全 文 ：收稿日期: 2001-12-18.
作者简介: 王春明 ( 1971-) ,男 ,博士研究生 . ① 通讯联系人 .
文章编号: 0455-2059( 2002) 06-0123-02 研 究 简 报
离舌橐吾中 3种倍半萜的体外抗癌活性
王春明1 , 陈 兴 1 , 王 瑛 2 , 贾忠建 2 , 郑荣梁 1,①
( 1.兰州大学 生命科学学院 ; 2.兰州大学 化学化工学院 , 甘肃 兰州 730000)
菊科橐吾属植物在我国分布于西北、西南、华北和东北 ,约有 100余种 ,为民间广泛应用的
中草药资源 ,其根、茎、叶均可入药 .主要有散寒祛风、润肺下气 ,化痰止咳、理气顺中、抗菌消
炎、清热解毒、活血止痛等功效 .民间常用于治疗痈肿、疔疮、风湿感冒、肺结核咯血、小便不利、
咽喉炎及跌打损伤等症 [1 ] .从这种植物中提取了 3种倍半萜 ,本文用噻唑蓝 MT T法 [2～ 4 ]研究
它们的体外抗癌活性 ,初步探讨了其构效关系 .
1 材料与方法
图 1 3种天然产物的结构式
Fig. 1 Structur es o f the 3 natur e products
1. 1 材料 橐吾环氧素 ( L1 )、橐
吾环氧醇 ( L2 )和橐吾环氧醇乙酸
酯 ( L3 )为提自菊科橐吾属植物离
舌 橐 吾 ( Ligularia veitchiana
( Hemsl. ) Greenm)的 3种倍半萜 ,
由兰州大学有机化学研究所王瑛、
贾忠建分离、鉴定并惠赠 .长春新
碱为上海华联制药有限公司产品 .
1. 2 细胞培养及细胞计数 人肝
癌细胞 ( SMMC-7721)和人卵巢癌细胞 ( HO-8910) [5 ]用 h= 10%的小牛血清的 RPM I1640在
37℃ ,h( CO2 )= 5%的条件下培养 ,细胞存活率用 M T T染色法检测 , M TT在活细胞线粒体脱
氢酶作用下 ,发生氧化还原反应 ,生成甲月赞 ( formazane)结晶 ,溶于二甲基亚砜 ( DM SO)中 ,显
蓝紫色 ,在 595 nm处有较大光吸收 ,参考波长 655 nm ,细胞存活率按下式计算
细胞存活率 (% )= (实验组 A595- 655 /对照组 A595-655 )× 100% .
1. 3 体外抗癌活性检测 将 4× 104个 /mL的细胞加入 96孔板中 ,每孔 100μL,培养 24 h
后 ,加入不同质量浓度的药物 (先溶于 DM SO,配成母液 . DM SO在培养体系的终体积分数小
于 0. 05% ) ,阳性对照孔每孔加入不同质量浓度的长春新碱 ,每个质量浓度各设 5孔平行 .继续
培养 48 h后 ,小心吸去药液 ,每孔内分别加入 10μL M TT( 5 mg /mL)和 90μL新鲜培养液继
续培养 4 h,吸去培养液 ,加入 100μL DMSO,振荡 5 min,在 ELSA酶标仪上测出 A595-655.
2 结果与讨论
以不加药细胞存活率为 100% ,以药物浓度的对数值和细胞存活率作线性回归 ,求出各种
药物对细胞的半抑制质量浓度d( IC50 ) .结果见表 1.
国际上普遍将d( IC50 )在 1～ 100μg /mL范围内的效果看作抗癌有效范围 ,大于 100
第 38卷第 6期
2002年 12月
兰 州 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 )
Journal of Lanzhou Univ er sity ( Natura l Sciences)
Vo l. 38 No . 6
Dec. 2002
DOI : 10. 13885 /j . i ssn. 0455 -2059. 2002. 06. 026
μg /mL认为无效 ,趋于 1μg /mL认为非常有效 . L1对两种癌细胞的 d( IC50 )均远大于 100μg /
m L,故可认为无抗癌活性 . L2对两种细胞的d( IC50 )仍大于 100μg /mL,因此抗癌作用不大 . L3
对人肝癌细胞的d( IC50 )十分接近于 100μg /mL,但对人卵巢癌细胞的d( IC50 )却只有 81μg /
m L,可见这 3种天然产物中 L3的抗癌能力最强 . L2是 L1的羟基化衍生物 , L3是 L2的羟基酯
化衍生物 ,似乎这类倍半萜的羟基酯化是表现抗癌力的关键 .本文结果可为药物设计提供有价
值的先导化合物作参考 .
表 1 3种天然产物及长春新碱对癌细胞增殖的半抑制质量浓度
Table 1 Theρ( IC50 ) of 3 nature products and vincristin on proliferat ion of tumor cells
d( IC50) /μg· mL- 1
人肝癌细胞 SM MC-7721 人卵巢癌细胞 HO-8910
L1 > 400 > 400
L2 165. 11± 1. 89 178. 09± 4. 61
L3 102. 38± 2. 20 81. 29± 2. 37
长春新碱 48. 92± 4. 08 46. 57± 2. 35
参 考 文 献
[ 1] 江苏新医学院 .中药大辞典 [ M ].北京:人民卫生出版社 , 1977. 154, 549, 1152, 2349.
[ 2] 韩锐 .抗癌药物研究与实验技术 [M ].北京: 北京医科大学中国协和医科大学联合出版社 , 1997. 284-
286.
[ 3] 李忌 ,郑耘 ,郑荣梁 ,等 .苯丙素甙化合物的抗肿瘤活性 [ J].中国药学杂志 , 1995, 30( 5): 269-271.
[ 4 ] 赵晨阳 ,邱嵘 ,郑荣梁 .呋喃骈呋喃木脂素的体外抗肿瘤活性 [ J].兰州大学学报 (自然科学版 ) , 2000, 36
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[ 5] 牟翰舟 ,许沈华 ,张奕荫 ,等 .人卵巢癌细胞系 HO-8910的建立及其生物学特性 [ J].中华妇产科杂志 ,
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