全 文 ：中国药师 一年第一卷第 期 。 , 一
·研 究 论 文 ·
抱 茎 苦 卖 菜 指 纹 图 谱 研 究
陈英红 姜翔之 , 罗浩铭 王颖 姜瑞芝 , 吉林省中医药科学院 长春 吉林大学中日联谊医院
摘 要 目的 采用高效液相色语法建立抱茎苦英莱药材的指纹图谱。方法 色谱柱 ,
卜 ,流动相 乙猜一 磷酸 梯度洗脱 一碎 , 弓 , 一币 ,柱温 ℃ ,检测波长 ,分
析时间 ,流速 卜 一 。结果 抱茎苦卖菜药材指纹图谱共检出 个峰 ,其中已通过对照品确定 个色语峰的归
属 ,尚有 个未知峰 。结论 本方法可作为控制抱茎苦英莱药材内在质量的标准 ,
关键词 抱茎苦英莱 指纹图谱 高效液相色谱法
中图分类号 文献标识码 文章编号 拱 一 一
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抱茎苦英菜 〔, 瓜 如 」
为菊科苦英菜属植物的当年生干燥全草 ,具有清
热解毒 、消肿止痛之功效 。其化学成分已有报道 ,
主要为黄酮类 、有机酸类 、内醋类 、腺昔类等化合
物 一 目前市场 广泛使用的苦碟子注射液即
以该药材为原料 ,经提取精制而成 本试验室对
抱茎苦英菜做了更深人研究 ,发现其含有的有机
酸和黄酮类成分治疗血管性老年痴呆疗效显著 ,
因此申请国家重大专项对该药材做进一步的候选
药物研究 。本文根据指纹图谱的技术要求 ,采用
法建立药材的指纹图谱 ,可作为其内在质量
控制标准 。
, 仪器与试药
仪 器
一 一高效液相色谱仪 , 一 二
极管阵列检测器 , 一 色谱工作站 相似度
计算软件 一 由湖南中南大学梁逸曾教授领
衔开发 ,为药典会认可试用的两个软件之一 。
试药
抱茎苦英菜药材由通化华夏药业有限公司提供
产地海城岔沟 、河北玉田 、天津蓟县 ,对照品
二经基咖啡酞基酒石酸 ,木犀草素一 一一一毗喃葡
萄糖 一 一一一毗喃葡萄糖昔 ,木犀草素一 一
一毗喃葡萄糖昔 ,木犀草素一一一一一毗喃葡萄糖醛
酸昔 ,菊芭酸 ,芹菜素一 一一一毗喃葡萄糖醛酸昔
由吉林省中医药科学院提供 经 , ” , 等检
测纯度在 以上 。乙睛 、甲醇为色谱纯 ,其余试
剂为分析纯 。
方法与结果
色谱条件
色谱 柱 ,
林 梯度洗脱 弓 ,流动相 。 ,
流动相 流速 · 一 柱温
℃ 检测波长为 分析时间 进样
量 供试品溶液与参照物溶液各 闪 。理论塔板
数按木犀草素一一一日一一葡萄糖醛酸昔计算应不低
基金项目 国家十一五科技重大专项 编号 《刃 、吉林省科技发展计划青年基金项 目 编号 ,吉林省中医局项目 编
号 一
通讯作者 姜瑞芝 一 ,` 爵 。 曲
,尸四 · 研究伦文
草素一 一一一毗喃葡萄糖醛酸昔占 以上 ,因此
以其为参照峰 。相对保留时间为 ,各共有峰相对
保留时间依次为 ① , ② , ③ , ④
,穷 〕 ,⑦ , ⑧ 。 批样品相对
保留时间和共有峰面积百分比见表 、表 。
一
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图 抱茎苦卖菜药材标准指纹图谱
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于 。
供试品溶液的制备
取抱茎苦英菜 ,加 乙醇回流提取两次 ,每
次 ,提取液合并回收至无醇 ,浓缩至适量 。将浓
缩液加浓盐酸调 至 一 ,过 石 树脂柱 ,
先以水洗脱 ,继以 乙醇洗脱 。收集 乙醇洗
脱液 ,回收至无醇 ,浓缩 ,冻干即得 。取供试品适量
用 乙醇溶解并稀释至刻度 ,使浓度为
一 。作为供试品溶液 。
参照物 、对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的 种对照品适量 ,置
量瓶中 ,用 乙醇溶解并稀释至刻度 ,使浓度
为 · 一 。作为对照品溶液和参照物溶液 。
方法学考察
稳定性试验 取同一批号供试品溶液 编
号 ,分别于 。, , , , , 进样 ,测得各共有
峰相对峰面积 小于 ,表明供试品溶液在
内稳定 。
精密度试验 取同一批号供试品溶液 编
号 ,连续进样 次 ,测得各共有峰相对峰面积
小于 ,表明进样的精密度良好 。
重复性试验 取抱茎苦英菜药材 编号
,按供试品溶液制备方法 ,分别制备 份供试品 ,
分别进样 ,测得各共有峰相对峰面积 小于 ,
表明方法重复性较好 。
指纹图谱分析 、数据处理和相似度评价
指纹图谱分析 、数据处理 试验中将现有
已经分离鉴定的对照品 一二经基咖啡酞基酒石
酸 、木犀草素一一一一一毗喃葡萄糖 、 一一一毗
喃葡萄糖昔 、木犀草素一 一一一毗喃葡萄糖昔 、木
犀草素一一一一一毗喃葡萄糖醛酸昔 、菊首酸 、芹菜
素一 一日一一毗喃葡萄糖醛酸昔 。按照 “ ”方法制
图 批抱茎苦卖菜药材指纹图谱
表 指纹图谱共有峰相对保留时间
编号
平均
,
碎
,
】 】
,
】
】
、︸亡勺勺们乙洲
备对照品溶液 ,分别进样 ,通过保留时间确定供试品 表 指纹图谱共有峰面积百分比
溶液中 号峰为 一二轻基咖啡酞基酒石酸 , 号
峰为木犀草素一 一一一毗喃葡萄糖 、 一日一一毗
喃葡萄糖昔 , 号峰为木犀草素一 一一一毗喃葡萄
糖昔 , 号峰为木犀草素一一一一一毗喃葡萄糖醛酸
昔 , 号峰为菊首酸 , 号峰为芹菜素一 一一一毗喃
葡萄糖醛酸昔 。其中 号峰未知 。
按上述方法检测 批抱茎苦荚菜药材的指纹
图谱 ,见图 、图 。通过 批供试品指纹图谱分
析 ,上述 个色谱峰为各批供试品所共有 ,因此确定
这 个峰为共有指纹峰 。在共有峰中 , 号峰 、木犀
编号
】
, ,
平均
】
】
,
,
】
夕
中国药师 年第 卷第 期
相似度评价 采用计算机辅助相似度评价
系统比较 批供试品 指纹图谱全谱相似度 ,
通过中位数和均值评价 , 批供试品相似度达到
表明 批供试品具有较好的相似度 。结果见
表
表 , 批抱茎苦卖菜药材指纹图谱相似度评价结果
钾州练目弓 相关系数中位数 相关系数均值 相合系数中位数 相合系数均值
,
饭科
】
,
,
供试品溶液的制备
提取时考察了提取溶剂 ,提取方法 ,提取 时间
及次数 ,结果表明 乙醇回流提取两次 ,每次
,提取率较高 。为有效富集两类成分 ,除去其他
杂质 ,选用大孔树脂进一步分离纯化 ,得到供试品
中有效成分总黄酮和总有机酸含量之和达到
以上 。
检测波长的选择
抱茎苦英菜药材中含有有机酸和黄酮两类成
分 ,通过 检测器进行全波长扫描 ,有机酸类成
分最大吸收波长为 ,黄酮类成分最大吸收波
长为 ,考虑黄酮含量 占 以上且在
,基线平 稳 ,分离度较好 ,故确定检 测波长为
“
参 考 文 献
讨论
色谱峰的确定
前期研究已从抱茎苦英菜药材中提取分离鉴定
上述 种成分并对 种黄酮进行了含量测定 , , 〕,
根据 种对照品的保 留时间确定了指纹图谱中 、
、 、 、 、 号色谱峰 , 、 号峰尚未确定 ,通过紫外
光谱可确认为有机酸类成分 ,将在以后的工作中进
行分离纯化及结构鉴定 。
南京中暖药大学 中药大词典 上海 上海人民出版社 ,
】一
戴锦娜 ,尹然 ,陈晓辉 ,等 苦碟子化学成分和药理作用研究进展
〔 〕西北药学杂志 , 《 〕 , 一
封锡志 徐绥绪 ,姚金鹏 ,等 抱茎苦英菜化学成分研究【 中草
药 , , 一
姜瑞芝 陈英红 ,罗浩铭 ,等 抱茎苦荚菜水溶性成分的分离与结
构鉴定 天然产物研究与开发 ,
陈英红 姜翔之 ,罗浩铭 ,等 高效液相色谱法同时测定苦碟子中
四种黄酮的含址〔 中国药师 , , 一
一一 一 收稿 一伪 一 修巨
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