全 文 ：表 3　蚕蛹蛋白中的氨基酸含量 mg· g-1
氨基酸 含量 氨基酸 含量
Asp 84.07 Val 48.85
Glu 92.00 Met 26.30
Ser 30.47 Trp 33.39
His 26.39 Phe 41.16
Gly 16.79 Ile 37.94
Thr 30.62 Leu 54.78
Ala 43.81 Lys 127.10
Arg 50.29 Pro 16.76
Tyr 45.22
Cys 63.36 总计 869.29
4　结论
建立了 OPA和 FMOC试剂联用柱前衍生的高效液相色谱分
析方法 , 在 35min内 18种常见氨基酸可获得较好的分离。 用峰
面积定量计算其重复性和精密度较好。
在相同实验条件下 ,检测了蚕蛹蛋白质中氨基酸的组成和含
量 , 表明蚕蛹蛋白氨基酸品种齐全 , 必需氨基酸和 l8种氨基酸的
配比的含量均符合联合国粮农 /世界卫生组织(FAO/WHO)所规
定的理想蛋白质模式 ,蚕蛹蛋白中非极性氨基酸和芳香氨基酸含
量占氨基酸总组成的 41.3%, 可作为开发功能食品的优质原料。
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收稿日期:2009-03-17;　修订日期:2009-08-12
基金项目:江西省自然科学基金(No.2007GQY0114)
作者简介:李辉敏(1974-),女(汉族),江西九江人 ,现任九江学院基础医
学院副教授 ,硕士学位 ,主要从事药品质量控制工作.
复叶耳蕨地上部分微量元素锌铁铜锰含量测定
李辉敏 ,张　磊
(九江学院 ·基础医学院 ,江西 九江　332000)
摘要:目的 测定复叶耳蕨地上部分微量元素 Zn, Fe, Cu, Mn的含量。方法 利用微波消解法处理样品 , 火焰原子吸收分
光光度法测定 。结果 复叶耳蕨地上部分 Zn, Fe, Cu, Mn含量分别为 175.51, 286.91, 14.38, 78.84μg/g。结论 复叶耳蕨
地上部分含有丰富的 Zn, Fe, Cu, Mn,该方法简便 , 结果准确可靠 , 可用于实际样品的测定。
关键词:原子吸收分光光度法;　微波消解;　复叶耳蕨;　微量元素
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2010)03-0539-02
DeterminationofContentsofTraceElementsinAerialPartsofArachniodesexilis
LIHui-min, ZHANGLei
(MedicalSchool, JiujiangColege, Jiujiang, Jiangxi332000 , China)
Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentsoffourtraceelementsofZn, Fe, CuandMninaerialpartsofArachniodesexi-
lis.MethodsThesamplesweredigestedwithmixedacidofHNO3 andH2O2 bymicrowavedigestion.FAASmethodwasestab-
lishedforthedeterminationofZn, Fe, CuandMninthesamples.ResultsThecontentsofZn, Fe, CuandMnwere175.51,
286.91, 14.38, 78.84μg/ginaerialpartsofArachniodesexilis.ConclusionThereareplentyofZn, Fe, CuandMninaerial
partsofArachniodesexilis.Thismethodissimpleandreliableandcanbeusedforthedeterminationofpracticalsamples.
Keywords:FAAS;　Microwavedigestion;　Arachniodesexilis;　Traceelements
　　微量元素在生物体内的作用日益受到人们的重视。它们在
生物体内成为某些酶 、激素和维生素的主要组成部分 , 在人体的
代谢中起着重要作用 。Zn是人体上百种酶的组成部分和激活因
子 , 对体内的免疫功能起调节作用 , 并能通过酶系统发挥对机
体代谢的调节和控制 , 还起到抗菌抗病毒作用;Cu, Fe是人体必
需的微量元素 , 参与机体多种代谢活动和生理过程 , 可增强机
体免疫力 , Fe是血红蛋白中氧的携带者 , 也是很多酶的活性部
分;Zn, Mn对神经系统机能和结构发挥重要作用。 有些微量元
素如 Fe, Cu, Zn, Mn, Co等比例失调与许多疾病如癌症 、心血管疾
病 、瘫痪的发生及人体衰老有着密切的关系。有些微量元素的缺
乏将导致生殖机能下降和中枢神经感觉障碍 [ 1] 。对微量元素含
量的研究有助于全面了解中草药的生理活性。复叶耳蕨 Arach-
niodesexilisChing为鳞毛蕨科复叶耳蕨属植物 ,广泛分布于世界
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.3 时珍国医国药 2010年第 21卷第 3期
热带和亚热带湿润区域 ,以亚洲东部和东南部种类最为丰富 ,我
国主要分布于长江流域以南地区及山东 、河南等省 , 具有清热利
湿 , 抗菌消炎 ,镇静作用 , 民间用于治疗急性黄疸型肝炎 、关节炎 、
腰腿疼 、痢疾 、烫火伤 、抗癌等 [ 2] 。 目前未见其微量元素的研究
报道。在参考文献的基础上 [ 3～ 5] ,我们采用火焰原子吸收法 , 测
定了中药复叶耳蕨地上部分中微量元素 Cu, Fe, Zn, Mn的含量。
1　材料与方法
1.1　仪器与试剂 AA240FS型原子吸收分光光度计(瓦里安);
Cu, Zn空心阴极灯(瓦里安), Mn, Fe空心阴极灯(威格拉斯);
MDS-6型微波消解仪(上海新仪);BT224S型电子分析天平(赛
多利斯);DFT-50手提式中药粉碎机(温岭市大德)。复叶耳蕨
由九江学院药学系吴家忠副教授鉴定。浓硝酸(优级纯);H
2
O
2(分析纯);Zn, Fe, Cu, Mn标准液浓度均为 1 mg/ ml(国家标准
物质研究中心提供),用 0.5%硝酸配制成含 4种元素的混合标
准应用液。见表 1。
表 1　各种元素标准系列的配制含量 mg· L-1
元素 1 2 3 4 5
Zn 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
Fe 0.5 1.0 2.0 4.0 6.0
Cu 0.2 0.8 1.0 2.0 3.0
Mn 0.2 0.6 1.0 1.4 2.0
1.2　仪器工作条件 通过改变实验条件考察了 4种待测元素的
仪器工作条件 , 并进行了优化选择。见表 2。
表 2　仪器最佳工作条件
元素 波长λ/nm
灯电流
I/mA
狭缝
λ/nm
空气 /乙炔流量
ν/L· min-1
背景校正
(氘灯)
Zn 213.9 5.0 1.0 13.5/2.0 开Fe 248.3 4.0 0.2 13.5/2.0 开
Cu 324.8 4.0 0.5 13.5/2.0 开
Mn 279.5 3.0 0.2 13.5/2.0 开
2　方法与结果
2.1　样品预处理 复叶耳蕨地上部分用去离子水漂洗 3 ～ 4次 ,
纱布过滤 , 60℃烘干 , 研碎 ,过 200目筛 ,取粉末存放于干燥器中
待用。
2.2　药材消化 利用电子天平精确称取约 1.000 g复叶耳蕨地
上部分粉末 , 精密称定 ,放置于聚四氟乙烯消解罐中 ,加入 5ml硝
酸 , 2mlH2O2 ,水浴加热 4 h,使反应趋于缓和。将溶样杯取下 , 稍
冷却 , 擦干外表水分 , 放入消化罐内 , 盖好盖子 , 将消化罐置于微
波消解炉内的托盘上 ,设置压力档为 1档 0.3 Mp3 min, 2档 0.5
Mp3 min, 3档 1.0 Mp3 min, 4档 1.5 Mp3 min, 5档 1.8Mp10
min进行微波消解 , 消解完成后取出样品冷却 、定容 、待测 , 进样
前用 0.45 μm滤膜过滤 ,待用。同时做空白实验。
2.3　标准曲线 Fe, Cu, Zn, Mn4种元素利用瓦里安原子吸收
快速序列功能同时进行火焰法测定 , 以标准溶液吸光度(Abs)对
应的浓度(C)进行线性回归 ,得到 4种待测组分的回归方程及相
关系数 , 方法的检出限以空白浓度重复测定所得吸光度标准偏差
3倍值所对应浓度计量。见表 3。
表 3　回归方程和相关系数
元素 标准曲线方程 线性范围C/mg· L-1 r
最低检出限
C/mg· L-1
Zn Abs=0.408 32×C+0.015 74 0 ～ 1.0 0.997 7 0.006
Fe Abs=0.060 69×C+0.007 51 0 ～ 6.0 0.999 2 0.008
Cu Abs=0.122 41×C+0.001 67 0 ～ 3.0 0.999 8 0.022Mn Abs=0.168 73×C+0.002 17 0 ～ 2.0 0.999 7 0.013
2.4　精密度实验 精密称取 0.501 4 g样品 , 按 “ 2.2”项方法消化
处理 , 用 0.5%硝酸定容于 50 ml容量瓶中 , 按照表 1的仪器工
作条件 ,分别测定待测溶液中 Zn, Fe, Cu, Mn的吸光度 , 连续进
样 3次。 Zn, Fe, Cu, Mn吸光度的 RSD分别为 0.5%, 0.1%,
0.2%和 0.7%。测定的精密度良好。
2.5　重复性实验 称取约 0.5 g样品 3份 , 精密称定 , 用 “ 2.2”
项方法消化处理 , 定容于 50ml容量瓶中进行测定。按照表 2的
仪器工作条件 , 分别测定待测溶液中 Zn, Fe, Cu, Mn的吸光度 ,
连续进样 3次。 Zn, Fe, Cu, Mn吸光度的 RSD分别为 0.3 %,
0.2%, 0.8%和 0.8%。测定的重复性良好。
2.6　回收率实验 取适量消化后的供试品溶液 , 加入一定量的
Zn, Fe, Cu, Mn的标准溶液 , 按照表 1的仪器工作条件 , 分别测
定待测溶液中 Zn, Fe, Cu, Mn的吸光度 , 连续进样 3次。计算回
收率。见表 4。
表 4　回收率实验
元素 样品含量C/μg· g-1
加标量
C/μg· g-1
测定值
C/μg· g-1
RSD
(%)
回收率
(%)
Zn 5.32 5.00 10.30 1.0 99.6Fe 8.21 10.0 17.75 0.5 95.4
Cu 2.52 2.50 5.07 0.9 102
Mn 5.42 5.00 10.32 1.5 98.0
　　n=3
2.7　复叶耳蕨样品中微量元素含量测定 将按 “ 2.2”项方法处
理好的复叶耳蕨地上部分消化液 ,用火焰原子吸收分光光度法按
照表 2的仪器工作条件 , 分别测定。测定结果见表 5。
表 5　叶耳蕨地上部分中微量元素的含量
元素 药材中含量C/μg· g-1 RSD(%)
Zn 175.51 1.5
Fe 286.91 0.4
Cu 14.38 1.6
Mn 78.84 0.5
　　n= 3
3　结论
采用火焰原子吸收分光光度法测定复叶耳蕨地上部分中
Zn, Fe, Cu, Mn的准确度和精密度良好 ,回收率符合要求 , 方法选
择性好 ,仪器设备简单 , 操作步骤简便 , 测定结果准确可靠 ,是研
究中药微量元素的有效方法。 本文测定了复叶耳蕨地上部分中
微量元素的含量 ,对中药复叶耳蕨的合理用药具有指导意义 。从
分析结果看 , 复叶耳蕨地上部分中含有丰富的微量元素 Zn, Fe,
Cu, Mn。
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 3期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.3