全 文 ：第 34 卷 第 3 期
2015 年 3 月
分析测试学报
FENXI CESHI XUEBAO(Journal of Instrumental Analysis)
Vol. 34 No. 3
314 ～ 320
收稿日期:2014 － 10 － 16;修回日期:2014 － 11 － 20
基金项目:中国科学院仪器功能开发项目(yg2012086)
* 通讯作者:胡风祖，研究员，研究方向:天然产物化学，Tel:0971 － 6132750，E － mail:
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hufz@ nwipb. cas. cn
研究报告
doi:10. 3969 / j. issn. 1004 －4957. 2015. 03. 010
HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH在线筛选与鉴别
丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分
耿丹丹1，2，董 琦1，谭 亮1，迟晓峰1，许 旭1，2，胡风祖1*
(1． 中国科学院 西北高原生物研究所，青海 西宁 810008;2． 中国科学院大学，北京 100049)
摘 要:本研究建立了在线高效液相色谱 －质谱 －二苯基三硝基苯肼(HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH)快速
筛选和鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分和含量的方法。经液相色谱、质谱和文献报道综合分析鉴定
出丹参和康定鼠尾草中的 3 种抗氧化活性化合物，分别为咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸。比较了热回
流、超声辅助提取和快速溶剂萃取的提取效果，并对色谱条件进行优化。在优化条件下，这 3 种化合物均可
有效分离，并在 1. 7 ～ 35. 3 μg /mL 范围内线性关系良好，相关系数为 0. 999 5 ～ 0. 999 8，检出限为 0. 05 ～
1. 85 μg /mL，定量下限为 0. 18 ～ 6. 16 μg /mL，平均回收率为 96. 6%～ 97. 2%，相对标准偏差为 1. 1%～ 1. 3%。
运用该方法测定丹参和鼠尾草样品中这 3 个化合物的含量分别为:咖啡酸 0. 303，0. 254 mg /g;异迷迭香酸
苷 1. 019，1. 401 mg /g;迷迭香酸 17. 279，8. 104 mg /g。本方法简便、快速、准确、重现性好，适用于从复
杂天然产物中快速筛选与鉴别抗氧化活性成分。
关键词:丹参;康定鼠尾草;抗氧化活性成分;HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH在线筛选
中图分类号:O657. 72;TQ460. 72 文献标识码:A 文章编号:1004 － 4957(2015)03 － 0314 － 07
On-line Screening and Identification of Free Ｒadical Scavenging Compounds in
Salvia miltiorrhiza Bunge and Salvia prattiiHemsl． by
HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH
GENG Dan-dan1，2，DONG Qi1，TAN Liang1，CHI Xiao-feng1，XU Xu1，2，HU Feng-zu1*
(1 ． Northwest Institute of Plateau Biology，Chinese Academy of Sciences，Xining 810008，
China;2． University of Chinese Academy of Science，Beijing 100049，China)
Abstract:A new method was used for the rapid screening and identification of free radical scavengers
in the extracts of Salvia miltiorrhiza Bunge and Salvia prattiiHemsl．，and the determination of the con-
tent of the analytes in the samples based on HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH was developed． The
three compounds were identified to be caffeic acid，salviaflaside and rosmarinic through comprehen-
sive analysis of HPLC spectra，MS spectra and literature data． The extraction effects of the hot re-
flux，ultrasonic assisted extraction and accelerated solvent extraction(ASE)were compared and the
chromatographic conditions were optimized． Under the optimized conditions，three compounds could
be effectively separated． Good linear relationships were obtained for three compounds in the concen-
tration range of 1. 7 － 35. 3 μg /mL，with correlation coefficients of 0. 999 5 － 0. 999 8． The detec-
tion limits were in the range of 0. 05 － 1. 85 μg /mL，and the quantitation limits were in the range of
0. 18 － 6. 16 μg /mL． The average recoveries of three compounds were between 96. 6% and 97. 2%，
with relative standard deviations of 1. 1% － 1. 3% ． The method was applied in the determination of
three compounds contents in Salvia miltiorrhiza Bunge and Salvia prattiiHemsl．，with caffeic acid:
0. 303，0. 254 mg /g;salviaflaside:1. 019，1. 401 mg /g;rosmarinic:17. 279，8. 104 mg /g． The
method is convenient，fast，accurate and reproducibile． Otherwise，it gives a powerful tool for the
第 3 期 耿丹丹等:HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH在线筛选与鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分 315
rapid screening and identification of free radical scavenging compounds in complex natural products．
Key words:Salvia miltiorrhiza Bunge;Salvia prattiiHemsl．;antioxidant activity compounds;on-
line HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH
丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)和康定鼠尾草(Salvia prattiiHemsl．)均为唇形科(Labiatae)鼠尾草属
(Salvia Linn．)植物，丹参为临床常用中药，具有活血祛瘀、调经止痛等效用［1］。丹参和康定鼠尾草中
含有大量酚酸类化合物，具有很好的抗氧化活性［2］。杨菲等［3］利用 “一测多评”法测定了丹参中原儿
茶醛和迷迭香酸等酚酸类化合物含量;章林等［4］利用 Folin － Ciocalteu 法对鼠尾草中总多酚的含量进行
测定;然而大多研究仅针对其中的总酚酸做了离线抗氧化活性的研究，对其异迷迭香酸苷的含量测定
以及酚酸类化合物的在线筛选尚未见报道。
1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(1，1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH)是一种很稳定的氮中心的自由
基，可以捕获其它自由基，在 517 nm下有最大吸收。当 DPPH接受 1 个电子被氧化后，其吸收度的降
低程度代表物质的抗氧化能力。目前，HPLC － DAD － DPPH 自由基法在线筛选体系已成为筛选天然植
物中抗氧化活性成分的主要方法之一［5 － 7］。本研究在 HPLC － DAD － DPPH 在线抗氧化成分筛选基础
上，结合质谱分析，对丹参和康定鼠尾草中的天然抗氧化活性成分进行快速筛选和鉴定。与传统植物
中天然抗氧化活性成分的筛选方法相比，该方法可以充分利用液相色谱 －质谱联用的优势，准确定向、
快速、高效地对植物中抗氧化活性成分进行筛选和鉴定，以利于资源的充分利用。
1 实验部分
1. 1 仪器与试剂
Agilent 1100 HPLC － MSD液相色谱 －质谱联用仪，配有二极管阵列(DAD)检测器，电喷雾(ESI)
离子源(美国 Agilent 公司) ;Agilent 1260 高效液相色谱仪，配有 UV 检测器(美国 Agilent 公司) ;
ASE350 快速溶剂萃取仪(美国 Dionex公司) ;AG135 型精密电子天平(瑞士 Mettler Toledo公司) ;KQ －
100E型超声波清洗仪(昆山超声仪器有限公司) ;优普 UPE －Ⅱ － 40L 型超纯水机(上海优普实业有限
公司) ;IKA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ;PEEK 盘管(15 m × 0. 254 mm) ;单向阀;定比分流
阀(美国 IDEX Health ＆ Science 公司) ;
二苯基三硝基苯肼(DPPH，批号:101408373，德国 Sigma 公司) ;咖啡酸(供含量测定用，批号:
110885 － 200102，中国食品药品检定研究院)，迷迭香酸(纯度 ＞ 97%，批号:E － 0074，上海同田生
物技术股份有限公司);异迷迭香酸苷［14］(实验室自制，从丹参根的 60%乙醇提取物中分离制备得到，
通过 3 个 TLC 不同溶剂系统展开均为 1 个斑点，HPLC 鉴定其纯度 ＞ 96%) ;甲醇(色谱纯) ;冰乙酸
(分析纯)。
实验样品经中国科学院西北高原生物研究所卢学峰副研究员鉴定为唇形科鼠尾草属丹参和康定鼠
尾草的根。
1. 2 抗氧化成分在线筛选与鉴别流程
HPLC － DAD － DPPH在线筛选丹参与鼠尾草中抗氧化活性成分及鉴别装置流程见图 1。样品提取
液经 HPLC1 色谱柱分离，流出液通过定比分流阀被分成大小两部分，小流速部分进入 DAD 检测器和
质谱仪，实现各成分的紫外吸收检测以及各成分的在线质谱分析;大流速部分进入 PEEK 混合池，与
HPLC2 泵入的 DPPH 自由基溶液混合，样品中的抗氧化活性成分与 DPPH 自由基溶液反应后进入 UV
检测器，在 517 nm下在线检测由于自由基的清除作用而形成的负峰;对比 DAD 检测器获得的色谱图
与 UV检测器得到的负峰色谱图，可分辨所分析的化合物是否具有抗氧化活性。再结合质谱结果，即
可实现样品中抗氧化活性化合物的在线快速筛选。
1. 3 抗氧化成分的在线筛选与鉴别条件
HPLC1 工作条件:色谱柱:Diamonsil － C18(2) (250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;流动相:0. 5%冰乙
酸(A)－甲醇(B) ，梯度洗脱:0 ～ 10 min，30%～ 35% B;10 ～ 20 min，35%～ 40% B;20 ～ 32 min，
40% B，32 ～ 50 min，40%～ 90% B，50 ～ 55 min，90% B，55 ～ 60 min，90%～ 30% B;柱温:25
316 分析测试学报 第 34 卷
℃;流速:1. 0 mL /min;检测波长:330 nm;进样量:5 μL。HPLC1 色谱柱后分流至质谱的流速为
0. 3 mL /min，另一路液体的流速为 0. 7 mL /min。
HPLC2工作条件:反应环:PEEK盘管(15 m ×0. 254 mm) ;流动相:DPPH溶液(24. 7 μg /mL) ，等
度洗脱;流速:0. 45 mL /min;检测波长 517 nm。
质谱工作条件:离子源:电喷雾 ESI，负离子电离模式;雾化气:N2;雾化气压力:40 psi;干燥
气体流速:9 L /min;干燥气体温度:325 ℃。
图 1 抗氧化活性成分在线筛选与鉴别流程
Fig. 1 The process of on-line screening and identification of free radical scavenging compounds
1. 4 供试品溶液及 DPPH溶液的制备
分别称取 0. 5 g丹参和鼠尾草样品，精密称定，加入适量硅藻土混合均匀，置于 34 mL不锈钢萃取
池中。萃取条件为:压力 10 MPa，温度 70 ℃，静态萃取时间 10 min，冲洗溶剂体积为池容积的 60%，
氮气吹扫时间为 100 s，静态循环 2 次。收集甲醇提取液于旋转蒸发仪上蒸干后，用流动相定容于 25
mL容量瓶中，0. 45 μm滤膜过滤，备用。
称取 DPPH标准品，精密称定，配制成浓度为 24. 7 μg /mL 的甲醇溶液。置于 4 ℃冰箱中保存
待用。
1. 5 对照品溶液的制备
称取咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸对照品适量，精密称定，各置于 25 mL 容量瓶中，用甲醇
溶解并稀释至刻度，摇匀，得到浓度为 0. 085 mg /mL 的咖啡酸、0. 058 mg /mL 的异迷迭香酸苷和
0. 147 mg /mL的迷迭香酸对照品溶液。精密量取各对照品溶液适量，用甲醇配制成一定浓度的混合对
照品溶液，待用。
2 结果与讨论
2. 1 丹参与康定鼠尾草抗氧化活性成分的在线筛选
2. 1. 1 在线筛选参数的确定 考察了不同的 DPPH 流速(0. 2 ～ 0. 8 mL /min)、反应环的长度(2 ～ 25
m)、DPPH浓度(12. 3 ～ 197 μg /mL)对负峰信噪比的影响，并在单因素实验基础上对在线筛选参数进
行了响应面(Design － Expert 8. 0. 6)优化。结果表明:当 DPPH 流速为 0. 45 mL /min，反应环长度为 15
m，DPPH浓度为 24. 7 μg /mL时，负峰峰形较好，背景噪音最小，基线平稳，信噪比较大。
2. 1. 2 色谱条件的优化 根据酚酸类化合物含量测定的相关文献［8 － 9］可知，以乙腈 －水体系为流动相
时，色谱峰很难分开，以甲醇 －水为流动相时，分离效果明显改善，但色谱峰峰形仍较差。由于酚酸
类化合物在溶液中显弱酸性，流动相的 pH 值和样品溶解液对化合物的峰形和分离度均会产生影
响［10 － 11］，因此本实验考察了纯水 －甲醇、0. 05%乙酸水 －甲醇、0. 1%乙酸水 －甲醇、0. 2%乙酸水 －
甲醇和 0. 5%乙酸水 －甲醇作为流动相时对丹参和康定鼠尾草中酚酸类化合物色谱峰的影响［12］;采用
纯甲醇或者流动相作为样品溶解液考察溶解液对丹参和康定鼠尾草样品色谱峰的影响，所得色谱图见
图 2。由图 2 可知，随着流动相中乙酸比例的增大，色谱峰变窄，峰形有很大改善;且采用流动相作为
样品溶解液时，干扰物质明显减少。
第 3 期 耿丹丹等:HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH在线筛选与鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分 317
图 2 丹参和康定鼠尾草样品的 HPLC色谱图
Fig. 2 HPLC chromatograms of Salvia miltiorrhiza Bunge and Salvia prattiiHemsl．
1． caffeic acid，2． salviaflaside，3． rosmarinic;mobile phase:a． water + MeOH，b． 0. 5% acetic acid + MeOH，c． 0. 05% acetic
acid + MeOH，d． 0. 1% acetic acid + MeOH，e． 0. 2% acetic acid + MeOH，f． 0. 5% acetic acid + MeOH(Salvia miltiorrhiza
Bunge) ，g． 0. 5% acetic acid + MeOH(Salvia prattiiHemsl．) ，h． 0. 5% acetic acid + MeOH(negative peak) ;the
chromatogram of b was dissolved by MeOH and chromatograms of a，c，d，e，f，g and h were dissolved by mobile phase
2. 1. 3 丹参与康定鼠尾草中抗氧化成分提取方式的选择 考察了热回流提取、超声辅助提取和快速
溶剂萃取 3 种提取方式对样品提取效率的影响，其提取条件及咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸的含
量见表 1。其中快速溶剂萃取(ASE)法是指在密闭容器内于一定温度(50 ～ 200 ℃)和压力(1 000 ～ 3 000
psi或 10. 3 ～ 20. 6 MPa)条件下，在短时间内用有机溶剂提取固体或半固体样品的一种新型样品前处理
方法［13］。与超声、微波、回流、超临界萃取等成熟方法相比，ASE 法具有溶剂用量少、提取时间短、
萃取效率高、操作简单方便、安全和自动化程度高等优点，因此本实验采用该法提取样品中的抗氧化
活性成分。
表 1 提取方式与样品中咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸含量(n = 3)
Table 1 Extraction condition and contents of caffeic acid，salviaflaside and rosmarinic in samples(n = 3)
Extraction mode
Extraction
time(h)
Solvent
consumption(mL)
Solvent extraction
and filtration
Content of compound(mg /g)
Caffeic acid Salviaflaside Ｒosmarinic
Heat reflux extraction 1. 5 20 No 0. 282* ，0. 238 0. 929* ，1. 350 15. 277* ，7. 917
Ultrasound assisted extraction 1. 0 20 No 0. 199* ，0. 183 0. 889* ，0. 671 16. 303* ，4. 298
Accelerated solvent extraction(ASE) 0. 3 ＜ 15 Yes 0. 303* ，0. 254 1. 019* ，1. 401 17. 279* ，8. 104
* contents of caffeic acid，salviaflaside and rosmarinic in Salvia miltiorrhiza Bunge
2. 2 抗氧化成分的 ESI － MS鉴别
在 ESI负离子模式下，对雾化器压力、干燥气流、干燥气温度等条件进行优化，实验结果显示，
随着雾化压力的增大，酚酸类化合物的质谱检测信号由弱变强，且噪音变小;而干燥气流太小时易造
成样品溶剂不能充分挥干，气流太大会使样品吹散，检测灵敏度降低，选择 9 L /min 时可获得较好的
质谱信号;同时还考察了干燥气温度对质谱信号的影响，在 325 ℃下，质谱结果较好［14］。图 3 为该实
验条件下，康定鼠尾草样品的总离子流图。
图 3 康定鼠尾草样品的总离子流图
Fig. 3 Total ion chromatogram of Salvia prattiiHemsl．
1． caffeic acid，2． salviaflaside，3． rosmarinic
318 分析测试学报 第 34 卷
采用液质联用色谱仪得到样品中 1 ～ 3 号色谱峰的二级质谱图(见图 4) ，由图可知其准分子离子峰
以及碎片离子。根据［M － H］－的相对分子质量以及二级谱图，并结合 DAD 光谱图以及相关参考文献
可知，1 ～ 3 号色谱峰分别为咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸［15］。丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成
分的鉴定结果见表 2。
由化合物 1 的［M － H］－离子 m/z 179. 0 可推断为咖啡酸，由二级质谱碎片离子可推断其裂解方
式［16］。化合物 2，3 均产生相同的［M － H］－离子 m/z 359，据此可以断定它们可能为同一类成分。通
过对 ESI /MSn质谱中的碎片离子分析发现:分子离子 m/z 521 与碎片离子 m/z 359 为母子关系，母离子
是由分子离子失去 1 个质量数为 162 的中性碎片(即脱水六碳糖基)所得，说明该化合物存在 1 分子葡
萄糖。由此可知，化合物 2 是由化合物 3 的糖苷键断裂产生，根据相关参考文献可知化合物 3 为迷迭
香酸，化合物 2 为异迷迭香酸苷［17］。
图 4 咖啡酸(A)、异迷迭香酸苷(B)和迷迭香酸(C)的 HPLC /ESI － MS 负离子模式质谱信息
Fig. 4 Mass spectrometric signals of caffieic acid(A) ，salviaflaside(B)and
rosmarinic(C)using HPLC /ESI － MS with negative ion mode
left:MS spectrogram;right:MS /MS spectrogram
第 3 期 耿丹丹等:HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH在线筛选与鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分 319
表 2 丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分的鉴定结果
Table 2 Free radical scavenging compounds in Salvia miltiorrhiza Bunge and Salvia prattiiHemsl．
No．
tＲ
(min)
Selected ion
Experimental
value(m/z)
Product ions
(m/z)
Calculated
value(m/z)
Formula Compound Ｒeference
1 10. 156 ［M － H］－ 179. 0 135. 0 180. 15 C9H8O4 Caffeic acid ［12］
2 23. 171 ［M － H］－ 521. 1 197. 0，179. 0，161. 0 522. 00 C24H26O13 Salviaflaside ［13 － 14］
3 30. 231 ［M － H］－ 359. 0 359. 0，197. 0，179. 0，161. 0 360. 33 C18H16O8 Ｒosmarinic ［13 － 14］
2. 3 方法学验证
2. 3. 1 线性关系、检出限及定量下限 分别精密吸取“1. 5”配制的混合对照品溶液 0. 5，1. 0，2. 0，
3. 0，4. 0 mL于 5 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。按照 “1. 3”色谱条件测定峰面积。分别
以目标组分的进样浓度(x，μg /mL)为横坐标，色谱峰面积(y)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程分
别为:咖啡酸:y = 25. 98x － 52. 70(r2 = 0. 999 5) ;异迷迭香酸苷:y = 28. 75x － 38. 40(r2 = 0. 999 7) ;
迷迭香酸:y = 9. 52x － 54. 67(r2 = 0. 999 8)。表明咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸的质量浓度分别在
1. 7 ～ 13. 6，2. 9 ～ 23. 2，4. 4 ～ 35. 3 μg /mL范围内线性关系良好。
采用逐级稀释对照品溶液的方法确定检出限和定量下限。以信噪比 S /N≥3 及 S /N≥10 分别确定
咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸的检出限分别为 0. 05，0. 13，1. 85 μg /mL，定量下限分别为 0. 18，
0. 43，6. 16 μg /mL。
2. 3. 2 精密度与重现性 对方法的重复性进行了考察，取同一供试品溶液，重复进样 6 次，分别测定
3 个负峰的峰面积，计算各负峰峰面积的相对标准偏差(ＲSD)。结果显示，3 个负峰峰面积的 ＲSD 值
均小于 2. 5%，说明本实验所用仪器精密度良好。
分别称取 6 份丹参和康定鼠尾草样品 0. 5 g，精密称定，按 “1. 4”方法制备，并按 “1. 3”方法
测定峰面积和负峰面积，计算各峰峰面积和负峰面积的 ＲSD 值，结果显示，各峰峰面积和负峰面积的
ＲSD值均小于 5. 0%，表明此方法的重复性良好。
2. 3. 3 回收率实验 采用加标回收法，称取已知含量的丹参样品粉末 9 份，每份 0. 25 g，精密称定，
按低、中、高 3 个浓度分别精密加入对照品溶液，每一浓度平行 3 份，按 “1. 4”制成加标供试品溶
液，按“1. 3”色谱条件测定样品中咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量，并计算其回收率，结
果见表 3。由表 3 中数据计算可得，咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸的平均回收率分别为 96. 7%，
96. 6%和 97. 2%，ＲSD值分别为 1. 1%，1. 1%和 1. 3%。
表 3 回收率实验结果
Table 3 Ｒesult of recovery
Caffeic acid Salviaflaside Ｒosmarinic
Content
(mg /g)
Added
(mg)
Found
(mg)
Ｒecovery
(%)
Content
(mg /g)
Added
(mg)
Found
(mg)
Ｒecovery
(%)
Content
(mg /g)
Added
(mg)
Found
(mg)
Ｒecovery
(%)
0. 075 0. 038 0. 110 98. 2 0. 251 0. 125 0. 359 95. 6 4. 251 2. 150 6. 280 98. 1
0. 076 0. 038 0. 108 95. 4 0. 255 0. 125 0. 371 97. 7 4. 320 2. 150 6. 400 99. 5
0. 075 0. 038 0. 109 96. 8 0. 253 0. 125 0. 363 96. 1 4. 285 2. 150 6. 240 97. 0
0. 074 0. 075 0. 145 97. 2 0. 250 0. 250 0. 481 96. 3 4. 233 4. 300 8. 120 95. 2
0. 075 0. 075 0. 142 95. 0 0. 251 0. 250 0. 477 95. 3 4. 251 4. 300 8. 310 97. 2
0. 076 0. 075 0. 147 97. 5 0. 255 0. 250 0. 489 96. 9 4. 320 4. 300 8. 340 96. 8
0. 075 0. 113 0. 183 97. 5 0. 253 0. 375 0. 613 97. 7 4. 285 6. 450 10. 510 97. 9
0. 075 0. 113 0. 181 96. 5 0. 253 0. 375 0. 618 98. 5 4. 285 6. 450 10. 330 96. 2
0. 076 0. 113 0. 182 96. 7 0. 255 0. 375 0. 603 95. 8 4. 320 6. 450 10. 450 97. 0
2. 4 抗氧化活性成分的含量测定
按照“1. 4”方法制成丹参和康定鼠尾草供试品溶液，对其含量进行测定，结果见表 1。结果表
明，丹参和康定鼠尾草中 3 个化合物含量分别为:咖啡酸 0. 303，0. 254 mg /g;异迷迭香酸苷 1. 019，
1. 401 mg /g;迷迭香酸 17. 279，8. 104 mg /g。数据显示，丹参和康定鼠尾草中迷迭香酸的含量最高，
其次为异迷迭香酸苷，咖啡酸的含量最低。
320 分析测试学报 第 34 卷
3 结 论
本研究基于在线 HPLC － DAD － ESI /MSn － DPPH 快速筛选抗氧化活性成分的方法，建立了丹参和
康定鼠尾草中抗氧化活性成分的在线筛选与鉴别以及含量测定方法。筛选出 3 个具有明显抗氧化活性
的化合物，通过 HPLC － ESI /MSn在线鉴别出这 3 个化合物分别为咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸，
并利用高效液相色谱法对其进行含量测定。本方法操作简便，重复性好，与传统的天然产物中复杂成
分的分离与鉴别模式相比，更适用于从复杂的天然产物中快速筛选并鉴别出有效的抗氧化活性成分，
大大提高了抗氧化活性成分的筛选效率。
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