全 文 ：书云南大学学报(自然科学版)，2013，35(5):673 ～ 677 DOI:10． 7540 / j． ynu． 20120540
Journal of Yunnan University
柄果海桐化学成分研究(Ⅱ)*
罗 蕾1，张吕丽1，李祖强2，王吉华1，吴云飞1，马国义3
(1．云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650092;
2．云南大学 化学科学与工程学院，云南 昆明 650091;3．密西西比大学 药学系，美国)
摘要:在细胞毒试验结果指导下，采用萃取、柱层析、重结晶等方法，对柄果海桐(Pittosporum podocarpum
Gagnep)枝叶粗提物的有效部位进行化学成分分离纯化，通过波谱数据分析鉴定出 7 个单体的结构，分别是咖
啡酸乙酯 (ethyl caffeate，1) ，东莨菪素(scopoletin，2) ，熊果醇(uvaol，3) ，3 4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O － β －
D － glucopyranoside(4) ，3 4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O － β － D － xylopyranosyl －(1→2)－ β － D － glucopyrano-
side(5) ，丁香脂素 － 4，4＇－双 － O － β － D －葡萄糖苷(syringaresinol － 4，4 － di － O － β － D － glucoside，6) ，蔗糖
(sucrose，7)．化合物 1 ～ 7 均为首次从该植物中分离得到．细胞毒试验表明化合物 1、2、3 具有细胞毒活性，对
K562 细胞的 IC50分别为 4． 0、12． 5、13． 5 μg /mL．
关键词:柄果海桐;细胞毒性;咖啡酸乙酯;东莨菪素;熊果醇
中图分类号:Q 949． 758． 5;Q 946 文献标志码:A 文章编号:0258 － 7971(2013)05 － 0673 － 05
柄果海桐(Pittosporum podocarpum Gagnep)为海桐花科(Pittosporaceae)海桐花属(Pittosporum Bank )
植物．柄果海桐枝叶可入药，民间用于治疗扁桃体炎、咽喉炎、止血等．前文通过 HL60 细胞系的细胞毒试
验，筛选出柄果海桐的活性部位，并对其中的化学成分进行分离提纯，鉴定出 9 个化合物［1］． 本文报道在
K562 细胞系的细胞毒试验结果指导下，从该植物中分离出的另外 7 个单体，通过理化数据测定及波谱
(1D、2D NMＲ与 MS)分析，分别鉴定为:咖啡酸乙酯 (ethyl caffeate，1) ，东莨菪素(scopoletin，2) ，熊果醇
(uvaol，3) ，3 4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O － β － D － glucopyranoside(4) ，3 4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O
－ β － D － xylopyranosyl －(1→2)－ β － D － glucopyranoside(5) ，丁香脂素 － 4，4 －双 － O － β － D －葡萄糖
苷(syringaresinol － 4，4 － di － O － β － D － glucoside，6) ，蔗糖(sucrose，7)．化合物 1 ～ 7 均为首次从该植物
中分离得到．细胞毒试验显示化合物 1、2、3 具有细胞毒活性．
1 实验部分
1． 1 仪器和材料 熔点用北京泰克仪器有限公司 XT － 4 型显微熔点测定仪测定，温度未校正． NMＲ 用
Bruker公司 Avance 500 型核磁共振仪测定，TMS为内标． MS用Waters公司 Xevo TQ － S质谱仪测定．柱层
析用粗硅胶(37 ～ 75μm)为青岛海洋化工厂产品，细硅胶(40 ～ 60μm)及 TLC硅胶片(F254)为 Merck 公司
产品．柄果海桐枝叶采自云南省石屏县，由云南大学胡志浩教授鉴定，拉丁学名为 Pittosporum podocarpum
Gagnep．
1． 2 分离提取 采集柄果海桐(PP)枝叶，清洗、晾干、粉碎，得粗粉 35 ㎏，用 95%乙醇浸泡 30 d，过滤，减
压浓缩提取液，得粗提物浸膏 PP － 0(2． 1 ㎏) ，此浸膏与等重的硅藻土加 95%乙醇混合均匀，于水浴上炒
干，装入索氏提取器中，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮和甲醇等 5 种有机溶剂分步萃取，浓缩，得组
* 收稿日期:2012 － 09 － 29
基金项目:国家自然科学基金(20962024)．
作者简介:罗 蕾(1961 －) ，女，广东人，硕士，副教授，主要从事天然药物化学研究． E － mail:lluo12@ yahoo． com．
通信作者:李祖强(1943 －) ，男，云南人，教授，主要从事天然药物化学研究． E － mail:Zuqiang Li@ ynu． edu． cn．
分 PP － 1(100 g)、PP － 2(80 g)、PP － 3(80 g)、PP － 4(100 g)、PP － 5(800 g)．对组分 PP － 2、PP － 3、PP － 4，
经过硅胶柱层析得细组分，再经过多次硅胶柱层析及重结晶的方法，纯化得 7 个单体．
1． 3 细胞毒性试验 分别称取分步提取组分(PP － 1、PP － 2、PP － 3、PP － 4、PP － 5)及分离中的细组分各
10 mg，及单体化合物各 5 mg等样品，用二甲亚砜溶解配成 0，1，10，100 μg /mL等 4 种质量浓度溶液，置于
培养瓶中，分别加入含有等同数目的 K562(人白血病)细胞的 10%小牛血清的 ＲPMI1640 培养基，保存在
5% CO2 的 37 ℃恒温箱内．分别在 12，24，48，72 h的时间段，观察细胞生长情况，用台盼蓝染料排斥试验
法［2］计数活细胞及死亡细胞数，计算对 K562 细胞生长抑制率，推算出 IC50 ．体外试验由美国密西西比大学
药学系药理实验室合作完成．
2 结果与讨论
2． 1 细胞毒活性 细胞毒试验结果显示，柄果海桐的石油醚、氯仿、乙酸乙酯提取组分及化合物 1、2、3 有
一定的细胞毒活性．组分 PP － 1、PP － 2、PP － 3 对 K562 细胞的 IC50分别为 3． 3，4． 5，5． 2 μg /mL，化合物 1、
2、3 对 K562 细胞的 IC50分别为 4． 0，12． 5，13． 5 μg /mL．
2． 2 结构鉴定 对 7 个单体分别进行理化数据(熔点)和波谱(MS、1D NMＲ、2D NMＲ)测定，鉴定了结
构，分别是:咖啡酸乙酯 (ethyl caffeate，1) ，东莨菪素(scopoletin，2) ，熊果醇(uvaol，3) ，3 4，5 － trimethoxy-
phenol － 1 － O － β － D － glucopyranoside(4) ，3 4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O － β － D － xylopyranosyl －(1→
2)－ β － D － glucopyranoside(5) ，丁香脂素 － 4，4 －双 － O － β － D －葡萄糖苷(syringaresinol － 4，4 － di －
O － β － D － glucoside，6) ，蔗糖(sucrose，7)．化合物 1 ～ 6 的结构见图 1．
图 1 化合物 1 ～ 6 的结构
Fig． 1 Structures of compounds 1—6
化合物 1 白色针晶(石油醚 －乙酸乙酯) ，m． p． 145 ～ 147 ℃ ．分子式:C11H12O4 ． ESI － MS(m/z) :209
［M + H］+，231［M + Na］+，439［2M + Na］+ ． 1H NMＲ (500 MHz，Me2CO － d2)δ:7． 53(1H，d，J = 16． 0
Hz，H －3) ，7． 16 (1H，d，J = 2． 0 Hz，H － 5) ，7． 04 (1H，dd，J = 8． 5，2． 0 Hz，H － 9) ，6． 86 (1H，d，J = 8． 5
Hz，H －8) ，6． 27(1H，d，J = 16． 0 Hz，H －2) ，4． 18(2H，q，J = 7． 2 Hz，－ OCH2 －) ，1． 26(3H，t，J = 7． 2 Hz，
－ CH3) ;
13C NMＲ(125 MHz，Me2CO － d2)δ:167． 5(C － 1) ，115． 3(C － 2) ，145． 6(C － 3) ，127． 8(C － 4) ，
476 云南大学学报(自然科学版) http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn 第 35 卷
115． 9(C －5) ，146． 4(C － 6) ，148． 8(C － 7) ，116． 5(C － 8) ，122． 6(C － 9) ，60． 6(－ OCH2 －) ，14． 8(－
CH3)．上述数据与文献［3］报道的咖啡酸乙酯的数据一致，故鉴定该化合物为咖啡酸乙酯(ethyl caf-
feate)．
化合物 2 淡黄色针晶(丙酮) ，m． p． 201 ～ 203 ℃ ． 分子式:C10 H8O4 ． ESI － MS(m/z) :193［M + H
］+，215［M + Na］+ ． 1H NMＲ(500 MHz，Me2CO － d2)δ:7． 86(1H，d，J = 9． 5 Hz，H － 4) ，7． 22(1H，s，H －
5) ，6． 81(1H，s，H － 8) ，6． 19(1H，d，J = 9． 5 Hz，H － 3) ，3． 92(3H，s，6 － OCH3) ;
13 C NMＲ(125 MHz，Me2
CO － d2)δ:161． 4(2 － C) ，113． 4(C －3) ，144． 8(C －4) ，110． 1(C －5) ，146． 1(C － 6) ，152． 0(C － 7) ，103． 8
(C －8) ，112． 2(C －9) ，151． 2(C －10) ，56． 8(6 － OCH3)．以上数据与文献［4］报道的东茛菪素一致，故鉴
定该化合物为东茛菪素(scopoletin)．
化合物 3 白色粒晶(丙酮) ，m． p． 229 ～ 231 ℃．分子式:C30H50O2 ． ESI － MS(m/z) :465［M + Na］
+ ． 1H
NMＲ(500 MHz，CDCl3)δ:5． 16(1H，t，J = 3． 5 Hz，H － 12) ，3． 56(1H，d，J = 10． 5 Hz，H － 28) ，3． 25(1H，
dd，J = 11． 0，3． 5 Hz，H －3 ) ，3． 20(1H，d，J = 10． 5 Hz，H － 28) ，1． 13，1． 02，1． 01，0． 96，0． 82(each 3H，s，
－ CH3 × 5 ) ，0． 97(3H，d，J = 6． 0 Hz，－ CH3) ，0． 84(3H，d，J = 6． 0 Hz，－ CH3) ;
13 C NMＲ(125 M Hz，
CDCl3)δ:38． 8(C －1) ，27． 3(C －2) ，79． 0(C － 3) ，38． 8(C － 4) ，55． 2(C － 5) ，18． 3(C － 6) ，32． 8(C － 7) ，
40． 0(C －8) ，47． 7(C －9) ，36． 9(C － 10) ，23． 4(C － 11) ，125． 1(C － 12) ，138． 7(C － 13) ，42． 1(C － 14) ，
26． 0(C －15) ，23． 3(C －16) ，38． 0(C － 17) ，54． 0(C － 18) ，39． 4(C － 19) ，39． 3(C － 20) ，30． 6(C － 21) ，
35． 2(C －22) ，28． 1(C －23) ，15． 6(C －24) ，15． 7(C － 25 ) ，17． 4(C － 26 ) ，23． 3(C － 27) ，70． 0(C － 28) ，
16． 8(C －29) ，21． 3(C －30)．以上数据与文献［5］报道的熊果醇一致，故鉴定该化合物为熊果醇(uvaol)．
化合物 4 白色粒晶，m． p． 201 ～ 203 ℃ ．分子式:C15H22O9 ． ESI － MS(m/z) :369［M + Na］
+，385［M +
K］+，715［2M + Na］+ ． 1H NMＲ(500 MHz，C5D5N)δ:6． 77(2H，s，H － 2，6) ，4． 62(1H，d，J = 7． 0 Hz，H －
1) ，3． 82(3H，s，4 － OCH3) ，3． 70(6H，s，3，5 － OCH3) ;
13 C NMＲ(125 MHz，C5D5N )δ:156． 1(s，C － 1) ，
96． 3(d，C －2，6) ，155． 0(s，C －3，5) ，134． 8(s，C －4) ，103． 8(d，C －1) ，75． 5(d，C －2) ，79． 5(d，C － 3) ，
72． 5(d，C －4) ，79． 9(d，C － 5) ，63． 4(t，C － 6) ，56． 8(q，3，5 － OCH3) ，61． 5(q，4 － OCH3)．以上数据与
文献［6］报道基本一致，故鉴定为 3，4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O － β － D － glucopyranoside．
化合物 5 白色粉末． 分子式:C20H30 O13 ． ESI － MS(m/z) :501［M + Na］
+，517［M + K］+，979［2M +
Na］+ ． 1H NMＲ(500 MHz，C5D5N)δ:6． 89(2H，s，H － 2，6) ，5． 53(1H，d，J = 7． 0 Hz，H － 1) ，5． 47(1H，d，
J = 7． 2 Hz，H －1″) ，4． 58(1H，d，J = 11． 9 Hz，H － 6a) ，4． 47(1H，dd，J = 11． 2，4． 5 Hz，H － 5″a) ，4． 44(1H，
m，H －2) ，4． 43(1H，m，H －3) ，4． 30(1H，dd，J = 11． 8，6． 3 Hz，H － 6b) ，4． 26(1H，m，H － 4″) ，4． 24(1H，
m，H －4) ，4． 21(1H，m，H －3″) ，4． 16(1H，t，J = 7． 4 Hz，H － 2″) ，4． 08(1H，m，H － 5) ，3． 85(1H，m，H －
5″b) ，3． 83(3H，s，4 － OCH3) ，3． 71(6H，s，3，5 － OCH3) ;
13 C NMＲ(125 MHz，C5D5N )δ:155． 1(s，C － 1) ，
95． 9(d，C －2，6) ，154． 0(s，C －3，5) ，134． 1(s，C －4) ，101． 6(d，C －1) ，83． 3(d，C －2) ，78． 1(d，C － 3) ，
71． 0(d，C －4) ，78． 7(d，C －5) ，62． 1(t，C －6) ，106． 6(d，C －1″) ，75． 9(d，C －2″) ，77． 7(d，C －3″) ，70． 8
(d，C －4″) ，67． 2(t，C － 5″) ，55． 7(q，3，5 － OCH3) ，60． 5(q，4 － OCH3)．以上数据与文献［7］报道基本一
致，故鉴定为 3，4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O － β － D － xylopyranosyl －(1→2)－ β － D － glucopyranoside．
化合物 6 白色粉末．分子式:C34H46O18 ． ESI － MS(m/z) :765［M + Na］
+ ． 1H NMＲ(500 MHz，C5D5N)
δ:6． 93(4H，s，H －2，6，2，6 ) ，4． 95(2H，s，H － 1″) ，4． 33(2H，s，H － 7，7) ，4． 04(2H，d，J = 8． 8 Hz，Hb －
9，9) ，3． 94(2H，brs，Ha －9，9) ，3． 15(2H，m，H － 8，8) ，3． 79(12H，s，3，5，3，5 － OCH3) ，5． 82(2H，d，
J = 6． 8 Hz，H －1″) ;13 C NMＲ(125 MHz，C5D5N)δ:153． 8(s，C －3，5，3，5) ，138． 1(s，C －4，4) ，135． 1(s，
C －1，1) ，104． 7(d，C －2，6，2，6) ，86． 0(d，C － 7，7) ，72． 1(t，C － 9，9) ，54． 6(d，C － 8，8) ，56． 6(q，3，
5，3，5 － OCH3) ;104． 9(d，C － 1″) ，78． 5(d，C － 5″) ，78． 2(d，C － 3″) ，75． 9(d，C － 2″) ，71． 4(d，C － 4″) ，
62． 4(t，C －6″)．以上数据与文献［8］报道一致，故鉴定为丁香脂素 － 4，4 －双 － O － β － D －葡萄糖苷(sy-
ringaresinol － 4，4 － di － O － β － D － glucoside)．
576第 5 期 罗 蕾等:柄果海桐化学成分研究(Ⅱ)
化合物 7，白色结晶，m． p． 187 ～ 189 ℃ ．分子式:C12H22O11 ． ESI － MS(m/z) :365［M + Na］
+ ． 13C NMＲ
(125 MHz，C5D5N)δ:94． 8(C －1) ，74． 7(C － 2) ，76． 3(C － 3) ，73． 1(C － 4) ，76． 4(C － 5) ，63． 7(C － 6) ，
66． 1(C －1) ，107． 2(C －2) ，85． 7(C －3) ，81． 2(C － 4) ，76． 8(C －5) ，64． 2(C － 6)．以上数据与文献
［9］报道蔗糖一致，故鉴定该化合物为蔗糖(sucrose)．
2． 3 结果与讨论 本文在抗癌活性药理筛选结果指导下，对柄果海桐的氯仿、乙酸乙酯及丙酮萃取组分
进行分离纯化，鉴定出 7 个成分．这些化合物均为首次从该植物中分离得到．通过细胞毒试验，发现 3 个化
合物，咖啡酸乙酯(ethyl caffeate，1) ，东莨菪素(scopoletin，2) ，熊果醇(uvaol，3) ，具有细胞毒活性．
本课题采用 HL60、K562 等细胞系对柄果海桐粗提物、组分、化合物进行细胞毒筛选研究．前文［1］报
道的是以 HL60 细胞系进行细胞毒研究的结果，本文报道的是用 K652 细胞系进行细胞毒研究的结果．由
于不同细胞系对样品的敏感度不同，所以细胞毒活性有差异．
化学成分研究是在细胞毒试验结果指导下进行的，对有活性及有一定活性的组分进行化学成分提取
分离、结构鉴定．前文报道的是在 HL60 细胞系的细胞毒试验结果指导下进行化学成分研究结果，本文报
道的是在 K652 细胞系的细胞毒试验结果指导下进行化学成分研究结果．从 K562 和 HL60 细胞系活性的
细组分中分离出来的化合物，既有相同的也有不同的，与前文相比，共已鉴定出 15 个成分，化合物的结构
类型丰富多样，有甾醇、三萜、黄酮、有机酸、香豆素、苯丙素、木脂素甙、苯酚甙等类，本文报道了与前文不
同的 7 个成分．
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676 云南大学学报(自然科学版) http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn 第 35 卷
The chemical constituents from Pittosporum podocarpum Gagnep(Ⅱ)
LUO Lei1，ZHANG Lv-li1，LI Zu-qiang2，WANG Ji-hua1，WU Yun-fei1，MA Guo-yi3
(1． College of Chemical ＆ Engineering，Yunnan Normal University，Kunming 650092，China;
2． School of Chemical Science and Technology，Yunnan University，Kunming 650091，China;
3． Faculty of Pharmacy，University of Mississibi，USA)
Abstract:The chemical constituents of Pittosporum podocarpum Gagnep were studied． Seven of compounds
were isolated from this plant by column chromatogramphies of silica gel． Their structures were identified by spec-
tral data analysis． All these compounds were isolated for the first time from this plant． These are:ethyl caffeate
(1) ;scopoletin(2) ;uvaol(3) ;3，4，5 － trimethoxyphenol － 1 － O － β － D － glucopyranoside(4) ;3，4，5 － trime-
thoxyphenol － 1 － O － β － D － xylopyranosyl －(1→2)－ β － D － glucopyranoside(5) ;syringaresinol － 4，4 － di
－ O － β － D － glucoside(6) ;sucrose(7)． Cytotoxicity screening of extracts and the compounds from Pittosporum
podocarpum Gagnep was carried out by K562 cell． Three compounds(1，2，3 )possess cytotoxic activities and the
IC50 are 4． 0，12． 5，13． 5 μg /mL for K562，respectively．
Key words:Pittosporum podocarpum Gagnep;cytotoxicity;ethyl caffeate;scopoletin;uvaol
776第 5 期 罗 蕾等:柄果海桐化学成分研究(Ⅱ)