全 文 ：酯 ,定容至 5 ml ,加入无水 Na2SO4 脱水 ,得供试品
C 。精密称取阿魏酸标准品 1.5 mg ,加 1 ml色谱纯
甲醇溶解 ,分别稀释至 15 、30 、60 、75 、150 μg/ml待
用 ,另精密称取 1.6 mg 阿魏酸标准品 ,用纯水定容
至100 ml。精密称取 3.8 mg 5-羟甲基呋喃甲醛 ,加
1 ml纯水溶解 ,稀释至 38 μg/ml待用。
2.2 　高效液相色谱分析　Agilent Zo rbax C18反相
柱;流动相:甲醇-1%冰醋酸 ,流速:1 ml/min ,检测
波长:320 nm ,柱温:30℃,进样量 10μl。
2.3 　血小板凝集抑制试验　取 20 ml健康人静脉
血 ,于 1200 r/min离心 10 min ,取上清为 PRP(富血
小板血浆),剩余部分以 3000 r/min离心 10 min ,取
上清为 PPP(贫血小板血浆)。在血小板聚集仪上 ,
于测试管内加入 30 μl测试药液 , 再加入 170 μl
PRP ,总体积为 200 μl ,以 PRP 调零 ,以 PPP 调透光
度为 100 , 37℃预热 2 min后 ,加入诱导剂 ADP(40
μmol/L)22 μl至 PRP 中 ,观察血小板聚集情况 ,计
算血小板最大聚集抑制百分数 。
2.4 　色谱-质谱分析　柱头温度 220℃,进样量 2
μl ,不分流 , He气流量 1 ml/min;程序升温条件为:
70℃维持 1 min后 ,以10℃/min上升至 200℃,维持
1 min , 以 20℃/min 的速度上升到 270℃, 停留 5
min;分析数据库为 NIS T98。
3 　结果
3.1 　高效液相色谱　当归注射液中阿魏酸含量为
48 μg/ml ,A中阿魏酸含量为 16 μg/ml ,B不含阿魏
酸 。
3.2 　血小板凝集抑制试验　从表中可以看出浓当
归注射液中除阿魏酸以外还有其它可以抑制血小板
凝聚的物质 。
　表 血小板凝集抑制试验结果
组别 阿魏酸(16μg/ml) A B
1 15.0 38.1 17.6
2 16.3 58.1 36.6
3 15.7 45.7 25.6
4 15.6 39.3 21.9
5 15.2 37.4 29.5
3.3 　气相色谱-质谱分析　对 C 进行 GC-MS 分
析 ,表明含有 5-羟甲基呋喃甲醛。
参 考 文 献
1 　尹钟洙 , 等.当归及其成分阿魏酸对大鼠血小板聚集
5HT 释放的影响.药学学报 , 1980 , 15(6)∶321
2 　徐理纳 ,等.阿魏酸钠和阿斯匹林联用对大鼠血小板聚
集的影响及对 PGI2-TXA2 平衡的调节.药学学报 ,
1985 , 20(1)∶5
(2003-12-19收稿)
高效毛细管电泳法测定蒲公英中咖啡酸的含量
晏　媛　许重远　陈志良　郑　萍　郭　丹
(第一军医大学南方医院药学部 ,广州 510515)
　　摘要　目的:测定蒲公英药材中咖啡酸的含量。 方法:采用高效毛细管电泳法。电泳条件为:石英毛细管柱
(78 μm×60 cm);运行缓冲液为 20 mmo l/ L的硼砂溶液(25℃时 pH=9.18);分离电压 12 kV;进样时间为 5 s;温度
为 25℃,检测波长为 313 nm。结果:咖啡酸在 10 ～ 100 μg/ ml范围内呈良好的线性关系(0.9992)。平均回收率分
别为 98.3%、94.8%、96.5%;RSD分别为 1.9%、2.3%、1.6%(n=3)。结论:毛细管电泳法用于测定蒲公英中咖
啡酸的含量是可行的。
关键词　蒲公英　咖啡酸　高效毛细管电泳
　　蒲公英为常用清热解毒的中药 ,主治乳痈 、疔疮
肿毒 、瘰疬 、目赤 、咽痛 、湿热黄疸和热淋涩痛等。药
理实验表明蒲公英具抗菌消炎 、利胆保肝和免疫促
进作用 。笔者采用 HPCE 法测定蒲公英中咖啡酸
的含量 ,现报道如下 。
1 　仪器与试药
Waters高效毛细管电泳仪 , Millennium 32色谱
工作站 ,石英毛细管(75μm ×60 cm ,Waters公司),
超纯水器(Mill-Qplus USA), SK5200LH 型超声波
仪(上海科导超声仪器有限公司), TGL-16B 离心机
(上海安亭科学仪器厂)。咖啡酸对照品(供含量测
定用 ,批号:885-200001)由中国药品生物制品检定
所提供。蒲公英药材为市售品(产地甘肃),购自广
东省药材公司并经鉴定为菊科植物蒲公英 Tarax-
acum mongolicum Hand.-Mazz.的干燥全草 。硼
砂 、氢氧化钠 、甲醇 、乙酸乙酯 、甲酸 、乙酸等均为分
·100· 中药材第 27 卷第 2期 2004 年 2 月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2004.02.013
析纯 。
2 　方法与结果
2.1 　分离条件　分离电压为 12 kV ,极性为正极到
负极;进样:5.066 kPa×5 s;检测波长 313 nm ;运行
缓冲液为 20 mmol/L 硼砂溶液(四硼酸钠 1.907 g
于 25℃时溶于水并定容至 250 ml 即得), pH =
9.18 ,25℃时以 pH 计测定 。每次进样前 ,均用 0.1
mol/L 氢氧化钠溶液冲洗 1 min ,纯水冲洗 2 min ,最
后用运行缓冲液冲洗毛细管柱 3 min ,每次分析后
用 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液冲洗 10 min ,水冲洗 10
min。所用溶液均经 0.45 μm 纤维树脂膜过滤。在
上述分离条件下 ,蒲公英中咖啡酸的迁移时间约为
8 min ,与其它成分分离较好(见图)。
图　咖啡酸对照品(A)、蒲公英药材(B)色谱图
2.2 　溶液制备
2.2.1 　咖啡酸对照品溶液:精密称取咖啡酸对照
品 5 mg ,用甲醇溶解并定容至 25 ml ,然后精密量取
0.5 、1 、2 、3 、4 、5 m l分别置 10 ml容量瓶中 ,用甲醇
定容至刻度 ,即得。
2.2.2 　蒲公英样品溶液:蒲公英样品 60℃干燥后
粉碎成细粉 ,过 100目筛 。精密称取生药粉末 2 g ,
用 95%乙醇渗漉 ,收集渗漉液 100 ml ,回收乙醇 ,浓
缩物混悬于 10 ml水中 ,置分液漏斗中 ,用乙酸乙酯
萃取 3次 ,每次 15 ml ,合并乙酸乙酯液 。减压回收
乙酸乙酯至干 ,残渣用甲醇溶解并定容至 10 ml ,以
0.45μm滤膜过滤。
2.3 　精密度试验　取 40μg/ml的咖啡酸对照品溶
液按 2.1项下所述电泳条件连续进样 5次 ,分别计
算咖啡酸的峰面积 , RSD为 0.83%,表明仪器精密
度良好 。
2.4 　线性关系考察　分别取 10 、20 、40 、60 、80 、100
μg/ml的咖啡酸对照品溶液 ,按 2.1 项下所述电泳
条件分别进样 ,以咖啡酸浓度(μg/ml)为横坐标 ,咖
啡酸的峰面积为纵坐标 ,回归得方程:Y=1002.45
X-327.87 , r=0.9992。表明在 10 ～ 100 μg/ml范
围内线性关系良好 。
2.5 　重现性试验　精密称取同一批蒲公英样品粉
末 2 g 共 5份 ,照 2.2.2项下处理后分别按 2.1项
下所述电泳条件进样分析 ,计算峰面积 ,得咖啡酸的
平均含量为 0.34 mg/g , RSD为 1.8%,表明该法重
现性好 。
2.6 　稳定性实验　取蒲公英样品溶液 ,分别在 0 、
2 、4 、6 、8 、10 h 进样 ,测定咖啡酸峰面积 ,结果 RSD
=1.3%(n=6)。
2.7 　加样回收率试验　取已测咖啡酸含量的蒲公
英样品 9份 ,分别加入咖啡酸对照品 50 μg 、100 μg 、
200μg ,按 2.2.2项方法制成溶液 ,测定其回收率(n
=3), 结果平均回收率分别为 98.3%、94.8%、
96.5%;RSD分别为 1.9%、2.3%、1.6%。
2.8 　样品测定　将蒲公英药材按溶液制备项下处
理后 ,按 2.1项下所述电泳条件进样分析 ,3 批蒲公
英药材中咖啡酸含量分别为 0.34 mg/g 、0.31 mg/
g 、0.30 mg/g 。
(2003-08-26收稿)
书　　讯
《中国药材栽培与饲养》(第一册)定价 18 元(含邮资 ,下同);《实用中药炮制》 12 元;《中药房中药店工作手册》 15 元。《中
药材》杂志合订本　现有 1990 年(16 元), 1991 年(22 元), 1992 年(22 元), 1995 年(45 元), 1996 年(45 元), 1997 年(75 元),
1998 年(精装 90 元), 1999 年(精装 90 元), 2000 年(精装 135 元), 2001 年(精装上 、下册 180 元), 2002 年(精装上 、下册 180
元), 2003 年(精装上 、下册 180元)《中药材》杂志合订本。以上各书可汇款至广州市中山二路 24 号中粤大厦十楼《中药材》编
辑部购买。
·101·中药材第 27 卷第 2 期 2004 年 2 月