全 文 :浙江大学学报(农业与生命科学版) 37(1):49~ 53 , 2011
Journal of Zhejiang University(Agric.& Life Sci.)
文章编号:1008-9209(2011)01-0049-05 DOI:10.3785/j.issn.1008-9209.2011.01.007
收稿日期:2010-04-08
基金项目:四川省青年科技基金资助项目(08ZQ026-034);四川省科技厅科技支撑计划资助项目(2008FZ0148;2008SZ0074);
四川省科技厅应用基础研究资助项目(07jy029-023).
作者简介:蔡文国(1987—),男 ,四川安岳人 ,硕士研究生 ,从事药用植物研究.E-mai l:w engu o.cai@gmail.com .
通信作者:张利 ,女,教授, 博士生导师 , 主要从事植物系统学与分子生物学研究.Tel:0835-8569011;E-mail:zhangli@sicau.
edu.cn.
雪山鼠尾草与丹参的生药学比较
蔡文国1 , 刘增禹1 , 钟国成2 , 王 萌2 , 张利2
(1.四川农业大学农学院 ,四川 雅安 625014;2.四川农业大学 生命科学与理学院 , 四川雅安 625014)
摘 要:采用形态鉴别 、粉末鉴别 、薄层鉴别、HPLC 4 种方法, 从形态 、显微、理化等方面对雪山鼠尾草
(Salvia evansiana Hand.-Mazz.)和丹参(Salv ia mi ltiorrhiza Bunge)2 种植物进行比较研究.结果表明:与
丹参相比, 雪山鼠尾草的植株、叶、花等多个部位与丹参不同 ,其粉末中不含石细胞结构 , 导管较大 ,薄层鉴
别显示出不同的斑点数, HPLC 检测表明雪山鼠尾草中丹参酮ⅡA 含量为 0.0812%,丹参素未检出.综合运
用这 4 种方法能清楚地区分雪山鼠尾和丹参;雪山鼠尾草作丹参药用的可行性有待商榷.
关 键 词:雪山鼠尾草;丹参;生药鉴定
中图分类号:R 282.5 文献标志码:A
CAI Wen-guo1 , LIU Zeng-yu1 , ZHONG Guo-cheng 2 , WANG Meng 2 , ZHANG Li2(1 .College of
Agronomy , Sichuan Agricultural Univ ersity , Yaan , Sichuan 625014 , China ;2 .Col lege o f L i f e and
S ciences , S ichuan Agricultural University , Yaan , S ichuan 625014 , China)
Comparison of pharmacognosy between Salvia evansiana and S.miltiorrhiza. Journal of Zhejiang
Unive rsity(Agric.&L ife Sci.), 2011 , 37(1):49-53
Abstract:Pharmacogno stic cha racteristics between S alv ia evansiana and S.miltiorrhiz a were assessed
based on mo rpholo gic identifica tion , micr oscopic identifica tion , thin-lay er chroma tog raphy (TLC) and
high per formance liquid chr omatog raphy (H PLC).The results demonstrated tha t , compared with S .
mi ltiorrhiza , S.evansiana show ed some difference s in morpholog ical tr aits of plants height , foliage and
flow er , e tc , and there was no scler eid but large r vessels in its roo t pow der.On the TLC plate , there
w ere different numbe rs of spo ts on the extr acts o f the tw o specie s.H PLC analysis show ed that the
content o f tanshinone Ⅱ A in S.evansiana w as 0.0812%, w hich did no t reach the amount sta ted by The
P harmacopoeia o f the Peop les Republic o f China (2005), w he reas Danshensu was no t de tected.
Therefo re , S.evansiana and S.miltiorrhiza can be clea rly distinguished by the four methods mentioned
above.The results ov er indicate also tha t S.evansiana may no t be used a s S .mi ltiorrhiza.
Key words:Sa lv ia evansiana;Salvia miltiorrhiz a;pharmacognostic identification
中药丹参(S alvia m i ltiorrhiza Bunge)为
唇形花科鼠尾草属多年生草本植物 ,其根为药
用部位 ,具有祛瘀止痛 、活血通经和清心除烦的
功效[ 1] ,是我国使用历史悠久的传统中药之一.
浙江大学学报(农业与生命科学版)
历版《中华人民共和国药典》(简称《药典》)收载
丹参的干燥根及根茎为中药丹参唯一来源 ,但
在民间应用和地方入药中 ,同属多种植物的根
均作丹参用[ 2] .在云南丽江 ,雪山鼠尾草(S.
evansiana Hand.-Mazz.)以根入药 ,功同丹参[ 3] .
本研究通过形态 、粉末 、薄层 3种方法对雪
山鼠尾草和丹参进行比较 ,旨在为 2种植物的
鉴别提供参考 ,并运用高效液相色谱仪对二者
的化学成分进行分析 ,探讨雪山鼠尾草的药用
可行性 ,为雪山鼠尾草的科学利用和开发提供
科学依据.
1 材料与方法
1.1 仪 器
日本岛津 LC-10AVP 型高效液相色谱仪 ,
Motic DM-BA400显微镜.
1.2 试 剂
丹参酮 IIA 、隐丹参酮 、丹参素和原儿茶醛
标准品 ,均由中国药品生物制品检定所提供 ,编
号 分 别 为 0766-200011 、 110852-200305 、
110855-200405和 0810-9803.甲醇为色谱纯 ,
其他试剂均为分析纯 ,水为超纯水.
1.3 材 料
丹参(凭证标本编号 13318)和雪山鼠尾草
(凭证标本编号 31255)腊叶标本(四川大学标
本馆提供);丹参(采自四川中江)和雪山属尾草
(采自云南)的干燥根及根茎(生长年限均为 2
年),由四川农业大学周永红教授鉴定.
1.4 方 法
1.4.1 形态鉴别 观察丹参和雪山鼠尾草
腊叶标本 ,并测定株高 、花序长 、叶柄长 、叶片
长 、叶片宽 、花萼长 、花冠长等形态指标 ,计算各
物种的性状平均值和标准误差;并结合《中国植
物志》[ 4] 和《四川植物志》[ 5] 有关资料 ,记录丹参
和雪山鼠尾草形态差异.
1.4.2 显微结构鉴别 按《中国药典》规定
的方法[ 6] ,取阴干材料粉碎 ,过 60目筛 ,混合均
匀.显微观察时 ,用解剖针挑取少许置载玻片
上 ,滴加甘油醋酸试液 、水合氯醛试液或其他适
宜的试液 ,盖上盖玻片;必要时 ,滴加水合氯醛
试液后 ,在酒精灯上加热透化 ,并滴加甘油醋酸
试液 ,盖上盖玻片 , 然后在显微镜下观察并
摄像.
1.4.3 薄层色谱鉴别 精密称取干燥粉末
样品 0.5 g ,置于 250 mL 平底烧瓶中 ,加甲醇
100 mL ,加热回流 1 h ,冷却 ,过滤 ,滤液经旋转
蒸发仪蒸发浓缩后 ,定容至 50.0 mL ,作为供试
品溶液.用毛细管分别吸取制备的丹参和雪山
鼠尾草脂溶性供试品溶液 5 μL 点于同一硅胶
G薄层板上 ,以苯-乙酸乙酯[ V(苯)∶V(乙酸
乙酯)=19∶1]为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,观
察并绘制薄层色谱斑点.
1.4.4 高效液相色谱(HPLC)检测 对照
品溶液的配制.采用混合对照品配置法 ,用丹参
酮 ⅡA 和隐丹参酮共同配制成脂溶性对照品 ,
以甲醇为溶剂;原儿茶醛和丹参素共同配制成
水溶性对照品 ,以超纯水为溶剂.
供试品溶液的制备.精密称取待测干燥粉
末样品 0.5 g ,置于 250 mL 平底烧瓶中 ,加入
溶剂 ,加热回流 1 h ,冷却 ,过滤 ,滤液经旋转蒸
发仪蒸发浓缩后 ,定容至 50.0 mL 即得.脂溶
性供试品溶液以甲醇为溶剂 ,水溶性成分的供
试品溶液以水为溶剂.
色谱条件[ 6-7] .隐丹参酮 , 丹参酮 IIA :
Shim-pack-VP-ODS , C18 柱(250 mm ×4.60
mm i.d., 5 μm);流动相为甲醇-水 [ V(甲
醇)∶V(水)=80∶20] ,流速:1.0 mL min-1 ,
柱温:40 ℃,检测波长:270 nm ,进样量 10 μL .
丹参素 ,原儿茶醛:Shim-pack-VP-ODS , C18柱
(250 mm×4.60 mm i.d., 5 μm),流动相为甲
醇-0.2 mol L -1醋酸胺[ V(甲醇)∶V(醋酸
胺)=12∶88] ,流速:1.0 mL min-1 ,柱温:40
℃,检测波长:280 nm ,进样量 10μL.
样品测定.分别精密吸取对照品与供试品
溶液 ,注入高效液相色谱仪 ,测定丹参酮 ⅡA 、
隐丹参酮 、原儿茶醛和丹参素的质量分数.平行
测定 3次.
2 结果与分析
2.1 形态鉴别
由表1可知:丹参株高明显高于雪山鼠尾
草 ,前者约为后者的2倍;雪山鼠尾草为单叶 ,
50 第 3 7卷
蔡文国,等:雪山鼠尾草与丹参的生药学比较
表 1 雪山鼠尾草和丹参的形态比较结果
Table 1 Comparison result s of mo rp hological t rait s of S.evansiana and S.milt iorrh iza
项目 丹参 雪山鼠尾草 项目 丹参 雪山鼠尾草
株高/cm 52.20±36.20 11.00±3.00
叶柄长/cm 6.98±2.02 6.17±1.17
叶片长/cm 6.16±3.04 3.80±0.40
叶片宽/cm 4.08±2.22 3.37±0.37
花序长/cm 23.40±15.20 4.25±0.25
花萼长/cm 0.97±0.53 1.20±0.10
花冠长/cm 2.41±0.91 -
叶柄长/叶片长 1.33 1.62
花冠长/花萼长 2.48 -
几年生 多年生 多年生
主根明显否 明显 明显
单叶或复叶 复叶 单叶
叶片被毛类型 疏软毛 长柔毛
花冠颜色 蓝紫色 蓝紫 ,紫色
花冠筒内毛环有无 有 有
花柱伸出花冠与否 伸出 不伸出
花下药室能否育 不能 能
花药联合 下臂联合 顶端联合
注:样本量 n=20.
(1~ 5):依次为丹参的石细胞 、纤维、木栓细胞 、石细胞 、具缘纹孔导管;
(6~ 9):依次为雪山鼠尾草的环纹导管 、网纹导管 、纤维 、木栓细胞.
图 1 丹参和雪山鼠尾草的显微结构图
Fig.1 Micros copic images of S.evansiana and S.milt iorrhiza
51 第 1期
浙江大学学报(农业与生命科学版)
卵形或卵状三角形 ,被长绒毛 ,丹参叶常为单数
羽状复叶 ,小叶 1 ~ 3对 ,卵形或椭圆状卵形 , 2
面有长柔毛;雪山鼠尾草叶片长宽均较丹参小 ,
叶柄比丹参短 ,叶柄长与叶片长的比值较丹参
大;雪山鼠尾草花冠紫色或蓝紫色 ,丹参为蓝紫
色;雪山鼠尾草花柱伸出花冠 ,花药上部联合 ,
具能育药室 ,丹参花柱不能伸出花冠 ,花药下部
联合 ,花下药室不育 ,二者花冠筒内均有绒毛;
丹参花序长度变化幅度较大 ,且明显比雪山鼠
尾草长 ,可达雪山鼠尾草的 5倍;雪山鼠尾草的
下部苞片叶状 ,比萼长 ,上部卵形或椭圆形 ,丹
参苞片披针形;雪山鼠尾草的花萼却较丹参长.
2.2 显微结构鉴别
显微鉴定结果见图 1.丹参粉末呈红棕色 ,
气微 ,味淡;导管以网纹导管为主 ,具缘纹孔导
管常见 ,导管直径为 16.18 ~ 49.71 μm ,平均为
28.72μm ;木纤维细长 ,多成束存在;木栓细胞
黄棕色 ,长方形或多角形 ,壁稍厚;石细胞常见 ,
或单个散在或成对出现 ,类梭形 、长方形 、类三
角形或不规则多角形 ,边缘不平整 ,直径平均为
138.19 μm ,可长至 257.39 μm , 壁厚平均为
13.29μm ,最厚可达 30 μm ,孔沟明显 ,纹孔稀
疏 ,有的可见层纹.雪山鼠尾草颜色 、气味与丹
参相似;导管以网纹为主 ,环纹 、梯纹导管常见 ,
具缘纹孔少见 ,直径 47.24 ~ 84.51 μm ,可长至
103.54μm;木纤维甚多 ,细长 ,成束存在;木栓
细胞黄棕色 ,多角形 ,壁稍厚.
2.3 薄层色谱鉴别
由图 2可见 ,薄层板上雪山鼠尾草出现 3
个斑点 ,而丹参只出现 2个斑点 ,所有斑点都显
示出红色或暗红色.说明雪山鼠尾草与丹参在
化学成分种类上存在差异.
2.4 高效液相色谱检测
通过高效液相色谱法在雪山鼠尾草中检测
出隐丹参酮 、丹参酮 IIA 2种成分的质量分数
分别为 0.0334%、0.0812%;水溶性成分中只
检测到原儿茶醛 ,其质量分数为 0.0428%,丹
参素未检出(图 3).
52 第 3 7卷
蔡文国,等:雪山鼠尾草与丹参的生药学比较
3 结论与讨论
实验结果表明 ,从形态观察 、粉末鉴别和薄
层鉴别 3个方面能很好地将雪山鼠尾草和丹参
区分开来.形态上 ,丹参植株大型 ,株高几乎是
雪山鼠尾草的 2倍.2种植物的叶部特征区别
明显 ,雪山鼠尾草为单叶 ,丹参为羽状复叶 ,且
叶片也比雪山鼠尾草大.花部特征也有较大差
异 ,二者的花柱相对于花冠的位置 、花药联合的
位置 、药室的育性 、苞片形状以及花序长度等均
不相同;因此 ,在形态鉴别时 ,可以从整体植株 、
叶和花部特征等方面加以鉴定区别.在粉末特
征上 ,石细胞是二者最明显的区别点.雪山鼠尾
草中石细胞未见 ,而丹参中石细胞常见且形态
多样 ,有的甚长 ,可达 257.39 μm ,这与陈代贤
等[ 8]报道的结果相符.薄层展开后 ,二者斑点数
不同 ,且斑点本身为红色或暗红色 ,不需要使用
显色剂 ,因此该方法可用于快速鉴别丹参与雪
山鼠尾草.
高效液相色谱研究结果显示 ,雪山鼠尾草
与丹参的化学成分存在差异 ,且雪山鼠尾草丹
参酮 ⅡA 的质量分数仅 0.0812%, 未能达到
《中国 药典》 规定的化 学成分质量 分数
(0.2%)[ 6] ;因此 ,从这个角度来说 ,雪山鼠尾草
在民间作丹参药用是不科学的;但雪山鼠尾是
否具有其他重要化学成分 ,甚至其他药理作用 ,
还有待于进一步研究.
References:
[ 1 ] XU Li-jun , HUANG Guang-ying(徐丽君 , 黄光英).
Survey of research on the ch emical composi tion and
pharmacological act iviti es of salvia [ J] .Research of
Integrated Traditional Chinese andWestern Medicine(中
西医结合研究), 2009 , 1(1):45-48.(in Chinese)
[ 2 ] TENG Yan-f en , WANG Zheng-t ao , YU Guo-dian(腾
艳芬 , 王峥涛 , 余国奠).Research advances on the
medicinal plan t resources of Salvia mi l tior rhiza root s
[ J] .Chinese Wild Plant Resource(中国野生植物资
源), 2003 , 20(2):1-3.(in C hinese)
[ 3 ] XIAO Xiao-he , FANG Qing-m ao , XIA Wen-juan(肖小
河 , 方清 茂 , 夏文 娟) .Numerical taxonomy of
medicinal Salvia L.and th e genus of Danshen [ J] .
Journal of Plant Resources and Environment(植物资源
与环境), 1997 , 6(2):17-21.(in Chines e)
[ 4 ] 中国科学院中国植物志编缉委员会.中国植物志:第六
十六卷[ M] .北京:科学出版社 , 1977:104 , 145.
[ 5 ] 四川植物志编委会.四川植物志:第十卷[ M] .成都:民
族出版社 , 1992:348-349.
[ 6 ] 国家药典委员会.中国药典:2005版 第一部[ S] .北京:
化学工业出版社 , 2006:52-53.
[ 7 ] YU Lian-kang , LI U San-kan g (余练康 , 刘三康).
Determinat ion of Danshensu of Lemai Granu le [ J] .
China Journal of Chinese Materia Medica(中国中药杂
志), 1998 , 23(12):729-730.(in Chinese)
[ 8 ] 陈代贤 , 张贵君 , 郭月秋 ,等.常用中药鉴定名词图解
[ M] .北京:化学工业出版社 , 2005:67-109.
53 第 1期