全 文 ：华西药学杂志W CJ· PS　2009, 24(1)：084 ～ 085 　　
基金项目:西南民族大学引进高层次人才科研资助金项目;四川省科技攻关项目(2006Z08-081)
作者简介:张志锋(1973-),男 ,博士 ,从事民族药物资源开发及品质评价工作。
＊通讯作者(Correspondentauthor), Email:zhanghhx@vip.sina.com
RP-HPLC测定不同产地飞蓬中的灯盏乙素
张志锋 1 ,王建刚 2 ,安　静2 , 张　浩 2＊
(1.西南民族大学少数民族药物研究所 , 四川 成都 610041;2.四川大学华西药学院 , 四川 成都 610041)
摘要:目的　用 RP-HPLC法测定民族药物飞蓬中的灯盏乙素 。方法　色谱柱用 Shim-packVP-C18(150 mm×4.6 mm, 5
μm);流动相 A为乙腈 、B为 0.2%醋酸水溶液;梯度洗脱程序为:15% ～ 20% A(0 ～ 10 min), 20% ～ 25.3% A(10 ～ 30 min),
25.3% ～ 40% A(30 ～ 50min), 40% ～ 15% A(50 ～ 60min);流速 1.0 ml·min-1;检测波长 335nm。结果　线性范围为 0.27 ～
5.40 μg(r=0.9999, n=5);平均回收率为 98.7%, RSD=2.1%(n=9)。结论　所建方法准确 、简便 ,可作为测定飞蓬中灯盏
乙素的方法。
关键词:反相高效液相色谱法;飞蓬;灯盏乙素;含量测定;不同产地
中图分类号:R917　 文献标识码:A　 　文章编号:1006-0103(2009)01-0084-02
DeterminationofscutelarininErigeronacerfromdifferenthabitatsbyRP-HPLC
ZHANGZhi-feng1 , WANGJian-gang2 , ANJing2 , ZHANGHao2＊
(1.EthnicPharmaceuticalInstituteofSouthwestUniversityforNationalities, Chengdu, Sichuan, 610041 P.R.China;2.WestChina
schoolofPharmacy, SichuanUniversity, Chengdu, Sichuan, 610041 P.R.China)
Abstract:OBJECTIVE　TodevelopanHPLCmethodfordeterminationofscutelarininErigeronacer.METHODS　Forchromato-
graphicanalysis, aShim-packVP-ODScolumn(150 mm ×4.6 mm, 5μm)wasused.Themobilephasewasconsistedofaceto-
nitile(A)and0.2% aqueousaceticacid(v/v, B)usingagradientprogramof15%-20% Ain0-10 min, 20%-25.3% Ain
10-30 min, 25.3%-40% Ain30-50min, 40%-15% Ain50-60 min.Theflowratewas1.0 ml·min-1.Thedetectionwave-
lengthwassetat335nmforacquiringchromatograms.RESULTS　Thelinearrangeofscutelarinwas0.27-5.4 μg(r=0.9999, n=
6);Therecoveryratewas98.7 %withRSDof2.1%.CONCLUSION　Themethodwasaccurate, rapid, andsimplefordetermina-
tionofscutelarininErigeronacer.
Keywords:RP-HPLC;Erigeronacer;Scutellarin;Determination;Differenthabitats
CLCnumber:R917　　　 Documentcode:A　 　ArticleID:1006-0103(2009)01-0084-02
　　飞蓬 ErigeronacerL.为菊科飞蓬属植物飞蓬的
干燥全草 ,广泛分布于中国四川 、西藏 、新疆等地 ,欧
洲也有分布 [ 1] 。飞蓬在民间常用于牙痛和关节炎
等疾病的治疗 ,已有文献报道飞蓬化学成分的分离
和鉴定 [ 2] 。灯盏乙素(scutelarin)具有扩张脑血管 、
冠脉血管和外周血管的作用 ,可增加血流量 、改善局
部供血 、降低外周阻力 、改善微循环 、减少血小板聚
集 、抗 HIV病毒等作用 [ 3 ～ 6] 。近年的调查和研究发
现 ,川西高原地区飞蓬分布较多 ,且在民间有悠久的
用药历史。因此 ,采用 HPLC法研究四川各产地飞
蓬中的灯盏乙素 ,为飞蓬药材的质量评价提供参考 。
1　实验部分
1.1　仪器和试药
N2010高效液相色谱仪 (日本岛津)。乙腈为
色谱纯;其余试剂为分析纯;水为双蒸水;灯盏乙素
对照品(中国药品生物制品检定所 ,纯度 >99%, 批
号:110842-200504);飞蓬药材采自四川省甘孜藏
族自治州和阿坝藏 、羌族自治州(表 1),经鉴定为飞
蓬 Erigeronacer的干燥全草 ,保存于四川大学华西
药学院标本室 。
1.2　方法与结果
1.2.1　色谱条件与系统适用性试验　采用 Shim-
packVP-C18柱(150mm×4.6 mm, 5 μm)和 Dikma
EasyGuardC18 Kit保护柱;流动相 A为乙腈 , B为
0.2%醋酸水溶液 ,采用梯度洗脱的程序为:15% ～
20% A(0 ～ 10 min), 20% ～ 25.3% A(10 ～ 30
min), 25.3% ～ 40% A(30 ～ 50 min), 40% ～ 15%
A(50 ～ 60 min);流速 1.0 ml·min-1 ,检测波长 335
nm;柱温 35℃,进样量 10μl,色谱图见图 1。在此条
件下 ,理论板数按灯盏乙素峰计 ,大于 3×103 ,灯盏
乙素峰与其他杂质峰均能得到良好的分离 ,分离度
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2009.01.027
图 1　对照品(A)和飞蓬药材(B)溶液的色谱图
Fig1　HPLCchromatogramsofcontrolsolution(A)andErigeron
acersolution(B)
符合要求(R>1.5)。
1.2.2　溶液的制备　精密称取 13.5 mg灯盏乙素
对照品 ,甲醇定容于 25 ml量瓶中 ,得 0.54 mg·ml-1
的对照品溶液。飞蓬药材粉碎后过 40目筛 ,精密称
取 1.0g,加入 20 ml甲醇 -水(1：1),超声提取 30
min,倾出提取液 ,药渣再提取 1次 ,合并两次提取
液 ,甲醇定容于 50 ml量瓶中作为样品溶液。
1.2.3　线性关系　取灯盏乙素对照品溶液 ,用甲醇
稀释成 0.270、0.135、0.054、0.027mg·ml-1的溶液 。
在 “1.2.1”项条件下分别进样 10 μl。以峰面积对
进样量 (μg)进行线性回归 , 其回归方程为:Y=
1.052×107X+8.909×103(r=0.9999),灯盏乙素
进样量 0.27 ～ 5.40μg与峰面积线性关系良好 。
1.2.4　精密度试验　精密吸取 10 μl同一对照品
溶液 ,连续进样 5次。灯盏乙素峰面积的 RSD=
1.3%(n=5),结果表明仪器的精密度较好 。
1.2.5　重复性试验　精密称取同一批飞蓬药材粉
末 6份 ,分别按 “1.2.8”项方法测定 。灯盏乙素的
含量为 0.89%, RSD=1.9%(n=6),结果表明方法
的重复性好 。
1.2.6　稳定性试验 　取同一样品溶液 ,室温下放
置 ,分别在配制后 0、2、4、8、12 h进样 10 μl,以灯盏
乙素的峰面积计 , RSD=2.1%(n=5),表明样品溶
液在 12 h之内稳定 。
1.2.7　回收率试验　取 0.5 g同一批飞蓬药材(表
1 No.1)粉末 9份 ,精密称定 ,分别精密加入一定量
低 、中 、高浓度的对照品溶液 ,混匀后 ,按 “ 1.2.8”项
下方法测定含量 ,计算回收率 。其平均回收率为
98.7%, RSD=2.1%(n=9),表明方法的准确度好 。
1.2.8　样品的测定　分别将不同来源的飞蓬药材
样品全草 ,按 “1.2.2”项制备样品溶液。分别取样
品溶液和对照品溶液各进样 10 μl,记录峰面积 ,以
外标法计算灯盏乙素的含量(表 1)。
表 1　不同产地飞蓬药材中灯盏乙素的含量 (n=3)
Table1　ContentofscutellarinfromthedifferenthakitatsinEriger-
onacer(n=3)
编号 产地 海拔 /km 采集日期 含量 /%
1 四川小金 2.00 2007.7 0.26
2 四川康定 3.40 2007.7 0.65
3 四川马尔康 4.10 2007.7 1.10
4 四川黑水 3.10 2007.7 0.27
5 四川黑水 2.75 2007.7 0.37
6 四川理县 3.10 2007.7 0.64
7 四川红原 3.15 2007.7 1.82
8 四川红原 3.40 2007.7 0.55
9 四川炉霍 3.60 2006.7 0.89
2　讨论
曾对流动相组成 、比例及 pH进行了筛选 ,最终
采用 “ 1.2.1”项下的流动相。按照梯度洗脱的条
件 ,能使样品溶液中灯盏乙素峰和其他杂质峰达到
基线分离 。此外 ,还对灯盏乙素的提取方法和条件
进行了筛选 ,试用了乙醇 、甲醇 、乙醇 -水(1：1)、
甲醇 -水(1：1)等不同溶剂 ,先后采用回流 、冷浸 、
超声等提取方法 ,最终确定以甲醇 -水 (1：1),超
声提取(30min×2)为最佳提取条件。
通过对不同产地飞蓬药材测定的结果表明 ,这
些药材中灯盏乙素的含量存在较大的差异 ,可能与
当地的环境 、气候 、海拔等有较大的关系 ,有待进一
步深入研究。
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收稿日期:2008-07
85第 1期 张志锋 ,等。 RP-HPLC测定不同产地飞蓬中的灯盏乙素