全 文 ：书收稿日期：２０１２－０３－１３
１）黑龙江省科技厅攻关项目（ＧＢ０７Ｂ３０３－０２）的部分内容
波兰引进花楸的生物学特性及组织培养研究１）
王丹，舒钰，李晶＊
（黑龙江省林业科学研究所，哈尔滨 １５００８１）
摘 要：以波兰引进花楸嫩茎为试验材料，利用组织培养技术，筛选出诱导分化、继代增殖和生根的最佳
培养基。结果表明：芽继代增殖培养基为：ｗｐｍ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ＋２％蔗糖，ｐＨ＝５．８；
最佳壮苗培养基为ｗｐｍ＋６－ＢＡ ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ；生根适宜培养基为ｗｐｍ＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ，
生根率达９８％。
关键词：花楸；生物学特性；组织培养
Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｏｆ Ｓｏｒｂｕｓ ａｕｃｕｐａｒｉａ Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌａｎｄ
Ｗａｎｇ Ｄａｎ，Ｓｈｕ Ｙｕ，Ｌｉ Ｊｉｎｇ
（Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｈａｒｂｉｎ １５００８１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇ ｙｏｕｎｇ ｓｔｅｍｓ ｏｆ Ｓｏｒｂｕｓ ａｕｃｕｐａｒｉａＬ．ａｓ ｔｅｘｔ ｍａｔｅｒｉａｌｓ，ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍ ａｂｏｕｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａ－
ｔｉｏｎ，ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｏｏｔｉｎｇ ｉｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｂｙ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ：ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｂｕｄ ｉｓ：ｗｐｍ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ＋２％ｓｕ－
ｃｒｏｓｅ，ｐＨ＝５．８；ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｔｒｏｎｇ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｉｓ：ｗｐｍ＋６－ＢＡ ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ；ｍｅｄｉｕｍ
ｆｏｒ ｒｏｏｔｉｎｇ ｉｓ ｗｐｍ＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ，ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｉｓ ９８％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｒｂｕｓ ａｕｃｕｐａｒｉａ Ｌ．；Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ
波兰引进花楸（Ｓｏｒｂｕｓ ａｕｃｕｐａｒｉａ Ｌ．）为蔷薇科，
花楸属，落叶小乔木，高１５～２０ｍ。树皮灰色，冠形宽
椎形；枝条呈平直状；叶为羽状复叶，长１５～２０ｃｍ，小
叶７～１５对，干皮紫灰褐色，光滑，秋季变为红色；浆果
状梨果，果橘红色，花两性，白色，顶生复伞状花序，为
喜光至半耐荫树种。黑龙江省森林植物园于１９８６年１
月从波兰引进了花楸种子，自引种以来欧洲花楸生长
良好，该树种的引进成功为我国东北及华北地区增加
了一个新的具有四季观赏价值的多用途树种，是极具
有开发前景的园林树种之一。
１ 试验材料与方法
１．１ 试验材料的采集与处理
试验材料选取波兰引进花楸带侧芽的茎段。剪取
生长健壮的波兰引进花楸当年生休眠枝条，切成小段，
放入适量水中，加入数滴洗涤灵，搅拌洗涤１０ｍｉｎ，自
来水冲洗３０ｍｉｎ。置于超净工作台上将小枝段消毒，
无菌水冲洗４～５次，每个带腋芽茎段切成长度１．５～
２．５ｃｍ，用无菌滤纸吸干水分，备用。
１．２ 培养条件
采用光照培养，光源采用日光灯，培养室内白天温
度为２４～２８℃，照明时间１２～１４ｈ，光照强度１５００～
１８００ｌｘ，湿度５０％～６０％。
１．３ 试验方法与设计
试验采用正交设计，数据分析采用统计软件ＳＡＳ
进行统计分析。
２ 结果与分析
２．１ 消毒试剂及处理时间对试材的影响
表１ 不同消毒处理试材表现
试剂种类 消毒时间 接种数 污染数 污染率／％ 试材表现
７０％乙醇 ３ｓ ２１ １５ ７１．４ 大部分污染
５ｓ ２１ １３ ６２．０ 大部分污染
７ｓ ２１ １２ ５７．１ 大部分污染
次氯酸鈉 １０ｍｉｎ ２４ １３ ５４．２ 大部分污染
１５ｍｉｎ ２４ １２ ５０．０ 大部分污染
２５ｍｉｎ ２４ １１ ４５．８ 部分污染
０．１％升汞 ４ｍｉｎ ２０ ９ ４５．０ 部分污染
６ｍｉｎ ２０ ３ １５．０ 表现良好，少量污染
１０ｍｉｎ ２０ １ ５．０ 大部分材料组织坏死
消毒处理接种１ｄ后进行观察，７０％乙醇与次氯酸
钠单独处理，繁殖材料污染严重；０．１％升汞处理４ｍｉｎ
的材料污染也较为严重；处理６ｍｉｎ的材料表现较好；
而处理１０ｍｉｎ的材料大部分茎段的组织有坏死现象，
１
第３期（总第１１８期） 中 国 林 副 特 产 Ｎｏ．３（ＧＳＮＯ．１１８）
２０１２年６月 Ｆｏｒｅｓｔ Ｂｙ－Ｐｒｏｄｕｃｔ ａｎｄ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｙ ｉｎ Ｃｈｉｎａ Ｊｕｎ．２０１２
DOI:10.13268/j.cnki.fbsic.2012.03.044
说明材料在升汞中的处理时间以６ｍｉｎ为最佳时间，见
表１。升汞具有很强的杀菌能力，但同时也具有很强
的杀伤力及穿透力，因此会导致外植体坏死，培养失
败。因此，在０．１％Ｌ汞消毒６ｍｉｎ后，用无菌水冲洗数
次后，再用无菌水浸泡２０～３０ｍｉｎ为宜。
２．２ 初代培养基本培养基的筛选
在波兰引进花楸组织培养中首先要筛选基本培养
基。将波兰引进花楸茎段接种于表２所列的培养基
中，１０ｄ后调查，比较基本培养基的诱导效果。结果表
明，ｗｐｍ培养基中腋芽逐渐长大、展叶、嫩茎伸长，生
长健壮，且叶大翠绿，生长迅速，增殖芽数≥１０个且多
伸长，生长状况最好；在 Ｎ６培养基中植株矮小，生长
缓慢，叶小且黄，增殖芽数３～６个且芽长度在０．５～
１．０ｃｍ之间；在 ＭＳ培养基中植株叶小卷曲，增殖芽数
６～８个但长度较短，在 Ｈ培养基中生长的植株矮小，
叶小且黄，增殖芽数１～２个，芽长度≤０．５ｃｍ。在增殖
培养阶段，获得最高增殖芽数是主要目的，所以选用
ｗｐｍ为波兰引进花楸基本培养基。
表２ 不同基本培养基对分化芽生长的影响
培养基
增殖芽数
／个
不定芽长度
／ｃｍ
芽伸长
情况
叶片
状态
腋芽
生长势
Ｎ６＋ＢＡ０．０５＋ＮＡＡ０．２ ３～６ ０．５～１．０ 稍伸长 小、黄 矮小、生长缓慢
ＭＳ＋ＢＡ０．０５＋ＮＡＡ０．２ ６～８ ０．５～１．０ 稍伸长 叶卷曲 较健壮
ＷＰＭ＋ＢＡ０．０５＋ＮＡＡ０．２ ≥１０ １．０～３．０ 伸长 叶大、翠绿 健壮，较高大
Ｈ＋ＢＡ０．０．５＋ＮＡＡ０．２ １～２ ≤０．５ 不伸长 叶黄 矮小
２．３ 生长调节剂组合对芽增殖的影响
表３ 生长调节剂组合对芽增殖方差及多重比较
序号 培养基
６－ＢＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
ＮＡＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
增殖芽数／
个
１ ｗｐｍ ０．２ ０．０５ ４．１６±０．５１Ｅ
２ ｗｐｍ ０．２ ０．１ ７．３６±０．２３Ｄ
３ ｗｐｍ ０．２ ０．２ ５．４３±０．５６ＤＥ
４ ｗｐｍ ０．５ ０．０５ ８．７８±０．２３Ｃ
５ ｗｐｍ ０．５ ０．１ １２．７７±０．９３Ｂ
６ ｗｐｍ ０．５ ０．２ １０．２３±０．２１ＢＣ
７ ｗｐｍ １．０ ０．０５ １２．８５±０．５Ｂ
８ ｗｐｍ １．０ ０．１ １６．０１±０．２４Ａ
９ ｗｐｍ １．０ ０．２ １１．２０±０．２７Ｃ
基本培养基能保证培养物的生存与最低生理活
动，只有配合使用适当的生长调节剂（激素）才能诱导
细胞分裂的启动、芽的分化等合乎理想的变化。
采集初代培养的波兰引进花楸嫩茎接种到诱导芽
增殖的培养基中，２０ｄ后对试验结果进行调查统计分
析。结果表明：茎尖开始启动分化，有不定芽产生，不
同激素配比对波兰引进花楸不定芽增殖系数差异达到
极显著水平，对表３中的数据进行单因素的方差分析
和多重比较结果表明，波兰引进花楸芽增殖最适宜培
养基组合为８号：ｗｐｍ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１
ｍｇ／Ｌ，继续培养１０ｄ左右，可形成丛生苗。
芽增殖阶段，一般以细胞分裂素为主，生长素为
辅，细胞分裂素浓度高于生长素浓度，促进不定芽快速
分化，达到增殖的目的。
２．４ 位置效应对芽启动的影响
木本植物是一个高度分化多年生植物，在组织培
养中关于它的生物学方面还有许多未知的方面，在组
织培养中有其特殊性，位置效应、年龄效应以及幼化程
度对芽萌动又有很大影响。试验结果表明，同一枝条
上的芽启动率有很大的差异，枝条中部的芽启动率较
高见图１；母树下部枝条上的芽萌动率高于上部枝条，
见图２。
图１ 芽在枝条上位置
图２ 枝条在母树上位置
２．５ 年龄效应对芽启动的影响
试验选取母树年龄分别为３年、１０年、２０年，母树
的年龄对木本植物的组织培养也至关重要，母树的年
龄与芽诱导启动成反比，随着年龄的增长，数目生理成
熟度增加，幼龄化效果降低。试验结果表明：来源幼年
母树芽启动率高于成年母树见图３。
图３ 母树年龄与芽诱导启动关系
２．６ 壮苗培养基的筛选
２
２０１２年 中 国 林 副 特 产 第３期
壮苗目的是促进芽伸长展叶，快速生长，抑制侧芽
分化，是获得高质量健壮组培苗的关键，为试管苗生根
及炼苗做准备。将增殖培养后的丛生苗切成单苗，接
种于表４所列的壮苗培养基上，当６－ＢＡ的浓度≥０．５
ｍｇ／Ｌ时，不定芽分化率高；当６－ＢＡ的浓度降至０．２
ｍｇ／Ｌ时，无分化或分化率极低；当加入适量的生长素
后，植株生长健壮。从试验结果可以看出，最佳壮苗培
养基为ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ，在此培
养基中植株分化率较低，保持旺盛生长，无根苗叶大，
叶色翠绿，茎粗壮，平均株高２．８ｃｍ以上。
表４ 不同壮苗培养基对苗木生长的影响及多重比较
序号 培养基组合
壮苗前
平均高
／ｃｍ
壮苗后
平均高
／ｃｍ
不定芽
分化
植株生长势
１ ｗｐｍ＋６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．１ ０．８ ０．８ 分化 有枯叶、纤细、叶很小
２ ｗｐｍ＋６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．２ ０．８ １．０ 分化 有枯叶、纤细、叶小
３ ｗｐｍ＋６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．５ ０．８ １．２ 分化 有枯叶、纤细、叶稍大
４ ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．１ ０．８ １．５ 分化 有黄叶、较纤细、叶稍大
５ ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．２ ０．８ １．５ 分化 有黄叶、较纤细、叶稍大
６ ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．５ ０．８ １．８ 分化 少量黄叶、较纤细、叶大
７ ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．２＋ＮＡＡ０．１ ０．８ ２．１ 分化率低 叶绿、较粗壮、叶大
８ ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．２＋ＮＡＡ０．２ ０．８ ２．５ 分化率低 叶绿、粗壮、叶大
９ ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．２＋ＮＡＡ０．５ ０．８ ２．８ 分化率低 叶翠绿、粗壮、叶大
２．７ 生根培养基的筛选
表５ 培养基组合对生根的影响及多重比较
序号 培养基
ＩＢＡ浓度／
（ｍｇ·Ｌ－１）
ＮＡＡ浓度／
（ｍｇ·Ｌ－１）
平均生根数／条
１ ｗｐｍ ０ ０ ０．１６±０．１２ｅ
２ ｗｐｍ ０ ０．２ ２．６７±０．１６ｄ
３ ｗｐｍ ０ ０．５ ７．０６±０．２８ａ
４ ｗｐｍ ０．２ ０ ３．７８±０．３５ｃｄ
５ ｗｐｍ ０．２ ０．２ ５．７６±０．３３ｂ
６ ｗｐｍ ０．２ ０．５ ５．６５±０．３２ｂ
７ ｗｐｍ ０．５ ０ ６．７２±０．４５ｂ
８ ｗｐｍ ０．５ ０．２ ６．６０±０．１７ｂ
９ ｗｐｍ ０．５ ０．５ ４．７０±０．２１ｃ
图４ 不同激素浓度对生根的影响
试管苗生根是保证组培苗工厂化生产的关键之
一，所以需针对不同的植物种类进行试验，以求得适
宜的生长素种类和浓度，获得更好的生根结果．当组
培苗嫩茎长到２～３ｃｍ时，接种到生根培养基上，经
７ｄ左右培养便可生根。２０ｄ调查统计生长情况，结
果表明，从表５中的数据进行单因素的方差分析及
多重比较得出：ＩＢＡ、ＮＡＡ对生根有显著影响，低浓
度的生长素有利于根的形成，生长素浓度过高会抑
制根的形成，从图４可以看出，ＮＡＡ促进生根效果
好于ＩＢＡ，生根率高达９８％。波兰引进花楸生根适
宜的生长素为ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ。
２．８ 生根苗驯化移栽
生根试管苗的移栽是工厂化生产中最为复杂的
一项技术，也是商品化生产取得效益的最重要环节。
试苗在移栽过程中，要由异养转为自养，生长环境条
件发生了剧烈的变化，为幼苗提供适合的过渡生长
条件，是移栽成活的关键。这就要求对移栽的基质、
水温度、湿度等加以控制，这样才能提高移栽成活
率，达到工厂化育苗的要求。
表６ 不同移栽季节和基质对波兰花楸驯化成活率
时间
细河沙
／％
蛭石
／％
有机质
珍珠岩
／％
细河沙∶珍珠岩
（２∶１）／％
３～４月 ８５ ９０ ８６ ８４ ８３
６～７月 ７０ ６８ ７６ ７０ ６９
９～１０月 ７９ ７５ ７８ ８０ ８４
由表６可知，波兰引进花楸在３～４月的平均驯化
成活率高达８５．６％，在蛭石中的平均驯化成活率最高
达９０％，综合来看，波兰引进花楸移栽季节和基质的
选择以４月蛭石中驯化最佳。
３ 结论
３．１ 芽的位置效应、年龄效应对芽萌动有很大影响。
母树下部枝条上的芽萌动率高于上部枝条，同一枝条
上的芽启动率有很大的差异，枝条中部的芽启动率较
高；来源幼年母树芽启动率高于成年母树。
３．２ 对影响波兰引进花楸组织培养因子进行了筛选，
建立稳定的花楸离体培育体系。ｗｐｍ为基本培养基，
芽继代增殖培养基为：ｗｐｍ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ／Ｌ最佳壮苗培养基为 ｗｐｍ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ；生根培养基为 ｗｐｍ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ，
生根率达９８％。
３．３ 波兰引进花楸组培苗移栽季节选择在４月份，基
质的选择蛭石为最佳。
参 考 文 献
［１］ 王志．黑果腺肋花楸的组织培养繁殖［Ｊ］．北方果树，
２００２（１）：１０－１１．
［２］ 沈海龙．植物组织培养［Ｍ］．中国林业出版社，７９－８０．
［３］ 陈荣伟，徐熙伟，等．花楸播种育苗技术［Ｊ］．山东林业
科技，２００４（３）：４３－４４．
［４］ 李立才，李力营，等．花楸的育苗及其利用［Ｊ］．特种经
济动植物，２００４，（７）：１９．
作者简介：王丹（１９８２－），女，原籍黑龙江省鸡西市，在
读硕士，环境科学专业，研究实习员，现主要从事单倍体育种
的研究工作，已发文章１篇，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｄ＿ｓｎａｉｌ＠１６３．ｃｏｍ。
＊李晶：通讯作者。
３
２０１２年 王丹等：波兰引进花楸的生物学特性及组织培养研究 第３期