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小叶龙船花对醋酸铅引起氧化压力的抑制作用



全 文 :第24卷第2期 海南师范大学学报(自然科学版) Vol.24 No.2
2011年6月 Journal of Hainan Normal University(Natural Science) Jun.2011
摘 要:为了探讨小叶龙船花乙醇提取物对醋酸铅引起的雌鼠氧化压力的抑制作用,将 60
只雌鼠分6组喂食,时间为2周,测定小叶龙船花提取物对小鼠的体重和肝肾的重量、血液生化
指标和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)的影响,并对肝组织进行切片扫描.
结果表明:单独服用小叶龙船花提取物对小鼠体重和肝、肾的重量,血液生化指标及肝切片扫描
图片无明显变化,但明显提高了GSH-PX酶活力,降低MDA值;但在醋酸铅引起的氧化压力的条
件下,小叶龙船花提取物能明显提高GSH-PX酶活力,改善血液生化指标.此外,这种改善在先口
服醋酸铅后口服小叶龙船花提取物组表现的最显著.
关键词:小叶龙船花;醋酸铅;氧化压力
中图分类号:TQ 072 文献标识码:A 文章编号:1674-4942(2011)02-0194-04
梁 萱 1,莫 果 1,陈 欣 1,杜云云 2,刘 红 1,3*,贾桂云 1
(1.海南师范大学 化学与化工学院,海南 海口 571158;
2.海南师范大学 物理与电子工程学院,海南 海口 571158;
3.海南省热带药用植物化学重点实验室,海南 海口 571158)
Abstract:In order to study the antioxidant activity of the ethanol extract of Ixora coccinea L. flowers against lead ace⁃
tate (LA)-induced oxidative stress in female rats, 60 female rats were divided into 6 groups to be fed, The feeding time
was two weeks to evaluate the effect on the body weight, the liver and kidney weight, the Serum biochemical parameters
and Glutathione peroxidase(GSH-PX)and Propanedial(MDA)in female rats, and the slice scanning of the liver tis⁃
sue. The Results indicated that the Ixora coccinea L.Flowers extract alone did not induce any significant changes in body
weight gain, serum biochemical chemistry or the histological picture of the liver. However, it increased significantly the
level of and decreased the level of MDA. However, under the conditions of the lead acetate-induced oxidative stress, The
extract succeeded to increase significantly the level of GSH-PX and improve biochemical parameters .Moreover, this im⁃
provement was pronounced in the animals treated with the extract after LA intoxication.
Key words:Ixora coccinea;Lead acetate;Oxidative stress
Inhibitory Effect of Ixora Coccinea L. Against Lead
Acetate-induced Oxidative Stress
LIANG Xuan1,MO Guo1,CHEN Xin2,DU Yunyun2,LIU Hong1,3*,JIA Guiyun1
(1. College of Chemistry and Chemical Engineering,Hainan Normal University,Haikou 571158,China;
2. College of Physics and Electronic Engineering,Hainan Normal University,Haikou 571158,China;
3. Hainan Provincial Key Lab of Tropical Pharmaceutical Herb Chemistry,Haikou 571158,China)
小叶龙船花对醋酸铅引起氧化压力的抑制作用
铅中毒被认为由氧化压力引起的主要途径,氧
化压力也是造成现代人肌肤衰老的重要原因.小叶
龙船花(Ixora coccinea L.)又名山丹、仙丹花,为茜
草科常绿小灌木,分布于广东、广西、台湾、福建、海
南等地 [1]. Latha and Panikkar(1998)报道小叶龙船
花提取物有抗肿瘤作用[2]. Moni Rani Saha(2008)认
为小叶龙船花提取物的有体外抗自由基能力,认为
起到抗氧化作用的主要是黄酮、甾醇类和单宁等物
质[3].研究小叶龙船花提取物对醋酸铅引起的雌鼠
氧化压力的抑制作用.实验分6组,分别测定6组小
鼠体重、血液生化指标和抗氧化指标 MDA 和
GSH-PX[4-6],并对肝组织切片扫描,期望小叶龙船
收稿日期:2011-03-08
基金项目:海南师范大学国家大学生创新实验计划资助项目(091165814);海南师范大学物理化学重点学科资助项目
*通讯作者
花提取物为人们的疾病提供新的治疗途径.
1.1 主要实验仪器
RE-52 型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器
厂);721型紫外-可见分光光度计(上海第三分析
仪器厂);电子天平(OEM型奥豪斯国际贸易(上
海有限公司);DHG-9246A型电热恒温鼓风干燥箱
(上海精宏实验设备有限公司);TDL-5-A型离心
机(海南新卫医药有限公司).
1.2 药品
小叶龙船花乙醇(95%)提取物,注射用醋酸
铅,测试用GSH-PX和MDA试剂盒由南京建成生
物工程研究所提供(规格:100T);ALT(丙氨酸氨基
转移酶)、AST(谷草转氨酶)、TP(总蛋白)、ALB(白
蛋白)、BUN(尿素氮)和TG(甘油三酯)等试剂由本
校附属医院提供.
1.3 实验动物
健康昆明种雌鼠 60只,体重 30±2g,由四川大
学实验动物中心提供.
1.4 方法
1.4.1 小叶龙船花提取物的提取
晴天采摘小叶龙船花的花,置于热风干燥箱
40 ℃干燥,将干燥的花粉碎至 50目,正己烷浸泡
2d,过滤得到浸出液,滤渣再用无水乙醇浸泡 2d.
取乙醇浸提液至旋转蒸发器中浓缩得到红色浓缩
液,将浓缩液用硅胶100~200目柱过柱,以正己烷∶
乙酸乙酯∶甲醇为 1∶4∶3的混合液作为洗脱剂,分
离得红色液体.
1.4.2 氧化压力雌鼠模型的建立和有关测定方法
建立醋酸铅引起的雌鼠氧化压力模型,分为6
组,每组 10只雌鼠. 饲养 2周:第 1组:每日口服
100 mg/kg小叶龙船花提取物(N1);第 2组:每日口
服 20 mg/kg醋酸铅(N2);第 3组:先每日口服 100
mg/kg小叶龙船花提取物1周,后每日口服20 mg/kg
醋酸铅1周(N3);第4组:先每日口服20 mg/kg醋酸
铅1周,后每日口服100 mg/kg小叶龙船花提取物1
周(N4);第 5组:同时每日口服 20 mg/kg醋酸铅和
100 mg/kg小叶龙船花提取物(N5);第 6组:正常组
(N6).观察这些动物每天的毒性迹象.每日记录食
物摄入和体重.在实验 14d结束后,收集眼眶静脉
血,一部分用于分析 ALT、AST、BUN、TP、ALB和
TG.另一部分按GSH-PX和MDA试剂盒方法测定
其吸光度值.
1)体重和肝肾变化
与N6组相比,其他五组雌鼠的体重都减轻,其
中N2组及N4组减轻的相对较少,N5组减轻最多,结
果见表1.雌性小鼠肝肾重量的影响见表2,与N6组
相比,各组雌鼠肝重及肾重均减少,但变化不大,仅
N5组肝肾重明显降低,统计分析(p<0.05)显示对肝
肾重量并无很大影响.
2)血液生化指标
表3列出了血液的生物化学指标,N1组和N6组
的血液生化指标没有显著差异. N2组增加 ALT、
AST和 BUN值,减少TP、ALB和TG值. N3、N4 和N5
三组明显改善血液指标,减少 TG和BUN指标,其
中N3组降低TG和BUN效果最好.
3)小叶龙船花提取物对 GSH-PX酶活力及
MDA的影响
表 4显示小叶龙船花提取物对GSH-PX酶活
力和MDA的影响.数据表明:与N6组相比,N2组肝
组织MDA显著增加,GSH-PX酶活力水平显著降
1 材料与方法
2 结果
组别 N1 N2 N3 N4 N5 N6
开始给药
2天
4天
6天
8天
10天
12天
14天
18.8±0.5
19.8±1.5
19.9±1.4
20.6±1.5
21.6±2.1
21.4±1.6
22.4±1.6
22.4±1.5
18.8±0.5
19.2±1.0
19.5±1.3
20.0±1.5
21.0±2.2
20.6±2.1
20.6±2.4
20.7±2.7
18.7±0.9
18.1±1.2
18.8±1.7
19.2±1.7
19.8±2.4
19.7±2.9
19.9±3.5
19.7±3.9
18.8±1.1
19.0±1.8
20.1±1.5
20.8±1.8
22.1±1.9
22.4±1.9
22.5±1.8
22.7±2.0
19.2±1.4
18.9±1.5
19.3±1.2
19.8±1.0
19.6±1.3
19.1±1.7
18.9±2.4
19.3±2.6
19.9±1.6
19.8±1.4
21.0±1.9
20.6±1.6
22.0±1.7
21.9±1.9
22.9±2.0
23.5±2.3
表1 灌胃对雌性小鼠体质量(g)的影响
Tab.1 The effect on weight of female rats after oral administration
第2期 梁 萱等:小叶龙船花对醋酸铅引起氧化压力的抑制作用 195
低.
而N1组对肝组织MDA影响较小,但GSH-PX
酶活力水平增大. N3、N4 和 N5 三组均有增加
GSH-PX酶活力,降低MDA的作用,其中N5组明显
增加GSH-PX酶活力水平,N4组显著降低MDA水
平,实验表明小叶龙船花提取物对由醋酸铅引起的
肝组织的损伤具有保护作用.
4)肝切片扫描
附图 1肝切片的显微照片包括:N1组(A1,A2)
呈现或多或少正常的肝细胞,核子和中央静脉
(40×,20×);N2组呈现门管扩张及扩散到不同区域
的单核炎症细胞大量聚合(B2)(20×),脂肪变性及
核间夹杂,核子支离破碎和固缩(B1)(40×);
N3组(C1,C2)呈现同样的门管扩张(40×,20×);
N4组(D1,D2)呈现正常肝细胞明显结构(40×,20×);
N5组(E1,E2)呈现肝细胞泡囊核突出(40×,20×);N6
组(F)呈现正常肝细胞及中央静脉.
本实验研究小叶龙船花提取物对氧化压力的
抑制作用.结果表明,小叶龙船花提取物能抑制醋
酸铅引起的雌鼠氧化压力.先治疗口服小叶龙船花
提取物后口服醋酸铅时,可以起到降低甘油三酯的
作用,减少醋酸铅引起的氧化压力作用,研究结果
为相关疾病的治疗提供了理论依据.
表2 灌胃对雌性小鼠肝肾重量影响
Tab.2 Effects on liver and kidney weight of
female rats after oral administration
组别 肝重(g) 肾重(g)
1.3628±0.1026
1.1396±0.1330
1.3537±0.1961
1.2394±0.0391
1.0922±0.0417
1.4715±0.0455
0.1984±0.0229
0.2519±0.0154
0.2512±0.0269
0.2420±0.0308
0.2448±0.0380
0.2496±0.0398
N1
N2
N3
N4
N5
N6
3 讨论
表3 雌性小鼠血液指标
Tab.3 Serum biochemical parameters in female rats
组别 丙氨酸氨基转移酶(IU/L) 谷草转氨酶(IU/L) 总蛋白(g/L) 白蛋白(mg/dl) 尿素氮(mmol/L) 甘油三酯(mmol/L)
N1
N2
N3
N4
N5
N6
30.2±2.0
46.5±3.2
39.7±2.0
33.0±9.0
35.7±1.0
29.5±2.4
68.4±3.0
88.0±2.7
86.6±1.5
79.7±6.3
84.65±2.7
74.3±5.0
73.8±2.1
45.0±1.9
53.2±1.4
60.6±1.6
54.1±8.0
73.3±4.9
3.10±0.9
1.39±0.6
1.41±0.4
4.22±0.2
3.30±0.5
3.16±0.3
4.9±0.98
7.09±3.67
6.75±0.03
5.2±0.85
4.77±0.91
5.07±0.25
0.96±0.2
0.45±0.1
0.50±0.1
0.67±0.2
0.9±0.3
1.03±0.2
组别 N1 N2 N3 N4 N5 N6
GSH(μmol/L)
MDA(nmol/ml)
77.71
8.161
39.19
29.08
45.14
27.931
49.33
11.149
64.86
15.517
69.59
1.379
表4 不同给药方式对雌性小鼠全血GSH-PX酶活力及MDA值的影响
Tab.4 Effects of different treatments on MDA and GPX in blood of rats in different treatment groups
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196 海南师范大学学报(自然科学版) 2011年
责任编辑:毕和平
(上接第193页)
CP对于大鼠脑皮层AChE活性的降低影响,结
合大鼠行为学表现的神经毒性症状,表明AChE活
性可能是神经毒性的标志物之一,其具备应用于饲
料、兽药和药品安全性评价研究的潜力.至于CP降
低脑皮层AChE活性的机制,尚需后续研究.
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