chin H osp Pharm J , 2011 Jun , Vol 31 , No. 11