全 文 ：声提取的方法。据文献报道棉酚在丙酮中稳定 ,故
以丙酮定容 。同时由于棉酚的特殊结构 ,用硅胶 G
板无法实现理想分离 。硅胶 H 板加入 2%草酸后 ,
效果明显好转 ,同时比较了以 0.5%、1%、3%草酸
制备的薄层板 ,结果均不如 2%的理想 。该薄层色
谱鉴别方法是在重复文献报道方法无法得到理想结
果的情况下 ,经过反复摸索而得出的 ,为棉根皮中棉
酚的定性鉴别提供了参考 。
为了考察棉根皮紫外谱线组鉴别的可靠性 ,笔
者对不同产地的棉根皮亦进行了测定 ,结果其吸收
峰数目和最大吸收峰峰位值均具有极好的重现性 ,
表明紫外谱线组可用于棉根皮的鉴别。同时薄层色
谱以及紫外谱线组鉴别表明 ,根皮与茎皮化学成分
存在较大的差异 ,不可同等入药 。
参 考 文 献
1 　贾美华.棉花子及其根皮的临床应用.上海中医药杂
志 , 1992 , 4∶31
2 　李宗友摘译.手性形式的棉酚在植物中的分布.国外
医学中医中药分册 , 1994 , 16(1)∶47
3 　吴国沛.棉酚和有关化合物作为避孕药和妇科疾病治
疗药的研究.生殖与避孕 , 1988 , 8(13)∶8
4 　唐文皓.棉酚的抗肿瘤研究进展.国外医学·肿瘤学分
册 , 2000 , 27(3)∶154
5 　袁久荣.中药鉴别紫外谱线组法及其应用.北京:人民
卫生出版社 , 1999∶83
(2003-09-23收稿)
·化学成分·
水蔓菁 HPLC 指纹图谱研究
王　斌1　伍蔚萍1　冯　旭2　李　珍2　孙文基1
(1.西北大学生物医药重点实验室 ,西安 710069;2.万荣三九药业有限公司 ,山西 044200)
　　摘要　目的:应用 RP-HPLC(DAD)建立了水蔓菁的指纹图谱。方法:用 Beckman C18柱(4.6 mm×250 mm , 5
μm),甲醇-0.5%冰醋酸溶液恒流洗脱 ,流速 1 ml/ min , 检测波长 254 nm。结果:获得了该药材HPLC 指纹图谱共有
模式 ,并对不同批药材进行了相似度比较。结论:指纹图谱可用于控制水蔓菁的内在质量。
关键词　水蔓菁　指纹图谱　高效液相色谱
　　水蔓菁为玄参科婆婆纳属植物水蔓菁 Veroni-
ca linarii folia Pall.ex Link subsp.dilatata (Nakai
et Kitag.)Hong 的干燥全草 。该植物广布于甘肃
至云南以东 、陕西 、山西和河北以南各省区 ,为多年
生草本 ,高 30 ～ 80 cm ,其性味苦 、微寒 ,具有清热解
毒 、利尿 、止咳化痰的功效 ,用于支气管炎 、肺脓 、急
性肾炎 、尿路感染 、疖肿〔1〕 。水蔓菁别名蜈蚣草 、斩
龙剑(山东)、追风草(河北)、一支香 、细叶婆婆纳(江
苏)。由于受产地 、气候和生态环境的影响 ,不同水
蔓菁药材所含成分差异较大。本研究对山西万荣产
水蔓菁药材进行考察 ,建立指纹图谱 ,以控制其内在
质量 。
1 　仪器与材料
Beckman高效液相色谱仪(Beckmans 125 高压
泵 , system Gold168二极管阵列检测器 ,32 Karat色谱
工作站)。甲醇为色谱醇 ,其他试剂为分析醇 ,水为超
纯水。水蔓菁药材由万荣三九药业有限公司提供 ,均
采自山西省万荣县水蔓菁种植基地。
2 　色谱条件
色谱柱:Beckman C18柱(4.6mm ×250 mm , 5
μm);流动相:甲醇-0.5%冰醋酸溶液(25∶75)洗脱;流
速 1 ml/min;检测波长:254 nm ,柱温:30℃,进样量:
20μl。
3 　供试品溶液的制备
取药材 100.0 g 加水 1000 ml ,水煮 2h;药渣加水
1000ml ,水煮 1 h;药渣加水 800 ml ,水煮 0.5 h;合并
三次滤液 , 浓缩至 100 ml ,加入乙醇 ,使含醇量达
60%,静置 24 h ,取上清液 ,回收醇至无醇味 ,加入
95%乙醇 ,使含醇量达 80%,静置 24 h ,取上清液 ,回
收醇至无醇味 ,用水定容至 100 ml。吸取 5 ml至分
液漏斗中 ,用水饱和正丁醇萃取 4次 ,每次 15 ml。合
并正丁醇萃取液 ,蒸干 ,用甲醇定容至 10 ml量瓶中 ,
精密吸取 1 ml至 10 ml量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,用
0.45μm微孔滤膜过滤 ,作为供试品溶液。
4 　方法学考察
4.1 　稳定性试验　取一新制备供试品溶液 ,连续测
定 7次 ,0 h 、1.5 h 、3 h 、6 h 、9 h 、12 h 、24 h的进样结果
用相似度软件计算 , 相似度均大于 0.95 , RSD为
2.10%。
4.2 　精密度试验　取一新制备供试品溶液 ,连续测
·95·中药材第 27 卷第 2 期 2004 年 2 月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2004.02.010
定6次 ,对测定结果用相似度软件计算 ,均大于 0.98 ,
RSD为 0.77%。
4.3 　重现性试验　取同一供试品 ,同法制备 6个供
试品溶液进行测定 ,对测定结果用相似度软件计算 ,
均大于 0.98 ,RSD为1.51%。
5 　结果
5.1 　经分析比较 ,从水蔓菁 HPLC 色谱图中选定 8
个共有峰 ,构成其指纹特征(图1)。
图 1　水蔓菁指纹图谱特征峰
5.2 　根据 10 批供试品 HPLC图谱所给出的相关
参数 ,以参照峰(s)的相对保留时间和峰面积为 1 ,
计算各指纹峰的相对保留时间及峰面积比值 。共
有峰的相对保留时间:1(0.179), 2(0.288), 3
(0.469), 4(0.566), 5(1), 6(2.028), 7(2.493), 8
(2.795)。共有指纹峰面积比值:根据《中药注射剂
指纹图谱研究的技术要求(暂行)》〔2〕 , 供试品色谱
中 2 、5号共有指纹峰面积与参照物对应的色谱峰
(s)峰面积比值为:(2∶5∶s)=(0.223 ～ 0.372)∶(0.287
～ 0.479)∶1.000。
5.3 　将色谱工作站数据分别导入西北大学 、中南
大学两种中药指纹图谱相似度计算软件 ,选定 1 、5
两个峰为 marker 峰 ,进行谱峰匹配(匹配后色谱图
见图 2),通过相似度计算软件得出水蔓菁指纹图谱
的共有模式 ,并以此共有模式为标准 ,采用不同算法
对每批样品进行整体相似度评价〔3〕 ,结果见表 。
图 2　匹配后十批样品的色谱图
6 　讨论
　　表 不同软件 、不同算法相似度计算结果
软件 计算方法 不同批次编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
RSD(%)
中南大学相似度计算软件　
相关系数(中位数) 0.9961 0.9653 0.9948 0.9941 0.9865 0.9967 0.9943 0.0787 0.9581 0.9933 1.12
相关系数(均值) 0.9952 0.9729 0.9951 0.9934 0.9891 0.9961 0.9933 0.9807 0.9629 0.9925 0.91
相合系数(中位数) 0.9962 0.9666 0.9928 0.9944 0.9873 0.9966 0.9944 0.9796 0.9605 0.9936 1.05
相合系数(均值) 0.9951 0.9742 0.9923 0.9938 0.9896 0.9963 0.9937 0.9818 0.9652 0.9930 0.84
西北大学相似度计算软件　
相关系数 0.99012 0.98568 0.99206 0.99061 0.98407 0.99086 0.98951 0.94166 0.94620 0.96321 2.07
夹角余弦法 0.99074 0.9876 0.98950 0.99192 0.98582 0.99217 0.99098 0.95012 0.95403 0.96852 1.73
模糊相关法 0.99013 0.98578 0.99213 0.99086 0.98408 0.99113 0.98964 0.94198 0.94633 0.96329 2.06
6.1 　考虑到与以该药材为原料生产注射剂的工艺
的一致性 ,本试验采用 HPLC 法主要考察其水溶性
成分 ,药材用水煮醇沉提取。通过对水饱和正丁醇 、
乙酸乙酯 、氯仿萃取的比较 ,结果发现水饱和正丁醇
萃取液的液相色谱图峰数多 ,吸收值大 ,符合指纹图
谱研究的技术要求。
6.2 　本实验将实验结果分别导入中南大学 、西北
大学两种相似度计算软件 ,由表中可以看出 ,同一实
验数据 ,采用不同软件 、不同算法 ,其结果不同 ,因此
亟待国家有关部门出台相关政策 ,以规范相似度计
算方法。
6.3 　本实验所用的材料来自山西省万荣县水蔓菁
种植基地 ,从指纹图谱看 , 10批样品具有较好的相
似度 ,因此 ,利用指纹图谱可以较好地控制水蔓菁的
内在质量 ,同时也说明建立药材种植生产基地能保
证药材的质量稳定 。
参 考 文 献
1 　中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志六十
七卷(Ⅱ).北京:科学出版社 , 1979∶265
2 　国家药品监管管理局.中药注射剂指纹图谱研究的技
术要求(暂行).中国药品标准 , 2000 , 1(4)∶3
3 　国家药品监督管理局.中药注射剂色谱指纹图谱实验
研究技术指南(试行).中成药 , 2000 , 22(10)∶671
(2003-11-02收稿)
·96· 中药材第 27 卷第 2期 2004 年 2 月
Study on HPLC Fingerprint of Herba Veronicae Dilatatae
Wang Bin1 , Wu Weiping1 , Feng Xu2 , Li Zhen2 , Sun Wenji1
(1.Key Laboratory of Biological Medicine of Nor thwest University , Xi an 710069;2.WanRong Sanjiu Pharmaceutical Co.L td.,
Shanx i 044200)
Abstract　Objective:To establish HPLC fingerprint of Herba Veronicae Dilatatae.Methods:Beckman C18 column was used , with
mixtures of 0.5% ice acetic acid-methanol as mobile phase.The flow rate w as 1 ml/min.The w avelength of detection was 254
nm.Results:After the mutual mode o f HPLC fingerprint was set up , comparsion o f similar degree w ith the medicinal materials of dif-
ferent batch were car ried out.Conclusion:According to the selected chromatographic conditions , a good fingerprint has been de-
scribed.The method is simple , accurate and reproducible.I t may have practical v alue for the quality contro l of samples of Herba Veron-
icae Dilatatae.
Key words　Herba Veronicae Dila tatae;Fingerprint;HPLC
泰山白首乌挥发油成分分析
徐凌川　张　华　王建平　李凤华　许昌盛
(山东中医药大学 ,济南 250014)
　　摘要　目的:分析泰山白首乌挥发油成分。方法:采用超临界 CO2 萃取技术和 GC-MS 联用技术。结果:从泰
山白首乌挥发油中分离鉴定出 123 种成分 ,以邻苯二甲酸酯为代表的酯类成分含量最高(33.77%), 其次为苯乙酮
类(17.97%)、甾醇类(13.46%)、不饱和脂肪酸类(7.73%)、烷烃类(5.13%)。
关键词　泰山白首乌　超临界 CO 2 萃取　挥发油
　　泰山白首乌为萝 科戟叶牛皮消 Cynanchum
bungei Decne.的干燥块根 ,主产于山东 、河北等省 ,
具有补肝肾 、益精血 、乌须发等作用 。经文献调研 ,
尚未见有关白首乌挥发油成分的报道。笔者采用超
临界 CO2萃取技术提取挥发油 ,并用 GC-MS 联用
技术对挥发油成分进行分析 ,共鉴定出 123种成分 ,
现报道如下。
1 　材料与仪器
材料:泰山白首乌采于山东济南历城梯子山 ,经
鉴定为戟叶牛皮消 Cynanchum bungei Decne.(为区
别江苏产白首乌 C.auriculatum Royle ex Wright ,
称之为泰山白首乌)。50 ～ 60℃烘干制成粗粉备用 。
仪器:5 L HA121-50-05 型超临界萃取仪;Agilent
6890N/5973N GC-MSD 联用仪 , 条件:气化温度
250℃,HP-5 毛细管柱 ,柱内径 0.25 mm , 柱长 30
m ,程序升温:50℃(1 min) 5℃/min 200℃(5 min)
10℃/min
280℃(20 min)。
2 　挥发油提取与分析
2.1 　萃取条件　萃取 Ⅰ压力 30 MPa ,温度 53℃,
分离 Ⅰ压力 10 MPa ,温度 40℃,分离 Ⅱ压力约 5
MPa ,温度 40℃,提取 2 h ,夹带剂 EtOH 约 300 ml ,
每隔 40 min分别从两个解析釜出料口出料 ,得到白
首乌挥发油 ,解析釜Ⅰ收集的油呈黄绿色 ,解析釜Ⅱ
收集的油呈淡黄色 ,二者均具香气 ,但以Ⅱ的香气更
浓郁 ,当达到选定的萃取时间后 ,停止萃取 。
2.2 　挥发油处理　将从解析釜 Ⅱ得到的萃取物用
吸管吸出上清液 ,浓缩 ,并用乙醚萃取 ,取出乙醚层 ,
自然挥干乙醚 ,测定。
3 　结果与讨论
3.1 　泰山白首乌挥发油中分出 128 种成分 ,经计
算机检索及核对质谱标准谱图〔1〕 ,共鉴定出 123种
成分 ,占总油量的 98.31%,结果见表。
3.2 　从表中看出 ,泰山白首乌挥发油中酯类占比
例较大 ,为总油量的 33.77%,其中邻苯二甲酸二丁
酯占 12.43%,邻苯二甲酸异辛基酯占 13.01%,为
挥发油中芳香气味的主要成分;其次为酮类化合物 ,
占总油量的 17.97%,其中 4-羟基苯乙酮占 8.41%,
2 ,4-二羟基苯乙酮占 7.20%;不饱和脂肪酸占总油
量的7.73%,其中9 ,12-十八碳二烯酸占 6.89%;烷
烃类占总油量的 5.13%;另含有少量的烯烃类 、胺
类 、醇类及香草醛类。此外 ,萃取物中含甾醇类化合
物 13.46%。
·97·中药材第 27 卷第 2 期 2004 年 2 月