全 文 :3 厘米深的小孔 , 用镊子将胚根向下轻轻放
人孔内 , 每孔播一粒 , 然后用上将孔封上 .
4
. 光照及温度 管理 播种后每天 晚上
开灯补充光照 , 以满足植株光照阶段和补充
春化不足的需要 , 促进发育 。 经试验 ,温度控
制在 18 ~ 2 5 O c 较为理想 。 超过 30 “ c 的连续高
温将使阶段发育逆转或无花粉散出 。 呼市地
区 7 月份到 8 月初持续高温 ,加代不能进行 。
5
. 补充养分 由于栽培基质数量有限 ,
待植株抽蔓后隔 3 一 4 天灌一次营养液以补
充开花结实对养分的需求 。
6
. 开花及授粉 植株抽蔓现 蕾 后 , 及
时插棍 (防倒伏 ) 隔离 。 .单株 自交授粉可采
用 套袋隔离法 , 授粉时 , 如主 枝花蕾正常 ,
可打掉侧枝 , 授粉完毕掐掉主 枝顶端 , 采用
一次授粉法 。 欲测定亲和指数 , 花蕾划分可
采用掐大蕾或系线标记法 ,分别授粉 ,然后挂
牌记录 。 授粉后 10 天左右即可检查去袋 。 如繁
殖群体大 ,可采用纱罩隔离 ,待开花时放养蜜
蜂或用 蜜烽棒等简易授粉法进行人工授粉 。
7
. 剥种皮 授粉后25 一 30 天 , 剥去种皮
于 2 p p m的赤霉素溶液 中浸泡 1 ~ 2 天打破
种子休眠 , 继续进行 一F一世代的春化处理 ,
通过试验 , 成活率在肠 %以上 。 剥除种皮时
间要严格掌握 , 操作过早 , 子什尚未膨大 ,
营养不足 , 幼苗瘦弱 , 戍活率不高 , 操作过
晚 , 由于胚乳完全吸收 , 种皮 刘徐困准 , 子
叶容易受伤造成种子死亡 。
8
, 采种 待种荚变黄时即可 进 行采种
登记 。
在育种中 , 这项技术可进行自交系的选
育及种质资源的繁育保存 , 设备简单 , 投资
少 , 占地面积小 , 利用 80 平方米的地方可进
行 80 。多份材料的繁育工作 , 生育期短 ,容易
隔离 , 操作方便 , 可节省研究工作的人力 ,
提高工作效率 。 把季节性的集中工作分散到
全年 , 在白菜 、 萝 卜、 油菜等育种工作中具
有非常实用的价值 。
蕃茄是我国主要蔬菜
作物之一 , 产量较高。 其
果 实 柔 软多汁 , 营养丰
富 , 甜酸适度 , 不但可作
蔬菜及水果食用 , 且为重
要的蔬菜加工原料 , 颇受
广大人民喜爱 。 但在生产
上 , 蕃茄病毒病为害逐年
严重 , 致使蕃茄的品质与
产量降低 。 近年来 , 许多
育种工作者虽培育了一些
较抗病的品种 , 但仍满足
不了生产的需要 , 为此 ,
研究蕃茄脱毒的有关问题
很有必要 。
值物病毒是通过其维
管束传导的 , 在植物体内
病毒分布很不均一 , 愈接
近 茎顶端 , 病毒的浓度愈
低 , 特别是在生长锥 , 没
ǎ蒙内古农牧学院à
张津来石岭
ǎ呼和浩市特蔬菜所à戎美玲郭树
蕃茄茎尖组织培养试验
有或很少有病毒存在 。 国内有的单位已经做
了一些有关蕃茄茎尖培养的研究 , 但培养基
不够过关 , 一般需要生根 、 长芽两种培养墓
才能形成完整植株 , 且所需时闷较长 。 我们
自1 98 5年开始进行蒸茄茎尖组织培养的培养
基筛选工作 , 于 1 0 8 8年 2 月筛选出了优良培
养墓M s H + N A A O . 2 m g / l 十 B A o . 05 : n g / 百。
将蕃茄生长点带一个叶原基约外植体接种在
此培养基上 , 10 ~ 15 天生根 , 20 天长芽 , 一
价月 左右印可形成完整植株 。 这样通过一次
培养 , 只角一种培养基既生根又长芽 , 成苗
的速度是比较快的 。
(一 ) 材料和方法
1
. 供试品种为强丰
2
. 培养材料的制备
取材和消毒 :
取 7 日苗龄蕃茄幼苗茎上端 , 用 自来水
冲洗功分钟 , 再用蒸馏水冲洗 , 然后在 75 %
的酒精溶液中迅速蘸浸 1 ~2 秒 , 再用饱和
漂白粉上清液浸泡 6 分钟进行消毒 , 最后用
无菌水冲洗三遍 。
剥离和接种 :
将消毒好的材料在超净工作台中解剖镜
下进行剥离所需的茎尖 , 然后接种在备好的
培养基上 .
3
. 培养方法
基本培养基为M s和M s背两 种 , 这两种
基本培养基及其添加物一一生长素 ( N A A 、
I A A
、
I B A
、
2
.
4一 D ) 、 细胞分裂素 ( K T 、
z t
、
6 B A ) 进行不 同组合和浓度的配组 。
培养温度为 25 一 27 O c , 用两 个 4 0瓦 日
光灯 ( 3 5 0 0 L u x ) 每天照明 1 6 小口」` 。 光质采
用红光 、 白光 、 混合光和兰光四种 。
(二 ) 结果与分析
1
. 培养基 筛选
经试验 , 以 63 号 培养基 (M s胃添加 N A A
。 . 2 m g l/ 和 B A O . 05 m g I/ ) 最优 , 接种后一
周开始形成少量愈伤组织 , 10 ~ 15 天开始生
根 , 2 0天开始长芽 , 30 天左右形 成 完 整植
株 ; 其次为 61 号培 养 基 (M s H + N A A O . 2
m g / I + B A 1 m g / I )
, 长芽比 6 3号培养基稍
慢 ; 再次为 60 号培养基 (M s + I A A O . 2 m g I/
+ B A 2 m g I/ )
, 接种后只长芽不长根 , 在
接种 30 天后需转接一次培养基 (士M s + I A A
0
.
2 ~ o
.
s m g / I)
, 6 一 a 天后才 生 根 , 共
需 50 天左右才能形成完整植株 。 其它生长素
和激动素配组都不如上述三个培养基 。 有的
培养基在接种后 , 外植体很快变成褐色而死
亡 。
2
. 不 同光质对蕃茄茎尖的影响
将接种好的蕃茄茎尖放在不同光质下培
养 , 结果红光最好 , 在其它条 件 相 同情况
下 , 23 天可形成完整植株 , 白光次之 , 兰光
照射效果不好 。
3
. 试管苗移栽
在无菌条件下培养成功的试管植株 , 还
要从培养基上移栽到土壤中 。 这 是 一个由
“ 异养 ” 到 “ 自养 ” 的转变 , 这个转变需要
一个适应的过程 。 移栽采取两个步骤 : 第一
步 , 从三角瓶的培养基中洗去培养基 , 将苗
移栽到营养钵中 。 栽培试管苗所用的基质也
要进行筛选 。 采用的基质材料 有 砂 土 、 泥
炭 、 珍珠岩 、 炉灰渣 、 石至石等 , 试验结果 ,
以侄石和细砂 ( 2 : 1 ) 最好 。 同时 , 还要
注意基质的 P日值要与培养基的 P 日值接近 。
将移栽后的试管苗浇透水用大烧杯罩好 (苗
多时用塑料薄膜搭成小棚封盖 ) , 放人生长
箱内在 18 ~ 23 O C的温度下生长 。 最初四天内
遮阴 , 第五天开始逐渐放风 , 幼苗经 20 一 25
天锻炼后 , 方可进行第二步 , 即移人大田定
植 。 这样 , 幼苗从异养 ` 半异养~ 完全自养
的锻炼过程 , 苗子很易成活 , 成活率达 90 %
以上 .
关于外植体茎尖大小的问题 , 根据我们
的试验结果 , 不带叶原基的经两个月诱导 ,
外植体仅稍稍膨大转绿 , 很难继续生长 ; 生
长点带一个叶原基的生长很好 ; 生长点带两
个叶原基的生长比较快 , 但对去除病毒病不
利 .
· 。恤 、