全 文 ：中国当代医药 2014 年 6 月第 21 卷第 18 期
CHINA MODERN MEDICINE Vol. 21 No. 18 June 2014
·论 著·
[基金项目] 广西自然科学基金项目（2010GXNSFA013224）；
广西科学研究与技术开发计划项目（桂科攻 0815005-2-6）
[作者简介] 罗宇东（1974-），男，汉族，主管中药师，硕士，主
要研究方向为保健食品及新产品的研究与开发
▲通讯作者：张强，男，主治医师，从事中医临床应用及药理
药效学研究
常春卫矛为卫矛科植物常春卫矛（Euonymus hed- eraceus Champ.Ex Benth）的根、树皮或叶，具有补肝
肾、强筋骨、活血止血的功效，临床用于治疗肾虚腰
痛、慢性腹泻、跌打损伤、月经不调。 国内已开展了常
春卫矛抗凝血、活血化瘀、抗炎、镇痛、抗疲劳、免疫增
强等作用的药理研究，但有关其抑菌作用的研究尚未
见报道[1-3]。本研究观察常春卫矛提取物的抑菌活性，为
进一步拓宽常春卫矛的应用范围提供实验依据。
常春卫矛提取物体外及体内抑菌作用的试验研究
罗宇东 张 强▲ 蒋 林 李 娜
广西中医药大学制药厂，南宁 530023
[摘要] 目的 研究常春卫矛水提物、醇提物及 5 种不同溶剂提取物的抑菌活性。 方法 体外抑菌试验采用试管二
倍稀释法联合琼脂平板法，考察常春卫矛水提物、醇提物及 5 种不同溶剂（石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲
醇）提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单胞菌的体外抑菌活性；体内抑菌试验以金黄色葡萄
球菌为指示菌种，小鼠灌胃分别给予常春卫矛水提物、醇提物 14 d，腹腔注射金黄色葡萄球菌，通过观察小鼠死
亡率衡量常春卫矛提取物的体内抑菌活性。 结果 体外抑菌试验显示，常春卫矛水提物及醇提物均对金黄色葡
萄球菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单胞菌有一定程度的抑制作用，5 种不同溶剂提取物中，甲醇、正丁醇、乙醇
乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单胞菌有一定程度的抑制作用，石油醚、氯仿提取物
无明显抑制作用。 体内抑菌试验显示，常春卫矛水提物低（16.0 g/kg）、高（32.0 g/kg）剂量组、醇提物高剂量组
（32.0 g/kg）有明显降低金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡率的作用（P＜0.05）。 结论 常春卫矛提取物具有一定程度
的抑菌作用。
[关键词] 常春卫矛；提取物；体内；体外；抑菌作用
[中图分类号] R282 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）06（c）-0009-04
Experimental study in vitro and in vivo antibacterial effect of the extract
of Euonymus hederaceus
LUO Yu-dong ZHANG Qiang▲ JIANG Lin LI Na
Pharmaceutical Factory of Guangxi University of Chinese Medicine,Nanning 530023,China
[Abstract] Objective To investigate antibacterial activity of Euonymus hederaceus water extract,alcohol extract and 5
different solvent extracts. Methods In vitro inhibitory effect of Euonymus hederaceus water extract,alcohol extract and
different solvent extracts (petroleum ether,chloroform,ethyl acetate,n -butanol,methanol)on Staphylococcus aureus,Es-
cherichia coli,Salmonella and Pseudomonas aeruginosa were assayed by the method of tube double dilution method
combined with agar plate method.In vivo inhibitory effect of the Euonymus hederaceus water and alcohol extraction
with Staphylococcus aureus as index,the mice were given Euonymus hederaceus water and alcohol extraction by gavages
for 14 days,then the mice were intraperitoneally injected with Staphylococcus aureus suspension.In vivo antibacterial
activity of Euenymus hederaceus watder and alcohol extraction was detected respectively by observing the mortality rate
in mice. Results Bacteriostatic test in vitro showed that Euonymus hederaceus water extract and alcohol extract on
Staphylococcus aureus,Escherichia coli,Salmonella,Pseudomonas aeruginosa had certain degree of restrained.Different
solvent extracts of methanol,ethanol,n -butanol,ethyl acetate extract against Staphylococcus aureus,Escherichia coli,
Salmonella,Pseudomonas aeruginosa had certain degree of restrained,no obvious inhibition effect of petroleum
ether,chloroform extract.Bacteriostatic test in vivo showed that the water extract of Euonymus hederaceus low dose
group(16.0 g/kg),high dose group(32.0 g/kg),high dose group of alcohol extract(32.0 g/kg)of the death rate of mice in-
fected with Staphylococcus aureus was markedly decreased. Conclusion Euonymus hederaceus extract has a certain
degree of bacteriostatic action.
[Key words] Euonymus hederaceus;Extraction;In vitro;In vivo;Bacteriostatic action
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1 材料与方法
1.1 药物与试剂
常春卫矛采自广西壮族自治区资源县，经广西中
医药大学药用植物教研室韦松基教授鉴定为卫矛科
植物常春卫矛的地上部分。 阳性药：阿莫西林胶囊[中
诺药业（石家庄）有限公司，国药准字 H13021770，批
号：257130477，规格：0.5 g]。 营养琼脂培养基（北京三
药科技开发公司，批号：111205）。营养肉汤培养基（北
京三药科技开发公司，批号：121227）。 培养基使用时
按说明书配制。
1.2 仪器
HV-50 自动高压灭菌器（日本 Hirayama Manu-
facturing Corporation）、SW-CJ型超净工作台 （苏净集
团安泰公司）、SPX-150B-Z 生化培养箱（上海博迅实
业有限公司医疗设备厂）、AM100 电子天平（梅特勒-
托利多仪器有限公司）、101-2 电热恒温鼓风干燥箱
（上海跃进医疗器械厂）、RE-52A 旋转蒸发器 （上海
亚荣生化仪器厂）、恒温水浴锅（上海精密试验设备有
限公司）。
1.3 菌株与动物
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠埃
希菌 （Escherichia coli）、铜绿假单胞菌 （Pseudomonas
aeruginosa）、沙门菌（Salmonella）由广西中医药大学第
一附属医院微生物实验室提供。 昆明种小鼠，体质量
（20±2） g，雌雄各半，清洁级，由广西医科大学试验动
物中心提供，合格证号：SCXK桂 2009-0002。
1.4 方法
1.4.1 常春卫矛提取物的制备 ①常春卫矛水提物
（A）：药材粉碎，用水煎煮 2 次，1 h/次，煎液过滤，滤
液浓缩至浸膏（A），每克浸膏相当于 2.0 g 药材量，备
用。 ②常春卫矛醇提物（B）：药材粉碎，75%回流提取
2次，1 h/次，提取液过滤，回收乙醇，浓缩至浸膏（B），每
克浸膏相当于 2.0 g药材量，备用。③常春卫矛五倍位
提取物（C～G）：药材打成细粉，用 60%乙醇浸泡 3 次，
浸泡 7 h/次，浸泡液过滤，滤液用旋转蒸发仪减压浓
缩至无醇味，浓缩液再依次用石油醚、氯仿、乙酸乙
酯、正丁醇进行萃取，每种溶剂萃取 3 次，合并萃取
液，抽滤，滤液回收溶剂后减压干燥，分别得到常春卫
矛石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物；萃取后的
剩余稠膏用甲醇溶解，蒸干，为甲醇提取物；每克甲醇
（C）、正丁醇（D）、乙酸乙酯（E）、氯仿（F）、石油醚（G）
提取物分别相当于 14、50、300、200、700 g药材量。 以
上提取物均由广西中医药大学制药厂提供，临用时配
制成试验所需浓度。
1.4.2 常春卫矛提取物体外抑菌试验［4-11］ ①菌液的制
备：挑取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌
及沙门菌 4 个试验菌株的普通琼脂斜面培养基上的
单个菌落数个，分别接种于 2 ml 肉汤管中，37℃培养
18～24 h，用无菌生理盐水稀释到菌液浓度为 1×106
CFU/ml，备用。②抑菌试验：试管二倍稀释法联合琼脂
平板法测定常春卫矛系列提取物的最小抑菌浓度；取
装有 1 ml 营养肉汤培养基试管若干支， 按二倍稀释
法，将常春卫矛提取物 A、B、C、D、E、F、G 从第 1 管进
行稀释至第 7 管，稀释倍数分别为 1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、
1∶32、1∶64、1∶128，药物浓度分别为 80、40、20、10、5、
2.5、1.25 mg 提取物/ml，每管加相应受试标准菌液各
50 μl，充分混均，置 37℃培养箱培养 18～24 h，考虑到
提取物颜色较深，细菌生长后肉眼难以观察或观察的
结果易出现偏差，因此再从每一管中取培养物 10 μl
转种营养琼脂平板培养基上，用 L 棒涂布，置 37℃培
养箱培养 18～24 h，以不生长菌落的最高药物稀释度
为该药物对该种细菌的最小抑菌浓度；平行做 3 次，
以 2次或 3次相同结果为准。
1.4.3 常春卫矛提取物体内抑菌试验[12-13] ①体内抑菌
的预试验：取金黄色葡萄球菌备用菌液置无菌瓶中，
用无菌生理盐水稀释成不同浓度（1×103～1×108 CFU/ml）
的细菌悬液，将上述细菌悬液分别注射于小鼠腹腔，
每浓度组 6只，注射量 0.5 ml，观察小鼠 4 d内的死亡
情况，选定使小鼠死亡率达 80％的菌液浓度为试验注
射浓度。②常春卫矛提取物体内抑制金黄色葡萄球菌
的试验：取体质量 18～22 g 的小鼠 70 只，雌雄各半，
按体质量随机分为 7 组，分别为模型对照组，常春卫
矛水提物低（16.0 g/kg）、高（32.0 g/kg）剂量组，常春卫
矛醇提物低（16.0 g/kg）、高（32.0 g/kg）剂量组，阿莫西
林胶囊组（0.260 g/kg），每组 16 只。 模型对照组灌胃
等体积的蒸馏水，其余各组则灌胃相应的药物剂量。各
组小鼠连续灌胃给药 14 d 后，腹腔注射预试验所确
定的金黄色葡萄球菌接种浓度，观察并统计 4 d 内各
组小鼠的死亡率，各组小鼠死亡率与模型对照组比较。
1.5 统计学处理
采用 Excel 2003软件进行数据的分析和处理，计
数资料采用 χ2检验，以 P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 体外抑菌试验结果
常春卫矛水、醇提取物对金黄色葡萄球菌、铜绿
假单胞菌、大肠埃希菌、沙门菌有抑制作用，水提物的
最小抑菌浓度分别为 2.5 mg提取物/ml、5 mg提取物/ml、
40 mg提取物/ml、40 mg提取物/ml；醇提物的最小抑菌
浓度分别为 5 mg 提取物/ml、2.5 mg 提取物/ml、40 mg
提取物/ml、40 mg 提取物/ml（表 1）。 常春卫矛 5 种溶
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表 2 常春卫矛 5 种溶剂提取物对各菌株最小抑菌浓度测定的结果
（mg 提取物/ml）
2.2 体内抑菌试验结果
体内抑菌的预试验确定腹腔注射金黄色葡萄球
菌接种浓度为 1×107 CFU/ml（表 3）。 常春卫矛水提
物低 （16.0 g/kg）、高 （32.0 g/kg）剂量组及醇提物高
（32.0 g/kg） 剂量组有明显降低金黄色葡萄球菌感染
小鼠死亡率的作用（P＜0.05）（表 4）。
表 3 小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌预试验的结果
表 4 常春卫矛提取物对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用
与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
3 讨论
卫矛属植物是一类重要的天然药用资源，在世界
各地均有分布，在我国民间作为药物使用有悠久的历
史，主要用于抗肿瘤、抗炎、抗菌等 [14]。 本文对常春卫
矛提取物的体内及体外抑菌作用进行试验研究，体外
抑菌试验采用试管二倍稀释法联合琼脂平板法，考察
常春卫矛水提物、醇提物及 5 种不同溶剂（石油醚、氯
仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇）提取物对金黄色葡萄球
菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单胞菌的体外抑菌活
性，结果表明，常春卫矛水提物及醇提物均对金黄色
葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单胞菌有一定
程度的抑制作用，5 种不同溶剂提取物中，甲醇、正丁
醇、乙醇乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、
沙门菌、铜绿假单胞菌有一定程度的抑制作用，石油
醚、氯仿提取物无明显抑制作用；体内抑菌试验，常春
卫矛水提物低、高剂量组及醇提物高剂理组有明显降
低金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡率的作用（P＜0.05）。
常春卫矛含有卫矛醇、齐敦果烷型五环三萜等成
分，国内有关药效作用的物质基础研究较少[15-17]。本研
究的体外抑菌试验提示，常春卫矛的水、醇、高极性
（甲醇、正丁醇、乙醇乙酯）提取成分的抑菌效果较好，
非极性（石油醚、氯仿）提取成分的抑菌效果不明显。
常春卫矛是具有研究、开发价值的广西壮、瑶特色药
材，但抑菌作用还需进一步研究。
[参考文献]
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1
2
3
4
5
甲醇
正丁醇
乙酸乙脂
氯仿
石油醚
2.5
10
10
＞80
＞80
10
40
40
＞80
＞80
10
20
20
＞80
＞80
编号 提取物 铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 沙门菌金黄色葡萄球菌
5
5
10
＞80
＞80
1
2
3
4
5
6
1×103
1×104
1×105
1×106
1×107
1×108
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
6
6
6
6
6
6
0
0
1
3
5
6
0.0
0.0
16.6
50.0
83.3
100.0
组别 菌液浓度（CFU/ml） 剂量（ml）动物数（只） 死亡数（只） 死亡率（%）
模型对照组
常春卫矛水提物低剂量组
常春卫矛水提物高剂量组
常春卫矛醇提物低剂量组
常春卫矛醇提物高剂量组
阿莫西林胶囊组
16.0
32.0
16.0
32.0
0.260
16
16
16
16
16
16
14
8
7
9
8
5
87.5
50.0*
43.7**
56.3
50.0*
31.2**
组别
剂量
（g/kg）
动物数
（只）
死亡数
（只）
死亡率
（%）
表 1 常春卫矛水、醇提物对各菌株最小抑菌浓度测定的结果
“+”表示观察到生长；“－”表示未观察到生长
金黄色葡萄球菌
铜绿假单胞菌
大肠埃希菌
沙门菌
+
+
+
+
－
－
－
－
－
－
－
－
－
－
+
+
－
－
+
+
－
－
+
+
－
+
+
+
+
+
+
+
－
－
－
－
－
－
－
－
－
－
+
+
－
－
+
+
－
－
+
+
+
－
+
+
+
+
+
+
菌株 生理盐水
常春卫矛水提物（mg提取物/ml）
80 40 20 10 5 2.5 1.25
常春卫矛醇提物（mg提取物/ml）
80 40 20 10 5 2.5 1.25
剂提取物中，甲醇、正丁醇、乙酸乙酯提取物对金黄色
葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、沙门菌有抑制作
用，甲醇提取物的最小抑菌浓度分别为 5 mg提取物/ml、
2.5 mg 提取物/ml、10 mg 提取物/ml、10 mg 提取物/ml；
正丁醇提取物的最小抑菌浓度分别为 5 mg提取物/ml、
10 mg 提取物/ml、40 mg 提取物/ml、20 mg 提取物/ml；
乙酸乙酯提取物的最小抑菌浓度分别为 10 mg 提取
物/ml、10 mg 提取物/ml、40 mg 提取物/ml、20 mg 提取
物/ml；氯仿、石油醚提取物对金黄色葡萄球菌、铜绿
假单胞菌、大肠埃希菌、沙门菌无明显抑制作用（表 2）。
（下转第 15页）
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