全 文 :[成分分析]
多舌飞蓬中灯盏乙素的生态生物学分析
张 浩 , 张志锋
(四川大学华西药学院 ,成都 四川 610041)
收稿日期:2003-07-15
作者简介:张 浩(1950~ ),四川成都市人 ,四川大学华西药学院教授 ,博士生导师 , 主要从事生药的资源开发及品质评价。电话:028-
85503037;E-mail:zhangh95@hotmail.com
关键词:多舌飞蓬;灯盏乙素;HPLC;含量分析
摘要:目的:用 RP-HPLC 法研究多舌飞蓬[ Erigeron multiradiatus(Wall.)Benth.] 中主要成分灯盏乙素在不同产区 , 不同
采收季节 ,个体器官之间的变化规律。方法:测定的样品用甲醇-水(1∶1)提取;色谱柱 Shimadzu ODS-18(150×4.6mm ,
5μm), 流动相∶甲醇-水-醋酸(39∶61∶0.6), 流速 0.8ml/ min ,检测波长 335nm , 柱温 35℃。结果:不同地区 , 不同季节的多
舌飞蓬中的灯盏乙素的含量不同 ,地上部分远高于地下部分。结论:多舌飞蓬中的灯盏乙素的含量是由其基因与环境变
化共同作用的结果。
中图分类号:R282.7 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2004)01-0060-03
Ecological and biological analysis of scutellarin in Erigeron multiradiatus
ZHANG Hao , ZHANG Zhi-feng
(College of Pharmacy , S ichuan Univer si ty , Chengdu , 610041 , China)
KEYWORDS:Erigeron mult iradiatus;scutellarin;HPLC;determinat ion
ABSTRACT:AIM:To study the regular change of scutellarin in Erigeron mult iradiatus(Wall.)Benth , f rom
different areas , different seasons and dif ferent parts of plant by means of RP-HPLC.METHODS:The herbs of
Erigeron mul tiradiatus were ext racted w ith CH3OH-H2O(1∶1)w ixture , The samples were separated on an
ODS column w ith the mobile phase CH3OH-H2O-HAC(39∶61∶0.6).The flow rate w as 0.8ml/min , the detec-
tion w avelength w as set at 335nm and the temperature w as at 35℃.RESULTS:The determinat ion of scultellar-
in w as dif ferent f rom different areas and different seasons , Scutellarin content of terraneous including stem 、leaf
and f lower w as higher than that of subterraneous root.CONCLUSION:Variation in Erigeron multiradiatus
was inf luenced by the combined effects of geno type and ecological conditions.
多舌飞蓬 [ Erigeron multiradiatus (Wall.)
Benth.]为菊科飞蓬属多年生草本植物[ 1] ,主要分布
于我国四川西部和云南西北部高原地区 ,资源丰富 ,
在藏医药中全草入药 ,临床上用于治疗心脑血管疾
病的中药保护品种的灯盏细辛为同属植物[ 2] 。多
舌飞蓬中含有多种黄酮成分 ,已有报道从中分离出
芹菜素 、槲皮素 、木犀草素 、灯盏甲素 、异槲皮苷 、灯
盏乙素等[ 3-5] ,本课题对多舌飞蓬中的灯盏乙素的
生态生物学变化进行了系统的研究 ,为进一步开发
利用多舌飞蓬这一新的药源和人工种植技术的制定
提供理论依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器:Shimadzu LC-10Atvp高效液相色谱议 ,
LC-10AT 泵 ,CTO-10A柱温箱 ,SPD-10AV检测器 ,
SCL-10A 系统控制器 , Class-vp 色谱工作站;BP-
210D-AG 赛多利斯电子天平 。
1.2 试药:灯盏乙素对照品(中国科学院昆明植物
所孙汉董教授提供 , 纯度 >99%);甲醇为 HPLC
级;超纯水(四川大学华大制药提供);多舌飞蓬各样
品(作者实地采集并鉴定)。
2 方法与结果
2.1 对照品与样品溶液的制备
对照品的制备:精密称取灯盏乙素对照品
2.3mg溶于 50mL 甲醇溶液中 ,定容备用。
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中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
Jan., 2004
Vol.26 No.1
样品的制备:多舌飞蓬药材 ,粉碎过 40目筛 ,精
密称取 1.0g粉末 ,加入 20mL 甲醇 ,超声提取 30min ,
倾出提取液 ,再加入 20mL 甲醇 ,超声提取 30min ,合
并两次提取液 ,甲醇定容于 50mL 量瓶 ,备用。
2.2 色谱条件 色谱柱 Shimadzu ODS-18(150mm
×4.6mm , 5μm), 流动相∶甲醇-水-醋酸(39-61-
0.6),流速 0.8mL·min-1 ,波长 335nm ,柱温 35℃。
在此色谱条件下 ,所得对照品与样品色谱图见图 1 、
图 2 ,灯盏乙素峰的分离度为 1.9。
图 1 灯盏乙素对照品色谱图
Fig.1 The chromatogram of scutellarin
图 2 多舌飞蓬样品色谱图
Fig.2 The chromatogram of E.multiradiatus
2.3 线性关系的考察 取标准品供试液适量 ,分别
用甲醇稀释成浓度为 0.023 , 0.046 ,0.092 , 0.184 ,
0.276mg·mL-1 。进样 20uL ,采用外标法定量 ,以
进样量为横坐标 、峰面积为纵坐标 ,进行回归计算 。
其线性方程为:Y =76814 x -47569 , r=0.9996;结
果表明:进样量在范围 0.092 ~ 0.46μg 内 ,峰面积与
进样量线性关系良好 。
2.4 方法学考察
2.4.1 进样精密度考察
取供试液 20μL ,连续进样 5次 ,进行色谱分析 ,
以灯盏乙素的峰面积计 , RSD =1.3%。
2.4.2 重复性考察
精密称取多舌飞蓬药材 5份 ,按样品制备方法制
备5份供试液 ,按精密度项下测定 , RSD=1.9%。
2.4.3 稳定性考察
在一周内连续 5d ,取供试液进行色谱分析 ,以
灯盏乙素的峰面积计 , RSD =2.1%。
2.4.4 回收率实验
精密称取 0.5g 多舌飞蓬粉末 ,分别加入对照品
1.0mg 、2.0mg 、3.0mg ,形成低 、中 、高三种浓度 ,按
样品含量测定项下实验 ,回收率平均值为 99.2%,
RSD=1.8%,(n=9)。
2.5 结果与分析
2.5.1 不同地区多舌飞蓬的灯盏乙素含量分析 ,见
图 3:(样品 1.云南迪庆藏族自治州什塔海;样品 2 ,
四川甘孜藏族自治州康定县折多塘;样品 3 ,四川甘
孜县锣锅梁子;样品 4 ,四川甘孜藏族自治州德格县
新路海;样品 5 ,四川甘孜藏族自治州康定县新都
桥 ,以上样品均采于 2001年 7月)结果表明 ,各地生
长的多舌飞蓬的灯盏乙素的含量不相同 ,云南的较
低 。四川各地也有差异 ,锣锅梁子最高。
图 3 不同地区多舌飞蓬的灯盏乙素含量
Fig.3 The content of scutellarin in E.multiradiatus from
different areas
图 4 同一产地不同生长季节多舌飞蓬的灯盏乙素含量
Fig.4 The content of scutellarin in different time from the
same place
2.5.2 同一产地不同生长季节多舌飞蓬的灯盏乙
素含量分析 ,见图 4:该样品采自四川甘孜藏族自治
州康定县折多塘 。(样品 1号:2002年 5月 18 日 ,
样品 2:2002 年 7 月 4日 ,样品 3:2002 年 7 月 26
日 ,样品 4:2002年 8月 22日 ,样品 5:2002年 10月
18日)结果表明:多舌飞蓬中灯盏乙素在 5月含量
最高 ,10月最低 。
2.5.3 不同部位的灯盏乙素含量分析见图 5:2001
年 8月采自四川甘孜藏族自治州康定县折多塘 。结
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果:多舌飞蓬的茎中灯盏乙素含量最高 ,其次是叶和
花 ,根中的含量最低 。
图 5 不同部位的灯盏乙素含量(1.根 , 2.茎 , 3.叶 , 4.花)
Fig.5 The content of scutellarin in dif ferent parts.(1.root ,
2.stem , 3.leaf , 4.flower)
3 讨论
3.1 生长在不同地区的多舌飞蓬的含量存在一定
的差异 ,说明外界环境的改变影响其灯盏乙素的变
化 ,而同一生境不同植株之间的含量差异说明多舌
飞蓬的灯盏乙素含量的高低可能是有遗传背景的 。
3.2 同一产地的多舌飞蓬在不同的生长季节其体
内的灯盏乙素含量存在较大的差异 ,在花期(7-9
月)之前 ,体内的灯盏乙素最高。而当叶脱落时 ,含
量最低 ,这给我们采收提供了参考 。
3.3 不同部位的灯盏乙素含量表明:多舌飞蓬的地
上部分的含量远远高于地下部分 ,我们只需采集地
上部分即可 ,这有利于资源的可持续利用 。
3.4 不同地区不同生长季节的多舌飞蓬中的灯盏
乙素的含量会有变化 ,同一生境中的不同植株的灯
盏乙素的含量也略有差异 ,同一产地不同生长年限
的多舌飞蓬中灯盏乙素的含量差异较大 ,植株的地
上部分的含量比地下部分的含量高 。总之 ,多舌飞
蓬中灯盏乙素的含量可能是基因和环境条件共同作
用的结果。
参考文献:
[ 1 ] 中科院中国植物志编委会 ,中国植物志[ M] .第 74 卷.北京:
科学出版社 , 1985:309
[ 2 ] 中华人民共和国药典编委会 ,中国药典(一部)[ S] .1977 年
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学学报 , 1998 , 33(11):836-838.
[ 5 ] 李波 ,赵映梅 ,孙汉董 ,等.多舌飞蓬化学成分的研究[ J] .中草
药 , 1999 , 30(8):561-563.
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