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竹节参质量评价方法研究
郭　琳1 ,王　薇2 ,范少敏2 ,杨黎彬3 ,宋小妹2＊(1.陕
西中医学院第二附属医院 ,陕西 咸阳 712046;2.陕西中医学
院 ,陕西 咸阳 712046;3.西安医学院 , 陕西 西安 710021)
摘要:目的　探讨竹节参的质量研究方法。 方法　采用性状 、
显微 、T LC 法对竹节参进行定性鉴别 , 采用高效液相色谱法
测定竹节参皂苷Ⅳa的含量。结果　显微观察可见特定组织
特征 , T LC 能检出竹节参皂苷Ⅳ a 和人参皂苷 Ro , H PLC 图
谱中竹节参皂苷Ⅳa色谱峰与其他色谱峰分离良好 ,进样量在
1.007 6～ 10.076 0μg范围内呈良好线性关系(r =0.999 9),
平均回收率为 103.5%, RSD 为 0.8%(n =6)。 结论　所建
立的方法简便易行 ,可用于竹节参的质量评价 。
关键词:竹节参;质量标准;高效液相色谱法
doi:10.3969/ j.issn.1004-2407.2011.03.008
中图分类号:R282　　　文献标志码:A　　　
文章编号:1004-2407(2011)03-0169-03
基金项目:陕西省中医管理局基金项目(编号:ZY09),陕西省
教育厅基金项目(编号:JK467)
作者简介:郭琳 ,女 ,副主任护师
＊通信作者:宋小妹 ,女 , 教授 ,硕士生导师
　　竹节参为五加科植物竹节参 Panax japonicus
C.A.Mey .的干燥根茎 ,具有补虚强壮 、止咳祛痰 、散
痹止血 、消肿止痛的功效 ,用于治疗病后虚弱 、劳嗽咯
血 、咳嗽痰多 、跌打损伤等症[ 1] 。现代研究表明 ,竹节
参活性成分以皂苷类[ 2] 为主 , 具有强心 、抗心肌缺
血[ 3-4] 、镇痛[ 5] 、抗疲劳[ 6] 、抗风湿[ 7] 等作用 。现行药
典收载的竹节参质量控制方法只有性状 、显微和以齐
墩果酸 、人参二醇和人参三醇为对照品的 T LC鉴别。
笔者采用高效液相色谱法测定了竹节参主要皂苷类
成分人参皂苷 Ro 和竹节参皂苷Ⅳa的含量 ,同时对
竹节参的显微鉴定进一步完善 ,为竹节参药材的综合
评价提供科学依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器 　岛津 LC-2010AH T 高效液相色谱仪;
SB-3200D型超声清洗机(宁波新芝生物科技股份有
限公司);BP-121S电子天平(北京赛多利斯仪器系统
有限公司);硅胶 G 薄层板(青岛海洋化工厂)。
1.2　试药　竹节参药材购自四川成都 ,经陕西中医
学院药学院王继涛高级实验师鉴定为五加科竹节参
Pana x japonicus C.A.Mey.的干燥根茎;竹节参皂
苷Ⅳa对照品 、人参皂苷 Ro 对照品 (均为自制 ,质量
分数大于 98%);乙腈为色谱纯;其余均为分析纯;水
为纯净水 。
2　方法与结果
2.1　药材性状　本品呈竹鞭状 ,圆柱形 ,稍弯曲;长
5 ～ 22 cm ,直径 0.8 ～ 2.5 cm;表面黄色或黄褐色 ,粗
糙 ,有致密的纵皱纹及根痕;节明显 ,节间长 0.8 ～ 2
cm ,每节有 1个凹陷的茎痕;质坚硬;断面黄白色至
淡黄棕色 ,黄色点状维管束排列成环;无臭 ,味苦而后
微甜。见图 1 。
图 1　竹节参药材图
2.2　显微特征
2.2.1　节横切面　木栓层为 5 ～ 10层细胞。皮层有
大量草酸钙簇晶和分泌道 ,草酸钙簇晶直径 40 ～ 105
μm ;分泌道呈圆形 ,直径 32 ～ 450 μm ,周围分泌细胞
5 ～ 15个 。维管束外韧型 , 8 ～ 10环状排列。韧皮部
分泌道较多 。木质部束呈 2 ～ 3股性放射状排列 ,导
管类多角形或类圆形 ,直径约为 76 μm 。髓部较宽 。
本品薄壁细胞中含草酸钙簇晶及淀粉粒 。见图 2。
图 2　竹节参药材根茎节间横切面(×50)
1.木栓层;2.皮层;3.韧皮部;4.木质部;
5.木纤维束;6.髓部;7.树脂道;8.草酸钙簇晶
2.2.2　节间横切面　皮层稍宽 ,有少数分泌道 。维
管束外韧型 ,环状排列 ,形成层成环 。韧皮部偶见分
泌道。木质部束略作 2 ～ 4 股性放射状排列 ,也有呈
单行排列;木纤维常 1 ～ 4束 ,有的纤维束旁有较大的
木化厚壁细胞。中央有髓。本品薄壁细胞中含众多
草酸钙簇晶 ,直径 17 ～ 70μm;并含淀粉粒。见图 3 。
2.2.3　粉末　黄白色至黄棕色。木纤维成束 ,直径
约 25 μm ,壁稍厚 ,纹孔斜裂缝状 ,有的交叉呈人字
形 。草酸钙簇晶多见 ,直径 15 ～ 70 μm 。梯纹 、网纹
或具缘纹孔导管直径 20 ～ 70 μm 。树脂道碎片偶见 ,
内含黄色块状物 。木栓组织碎片细胞呈多角形 、长方
形或不规则形 ,壁厚。淀粉粒众多 ,多单粒 ,呈类圆
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形 ,直径约 10 μm ,或已糊化 。薄壁细胞类圆形。可
见棕色块 。见图 4。
图 3　竹节参药材根茎节横切面(×50)
1.木栓层;2.皮层;3.韧皮部;4.木质部;
5.树脂道;6.木纤维束;7.髓部;8.草酸钙簇晶
图 4　竹节参粉末显微图
1.木栓细胞;2.草酸钙簇晶;3.导管;4.薄壁细胞;
5.淀粉粒;6.棕色块;7.树脂道
2.3　薄层色谱鉴别　取本品粉末 1 g ,加甲醇 30 mL
超声提取 40 min ,滤过 ,滤液蒸干 ,残渣加水 20 mL
加热溶解 ,水饱和正丁醇萃取 5次(20 , 10 , 10 , 5 和 5
mL),合并正丁醇萃取液 ,蒸干 ,残渣加甲醇 5 mL 加
热溶解 ,作为供试品溶液 。另取竹节参皂苷Ⅳa和人
参皂苷 Ro 对照品 ,分别加甲醇制成每 1 mL 含 2.0
mg 的对照品溶液 。照薄层色谱法(附录 Ⅵ B)实验 ,
分别吸取竹节参皂苷Ⅳa 对照品溶液 、人参皂苷 Ro
对照品溶液各 1μL ,供试品溶液 1 μL ,点于同一硅胶
G 薄层板上 ,以正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水(5∶
10∶0.5∶0.3∶3.5 ,上层液)为展开剂 ,展开 ,取出 ,
晾干 ,喷以 10 mL ·L-1硫酸乙醇溶液 ,于 105 ℃加
热至斑点显色清晰 ,置紫外灯(365 nm)下检视。供
试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的位置上 ,显相同
颜色的荧光斑点 。见图 5。
2.4　含量测定
2.4.1 　色谱条件 　色谱柱:Inertsil ODS-sp(150
mm×4.6 mm ,5 μm);流动相:乙腈-2 g ·L-1磷酸溶
液(35∶65);检测波长:203 nm;柱温:30 ℃;流速:1.0
mL ·min-1 。
2.4.2　对照品溶液的制备　精密称取竹节参皂苷Ⅳ
a对照品适量 ,加体积分数 60%乙醇配制成 1.007 6
g · L-1的储备液 ,冷藏备用。精密吸取 2 mL 于 10
mL 量瓶中 ,加体积分数 60%乙醇至刻度 ,摇匀 ,作为
对照品溶液 。
图 5　薄层色谱图
1.竹节参皂苷Ⅳa对照品;10.人参皂苷 Ro对照品;
5 , 9.竹节参样品液;2 , 3 , 4 , 6 , 7 , 8.珠子参样品
2.4.3　供试品溶液的制备　精密称取竹节参粗粉
(过 2号筛)0.1 g ,加入 25 mL 体积分数 60%乙醇超
声(180 W , 40 kHz)提取 40 min ,取出 ,滤过 ,取续滤
液 ,冷藏备用。
2.4.4　系统适用性实验　分别按照 2.4.3及 2.4.2
项下方法制备供试品及对照品溶液 ,按上述色谱条件
各进样 20 μL ,记录色谱图 , 见图 6。在该实验条件
下 ,竹节参皂苷Ⅳa达到基线分离。理论板数按竹节
参皂苷Ⅳa 峰计算应不低于 3 000。
图 6　竹节参高效液相色谱图
A.竹节参皂苷Ⅳa 对照品;B.供试品;1.竹节参皂苷Ⅳa
2.4.5　线性关系考察　分别精密吸取上述对照品储
备液 0.5 ,1 ,2 ,3 ,4和 5 mL 于10 mL 量瓶中 ,加体积
分数 60%乙醇至刻度 ,摇匀 ,配制成系列对照品溶
液 。按 2.4.1项下色谱条件 ,依次进样 20 μL 测定 ,
记录色谱峰面积 ,以竹节参皂苷Ⅳa 对照品进样量
(μg)为横坐标 ,峰面积为纵坐标进行回归 ,并计算回
归方程得:Y =391 102X -16 725(r =0.999 9)。结
果表明 ,竹节参皂苷Ⅳa在 1.007 6 ～ 10.076 0 μg 范
围内线性关系良好。
2.4.6　精密度实验　取同一供试品溶液 ,按照 2.4.1
项下色谱条件 ,重复进样 6次 ,记录色谱峰面积 。结
果 RSD为 0.02%,表明本法精密度良好 。
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2.4.7　稳定性实验 　取同一供试品溶液分别于 0 ,
2 ,4 , 8 ,12 ,18和 24 h内进样 ,照 2.4.1项下色谱条件
下 ,记录色谱峰面积。结果 RSD 为 0.02%,表明样
品至少在 24 h内稳定 。
2.4.8　重复性实验　取同一批号样品 6份 ,按 2.4.3
项下方法制备供试品溶液 ,在 2.4.1项下色谱条件下
分别进样 20 μL 测定 ,记录色谱峰面积。结果 RSD
为 1.10%,表明本法具有较好的重复性。
2.4.9　回收率实验　取已知含量的样品 6份各 0.05
g ,精密称定 ,分别精密加入竹节参皂苷Ⅳa 对照品适
量 ,照 2.4.3项下方法制备供试品溶液 ,在 2.4.1项下
色谱条件下测定竹节参皂苷Ⅳa含量。计算回收率 ,见
表1。结果 RSD为 0.8%,表明本法回收率良好。
表 1　加样回收率实验结果(n=6)
实验号 样品质量/g 样品中量/ mg 加入量/mg 测得量/ mg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD/ %
1 0.051 62 2.299 6 2.508 0 4.917 8 104.39
2 0.050 45 2.247 5 2.508 0 4.857 0 104.05
3 0.051 89 2.311 6 2.508 0 4.885 9 102.64 103.5 0.8
4 0.051 02 2.272 9 2.508 0 4.857 0 103.03
5 0.050 99 2.271 6 2.508 0 4.883 6 104.15
6 0.051 34 2.287 1 2.508 0 4.857 2 102.48
2.4.10　样品含量测定　精密称取不同批次样品粉末
0.1 g ,按 2.4.3项下方法制备样品溶液 ,进样 20 μL ,
按 2.4.1项下色谱条件测定并记录色谱峰面积 ,计算
竹节参皂苷Ⅳa 含量 。结果竹节参中竹节参皂苷Ⅳa
的平均含量为 3.09%。
3　讨论
薄层色谱条件的选择　通过一系列实验 ,对点样
量 、提取溶媒 、提取时间 、制样方法 、对照品溶液质量
浓度 、样品质量浓度 、展开条件等进行了详细考察 ,经
过比较和筛选 ,最终确定本实验的薄层色谱条件。
含量测定实验条件的确定　检测波长的选择 ,根
据竹节参皂苷Ⅳa对照品及样品的紫外全波长扫描
图谱 ,在 203 nm 处竹节参皂苷Ⅳa 有最大吸收 ,故采
用 203 nm作为检测波长;流动相的选择 ,采用乙腈-2
g ·L-1磷酸溶液(35∶65)作为流动相 ,竹节参皂苷
Ⅳa峰与相邻峰能达到基线分离 ,且峰形较好 ,溶剂
空白无干扰。
首次测定了竹节参中竹节参皂苷Ⅳa的含量 ,方
法简便 、准确 ,重复性好 ,为竹节参药材质量控制提供
了理论依据。
参考文献:
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机制研究[ J] .中国医药学报 , 2003 , 18(4):247-248.
(收稿日期:2010-11-22)
丹陈化痰止咳颗粒质量标准研究
沈晓萌(广东食品药品职业学院 ,广东 广州 510520)
摘要:目的　建立丹陈化痰止咳颗粒的质量标准。 方法　采
用薄层色谱法对方中的丹参 、陈皮 、射干进行定性鉴别;采用
高效液相色谱法测定补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含
量。结果　薄层色谱鉴别特征明显 、专属性强。补骨脂素和
异补骨脂素分别在 0.020 6～ 0.206 和 0.021 3 ～ 0.213 μg 范
围内与峰面积有良好线性关系;平均回收率分别为 99.45%
和 99.92%。结论　所建标准可用于丹陈化痰止咳颗粒的质
量控制。
关键词:丹陈化痰止咳颗粒;质量标准;补骨脂素;异补骨脂素
doi:10.3969/ j.issn.1004-2407.2011.03.009
中图分类号:R927.2　　　文献标志码:A　　　
文章编号:1004-2407(2011)03-0171-03
　　丹陈化痰止咳颗粒由丹参 、陈皮 、补骨脂和射干
等 8味中药组成 ,具有温肺化痰 、止咳平喘 、健脾补肾
之功效 ,用于治疗慢性支气管炎 、慢性阻塞性肺疾病 。
为了有效控制该制剂的质量 ,笔者采用薄层色谱法鉴
别该制剂中的丹参 、陈皮 、补骨脂和射干 ,同时采用高
效液相色谱法测定君药补骨脂中补骨脂素和异补骨
脂素的含量 。结果表明 ,所建立的方法操作简便 ,结
果准确 ,重复性好 ,可为该制剂的质量控制提供依据 。
1　仪器与试药
1.1　仪器　Agi lent 1200型液相色谱仪;UV-1800
紫外分光光度仪(日本岛津);Sartorius BP211D 电子
天平(北京赛多利斯仪器有限公司);KQ5200DE 型
数控超声波仪(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2　试药　射干 、丹参 、陈皮对照药材 ,补骨脂素(批
号 110739-200613)、异补骨脂素(批号110738-200511)
对照品均由中国药品生物制品检定所提供;硅胶G 板
(青岛海洋化工厂);丹陈化痰止咳颗粒(广东省第二中
医院提供 ,批号 20091103 , 20091202 , 20091216);甲醇
为色谱纯 ,水为重蒸水 ,其他试剂均为分析纯。
171西北药学杂志　2011 年 6 月　第 26 卷　第 3 期